日本血吸虫成虫67kDa分子抗原的诊断价值

为检测日本血吸虫成虫67kDa分子抗原（sjAWA67)对血吸虫病的诊断价值。本研究通过SDS-PAGE和电渗方法,从日本血吸虫成虫抗原中分离纯化出67kDa分子抗原,并用该抗原包被酶标反应板微孔。进行常规ELISA检测。结果对急,慢性血吸虫病患血清的检出率分别为100%和95%,与正常人血清,肝吸虫病和肺吸虫病患血清均未出现明显的变叉反应,44例血吸虫病患治疗后3、6和12个月后的阴转率分别达45.7%,75.0%和90.09%。表明SjAWA67蛋白具有较好的疗效考核价值和现场应用前景。     

日本血吸虫尿素溶解性抗原的应用研究

本文报告采用一种不需特殊设备,从废弃的日本血吸虫水不溶性沉渣中提取尿素溶解性抗原的简易方法,获得尿素溶解性虫卵抗原(JEU)和尿素溶解性成虫抗原(JWU),并应用于血吸虫皮内试验(ICT),以及 JEU 在间接血疑试验(IHA)中的敏感性、特异性和现场应用结果。日本血吸虫卵和成虫按常规方法提取水溶性抗原(SEA 或 AWA)后的沉渣分别用8MpH8.0尿素缓冲溶液,通过研磨、超声、反复冻融浸提,然后以     

制备甲状腺微粒体抗原的方法

在桥本氏甲状腺炎中,许多自身抗原-抗体系统已被发现,但甲状腺球蛋白(TG)和甲状腺微粒体(TM)抗原-抗体(AgAb)系统仍被认为与该病发生发展最为密切相关。对于TMAg-Ab系统的研究,有助于对自身免疫性甲状腺疾病的病因学探讨     

甲状腺微粒体抗原的分离、提纯及鉴定

<正> 为建立甲状腺微粒体抗体(TMAb)的双抗体放射免疫检测法(RIA),高纯度抗原(TMAg)的获取是其先决条件。但 TMAg的分离纯化不易,国内外尚未见有完全成功的报道,使这一抗体的 RIA 迟迟未能建立,直到其血凝检测法问世后10年的1981始见 Kung 氏等报道他们实验室建立了TMAb-RIA。然而他们仍未曾真正分离取得     

反向间接血凝检测血吸虫病循环抗原(CSA)的研究——Ⅰ.抗原提纯、抗体制备及抗原抗体的鉴定

从血吸虫成虫体外培养与重感染家兔血清中(感染后30天)提取循环抗原;将成虫经冻干、脱脂、反复冻融处理,20,000 rpm离心提取的成虫抗原;分别经人工免疫家兔获得相应抗体,纯化后致敏醛化血球,检测血吸虫病的感染与考核疗效。初步证明日本血吸虫循环抗原为耐热、耐酸、耐硷、分子量大于45,000,沉降系数S=2.27的多糖体。抗体为IgG成分。     

日本血吸虫成虫及肝卵石蜡切片间接荧光抗体试验诊断血吸虫病

<正> 用血吸虫成虫冰冻切片为抗原,以血吸虫病人血清为抗体作间接免疫荧光实验(IFAT),诊断血吸虫病和循环抗原定位,显示出敏感性特异性均高。为适应血吸虫病流行疫区普遍推广使用,作者用福尔马林固定石蜡包埋血吸虫成虫和血吸虫病兔肝脏切片为抗原,以血吸虫患者血清为抗体作IFAT,获得较满意结果,现报道如下。     

广州管圆线虫成虫尿素溶解性抗原分析及其诊断价值的探讨

目的分析广州管圆线虫成虫尿素溶解性抗原,探讨其诊断价值。方法广州管圆线虫成虫匀浆后沉渣经尿素溶解,与成虫水溶解性抗原同时进行SDS-PAGE和Western-blot,分析蛋白谱与抗原谱;用ELISA检测不同样本中相应抗体。结果SDS-PAGE结果显示尿素抗原蛋白条带少于水溶解性抗原;尿素抗原与感染大鼠血清、免疫兔血清和广州管圆线虫病患者血清在32000Mr处均出现强反应带,尿素抗原的反应带条数较水溶性抗原少。两种抗原包被ELISA检测广州管圆线虫病疑似病人血清和感染大鼠血清的阳性率相同;尿素抗原用于检测血吸虫感染小鼠血清的交叉阳性率明显低于水溶性抗原,检测正常大鼠血清、献血员血清及其他非广州管圆线虫感染血清时,假阳性数较水溶性抗原少。结论广州管圆线虫成虫尿素抗原含有32000Mr抗原;广州管圆线虫尿素抗原用于诊断时,与水溶性抗原有同样的敏感性,而特异性高于水溶解性抗原。     

一种新的敏感的血吸虫皮试抗原的制备研究

<正> Tsang、陶义训证明用高浓度尿素提取的血吸虫卵水不溶物是一种高敏感性和特异性的抗原。对血吸虫成虫的水不溶性蛋白成分的提取尚未见报道。作者等采用一种不需特殊设备从废弃的虫渣中提取尿素溶解性抗原的简易方法,获得分子量较为均一的另一类大分子抗原(urea soluble schistosomajaponicum adult worm antigen,简称 JWU),并用于血吸虫病皮内反应试验,取得较满意的结果。现报道如下。     

日本血吸虫24-26KD和90KD蛋白质“靶抗原”的抗原性

作者从日本血吸虫成虫抽提出两种国际公认在诱导保护性免疫力中起重要作用的24-26KD和90KD蛋白质“靶抗原”,用以免疫小鼠.结果表明上述两种“靶抗原”具有明显的抗原性.表现在(1)上述“靶抗原”免疫后可刺激宿主血清IgM升高,特别是IgG中的IgG1明显升高;(2)免疫鼠血清中的抗体能在成虫的表皮和实质层定位;(3)以ELISA和IFA检测免疫血清中的抗体水平时,均表现特异性抗体滴度明显增高(ELISA:90KD 1:5/20,24-26KD/:640;IFA:90KD1:80～1:2560,24-26KD1:40～1:160);(4)免疫血清中均存在着针对上述两种“靶抗原”的特异性抗体,免疫印渍试验结果进一步表明上述“靶抗原”免疫鼠血清中抗体均能特异地分别识别日本血吸虫抗原中分子量90KD和24-26KD的抗原决定簇。     

一种新的血吸虫病诊断用皮试抗原的研究

<正> 对血吸虫成虫提取水溶性抗原(AWA)后的虫渣,用 BM 尿素为蛋白质裂解剂,进一步分离具有抗原性的结合蛋白成分(JWU),抗原得量可增加1.25倍。应用 JWU 制备皮内反应诊断用抗原,试验用浓度为1μg/ml,对1,395例血吸虫病人和健康人进行检测,同时用 AWA 作平行对照。对240例血吸虫病人检出率为97.5%,对680例健康人群的特异性为98.5%,经统计处理与 AWA 无显著差异。但 JWU 皮丘直径均值1.43cm 较 AWA 皮丘均值1.33cm 大。对58例肝吸虫病人未发现交叉反应,对36例肺吸虫病人的交叉反应为5.56%,低于 AWA 的8.33%。提取 JWU 并将其用于皮内反应试验,国内外尚未见报道。目前这种皮试抗原已批量生产,供应流行区现场用于普查血吸虫病过筛试验。     

日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEAj)的主要血清学抗原(MSA)的分离及电泳分析

<正> 经电泳分析证实,血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)系由蛋白质、糖蛋白以及多糖等组成的不均一混合物。Harrison等曾用二步亲和层析法,从曼氏血吸虫SEA(SEAm)中分离具有抗原活性的分部,并证明此抗原分部对刺激致敏动物淋巴细胞的转化较粗制的SEAm更有效,同时与SEAm一样能对致敏小鼠激发强的迟发型超敏反应。Carter等也曾采用Harrison等的方法从日本血吸虫SEA(SEAj)中分离具有抗原活性的分部,并应用此抗原分部证实感染日本血吸虫小鼠血清内的主要沉淀抗体是与糖蛋白或蛋     

SPA协同凝集试验检测日本血吸虫病兔循环抗原

<正> 据国内外报道,血吸虫CAg来自成虫肠道,CAg检出率与感染时间、感染尾蚴数、检测方法及宿主不同而异。本试验研究用SPA协同凝集试验方法,对感染不同尾蚴数的病兔进行血清内CAg检测研究,并观察血吸虫病兔经吡喹酮药物治疗后血清内CAg有否阴转的变化,以探求血吸虫病疗效考核方法。 试验选2.5～3kg重雄性家免感染血吸虫尾蚴500条,感染后第42天选与血吸虫成虫抗原对流电泳血清效价1:64的感染兔一只,心脏取血分离血     

斯氏肺吸虫尿素可溶性抗源在ELISA中的应用

<正> 陶义训等用高浓度尿素从血吸虫卵水溶性抗原(SEA)的废弃物中提取出尿素可溶性抗原(JEU),并证实其抗原活性和特异性均优于水溶性抗原。我们参照陶义训等黎世涛等方法加以改进。用高 度尿素提取出肺吸虫可溶性抗原(PSAWU),用于皮内试验和ELISA检测肺吸虫病人抗体,同时作平行对照试验。现报道于后。     

日本血吸虫完整成虫盐水浸液抗原的化学及免疫学特性

本文报告日本血吸虫完整成虫盐水浸液抗原(ASE)的化学、免疫化学及免疫学性质。实验结果表明ASE中含有蛋白质、糖和类似核酸的物质。它与成虫抗原有相同的抗原成分与虫卵抗原也有共同的决定簇。PAGE结果显示ASE与新鲜成虫经Triton处理后的可溶性部份比较类似.以抗ASE与成虫冰冻切片进行IFA试验的结果证明ASE主要定位于虫的表膜,可以认为ASE主要含有成虫的表膜抗原。本实验中无论用ASE免疫家兔或用抗ASE-γ-G被动免疫小鼠都未能诱导动物产生对攻击感染的抵抗力;但抗ASE在有补体的参与下可在体外促使白细胞粘附在童虫的表面,产生对童虫的攻击作用。     

旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原保护性免疫的比较研究

目的:比较旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原诱导小鼠产生保护性免疫效果的异同.方法:制备旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原,分组免疫小鼠,并于末次免疫后10 d用旋毛虫感染性幼虫对各组小鼠实施攻击感染,检测攻击感染后各组小鼠肠道成虫和肌肉幼虫数并计算减虫率,同时采用ELISA法检测各组小鼠血清IgG抗体水平.结果:成虫抗原免疫组小鼠和肌幼虫抗原免疫组小鼠检获的肠道成虫数和肌幼虫数均显著少于对照组(P＜0.05),其中以成虫抗原免疫组小鼠减虫率最高(P＜0.01).成虫抗原免疫组和肌幼虫抗原免疫组小鼠于实施旋毛虫感染性幼虫进行攻击感染的当日所检测的血清IgG抗体水平与其免疫前相比均升高(P＜0.01,P＜0.05),与对照组相比亦升高(P＜0.01,P＜0.05),其中也以成虫抗原免疫组小鼠血清IgG抗体升高最为显著(P＜0.01).结论:旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原均能激发小鼠产生保护性免疫,其中成虫抗原免疫组小鼠显示出更好的抗感染保护性.     

分泌抗日本血吸虫排泄分泌抗原McAb杂交瘤细胞株的建立

<正> 本文报道用日本血吸虫尾蚴感染家兔,45天后用灌注法收集成虫,置台氏液中于25℃培育24小时,收集培养液,离心后取上清,蒸馏水透析、冻干,以此排泄分泌抗原(ESA)免疫BALB/c小鼠,于加     

日本血吸虫病感染小鼠的T细胞辅助活力变动的初步观察

体外测定T细胞辅助活力是近年来发展起来的一种细胞免疫观察方法。Ramalho-Pinto等(1979)在曼氏血吸虫感染小鼠上首先研究了这种感染早期的应答——对童虫的辅助T细胞应答。本文对Ramalho-Pinto等法改进后,在正常小鼠建立了T细胞辅助活力测定方法,并用此观察小鼠感染日本血吸虫和以日本血吸虫抗原免疫后,对半抗原-载体免疫应答的影响。结果表明:①小鼠感染日本血吸虫后早期存在对童虫的辅助T细胞应答;3周后应答水平渐降,反映小鼠感染后,辅助T细胞功能部分地受到抑制;②小鼠用日本血吸虫卵可溶性抗原(SEA)免疫后,T细胞辅助应答的规律和日本血吸虫感染小鼠者相似,但其应答水平比感染小鼠者低。用新鲜虫卵、冰冻干燥虫卵、成虫抗原免疫小鼠,亦能诱导出对童虫的辅助T细胞应答,初步表明来自日本血吸虫生活史不同发育阶段的抗原物质(如虫卵、成虫)和血吸虫童虫表面可能含有共同的抗原决定簇成份。     

肝肾微粒体1型抗原的制备及纯化

在1973年,Rizzetto用间接免疫荧光法发现了与近端肾小管和肝细胞胞浆反应的自身抗体[1]。这些针对细胞内质网反应的自身抗体被命名为肝肾微粒体抗体(LKM),随后鉴定出LKM抗体有3种亚型,LKM-1、LKM-2和LKM-3。LKM-1是Ⅱ型自身免疫性肝炎(AIH)的血清学标志[2]。细胞内质网包含两个主要的酶家族,即细胞色素P450s(CYP)和UDP-glucurinidation(UGTs),它们是代谢过程Ⅰ期和Ⅱ期中的主要参与者。1989年,鉴定出细胞色素P4502D6(CYP2D6)是LKM-1的主要自身抗原。LKM-1抗原的制备     

肝门型童虫免疫血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库

近年来 ,血吸虫疫苗研究进展迅速 ,国内外学者克隆表达了一系列血吸虫抗原基因 ,但至今它们在动物宿主体内诱导的保护性免疫未达到降低虫荷4 0 %或更多预期的研究目的〔1〕。因此继续筛选新的血吸虫疫苗候选分子成为当前血吸虫病研究的热点之一。我们用日本血吸虫肝门型童虫表膜抗原(SjHmAg)免疫兔血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 ,以期发现特异的具有保护作用的日本血吸虫抗原基因 ,为血吸虫疫苗的研究提供新的候选分子。材料和方法主要试剂 :日本血吸虫成虫cDNA文库由澳大利亚昆士兰医学研究所惠赠。快速剪切试剂盒购自美国Strategene…     

日本血吸虫肾病动物实验的研究

本文报道了急性感染日本血吸虫家兔肾病的免疫病理研究。用酶标抗体间接法在10只感染兔中5只的肾脏切片上显示出血吸虫抗原定位,并用 IHA、ELISA 测到肾匀浆中的特异性抗原和抗体,与肾脏大体标本及光镜下所见病理改变相一致,提示日本血吸虫肾病可能由免疫复合物致病。进一步用肾脏中特异性抗原组分作酶标定位分析,表明有虫卵抗原、成虫表膜相关抗原、肠相关抗原,以及特异性 IgG 参与肾脏内免疫复合物形成。