藏药湿生扁蕾提取物对人结肠癌SW480细胞增殖和周期的影响

目的：探讨藏药湿生扁蕾提取物（GPM）对人结肠癌细胞SW480增殖和周期的作用机制。方法：采用MTT比色法测定GPM对SW480细胞体外细胞毒活性,采用流式细胞仪检测细胞周期变化。结果：GPM对结肠癌SW480细胞的增殖具有抑制作用,且这种抑制作用具有明显的量效关系;用GPM处理后,SW480细胞表现出明显的G1期周期阻滞。结论：GPM能够抑制人结肠癌细胞SW480细胞的生长,并可改变细胞周期分布。     

复方肠泰抑制人结肠癌SW480细胞增殖的实验研究

目的:考察复方肠泰(人参、薏苡仁、莪术等)对人结肠癌细胞SW480细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法:采用噻唑蓝比色法测定不同浓度复方肠泰在不同作用时间内对在体外培养SW480细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化。结果:复方肠泰可在G0/G1期以及G2/M期阻滞人结肠癌细胞SW480的增殖,使S期细胞比率降低。结论:复方肠泰在3.51～7.81mg/mL范围内呈现明显的量效关系。     

人参皂苷CK抑制人结肠癌SW480细胞增殖的机制研究

目的研究人参皂苷CK对人结肠癌SW480细胞增殖及凋亡的影响,并进一步探讨其作用机制。方法采用CCK-8法检测细胞活力;通过流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡、活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(MMP)变化;Hoechst染色检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法检测细胞色素C(CytC)释放以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和cleaved Caspase-3等的表达。结果人参皂苷CK对SW480细胞的增殖有显著抑制作用。人参皂苷CK诱导SW480细胞周期阻滞于G0/G1期,促进细胞发生早期凋亡。人参皂苷CK可以显著增加细胞内ROS水平,降低MMP水平;人参皂苷CK促进Bax和cleaved Caspase-3的表达,抑制Bcl-2的表达。此外,人参皂苷CK使SW480细胞内CytC大量释放。结论人参皂苷CK对SW480细胞的增殖具有显著的抑制作用,其作用机制可能是通过促进线粒体超氧化物升高,导致胞内ROS水平显著增加和MMP显著下降,进而导致CytC释放,上调Bax的表达,下调Bcl-2的表达,最终导致细胞发生凋亡。     

DADS对人结肠癌SW480细胞凋亡的影响

目的：探讨二烯丙基二硫（diallyl disulfide,DADS）诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的作用。方法：采用MTT、细胞计数法,观察不同浓度和作用时间DADS对SW480细胞的生长抑制作用;施用流式细胞术检测不同浓度DADS对SW480细胞的凋亡率。结果：MTT法显示,DADS能明显抑制SW480细胞生长增殖,呈浓度和时间依赖性,细胞生长增殖速度明显减慢。细胞计数表明,当DADS浓度增加时,SW480细胞群体倍增时间延长,与对照组比较,差异有显著性意义（P〈0．05）。流式细胞仪分析显示,随着DADS处理浓度增加,使SW480细胞凋亡率逐渐增高,差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：DADS具有诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的作用。     

siRNA靶向抑制GHR对结直肠恶性肿瘤SW480细胞增殖影响的研究

目的分析siRNA靶向抑制GHR对结直肠恶性肿瘤SW480细胞增殖的影响。方法将结直肠恶性肿瘤SW480细胞进行培养,将代数生长期的细胞随机分为2组,观察组(siRNA靶向抑制组)10株,对照组(生理盐水组)10株,观察肿瘤SW480细胞增殖受抑制情况。结果观察组的四甲基偶氮唑蓝吸光度值均显著低于同一时间测得的对照组吸光度值;人生长素受体蛋白表达平均值显著低于对照组;人生长素受体mRNA表达ΔCT值显著高于对照组,均有显著性差异(P<0.05)。结论 siRNA对GHR的靶向抑制作用能够显著抑制结直肠恶性肿瘤SW480细胞的生长及增殖。     

中药复方脏毒清体外诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的影响

目的:探讨中药复方脏毒清对人结肠癌SW480细胞的促凋亡作用及机制。方法:体外培养人结肠癌细胞株SW480,用不同质量浓度的脏毒清(0.05,0.10,0.15,0.20,0.25 g·m L-1)进行干预12,24,36,48 h后,采用MTT法检测细胞增殖抑制率。用不同质量浓度脏毒清(0.10,0.15,0.20 g·m L-1)作用SW480细胞24 h后,另设空白组,采用用荧光染色技术和流式细胞仪检测细胞凋亡率,分光光度法测定半胱天冬酶-3(Caspase-3),Caspase-9的酶活性,Western blot技术检测凋亡蛋白Bax,Bcl-2蛋白的表达情况。结果:MTT结果显示脏毒清对其有明显的增殖抑制作用,并呈现时间和剂量依赖性;与空白组比较,脏毒清0.10,0.15,0.20 g·m L-1组能明显诱导SW480细胞凋亡,Caspase-3及Caspase-9酶活性明显升高,促凋亡蛋白Bax表达明显升高,抗凋亡蛋白Bal-2表达明显降低,均具有统计学意义(P0.01)。结论:脏毒清具有促进人结肠癌SW480细胞凋亡的作用,并通过线粒体凋亡途径发挥作用。     

通泰合剂对大肠癌细胞增殖抑制及抗转移作用的实验研究

目的:观察通泰合剂对人结肠癌SW480细胞增殖的抑制作用以及对MMP-2、TIMP-2表达的影响,观察其对大肠癌细胞的增殖抑制及抗转移作用。方法:采用四唑盐比色法测定通泰合剂对SW480细胞增殖的影响,应用免疫组化法观察其对MMP-2、TIMP-2阳性表达细胞数的影响。结果:通泰合剂可阻滞SW480细胞的增殖,在一定范围内,通泰合剂的浓度越高,对肿瘤细胞增殖的抑制作用越强;与空白对照组比较,通泰合剂组作用72h后MMP-2表达阳性细胞明显减少,TIMP-2阳性细胞表达率明显增高。结论:通泰合剂能抑制人结肠癌SW480细胞的增殖及转移,其抗转移作用机制可能与调节MMP-2/TIMP-2的平衡相关。     

灵芪胶囊对直结肠癌 SW480细胞bcl-2表达的研究

目的：针对直结肠癌相关基因bcl-2,观察灵芪胶囊抑制肿瘤作用机理。方法： SW480细胞体外培养,应用real-time PCR检测bcl-2 RNA的含量。结果：灵芪胶囊抑制bcl-2 mRNA表达。结论：灵芪胶囊具有抑制人源性直结肠癌SW480细胞作用,其作用机制可能与bcl-2有关。     

黄芪多糖对结肠癌SW620细胞增殖及凋亡作用的影响

目的:研究黄芪多糖对结肠癌细胞SW620增殖的影响,探讨其抗肿瘤机制。方法:体外培养的SW620细胞,分别给予黄芪多糖(0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 g·L~(-1)),培养48 h后,用噻唑蓝(MTT)比色法检测黄芪多糖对人结肠癌细胞SW620增殖的影响;用1.0 g·L~(-1)黄芪多糖,体外培养SW620细胞48 h后,碘化丙啶(PI)单染检测药物处理后的肿瘤细胞周期,Annexin V/PI双染检测药物处理后的肿瘤细胞凋亡率;分别加入0.25,0.5,1.0 g·L~(-1)黄芪多糖,体外培养SW620细胞48 h后,通过蛋白免疫印记法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3,Caspase-9和细胞色素C的表达。结果:黄芪多糖能够抑制人结肠癌细胞SW620的增殖(P0.05,P0.01),且呈浓度依赖效应;与空白组比较,黄芪多糖1.0 g·L~(-1)处理组G2/M期比例增加,早期凋亡率增加,并且晚期凋亡率和总凋亡率均增加(P0.05,P0.01);与空白组比较,黄芪多糖0.25,0.5,1.0 g·L~(-1)组Caspase-3,Caspase-9,细胞色素C和促凋亡基因Bax表达量增加,Caspase-9前体和抗凋亡基因Bcl-2表达降低(P0.05,P0.01)。结论:黄芪多糖对结肠癌细胞SW620具有显著的抑制增殖和诱导凋亡作用,其诱导凋亡机制可能是通过线粒体凋亡通路实现的。     

桔梗皂苷D抑制人结肠癌SW620细胞增殖及其机制的研究

 目的 研究桔梗皂苷D对人结肠癌SW620细胞增殖的影响及作用机制。方法 采用人结肠癌细胞株SW620细胞,分别以四甲基偶氮唑蓝法观察桔梗皂苷D对细胞增殖的抑制作用,以流式细胞术检测桔梗皂苷D对细胞周期分布和凋亡的影响, 蛋白质免疫印迹法检测桔梗皂苷D对细胞周期蛋白和凋亡蛋白表达的影响。结果 与空白对照组比较,桔梗皂苷D呈剂量依赖地抑制人结肠癌SW620细胞的生长;15、20 μmol·L^-1桔梗皂苷D作用细胞24 h后,显著增加G₀/G₁期细胞比例,分别为(72.83±5.26)%和(76.82±5.83)%(P<0.05,空白对照组(56.78±4.92)%,周期蛋白cyclinD1、c-myc、CDK6表达明显下调;10、15、20 μmol·L^-1桔梗皂苷D作用细胞48 h后,明显增加细胞凋亡率,分别为（19.5±5.1）%、（35.8±5.3）%和（43.8±4.0）%(P<0.05,空白对照组（8.93±5.72）%,相关蛋白pro-caspase3、PARP表达下降。结论 桔梗皂苷D通过调控周期蛋白cyclinD1、c-myc、CDK6的表达,将细胞阻滞于G₁期,进而诱导细胞凋亡,抑制人结肠癌细胞SW620的增殖。     

Chinese Herb Formulae Inhibit the Proliferation of Human Colon Cancer SW480 Cells by Inducing Cell Apoptosis

Objective: This study aimed to reveal the antitumor effects of Chinese herbal formulae and the underlying mechanisms in treating colorectal cancer, with a focus on developing traditional Chinese medicine(TCM) as a supplement and alternative therapeutic method for cancers.Materials and Methods: Human colon cancer SW480 cells were treated with three Chinese herbal formulae, Bu Zhong Yi Qi Decoction,Fuzi Lizhong Decoction, and Pulsatilla Decoction at different concentrations(50–600 μg/mL) for 24, 3...     

右旋糖酐-磁性层状复合氢氧化物-氟尿嘧啶给药系统对结肠癌细胞的增殖抑制与诱导凋亡作用

 目的 探讨右旋糖酐-磁性层状复合氢氧化物-氟尿嘧啶给药系统对体外培养结肠癌SW480细胞增殖的抑制效果与诱导凋亡作用。方法 采用MTT法检测各浓度右旋糖酐-磁性层状复合氢氧化物-氟尿嘧啶及所涉及各级超分子对结肠癌细胞的增殖抑制率;光镜显微、Giemsa染色表征细胞的形态变化;流式细胞术检测药物干预引起的SW480 细胞凋亡率;DNA ladder分析凋亡细胞核的裂解情况。结果 磁性层状复合氢氧化物、磁性层状复合氢氧化物-氟尿嘧啶、右旋糖酐-磁性层状复合氢氧化物-氟尿嘧啶 3级超分子对SW480细胞干预24 h的IC₅₀依次为44.83（25.74,48.78） μg· mL^-1、15.16 （13.78,16.66）μg· mL^-1和13.33（11.03,15.13） μg· mL^-1;不同浓度5-Fu及相等剂量的磁性层状复合氢氧化物、磁性层状复合氢氧化物-氟尿嘧啶、右旋糖酐-磁性层状复合氢氧化物-氟尿嘧啶对结肠癌SW480细胞分别干预24、48、72 h,细胞的增殖抑制率按磁性层状复合氢氧化物<<氟尿嘧啶<磁性层状复合氢氧化物-氟尿嘧啶<右旋糖酐-磁性层状复合氢氧化物-氟尿嘧啶升高,作用效果与剂量及时间有依赖关系;与原药相比,右旋糖酐-磁性层状复合氢氧化物-氟尿嘧啶对SW480细胞的增殖抑制率及早期凋亡率差异显著,能引起细胞核内染色质凝集、细胞解体。结论 磁性层状复合氢氧化物细胞毒性低,能用作药物载体;磁性层状复合氢氧化物与氟尿嘧啶的2~3级超分子组装,具有相对原药更高的药物传输效率、能有效发挥抗肿瘤药物对SW480细胞的抑制与诱导凋亡作用。     

辣椒碱通过TRPV1诱导结肠癌SW480细胞凋亡

目的 探讨辣椒碱通过瞬时受体电位香草酸亚型1（TRPV1）对人结肠癌SW480细胞的影响及可能的分子机制。方法 设立辣椒碱组及空白组,通过细胞增殖与活性检测-8（CCK-8）法检测辣椒碱（50,100,200,300,400,500,600,800,1 000 μmol·L^-1）处理SW480细胞12,24,48 h后的细胞活性,选取有效抑制增殖的辣椒碱浓度;采用流式细胞术检测辣椒碱干预（200,400,800 μmol·L^-1）后细胞凋亡及细胞周期的变化;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测辣椒碱（200,400 μmol·L^-1）干预后TRPV1,肿瘤抑制蛋白p53,磷酸化p53（p-p53）,抑癌基因［B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）］,活化的天冬氨酸蛋白水解酶-3（cleaved Caspase-3）,cleaved Caspase-8,活化的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（cleaved PARP）的蛋白表达的影响;此外,利用微小RNA（mRNA）沉默技术作用TRPV1,观察200 μmol·L^-1辣椒碱处理沉默TRPV1的SW480细胞凋亡率的变化,以及上述蛋白表达的影响。结果 与空白组比较,辣椒碱50,100 μmol·L^-1作用对细胞活性未出现显著影响,浓度在200 μmol·L^-1以上时,随浓度增加细胞活性逐渐降低（P<0.01）,呈剂量依赖效应;与空白组比较,辣椒碱200,400,800 μmol·L^-1处理可明显诱导细胞凋亡（P<0.05,P<0.01）;200,400 μmol·L^-1 辣椒碱干预下,细胞生长表现为G₂/M期阻滞,800 μmol·L^-1表现为G₀/G₁期阻滞（P<0.05）;与空白组比较,辣椒碱200,400 μmol·L^-1处理细胞能够明显上调上述凋亡途径中相关蛋白（p53,p-p53,Bax,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-8,cleaved PARP）的表达（P<0.05,P<0.01）,Bcl-2蛋白表达显著下调（P<0.01）;沉默TRPV1能明显抑制辣椒碱诱导的细胞凋亡及凋亡通路蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。结论 辣椒碱可能通过TRPV1受体抑制SW480细胞增殖,阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡。     

半枝莲对人结肠癌细胞SW620增殖和凋亡的影响

目的探索半枝莲对人结肠癌细胞株SW620增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度(0、12.5、25、50、75μg/mL)的半枝莲氯仿极性部位提取物(ECSB)干预SW620细胞后,MTT法检测细胞活力,DAPI染色观察SW620细胞的凋亡,流式细胞术检测SW620细胞的周期,蛋白质印迹法(Western blot)检测SW620细胞中PCNA、Survivin的表达。结果ECSB显著抑制了SW620细胞的活力(P<0.01),并呈剂量性依赖;DAPI染色显示ECSB处理SW620细胞24 h后出现明显的细胞核固缩,核碎裂形成,提示ECSB促进SW620细胞的凋亡;流式细胞术检测结果显示在50μg/mL ECSB干预SW620细胞48 h后,S期明显增高,提示ECSB抑制SW620细胞的增殖;Western blot检测结果显示各浓度的ECSB均能显著抑制SW620细胞的PCNA表达,75μg/mL ECSB能显著抑制SW620细胞的Survivin表达。结论ECSB促进人结肠癌细胞株SW620的凋亡,抑制其增殖,其可能机制是通过下调PCNA、Survivin的表达。     

常春藤皂苷元对肠癌SW480细胞上皮-间质转化(EMT)及侵袭的影响

目的:探讨常春藤皂苷元(HG)通过调控上皮-间质转化(EMT)途径抑制大肠癌侵袭转移的机制。方法:以肠癌细胞SW480细胞为研究对象,不同质量浓度HG干预转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的SW480细胞,作用24 h后噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力。转移小室(Transwell)实验检测细胞侵袭能力。实时荧光定量-聚合酶链式反应(q PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)法分别检测EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin),N-钙黏蛋白(N-cadherin),波形蛋白(Vimentin),蜗牛同源物1(果蝇)样1蛋白(Snail)及侵袭转移标志分子信号传导蛋白和转录激活物(STAT3),基质金属蛋白酶-9(MMP-9),MMP~(-1)4,伴有Kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)表达变化。结果:HG可抑制TGF-β1诱导的肠癌SW480细胞增殖、干预EMT和降低侵袭能力,降低EMT标志分子N-cadherin,Vimentin,Snail及侵袭转移标志分子STAT3,MMP-9,MMP~(-1)4表达,增强E-cadherin,RECK的表达,与TGF-β1组比较均具有统计学差异(P0.05)。结论:HG可通过抑制EMT途径影响大肠癌细胞SW480侵袭转移。     

蜘蛛香总环烯醚萜类成分纯化工艺优选

目的:优选大孔树脂分离纯化蜘蛛香总环烯醚萜类成分的工艺方法。方法:以Chlorovaltrate为对照品,采用紫外分光光度法测定蜘蛛香总环烯醚萜类成分的含量,动态吸附-解吸法筛选大孔树脂型号,并优选其纯化工艺条件。结果:D-101大孔树脂最适合蜘蛛香总环烯醚萜成分的分离纯化,最佳工艺为:上样液浓度为20g·L-1,用6 BV(Bed Volume)的水和4 BV的60%乙醇洗脱除杂,4 BV的95%乙醇洗脱,洗脱流速2 BV·h-1,收集95%乙醇洗脱液。洗脱液减压回收至干,在此工艺下所提取的蜘蛛香环烯醚萜类成分的纯度达66.3%。结论:D-101大孔树脂能有效提高蜘蛛香中总环烯醚萜类成分的纯度,工艺简单可行,较适宜应用于大生产。     

苦参碱对结肠癌SW1116细胞增殖及端粒酶活性的影响

目的:探讨苦参碱(Matrine,Ma) 对人结肠癌SW1116细胞增殖和端粒酶活性的影响.方法:采用MTT法检测细胞增殖抑制率, TRAP-ELISA测端粒酶活性,半定量RT-PCR法检测hTERT mRNA表达.结果:Ma对SW1116细胞具有显著抑制增殖作用,并呈现较明显的剂量及时间依赖性;与正常对照组相比,端粒酶活性显著下降(P＜0.05或P＜0.01),hTERT mRNA表达明显减少(P＜0.05或P＜0.01).结论:Ma能通过下调hTERT表达而有效地抑制SW1116细胞端粒酶活性,从而抑制其增殖.     

二至丸对人结肠癌细胞的侵袭转移作用

目的:探讨二至丸(Erzhiwan,EZW)对人属结肠癌细胞株HCT116侵袭及迁移的作用。方法:以人结肠癌细胞株HCT116为研究对象,以化疗药奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)作为阳性对照,以20%,10%,5%EZW含药血清做为高、中、低剂量,运用Transwell法检测EZW及联用L-OHP后对HCT116细胞侵袭的影响,划痕实验观察细胞迁移情况,蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测其对细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响。结果:(1)Transwell实验显示,与空白组比较,各用药组穿模细胞数均减少(P0.05),以联用后穿模细胞数最少。(2)划痕实验显示,与空白组比较,各用药组均能抑制HCT116细胞的迁移(P0.05)。12 h EZW高浓度组抑制率高于L-OHP组(P0.05),其余时间段EZW各剂量组抑制率低于L-OHP组(P0.05),各时间段联用组抑制率均高于EZW高、中、低剂量组(P0.05),12 h联用组抑制率高于L-OHP组(P0.05),48 h联用组抑制率低于L-OHP组(P0.05)。(3)WB实验显示,与空白组比较,10%,20%EZW组,VEGF蛋白表达量均明显降低(P0.05),联用组与L-OHP组相比蛋白表达量降低(P0.05);与空白组相比,EZW含药血清各组降低了E-cadherin蛋白的表达(P0.05),联用组和L-OHP组E-cadherin蛋白表达量均显著升高,且联用后E-cadherin蛋白表达量最高(P0.05)。结论:二至丸能抑制结肠癌HCT116细胞侵袭转移,并以协同L-OHP后效果最佳,可能与其降低VEGF蛋白表达,协同L-OHP升高E-cadherin蛋白表达有关。