丹参、川芎、红花合煎剂对大鼠心肌缺血模型心肌细胞凋亡的影响

目的:观察冠心Ⅱ号核心组成药物丹参、川芎、红花合煎剂(丹川红)对大鼠心肌缺血模型心肌细胞凋亡的影响.方法:缺血前0.5 h给大鼠灌胃冠心Ⅱ号标准汤剂、丹川红或等容积生理盐水,采用结扎左冠状动脉前降支法建立大鼠急性心肌缺血模型.3 h后收集大鼠心脏,应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)观察大鼠心肌缺血区的心肌细胞凋亡情况或24 h后收集大鼠心脏,应用氯化三苯基四氮唑(TTC)组织化学染色法测量心肌梗死面积.结果:各给药组心肌梗死面积(Infarct Size)和心肌细胞凋亡指数(Apoptosis Index)显著低于模型对照组;其中,丹川红高剂量组与冠心Ⅱ号标准汤剂组、丹川红低剂量组相比,心梗面积和凋亡指数无统计学差异;丹川红低剂量组与冠心Ⅱ号标准汤剂组相比,结果有统计学差异.结论:由药物丹参、川芎、红花组成的丹川红合煎剂与原方冠心Ⅱ号疗效一致,都能通过抑制心肌细胞凋亡以减少心肌缺血损伤,起到保护心肌作用.     

新冠心苏合滴丸抗异丙肾上腺素致大鼠急性心肌缺血的比较实验研究

目的:观察新冠心苏合滴丸Ⅰ号、Ⅱ号、冠心苏合胶囊3药对异丙肾上腺素(ISO)所致大鼠急性心肌缺血的保护作用。方法:采用腹腔注射ISO方法复制大鼠急性心肌缺血模型,观测心电图,检测心肌组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量以及血清谷草转氨酶(AST)含量。结果:新冠心苏合滴丸Ⅰ号、Ⅱ号均能明显提高心肌匀浆组织中NO、SOD活性,降低心肌MDA含量,降低血清AST含量,并改善心电图的异常,与心肌缺血模型组比较有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:新冠心苏合滴丸Ⅰ号对抗ISO致大鼠急性心肌缺血的作用显著优于Ⅱ号和冠心苏合胶囊。     

冠心Ⅱ号对大鼠心肌缺血基因差异表达谱的影响

目的 研究冠心Ⅱ号对大鼠心肌缺血基因差异表达谱的影响。方法 6只SD大鼠随机分为3组：假手术组、模型组和冠心Ⅱ号组,每组2只。假手术组及模型组灌胃饮用水,冠心Ⅱ号组按10 g/kg灌胃冠心Ⅱ号,灌胃10天后结扎冠状动脉左前降支造成心肌缺血,24 h后取心肌缺血交界区组织进行基因芯片检测、聚类分析,并对关键基因差异表达进行RT PCR验证。结果 大鼠心肌缺血后交界区差异表达基因上调基因较多,冠心Ⅱ号干预后,上调和下调基因均减少,突出表现于基因all trans 13,14 dihydroretinol saturase（AF465614）和similar to expressed sequence AW413625（AA799328）。各组共性基因功能涉及信号转导蛋白活性较多;药物干预基因有一定特异性。结论 冠心Ⅱ号对大鼠心肌缺血基因差异表达谱具有一定的特异性改善作用。     

冠心Ⅱ号方含药血清对心肌细胞缺血再灌注样损伤的比较药效学研究

目的:比较汤剂、微米制剂、有效成分重组复方三种冠心Ⅱ号方制剂的含药血清对体外培养心肌细胞缺血再灌注样损伤的影响,为临床使用和药物二次开发提供依据。方法:大鼠分别灌胃给予合生药剂量5g/kg的冠心Ⅱ号方汤剂、微米制剂或有效成分重组复方,1次/日连续5日,末次给药后90min采血制备含药血清。采用MTT法观察含药血清对体外培养大鼠正常心肌细胞活性及生长情况的影响,并检测其对缺氧-复氧模型或过氧化氢损伤心肌细胞培养上清乳酸脱氢酶(LDH)活性、肌酸激酶(CK)活性、丙二醛(MDA)含量、细胞胞浆超氧化物岐化酶(SOD)活性的影响。结果:三种冠心Ⅱ号方的含药血清对体外培养大鼠正常心肌细胞活性及生长无显著影响;而三者均能显著减轻由缺氧-复氧或过氧化氢造成的心肌细胞培养上清中LDH及MDA含量增高的变化,对细胞胞浆SOD活性降低有明显的保护作用,并可降低培养上清中CK活性,但三者比较未观察到显著性差异。结论:不同冠心Ⅱ号方的含药血清对体外培养心肌细胞缺血再灌注样损伤均有明显的保护作用,但三者作用差异不显著。     

冠心Ⅱ号对大鼠缺血心肌蛋白差异表达的影响

目的：研究冠心Ⅱ号对大鼠缺血心肌蛋白差异表达的影响。方法：随机分为假手术组、模型组和冠心Ⅱ号给药组。假手术组、模型组用饮用水灌胃，冠心Ⅱ号给药组按10 g·kg^-1灌胃；每日1次，连续10 d后手术。模型组和冠心Ⅱ号给药组予结扎冠状动脉成心肌缺血动物，假手术组只穿线不结扎。手术后24 h取心肌缺血交界区组织进行蛋白双向电泳、差异表达质谱分析等检测。结果：心肌缺血后差异蛋白表达数目增加，冠心Ⅱ号干预后又有所增加，其中有效蛋白11个。缺血时上调蛋白数目多，用药后有一定减少。调节关键蛋白的意义涉及抑制细胞形态结构变化，抑制亢进的能量代谢。结论：冠心Ⅱ号从蛋白水平对大鼠缺血心肌有一定影响。今后应进一步扩大差异筛选的范围，以获得更全面的结果。     

冠心Ⅱ号对犬心肌缺血模型血清超氧化物歧化酶、C反应蛋白、丙二醛的影响

目的观察冠心Ⅱ号对犬心肌缺血模型血清超氧化物歧化酶(SOD)、C反应蛋白(CRP)、丙二醛(MDA)的影响.方法2 0只心肌缺血模型犬随机分为空白对照组、模型组、单硝酸异山梨酯组及冠心Ⅱ号组.观察服药前后血SOD、CRP、MDA的情况.结果冠心Ⅱ号治疗后,犬心肌缺血模型血清SOD明显升高,CRP、MDA明显下降.与单硝酸山梨酯组比较,差异有显著性(P＜0.05).结论冠心Ⅱ号对S0D、CRP、MDA指标明显改善.这可能是其治疗动脉粥样硬化引起的缺血性疾病的机理之一.     

冠心平对H2O2致乳大鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的：观察冠心平对过氧化氢（H2O2）所致乳鼠培养心肌细胞损伤的保护作用。方法：原代培养的新生SD乳大鼠,随机分为正常组、模型组、维拉帕米组、和冠心平3个剂量组。用比色法观察乳鼠心肌细胞培养液的乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌酸激酶（CK）、脂质过氧化产物丙二醛（MDA）的含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性,并用光镜观察心肌细胞形态学改变。结果：损伤组乳鼠心肌细胞培养液中LDH、CK-MB、CK和MDA含量非常显著增高,SOD活性非常显著降低（与对照组相比,P〈0.01）,心肌细胞损伤严重;冠心平保护组与H2O2损伤组相比,LDH、CK-MB、CK和MDA明显降低,SOD活性显著升高（P〈0.01,P〈0.05）,心肌细胞形态学变化减轻。结论：冠心平对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞损伤有保护作用,其机制可能与清除氧自由基、抗脂质过氧化损伤有关。     

冠心康对实验性大鼠急性心肌缺血的保护作用

目的：探讨冠心康颗粒对大鼠急性心肌缺血的保护作用及其机理。方法：雄性大鼠32只，随机分为4组，每组8只，预防给药7d。灌胃结束后，采用在体大鼠冠状动脉左前降支结扎的方法建立心肌缺血模型，观察冠心康颗粒对大鼠急性心肌缺血后心肌中NO和NOS含量的影响，用免疫组化法检测Bcl-2蛋白在心肌中的表达。结果：模型组、冠心康组、地奥组与假手术组比较，心肌组织NO及NOS含量均有明显降低（P〈0．05）；而与模型组相比，冠心康组、地奥组的NO及NOS含量均有明显的恢复（P〈0．05），提示冠心康颗粒可明显提高大鼠急性心肌缺血后心肌中NO和NOS含量（P〈0．005，0．005），同时增加Bcl-2蛋白的表达，减少细胞凋亡。结论：冠心康颗粒对大鼠急性心肌缺血具有保护作用，可能与其提高心肌中NO和NOS含量，增加Bcl-2蛋白的表达有关。     

新冠心苏合滴丸抗大鼠急性心肌缺血的实验研究

目的观察新冠心苏合滴丸对异丙肾上腺素（ISO）所致大鼠急性心肌缺血的保护作用。方法采用腹腔注射ISO方法复制大鼠急性心肌缺血模型，检测心电图（ECG）改变及心脏组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量以及血清谷草转氨酶（GOT）含量。结果新冠心苏合滴丸能明显降低血清GOT含量，提高心肌匀浆组织中NO含量、SOD活性，降低MDA含量，降低ECG异常的阳性率，与心肌缺血模型组比较有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。结论新冠心苏合滴丸具有对抗ISO致大鼠急性心肌缺血的作用。     

“冠心平”对大鼠急性心肌缺血的保护作用研究

目的：观察冠心平对急性心肌缺血模型大鼠的保护作用。方法：大鼠随机分为6组,分别给以生理盐水、心可舒和大、中、小剂量的冠心平7d后,分别采用垂体后叶素﹙Pit﹚、异丙肾上腺素（ISO）致大鼠急性心肌缺血模型,记录各组大鼠心电图,测定血清LDH、肌酸磷酸激酶（CK）、丙二醛（MDA）、SOD指标,取心尖部全层心肌观察病理损伤情况。结果：冠心平对Pit所致急性缺血性心电图ST段变化有明显对抗作用,冠心平各剂量组均可不同程度降低ISO引起的急性心肌缺血模型大鼠血清LDH、CK活力,降低血清MDA水平,升高SOD水平,且均能减轻心肌病理损伤。结论：冠心平对Pit、ISO致大鼠心肌损伤模型具有明显保护作用。     

冠心Ⅱ 号提取工艺改进及其对急性心肌梗死大鼠心脏功能的影响

目的 对冠心Ⅱ 号进行提取工艺改进并观察其对急性心肌梗死（ AMI） 大鼠心脏功能的影响。方法 将冠心Ⅱ 号提取工艺进行改进和优化得到精制过滤液和纯化洗脱液， 并采用高效液相色谱仪进行主要成分分析。 采用左冠状动脉前降支下结扎法制备 AMI 模型， 造模成功的 50 只大鼠按随机数字表法分为模型组、 尼可地尔片组（ 2.7 mg/kg 体重）、 复方川丹颗粒组（ 川丹颗粒， 4.60 g 生药 /kg 体重）、 冠心Ⅱ 号精制组（ 4.60 g 生药 /kg 体重）、 冠心Ⅱ 号纯化组（ 4.60 g 生药 /kg 体重） 组， 每组 10 只。 另设 10 只穿线不结扎为假手术组。 术后第 2 天开始灌胃给药， 连续 4 周， 假手术组、 模型组灌胃等容积纯净水。 采用高频超声心动图检测各项心脏形态学和功能指标。 ELSIA 法检测心肌钙蛋白 T（ cTnT）、 内皮素 -1（ ET-1）、 降钙素基因相关肽（ CGRP）、 肌酸激酶同工酶 MB（ CK-MB）、 血栓素 B2（ TXB2） 和 6- 酮 - 前列腺素 F1α（ 6-Keto-PGF1α） 水平。 TTC 法染色测量心肌梗死面积， HE 染色观察心肌病理形态和炎症细胞浸润状态。 结果 丹酚酸 B 和芍药苷外标含量分别为川丹颗粒 0.767%、 0.418%， 冠心Ⅱ 号精制组 4.247%、1.546%， 冠心Ⅱ 号纯化组 32.758%、 12.150%。 与假手术组比较， 模型组 ET-1、 TXB2 升高（ P<0.05，P<0.01）， 心脏超声学检测指标改善（ P<0.05， P<0.01）。 与模型组比较， 冠心Ⅱ 号方两组和尼可地尔片组心脏超声学检测指标改善（ P<0.05， P<0.01）， 大鼠心重指数、 梗死面积比值、 cTnT、 ET-1 和 TXB2水平亦降低（ P<0.05， P<0.01） ； 川丹颗粒组部分心脏超声学检测指标改善（ P<0.05， P<0.01）， 大鼠心重指数、 cTnT、 ET-1 和 TXB2 降低（ P<0.05， P<0.01） ； 各给药组大鼠心肌缺血区的心肌细胞炎症浸润和细胞形态不同程度改善。 结论 冠心Ⅱ 号提取工艺改进的主要有效成分丹酚酸 B 和芍药苷含量有较大提高， 可提高 AMI 后大鼠心脏的射血分数、 抑制心室重构及改善心功能， 部分指标优于川丹颗粒。     

冠心Ⅱ号对动脉粥样硬化大鼠血脂、TNF-α、NO及TXA2/PGI2影响的实验研究

目的：观察冠心Ⅱ号对动脉粥样硬化大鼠血脂、TNF-α、NO及TXA2／PGI2的影响。方法：将24只大鼠随机分成正常对照组、模型组、冠心Ⅱ号治疗组，观察各组大鼠甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、TNF-α、NO及TXB2/6-keto PGF1α（T／K）水平的变化。结果：模型组的TG、TC和TNF—α含量及T／K比值明显高于正常对照组；冠心Ⅱ号组的TG、TC和/TNF-α含量及T／K比值较模型组明显下降。模型组血清NO含量较正常对照组明显降低，冠心Ⅱ号组血清NO含量较模型组明显增加。结论：冠心Ⅱ号可明显降低动脉粥样硬化大鼠血清TG、TC和TNF—α水平及T／K比值，提高NO含量。     

冠心Ⅱ号对急性心肌梗塞大鼠心肌损伤和心肌酶的影响

目的 观察冠心Ⅱ号对急性心肌梗塞大鼠心肌病理损伤和血清心肌酶的作用.方法 连续给大鼠灌胃冠心Ⅱ号标准汤剂5.6 ml/kg或等容积生理盐水7d,采用结扎左冠状动脉前降支(LAD)法建立大鼠急性心肌梗塞模型,24h后取血用比色法测定血清中谷-草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平;取心肌,固定、常规石蜡包埋、切片、HE染色,光镜观察心肌组织病理损伤程度.结果 冠心Ⅱ号组大鼠血清中AST,CK,CK-MB及LDH的水平较模型对照组下降(P<0.05);冠心Ⅱ号组大鼠心肌病理损伤等级低于模型对照组(P<0.05).结论 冠心Ⅱ号对急性心肌梗塞有保护作用和改善心肌酶作用.     

冠心二号方剂对健康人冠脉血流量的影响以及对大鼠心肌缺血再灌注模型抗心肌细胞凋亡的作用

目前缺血性心脏病仍是世界上人类的主要病死原因和公共健康问题。虽然中国的传统草药冠心二号方在中国及东亚地区广泛地用于治疗冠心病,但是其潜在机制尚不明晰。为了明确它的抗心肌缺血机制,我们招募了15名健康志愿者口服冠心二号方剂进行研究。比较服药前及服药后1小时这15个人的心率,血压和冠脉流速。结果发现口服冠心二号后,志愿者的冠脉流量成剂量依赖性地增加,而全身血流动力学参数却不受影响。此外,在大鼠心肌缺血再灌注模型中,我们研究冠心二号的心肌保护作用。细胞凋亡定量采用TUNEL法,并检测组织中caspase-3活性。冠心二号20g/kg的剂量口服给药,降低了大鼠心肌梗死面积和凋亡细胞百分比及caspase-3活性。以上结果表明,冠心二号抗心肌缺血的心脏保护作用可能是通过增加冠脉流量和抗心肌细胞凋亡实现的减少心梗面积。     

复方丹参注射液对兔急性心肌梗塞细胞凋亡的影响

目的探讨复方丹参注射液对兔急性心肌梗塞细胞凋亡的影响.方法采取末端脱氧核苷酸转换酶介导的dUTP生物素平移末端标记技术对兔实验性急性心肌梗塞时不同损伤区心肌细胞凋亡情况进行研究,同时观察外周血超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果对照组(急性心肌梗塞后静滴生理盐水)、用药组(急性心肌梗塞后静滴复方丹参注射液)的梗死区和再灌注区(梗死区边缘)心肌细胞凋亡阳性细胞数与阳性率均高于假手术组(不结扎冠脉静滴生理盐水)(P＜0.001,用药组再灌注区心肌细胞凋亡阳性细胞数与阳性率低于对照组(P＜0.05).血浆SOD活性,用药组高于对照组(P＜0.05),两组均低于假手术组(P＜0.001).血清脂质过氧化物产物加MDA含量,用药组低于对照组(P＜0.05),两组均高于假手术组(P＜0.01).结论复方丹参注射液可能通过减少血清MDA含量、提高血浆SOD活性来减少急性心肌梗塞时再灌注区的心肌细胞凋亡数.     

冠心康对实验性大鼠急性心肌缺血的保护作用

目的:探讨冠心康颗粒对大鼠急性心肌缺血的保护作用及其机理。方法:雄性大鼠32只,随机分为4组,每组8只,预防给药7d。灌胃结束后,采用在体大鼠冠状动脉左前降支结扎的方法建立心肌缺血模型,观察冠心康颗粒对大鼠急性心肌缺血后心肌中NO和NOS含量的影响,用免疫组化法检测Bc l-2蛋白在心肌中的表达。结果:模型组、冠心康组、地奥组与假手术组比较,心肌组织NO及NOS含量均有明显降低(P<0.05);而与模型组相比,冠心康组、地奥组的NO及NOS含量均有明显的恢复(P<0.05),提示冠心康颗粒可明显提高大鼠急性心肌缺血后心肌中NO和NOS含量(P<0.005,0.005),同时增加Bc l-2蛋白的表达,减少细胞凋亡。结论:冠心康颗粒对大鼠急性心肌缺血具有保护作用,可能与其提高心肌中NO和NOS含量,增加Bc l-2蛋白的表达有关。     

复方丹参滴丸与冠心丹参滴丸抗实验性心肌缺血的药效比较研究

目的：比较冠心丹参滴丸和复方丹参滴丸两种药物抗垂体后叶素（Pit)致大鼠急性心肌缺血的药效。方法：采用大鼠舌下静脉注射Pit造成急性心肌缺血的方法，观察各给药组在注射Pit后不同时间点Ⅱ导联心电图T波变化百分率（％），乳酸脱氢酶（LDH）、磷酸肌酸激酶（CPK）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量，结果：两种药物均能明显对抗Pit引起的急性心肌缺血的心电图变化；明显增加血清SOD的活性，减少MDA的含量；能够降低CPK的含量，对LDH未见明显影响，结论：两滴丸均具有明显对抗Pit致大鼠急性心肌缺血的作用，两药及不同剂量之间无明显差异，其作用可能与脂质过氧化作用有关。     

四逆汤有效部位抗心肌缺血/再灌注损伤神经酰胺机制的研究

目的:探讨四逆汤有效部位对心肌缺血再灌注过程中心肌细胞凋亡及神经酰胺含量的影响.方法:昆明种小鼠,随机分为对照组,模型组,四逆汤有效部位组,用垂体后叶素造模,取小鼠心肌测定SOD活性及MDA含量,通过DNALadder和Dapi荧光染色考察心肌细胞凋亡情况,通过高效薄层层析及薄层层析扫描,用随引标准曲线计算心肌组织中神经酰胺的含量.结果:模型组心肌细胞有凋亡特有的DNAladder,凋亡指数和神经酰胺含量及MDA含量均比正常组显著升高(P＜0.01),SOD活性比正常组显著降低(P＜0.01);与模型组相比,四逆汤有效部位组的凋亡指数和神经酰胺含量均显著降低(P＜0.01),SOD活性比模型组显著升高(P＜0.01);模型组神经酰胺含量与凋亡指数和MDA含量均呈明显正相关(r=0.970,P＜0.01;r=0.974,P＜0.001).结论:四逆汤有效部位可在一定程度上降低心肌缺血再灌注时增高的心肌神经酰胺的含量,减少心肌细胞凋亡,从而达到保护心肌的作用.     

黄芩苷对大鼠心肌缺血再灌注时细胞凋亡的影响

目的:研究黄芩苷对大鼠心肌缺血再灌注时细胞凋亡的影响。方法:结扎大鼠左冠状动脉前降支复制心肌缺血再灌注损伤模型,黄芩苷100mg/kg于冠脉结扎前10min静脉注射后,再灌注结束后称重法检测心肌梗死面积,分光光度法测定组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性,原位末端标记(TUNEL)法和HE染色观察凋亡心肌细胞和组织病理学改变。结果:黄芩苷可明显抑制缺血再灌注所致心肌梗死面积增大,降低组织MDA、MPO含量,升高SOD活性,抑制心肌细胞凋亡和炎性细胞浸润。结论:黄芩苷可通过抑制心肌细胞凋亡而保护缺血再灌注心肌。     

冠心Ⅱ号抗缺血性心肌损伤的自由基机理实验研究

目的：比较研究冠心Ⅱ号及其组成成分丹参、赤芍、川芎、红花、降香清除活性氧自由基(OFR),克服实验性急性心肌缺血所致损伤及保护心肌组织的分子作用机制。方法：大鼠腹腔注射垂体后叶素(pit),致急性心肌缺血作为实验动物模型,采用低温电子顺磁共振(EPR)技术直接测定动物组织内氧自由基的水平。结果：模型组大鼠心肌组织的病理切片(HE染色)及通过大鼠心电图的描记证实心肌组织发生了急性心肌缺血的典型病变,EPR实验表明心肌组织内OFR水平异常增高;而冠心Ⅱ号及其各单味药的乙醇粗提物均可使心肌组织内异常的自由基水平降低或接近正常,因而减轻了心肌组织的损伤程度。结论：氧自由基过量生成导致心肌组织损伤。运用低温EPR技术可直接测定其水平。冠心Ⅱ号及其组分抵抗并修复心肌损伤作用的分子机理之一是清除组织内异常增高的活性氧自由基。为进一步探讨中药复方的组方机理提供依据。