巨细胞病毒实验室检测方法研究进展及其用于 新生儿筛查的可行性

人巨细胞病毒(HCMV)感染后大多数无明显的临床症状,但可终身潜伏,并在特定条件下被激活而感染。孕期发生的HCMV活动性感染会导致流产、死胎、出生缺陷等,造成严重的经济和社会负担。由于原发性和继发性HCMV感染均可导致新生儿先天性感染,而目前无有效方法可筛查孕期HCMV继发性感染。因此对新生儿进行全面的先天性HCMV筛查,以便及早干预从而减轻先天性HCMV感染后果。文章对HCMV实验室检测的方法作一综述,并且分析其用于新生儿筛查的可行性,以期为新生儿先天性HCMV筛查方法的选择提供依据。     

先天性巨细胞病毒感染研究进展

人类巨细胞病毒(HCMV)是宫内病毒感染最常见的原因，先天性HCMV感染率很高是因为原发感染或再次感染的孕妇可以将病毒传给胎儿。先天性HCMV感染的胎儿各种器官、各种细胞均可能受累及，因此临床表现多样。先天性HCMV感染的产前诊断包括：取胎儿血液或羊水做HCMV培养、HCMV IgM、HCMV抗原、HCMV DNA和胎儿血抗热休克蛋白IgM检测。无临床表现的先天性HCMV感染的胎儿，HCMV IgM抗体水平低；低病毒含量亦与无症状性感染有关。为了减少先天性HCMV感染性疾病，疫苗的应用似乎是一种有效方法。更昔洛韦治疗先天性HCMV感染有一定的作用。     

先天性巨细胞病毒感染研究进展

人类巨细胞病毒 (HCMV)是宫内病毒感染最常见的原因 ,先天性HCMV感染率很高是因为原发感染或再次感染的孕妇可以将病毒传给胎儿。先天性HCMV感染的胎儿各种器官、各种细胞均可能受累及 ,因此临床表现多样。先天性HCMV感染的产前诊断包括 :取胎儿血液或羊水做HCMV培养、HCMVIgM、HCMV抗原、HCMVDNA和胎儿血抗热休克蛋白IgM检测。无临床表现的先天性HCMV感染的胎儿 ,HCMVIgM抗体水平低 ;低病毒含量亦与无症状性感染有关。为了减少先天性HCMV感染性疾病 ,疫苗的应用似乎是一种有效方法。更昔洛韦治疗先天性HCMV感染有一定的作用     

病毒抗原血症检测方法诊断活动性HCMV感染

人类巨细胞病毒（HCMV）常在免疫缺陷或免疫受抑制的病人中引起活动性感染，表现为多种临床症病，具有较高的病死率。HCMV抗原血症检测方法具有准确性高、技术简便、可快速诊断并具有定量分析的特点，是目前临床诊断活动性HCMV感染的一种重要方法。本文综述了对外周血白细胞应用单克隆抗体技术和免疫染色方法进行HCMV抗原检测以诊断活动性HCMV感染的方法和可能的质量监控手段。     

荧光定量聚合酶链式反应法检测婴儿尿液人巨细胞病毒DNA对人巨细胞病毒感染的诊断意义

目的探讨荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）方法检测婴儿尿液人巨细胞病毒（HCMV）DNA水平对婴儿HCMV感染的诊断价值。方法采用FQ-PCR检测348例临床疑似HCMV感染婴儿尿液中HCMVDNA水平。同时采用化学发光免疫分析法（CLIA）检测婴儿血清HCMV-IgM抗体。在尿液HCMVDNA检测阳性患儿中比较血清HCMV-IgM抗体检测阳性与阴性患儿尿液中HCMVDNA拷贝数差异。结果FQ-PCR检测尿液HCMVDNA的阳性率为41.74%,CLIA检测婴儿血清HCMV-IgM抗体的阳性率为19.83%。2种方法对HCMV感染诊断的符合率为76.7%。前者诊断阳性率显著高于后者（χ^2=69.44P〈0.01）。在尿液HCMVDNA检测阳性患儿中,IgM抗体阳性组尿液HCMVDNA拷贝数显著高于阴性组（P〈0.01）。结论FQ-PCR检测尿液HCMVDNA是早期诊断婴儿HCMV感染的敏感有效的方法。HCMV感染婴儿尿液中高HCMVDNA拷贝数与活动性HCMV感染密切相关;FQ-PCR方法检测尿液HCMVDNA水平对于判断是否为HCMV活动性感染具有一定意义。     

先天性巨结肠症与人类巨细胞病毒感染

目的；检测HD肠道组织中有无HCMV的DNA及其可能的组织分布，以了解HCMV感染是否可能为HD的病因。方法：利用原位PCR技术对先天性巨结肠症术后结肠样本进行了人巨细胞病毒DNA的组织分布检测。结果：HCMV在HD肠道组织中分布广泛，主要为结缔组织成纤维细胞的胞核及胞浆。无神经节细胞段HCMV阳性率为30．8％。结论：HCMV感染与HD有一定的关系，对于HCMV如何影响ENS神经节发育尚需进一步研究。     

人巨细胞病毒感染对脐血巨核系祖细胞体外增殖的影响

目的　探讨人巨细胞病毒 (HCMV)对脐血巨核系祖细胞 (CFU Mk)体外增殖的影响及其机制。方法　采用造血祖细胞体外培养技术 ,观察、计数HCMV AD169感染的CFU Mk集落产率、抑制率、集落峰值及维持时间 ;并采用聚合酶链反应 (PCR)技术检测集落细胞内HCMV AD169DNA。结果　 1.HCMV AD169感染组集落产率较对照组明显减少 ,HCMV对CFU Mk集落的抑制程度与病毒滴度有关 ,集落产率随病毒感染滴度增高而减少 ,抑制率随病毒感染滴度增高而渐增加 ;各组集落峰值出现时间无明显差异 (P均 >0 .0 5 ) ,但各感染组集落维持时间明显短于对照组 (P <0 .0 1) ;2 .用PCR在集落细胞内检测到HCMV AD169DNA。结论　CFU Mk是HCMV的宿主细胞之一 ,HCMV能直接感染CFU Mk ;在体外HCMV AD169对CFU Mk的增殖和集落形成有明显抑制作用 ,此作用可能与临床HCMV感染后患者血小板减少有关     

儿童人巨细胞病毒肺炎的临床特点及肺泡灌洗液人巨细胞病毒DNA检测的诊断价值

目的:分析儿童人巨细胞病毒(HCMV)肺炎的临床特征、治疗和预后特点,评价荧光定量PCR方法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)HCMV DNA拷贝数对HCMV肺炎的诊断价值。方法:在2015年1月至2019年12月中国医科大学附属盛京医院住院患儿中,收集荧光定量PCR方法检测BALF HCMV DNA阳性的58例0~7岁...     

直接酶标化学发光定量斑点杂交技术检测婴儿肝炎综合征巨细胞病毒感染

人巨细胞病毒(HCMV)是导致婴儿肝炎综合征的主要病原体之一.已认识到改进诊断方法是攻克该病的重要环节,以往HCMV感染的实验室检测方法多为定性诊断,本研究采用近年来发展起来的直接酶标化学发光自显影技术建立了定量斑点杂交方法诊断13例婴儿肝炎综合征HCMV感染,报告如下.     

昆明地区新生儿高胆红素血症患儿及母亲人巨细胞病毒感染探讨

人巨细胞病毒(HCMV)感染广泛存在于一般人群,我国妊娠妇女HCMV感染率为60%～90%[1-2],并且HCMV是宫内感染中最常见的病原[3],孕妇原发或再发感染均可引起HCMV宫内传播,可发生于妊娠期内任何时候。美国活产婴儿先天性感染率为0·4%～2·5%[4-5]。而现已知,有些感染HCMV的新生儿以轻重不等的黄疸为其临床表现。为了研究高胆新生儿中HCMV感染的状况,我院应用常规间接酶联免疫吸附法(ELISA)及聚合酶链反应(PCR)技术对123例新生儿高胆红素血症患儿及患儿母亲的血HCMV抗体、尿HCMV-DNA进行检测。资料与方法一、对象1·病例组:取…     

RNA干扰技术在体外抑制人巨细胞病毒基因表达的应用

目的探讨RNA干扰技术在体外抑制人巨细胞病毒(HCMV)基因表达时siRNA转染和病毒感染的先后顺序对抑制效果的影响。方法设计并化学合成靶向即刻早期(IE)基因的siRNA。应用阳离子脂质体法将siRNA导入人胚肺成纤维(HELF)细胞,并分为先转染siRNA后感染HCMV、先感染HCMV后转染siRNA以及同时转染siRNA和感染HCMV3组,同时设置正常对照组、阴性对照组、阳性对照组和转染试剂对照组。采用荧光定量PCR和琼脂糖凝胶电泳方法分别检测分析各组转染的siRNA对IE基因和阳性对照基因GAPDH的抑制效果。结果阳性对照组GAPDH基因mRNA表达量较阴性对照组和转染试剂对照组有明显下降,siRNA抑制率为70.4%,差异有统计学意义(P0.05)。先转染si RNA后感染HCMV组、先感染HCMV后转染si RNA组、同时转染siRNA和感染HCMV组以及阳性、阴性、转染试剂对照组的IE基因m RNA表达量比较,差异有统计学意义(F=146.93,P=0.000)。其中先转染siRNA后感染HCMV组以及同时转染si RNA和感染HCMV组对IE基因m RNA表达的抑制效果均好于先感染HCMV后转染siRNA组,差异有统计学意义(P0.05)。结论在体外,siRNA能有效抑制靶基因的表达,且先转染si RNA再感染病毒的抑制效果相对更好,提示siRNA对HCMV感染具有一定的预防作用。     

儿童急性淋巴细胞白血病合并人巨细胞病毒感染的临床特点及预后分析

目的 研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿化疗期间并发人巨细胞病毒(HCMV)感染的临床特点及其相关影响因素,探讨HCMV感染对ALL患儿的预后影响.方法 选取2015年-2018年纳入CCCG-ALL-2015方案治疗的6月～14岁ALL患儿共144例.按照HCMV病原学检测结果分为HCMV感染组(53例)和未感染组...     

咽拭子在新生儿先天性人巨细胞病毒感染筛查中的应用

目的 探讨咽拭子PCR检测在新生儿先天性人巨细胞病毒（HCMV）活动性感染筛查中的临床应用价值。方法 收集51例新生儿的咽拭子和脐血标本,均进行HCMV gB的巢式PCR检测,其中18例进行脐血pp65抗原检测。结果 巢式PCR法检测咽拭子HCMV gB基因的灵敏度和特异性分别为67%和75%,其阳性预测值和阴性预测值分别为57%和82%。结论 咽拭子HCMV gB的巢式PCR检测,具有无创、快速、特异的优点,有望成为新生儿HCMV先天性活动性感染筛查的最佳检测手段。     

血小板减少性紫癜患儿巨细胞病毒感染的研究

研究人类巨细胞病毒 (HCMV)感染与原发性血小板减少性紫癜 (ITP)之间的关系 ,采用ACD抗凝外周血HCMV DNAPCR以及非抗凝血清CMV IgM、IgGELISA方法 ,进行HCMV感染的检测。结果显示 ,ITP患儿组HCMV DNAPCR阳性率为71 7% ,体检儿童对照组为 2 0 8% ,P <0 0 1 ,差异有显著性。ITP患儿组CMV IgM阳性率为 4 1 5% ,CMV IgG阳性率为 75 5% ,体检儿童对照组中未检出CMV IgM阳性者 ,CMV IgG阳性率为 2 2 9% ,P <0 0 1差异有显著性。结论认为 :HCMV感染与ITP密切相关 ,HCMV病毒是ITP致病病因中很重要的一个致病病毒 ,对ITP患者的实验室检测不仅需要血液学检测而且需要HCMV等病毒学检测 ,对HCMV活动性感染的ITP患者加用更昔洛韦 ,可能会很好地提高疗效。     

先天性人巨细胞病毒感染发病机制的研究进展

人巨细胞病毒（HCMV）是人类最常见的先天性感染病毒,可引起流产、早产、死胎、胎儿宫内发育迟缓及小头畸形、抽搐、脑瘫、智力低下、视力损害及听力损害等后遗症。目前先天性HCMV感染的发病机制仍处于研究阶段。该文对近年来先天性HCMV感染发病机制的研究报道进行综述,主要涉及HCMV的潜伏．激活;HCMV的致畸机制,包括HCMV的直接损伤、通过影响胎盘和绒毛的损伤而导致胎儿畸形、HCMV感染引起细胞凋亡、同源盒基因表达异常及HCMV感染对脑组织的损伤;HCMV感染对免疫系统功能损害机制。     

宁夏地区0～3个月住院婴儿巨细胞病毒感染临床分析

正人巨细胞病毒(human cytomegalovir,HCMV)是引起先天性感染最常见的病毒,往往导致神经系统后遗症。文献报告,发达国家先天性HCMV感染的发病率为0.6%~0.7%,北京地区母婴HCMV感染的多中心调查显示,先天性HCMV感染的发生率为0.23%。HCMV血清阳性率具有明显的地方性和种族差异,我国儿童HCMV血清阳性率为83%~87%,成人则高达     

更昔洛韦治疗特发性血小板减少性紫癜应用指征

目的探讨更昔洛韦(GCV)治疗人巨细胞病毒(HCMV)感染相关的特发性血小板减少性紫癜的(ITP)应用指征。方法选择血清HCMV DNA PCR和(或)HCMV IgM检测呈阳性ITP患儿46例,采用逆转聚合酶扩增反应(RT-PCR)检测巨核系祖细胞中HCMV晚期抗原mRNA,并行GCV治疗,判定其疗效及应用指征。结果46例血清HCMV-DNA PCR阳性和(或)血清HCMV-IgM阳性的ITP骨髓巨核祖细胞HCMV晚期抗原基因mRNA阳性19例,GCV治疗有效16例,mRNA阴性27例,GCV治疗有效4例。阳性组疗效高于阴性组,有显著性差异(P<0.01)。结论HCMV感染的ITP患儿,若对常规治疗无效,应检测其巨核祖细胞内HCMV晚期抗原基因mRNA,阳性者是应用更昔洛韦的有效指征。     

新生儿人巨细胞病毒感染的诊断与治疗进展

人巨细胞病毒(HCMV)属B疱疹病毒亚科,是一种广泛传播的病原体,具有高度的种属特异性,仅在人与人之间传播.在健康人群中多数呈无症状或持续性感染,在免疫系统发育不成熟和免疫缺陷的人群中可引起严重疾病.除原发性HCMV感染外,潜伏感染的再发和继发性HCMV的感染亦导致先天性感染,造成出生缺陷的发生.因此,对HCMV感染早期诊治的重要性越来越受到关注.现就新生儿HCMV感染的现状、诊断、治疗方法及其进展作简要介绍.     

围产儿人巨细胞病毒感染及其诊断（综述）

人巨细胞病毒(Human Cytomealovirus,HCMV)是一种在人群中广泛存在的感染因子,用检测抗体方法调查世界各地HCMV的感染率,发达国家约40～60%,发展中国家可高达100%,上海市育龄妇女的感染率为93.2%,新生儿HCMV感染约为1%～3.4%。器官移植、长期应用免疫抑制     

人巨细胞病毒对造血系统的影响

目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)对造血系统的影响及其机制。方法 采用造血祖细胞体外半固体培养技术,研究HCMV AD169株对粒-巨噬系祖细胞(CFU-GM)、红系祖细胞(CFU—E)、多向造血祖细胞(CFU—Mix)及巨核系祖细胞(CFU-MK)集落生长的影响;分别用原位聚合酶链反应(IS-PCR)和聚合酶链反应(PCR)检测CFU-GM、CFU-Mix、CFU-MK及CFU-E集落细胞中的HCMV DNA;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CFU-E集落细胞中的晚期抗原(late antigen,LA)mRNA及CFU-MK集落细胞中的前早期抗原(immediate early antigen,IEA))mRNA;用免疫组化方法检测CFU—Mix集落细胞中HCMV早期蛋白P52。结果 HCMV AD169株在体外能明显抑制CFU—GM、CFU—E,CFU—Mix及CFU—MK的生长,抑制程度与病毒感染滴度呈剂量依赖关系;经IS-PCR或PCR检测发现病毒感染组CFU-GM,CFU-E,CFU-Mix及CFU-MK细胞中有HCMV DNA存在;RT—PCR检测发现病毒感染组CFU-MK细胞中有IEA mRNA的表达,而CFU-E细胞中的LA mRNA为阴性;免疫组化(IHC)检测发现病毒感染组CFU-Mix集落细胞中有HCMV P52的表达。结论 HCMV AD169可抑制CFU-GM,CFU-E,CFU-Mix及CFU-MK的分化和增殖;HCMV AD169对造血系统有直接损害作用。此作用可能是HCMV感染所致的粒细胞和血小板减少及贫血的原因之一。