松杉灵芝发酵菌丝对CCl_4诱导的小鼠肝纤维化保护作用研究

目的研究松杉灵芝发酵菌丝抗肝纤维化作用机制。方法利用雄性C57小鼠,采用腹腔注射CCl_4构建肝纤维化模型,同时松杉灵芝发酵菌丝(0.5、1 g/kg)灌胃给药干预。采用HE染色检测肝纤维化的变化;生化检测血清丙氨酸转移酶(ALT)和天冬氨酸转移酶(AST)以及肝组织的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;血清白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;Western blot法检测转化生长因子(TGF-β)、Smad蛋白-3(Smad-3)、磷酸化Smad蛋白-3(p-Smad-3)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达。结果松杉灵芝发酵菌丝(0.5、1 g/kg)组显著抑制CCl_4诱导的小鼠肝纤维化程度,与纤维化模型组相比,松杉灵芝发酵菌丝(0.5、1 g/kg)组可有效减轻小鼠CCl_4所致肝纤维化病理学变化;血清中炎症因子IL-6、TNF-α水平和ALT、AST水平及肝脏组织中MDA水平明显降低(P0.01),SOD水平显著提高(P0.01);松杉灵芝发酵菌丝(0.5、1 g/kg)组显著抑制肝组织中TGF-β、p-Smad-3、MMP-3、MMP-9的蛋白表达(P0.01),Smad-3蛋白表达无明显变化(P0.05)。结论松杉灵芝发酵菌丝具有改善CCl_4所致小鼠肝纤维化的作用。其机制可能与阻断TGF-β/Smad信号转导通路、降低?型胶原基因的转录和表达,通过所含的麦角甾醇转化成维生素D2,下调TGF-β的表达,下调肝组织MMP-3和MMP-9表达,阻止肝纤维化和坏死细胞极度迁移增生等多种因素有关。     

狗蚁草乙酸乙酯提取物对CCl4所致肝纤维化小鼠的保护作用

目的:探究狗蚁草乙酸乙酯提取物对四氯化碳(CCl_4)所致肝纤维化小鼠的保护作用。方法:将昆明种小鼠90只随机分为正常组,模型组,秋水仙碱组(0.2 mg·kg~(-1)),狗蚁草乙酸乙酯提取物高剂量组(40 g·kg~(-1)),中剂量组(20 g·kg~(-1)),低剂量组(10 g·kg~(-1))。除正常组外,给予各组小鼠ih四氯化碳(CCl_4),1次/3 d,连续8周,造成小鼠肝纤维化模型,造模同时,给予各组小鼠相应药物ig给药,1次/d,连续8周。第8周末,检测各组小鼠血清丙氨酸氨基-转氨酶(ALT),天门冬氨酸氨基转氨酶(AST)活性和肝组织丙二醛(MDA),羟脯氨酸(Hyp),I型胶原蛋白(ColⅠ),Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ),Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ),转化生长因子-β1(TGF-β1),血小板衍生因子(PDGF)含量,制作肝组织HE染色和MASSON染色病理切片,观察切片并进行评分。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清ALT,AST活性和肝组织MDA,Hyp,ColⅠ,ColⅢ,ColⅣ,TGF-β1,PDGF含量明显升高(P0.05,P0.01),肝组织炎症、坏死明显,肝脏胶原蛋白增多;与模型组比较,狗蚁草乙酸乙酯提取物可降低CCl_4所致肝纤维化小鼠血清ALT,AST活性和肝组织MDA,Hyp,ColⅠ,ColⅢ,ColⅣ,TGF-β1,PDGF含量(P0.05,P0.01),减轻肝组织炎症、坏死等病理改变,减少肝脏胶原蛋白的增生。结论:狗蚁草乙酸乙酯提取物对CCl_4所致的肝纤维化小鼠有保护作用。     

补骨脂素通过延缓肝再生加重四氯化碳所致肝毒性的机制研究

研究补骨脂素(psoralen,PSO)是否通过诱导肝细胞周期阻滞而延缓肝再生,从而加重四氯化碳(CCl_4)所致的肝毒性。将6～8周龄雌性C57BL/6小鼠随机分成对照组(control组)、模型组(CCl_4组)、联用组(CCl_4+PSO组)和补骨脂素组(PSO组)。给予CCl_4组和CCl_4+PSO组小鼠单次腹腔注射100μL·kg~(-1)的CCl_4建立小鼠急性肝损伤模型;CCl_4注射后12,36,60 h,给予CCl_4+PSO组和PSO组小鼠灌胃200 mg·kg~(-1)的PSO。检测CCl_4注射后36,60,84 h的血清ALT和AST水平;使用HE染色法观察肝组织病理变化;RT-qPCR法检测肝脏HGF,TGF-β,TNF-α,p53和p21的mRNA水平;Western blot法检测肝脏中细胞周期相关蛋白的表达。结果显示,与control组相比,CCl_4单次腹腔注射36 h后,CCl_4组的ALT和AST水平显著升高,在84 h出现明显回落;与CCl_4组相比,CCl_4+PSO组在36 h的ALT和AST水平与CCl_4组相当,而在60,84 h时,ALT和AST水平均显著高于CCl_4组。HE染色结果显示,CCl_4组呈现弥散性分布的炎细胞浸润,未观察到CCl_4模型经典肝损伤表现;CCl_4联用PSO可致小叶中央型坏死和大量的炎细胞浸润;PSO组仅出现弥漫性水肿,未见肝细胞坏死或炎细胞浸润。RT-qPCR结果显示,PSO显著抑制CCl_4造模后HGF和TNF-α的mRNA表达,并且上调TGF-β,p53,p21的mRNA水平。Western blot结果显示,CCl_4组和CCl_4+PSO组的PCNA表达显著升高,CCl_4+PSO组的升高幅度小于CCl_4组;CCl_4与PSO共同作用可致p27的表达显著升高。初步的机制研究表明,PSO可延缓CCl_4损伤后肝脏修复过程,这一作用主要与PSO抑制肝脏发生急性损伤后PCNA的上调,以及对一些细胞周期相关蛋白的调节有关,其中p27,p53和p21可能在其中发挥重要的作用。     

蝙蝠葛碱对小鼠肝纤维化的影响和机制

目的探讨蝙蝠葛碱(DAU)对CCl_4诱导小鼠肝纤维化(LF)的影响和机制。方法 C57BL/6小鼠随机分成对照组、模型组、秋水仙碱组(秋水仙碱1mg·kg~(-1))、DAU高、中、低剂量组(40,20,10mg·kg~(-1))。采用30%CCl_4(1μl·g~(-1))腹腔注射诱导LF小鼠模型。放射免疫法检测血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、III型前胶原(PCIII)和IV型胶原(CIV)水平。生化分析法检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平。酶联免疫法检测肝脏转化生长因子-β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。电子显微镜观察小鼠肝组织形态结构并计算肝脏器指数。结果与模型组比较,DAU高、中剂量组小鼠血清HA、LN、PC-III、CIV、ALT和AST明显降低(P0.05),TGF-β1和TNF-α水平明显降低(P0.05),小鼠肝脏病理纤维化明显减轻,肝脏器指数明显降低(P0.05)。结论 DAU能有效减轻CCl_4诱导LF小鼠肝脏损伤,降低LF程度,其机制与抑制肝脏TGF-β1和TNF-α表达有关。     

甘草次酸衍生物抗肝纤维化的实验研究

目的探讨甘草次酸衍生物(TY501)对四氯化碳(CCl_4)致小鼠肝纤维化的保护作用及其机制。方法采用经典CCl_4造模法建立小鼠肝纤维化模型,给予高、中、低剂量(45、15、5 mg/kg)TY501干预治疗,用秋水仙碱(0.36 mg/kg)作阳性对照。给药30 d后,检测各组小鼠肝功能指标、肝纤维化指标、肝组织羟脯氨酸(Hyp)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的量,并取其肝组织进行病理学染色。结果与模型组相比,TY501各治疗组肝功能指标(ALT、AST、ALP、ALB)、肝纤维化指标(HA、LN、PCIII、CIV)及肝组织Hyp、TGF-β1的量均有不同程度改善,其中高剂量组改善作用最为明显(P0.05、0.01);肝组织病理学切片显示,给药组小鼠肝纤维化程度降低,有逆转趋势。结论 TY501对CCl_4造成的肝纤维化有明显的保护作用。     

虎杖苷对肝纤维化治疗作用实验研究

目的:研究虎杖苷对肝纤维化的治疗作用。方法:使用腹腔注射CCl4构建C57小鼠的肝纤维化模型,同时采用虎杖苷腹腔注射进行治疗。检测血清ALT水平以判断肝脏损伤情况,运用组织病理观察和天狼猩红染色观察肝纤维化情况,使用人源肝星状细胞系LX-2细胞给药干预后采用Western blot检测TGF-β1和α-SMA蛋白的表达情况。结果:相较于CCl4组,虎杖苷治疗组小鼠血清ALT水平明显降低,差异具有统计学意义(P0.05)。虎杖苷显著下调LX-2细胞系中TGF-β1和α-SMA的蛋白表达。结论:虎杖苷具有良好的抗肝纤维化作用,其作用可能与抑制TGF-β1有关。     

鳖甲煎丸对CCl4诱导小鼠肝纤维化的治疗作用机制研究

目的:研究鳖甲煎丸是否可以通过抑制单核细胞浸润从而减少单核细胞相关的促炎促纤维化细胞因子分泌来缓解肝纤维化。方法:40只小鼠被随机分为五组:空白对照组、四氯化碳(CCl₄)组、低剂量鳖甲煎丸组、中剂量鳖甲煎丸组和高剂量鳖甲煎丸组。其中CCl₄组和鳖甲煎丸组予以CCl₄腹腔注射,每周两次,连续4周。高、中、低剂量鳖甲煎丸组小鼠在予以CCl₄腹腔注射的同时,分别每日予以鳖甲煎丸灌胃,连续4周,剂量为2.2、1.1、0.55 g /(kg·d)。实验结束后,通过肝酶、HE染色检测肝脏炎症,Masson染色、α-SMA和Col-I免疫组化观察肝脏胶原沉积和HSCs活化,CD11b和F4/80免疫组化、流式细胞术观察肝脏中单核细胞数量,qRT-PCR和WB检测肝脏中单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的表达。结果:经4周CCl₄腹腔反复注射后,小鼠肝酶谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)明显升高,HE染色显示肝脏肝细胞坏死、炎性细胞浸润、胶原沉积,提示纤维化模型小鼠建立成功。鳖甲煎丸给药后,纤维化模型小鼠肝脏炎症和纤维化明显减少。与CCl₄组比较,鳖甲煎丸组小鼠单核细胞的肝内浸润明显减少。同时,鳖甲煎丸显著降低单核细胞相关促炎性和促纤维化细胞因子分泌,与肝内单核细胞数量减少相一致。进一步的研究发现鳖甲煎丸能够降低肝组织损伤时MCP-1分泌,表明鳖甲煎丸可以减少肝纤维化过程中单核细胞的浸润。结论:鳖甲煎丸可通过抑制单核浸润缓解肝纤维化,提示鳖甲煎丸可以作为预防和治疗肝纤维化的候选药物。     

衢枳壳提取物对CCl_4诱导的肝纤维化小鼠肝脏炎症及NF-κB/NLRP3炎性体通路的影响

研究衢枳壳提取物(QAF)对四氯化碳(CCl_4)诱导的肝纤维化小鼠肝脏炎症的影响及其机制。将60只C57BL/6雄性小鼠按照随机数字表法随机分为对照组(蒸馏水灌胃)、模型组(蒸馏水灌胃)、秋水仙碱组(Col,秋水仙碱2 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃)、QAF低剂量组(QAF-L,QAF 100 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃)和QAF高剂量组(QAF-H,QAF 300 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃)。模型组和各给药组用1 mL·kg~(-1)CCl_4(CCl_4-橄榄油1∶4)腹腔注射,每周2次。给药和造模共6周。末次给药后16 h,处死小鼠,收集血清以及肝脏组织。检测血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)水平,并观察小鼠肝功能情况;HE染色法观察各组小鼠肝组织病理学变化;F4/80免疫组化法观察各组小鼠肝脏炎症细胞浸润情况;采用RT-PCR法检测各组小鼠肝脏肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin, IL)-18和IL-1β mRNA表达;采用Western blot法检测各组小鼠肝脏IκBα,p-IKKα/β,p-p65,NLRP3,caspase-1和cleaved caspase-1表达情况。结果显示,不同剂量QAF显著缓解肝损伤程度,并降低肝纤维化小鼠肝功能指标血清ALT和AST水平。免疫组化结果显示,QAF显著减少肝纤维化小鼠肝脏炎症细胞浸润。RT-PCR和Western blot结果显示,QAF显著降低肝纤维化小鼠肝组织TNF-α,IL-18和IL-1β基因表达,并抑制肝脏IκBα蛋白降解,以及p-IKKα/β,p-p65,NLRP3和cleaved caspase-1蛋白表达。综上所述,QAF具有改善CCl_4诱导的小鼠肝纤维化的作用,其机制可能与抑制NF-κB/NLRP3炎性体介导的炎症信号通路有关。     

益气逐瘀解毒方抗四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的作用研究

目的:研究益气逐瘀解毒方(YQZYJD)对四氯化碳(CCl_4)诱导的大鼠肝纤维化的治疗作用。方法:将SD雄性大鼠给予CCl_4橄榄油混合液进行皮下注射7周,制备肝纤维化大鼠模型,随机分为YQZYJD高、中、低剂量组、阳性对照组、模型组,给予相应治疗,5周后处死大鼠,检测外周血生化指标ALT、AST和GGT,酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测透明质酸(HA)和层黏连蛋白(LN),肝组织HE、MASSON染色分别检测肝组织损伤及肝纤维化程度,免疫组化法分别检测大鼠肝组织中α-SMA及TGF-β1表达水平。结果:与阳性对照组相比,YQZYJD高剂量组GGT、HA和LN水平显著降低(P0.05),病理组织学检测发现,YQZYJD治疗各组的肝组织结构回复均优于模型组,而高剂量组优于阳性对照组;YQZYJD各剂量组α-SMA表达均较模型组显著降低(P0.05),YQZYJD高剂量组TGF-β1的表达较阳性对照组显著降低(P0.01)。结论:YQZYJD可促进CCl_4诱导肝纤维化大鼠模型的肝组织结构回复,过度沉积的ECM降解,抑制HSCs的活化,降低TGF-β1的表达水平,改善CCl_4诱导肝纤维化大鼠的肝纤维化程度。     

黄芪汤上调肝组织BAMBI表达改善CCl＿4诱导小鼠肝纤维化

目的探讨黄芪汤(HQD)对肝纤维化模型小鼠骨形成蛋白和激活素跨膜抑制剂(BAMBI)的作用。方法以10%CCl_4橄榄油溶液2 g/kg腹腔注射建立C57BL/6小鼠肝纤维化模型;于第4周起将造模组小鼠随机分为模型组(M)和黄芪汤组(HQD),每组12只,干预3周;检测各组小鼠的肝功能、肝组织BAMBI及相关胶原基因表达。体外培养LX-2细胞,观察HQD有效组分黄芪总皂苷(AS)和甘草酸(GA)对转化生长因子-β(TGF-β)信号传导和基因表达的影响。结果与模型组比较,HQD组血清丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶活性显著降低(P0.01);肝组织炎症坏死、胶原沉积均显著减轻(P0.01);肝组织Ⅰ型胶原(Col1a1)和基质金属蛋白酶-12 mRNA水平显著降低(P0.05),而Bambi mRNA表达显著增加(P0.01)。体外实验结果表明,AS和GA可显著抑制TGF-β1诱导的LX-2细胞活化和胶原合成;显著降低脂多糖诱导LX-2细胞的肿瘤坏死因子-α表达(P0.01),且显著增加LX-2细胞BAMBI表达(P0.01)。结论黄芪汤抗肝纤维化的作用机制可能与抑制肝脏炎症反应及上调BAMBI表达有关。     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

耳鸣(肾精亏损型)临床资料研究

[目的]对2007年11月至2008年11月就诊的主观性耳鸣患者246例,排除其他中医证型,主要研究肾精亏损型耳鸣患者耳鸣的临床特征,变化规律及耳鸣产生的影响等.[方法]选择肾精亏损型耳鸣患者,记录临床症状及体征,采用电测听及耳鸣匹配、听觉脑干诱发电位(ABR)等方法检查,并将资料进行统计分析.[结果]患者年龄以51～60岁最多见,其次为61～70岁.耳鸣响度的自我评分与响度匹配值之间无关联.大多数病例的耳鸣病程在一年之内.大部分患者受耳鸣困扰的程度在中度以下.ABR测试结果听力正常者占25%,右侧和左侧听神经传导至脑干功能障碍患者分别占13%和19%,双侧听神经传导功能障碍占16%.[结论]临床耳鸣患者多数为肾精亏损型,年龄以51～60岁最多见,男女比例相当,大部分患者听神经传导障碍和脑干功能障碍,高音调耳鸣患者居多.     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

针灸治疗椎动脉型颈椎病的取穴规律分析

目的:探寻椎动脉型颈椎病针灸取穴规律。方法:检索CNKI、VIP,建立椎动脉型颈椎病针灸取穴数据库,采用SPSS17.0统计软件统计描述。结果:治疗椎动脉型颈椎病的针灸穴位共计72个,使用频次为1005次;所用腧穴归属为督脉、足少阳胆经、经外奇穴、足太阳膀胱经及足阳明胃经频次最多,其累积频率达82.29%;其中风池穴的频率为19.11%;夹脊穴的频率为17.13%;百会穴的频率为12.3%,三穴累积频率达64.28%。结论:针灸治疗本病,以疏通局部经络,调节阴阳气血,临床选取督脉、足少阳胆经、奇穴以及风池、夹脊、百会三穴治疗最多。     

股骨头坏死病因的相关因素分析

目的:基于中国股骨头坏死数据库(China osteonecrosis of the femoral head database,CONFHD)资料分析股骨头坏死(Osteonecrosis of the femoral head,ONFH)病因的相关因素。方法:纳入CONFHD中2016年7月至2018年12月收录的病例资料,由数据库工程师从数据库中导出资料,包括患者的性别、年龄、病因、受伤类型、饮酒史(饮酒年限、饮酒频率、饮酒量)、激素应用史(激素应用时间、原发病类型、激素应用途径、激素种类)。结果:本研究共纳入病因资料完整的ONFH患者1290例。创伤性239例(18.53%),酒精性692例(53.64%),激素性359例(27.83%)。男1011例(78.37%),女279例(21.63%)。男性患者中创伤性138例(13.65%)、酒精性653例(64.59%)、激素性220例(21.79%),女性患者中创伤性101例(36.20%)、酒精性39例(13.98%)、激素性139例(49.82%);男性中酒精性比例最高,女性中激素性比例最高。1290例中,年龄≤30岁169例,激素性71例(42.01%);年龄31~40岁254例,酒精性146例(57.48%);年龄41~50岁324例,酒精性202例(62.35%);年龄51~60岁319例,酒精性185例(58.00%);年龄61~70岁158例,酒精性67例(42.41%);年龄≥71岁66例,创伤性和酒精性均为25例(各占37.88%)。受伤类型资料完整的创伤性ONFH患者144例,股骨颈骨折126例(87.50%)。饮酒史资料完整的酒精性ONFH患者544例,男性537例(98.71%),年龄41~50岁者172例(31.62%),饮酒年限6~10年149例(27.39%),饮酒次数5次≤每周饮酒<6次与每周饮酒≥7次均为127例(各占23.35%),每周饮酒量3001~3500 mL 222例(40.81%)。激素应用史资料完整的激素性ONFH患者210例,男112例(53.33%)、女98例(46.67%);激素应用时间14~10950 d,中位数365 d;原发病中免疫系统疾病50例(23.81%),比例最高,其余依次为皮肤、泌尿及血液系统等疾病;激素应用途径,口服125例(59.50%);激素应用种类,强的松68例(32.38%),比例最高,其余依次为地塞米松、甲强龙、泼尼松龙等。结论:酒精、激素、创伤仍是排在前3位的ONFH发病诱因;酒精性ONFH患者,多数饮酒时间>5年,每周饮酒次数>5次;激素性ONFH患者,激素应用时间中位数为365 d,应用途径主要是口服,排在前3位的药物为强的松、地塞米松、甲强龙,原发病主要为免疫、皮肤、泌尿、血液系统疾病;创伤性ONFH患者受伤类型以股骨颈骨折为主。     

辨证与辨病相结合辨治乳腺增生病

探讨乳腺增生病中医辨证分型的客观依据,泌免疫变化与中医辨证分型的相关性进行了总结和研究,医药辨治乳腺增生病的新思路。对乳腺增生病的红外光扫描诊断、病理分类、内分以期能够使微观医学与宏观辨证相结合,以开拓中医药辨治乳腺增生病的新思路。     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论，分析了中药产业竞争力提升的环境与条件，提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。     

往来寒热证58例辨证论治探讨

收集我院门诊自2000年10月至2003年9月接诊的往来寒热证患者58例,实验室检查排除疟疾(血涂片均未找见疟原虫),分别从少阳辨证论治33例,从膜原辨证论治25例,疗效满意。     

咳嗽六经辨治初探

六经皆有咳嗽,寒热皆可致咳,治疗上不可拘于一理一方,当穷究其机,辨证施治,方能事半功倍。以六经辨证为纲,分析《伤寒杂病论》对咳嗽的有关论述,以期提高咳嗽的临床疗效。     

中医“治未病”理论的研究

治未病是中医学重要的防治思想,即预防疾病的发生和发展,防惠于未然的预防学思想,即未病之前,防止疾病的发生;已病之后,防止疾病的传变,强调以“预防为主”。本文从治未病的渊源;治未病思想的实质内容;“治未病”理论的应用;“治未病”临床研究进展等几方面解释治未病。