UPLC-MS/MS同时测定大承气汤大鼠血浆中9种活性成分的含量

该研究建立了大鼠血浆中大承气汤9种活性成分同时测定的UPLC-MS/MS方法。采用Aglient C₁₈色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）进行色谱分离,利用甲醇-5 mmol·L^-1甲酸铵流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1。实验过程血浆的前处理不仅考察了甲醇、乙腈等有机溶剂蛋白沉淀法,同时考察了液-液萃取法中不同萃取溶剂、不同涡旋时间、萃取次数及不同体积萃取溶剂等因素对各活性成分回收率的影响。最终确定以布洛芬为内标,采用乙酸乙酯液-液萃取法进行血样前处理,N₂吹干复溶,离心后上清液进行UPLC-MS/MS分析,在电喷雾电离（ESI）负离子模式下,采用多重反应监测模式进行检测。大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚、厚朴酚、和厚朴酚、橙皮苷及橙皮素的线性范围分别为0.33~660,0.40~792,0.41~827,0.34~680,0.45~907,0.46~927,0.43~867,0.34~683,0.39~787 μg·L^-1,且线性关系良好;提取回收率均>69.39%;日内和日间的RSD<15%。该方法符合生物样品分析的要求,可用于研究大鼠灌胃大承气汤后,血浆中该9种活性成分的同时测定,为其量-效物质基础提供了理论依据。     

UPLC-MS/MS法同时测定女金胶囊中10种成分

目的 建立UPLC-MS/MS法同时测定女金胶囊(当归、白芍、川芎等)中益母草碱、芍药苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、延胡索乙素、橙皮苷、黄芩苷、桂皮醛、甘草酸、欧前胡素的含量.方法 该药物70％乙醇提取液的分析采用Phenomenex Kinetex C1s色谱柱(2.1 mm×50 mm,2.6 μm);流动相0.1％甲酸...     

UPLC-MS/MS法测定四种雪莲培养物中九个维生素类成分含量

目的:建立超高效液相色谱三重四级杆串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定4种雪莲培养物中9个水溶性维生素类成分的方法,分析比较不同雪莲悬浮细胞中维生素种类和含量差异。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以10 mmol·L~(-1)乙酸铵(A)-乙腈(B)溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.5 m L·min~(-1),柱温为40℃;采用电喷雾离子源、正离子检测方式,得到相应的提取离子流图,以峰面积进行定量。结果:9个维生素类成分具有良好的线性关系,r值均大于0.999 0,方法精密度、重复性和稳定性的RSD值均小于4.28%,加样回收率在97.6%~103.4%,RSD在1.83%~3.12%。不同雪莲悬浮细胞中9个维生素类成分在组成和含量上无明显差异。结论:该方法操作简便、准确、重复性好,适用于雪莲悬浮细胞中水溶性维生素的测定。     

UPLC-MS/MS法同时测定贞芪扶正胶囊中10种成分

目的建立UPLC-MS/MS法同时测定贞芪扶正胶囊(女贞子和黄芪)中腺苷、红景天苷、绿原酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、特女贞苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、槲皮素、芹菜素、黄芪甲苷的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Inertsutain C18色谱柱(75 mm×3.0 mm,2μm);流动相乙腈-甲醇-4 mmol/L乙酸铵,梯度洗脱;体积流量0.5 m L/min;柱温40℃。结果 10种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.996 0),平均加样回收率95.1%~104.3%,RSD小于4.20%。结论该方法快速灵敏,专属性强,可用于贞芪扶正胶囊的质量控制。     

基于UPLC-MS/MS方法测定固培牛樟芝粉末中4种黄曲霉素含量

目的 建立UPLC-MS/MS方法测定固培牛樟芝粉末中4种黄曲霉素含量,考察方法的适用性和可行性.方法 Acquity BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相乙腈-0.1％ 甲酸水.采用不同浓度黄曲霉素B1、B2、G1、G2对照品溶液进样,获得校正曲线,进行方法学考察,测定固培牛樟芝粉末中...     

UPLC-MS/MS法同时测定辛夷中12种木脂素

目的建立超高效液相色谱-三重四级杆质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定辛夷Magnolia biondii Pamp.中桉脂素、木兰脂素、epimagnolin、里立脂素B二甲醚、落叶松树脂醇-4′-O-β-D-葡萄糖苷、7R~*,8S~*-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol-4-O-β-D-glucopyranoside、4,4′-dimethoxy-3′-hydr-oxy-7,9′:7′,9-diepoxylignan-3-O-β-D-glucopyranoside、3′,4-O-dimethylcedrusin、松脂醇、fargesol、辛夷脂素和conicaoside的含有量。方法辛夷60%甲醇提取物的分析采用Waters Acquity BEH C_(18)柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相0.1%甲酸水-甲醇溶液,梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min;柱温30℃。结果 12种成分在各自范围内线性关系良好(R~20.995 6),平均加样回收率为98.76%～102.32%, RSD 1.89%～2.58%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于辛夷的质量控制。     

UPLC-MS/MS法同时测定百合知母汤中10种成分的含量

目的 建立UPLC-MS/MS法同时测定百合知母汤中菝契皂苷元、王百合苷C、知母皂苷AⅢ、芒果苷、新芒果苷、王百合苷A、王百合苷B、知母皂苷BⅢ、异芒果苷、知母皂苷BⅡ的含量。方法 分析采用Agilent Poroshell 120 EC-C₁₈色谱柱(3.0 mm×150 mm, 2.7μm);流动相水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温30℃;电喷雾离子源;正负离子扫描;多反应监测模式。结果 10种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.998 1),平均加样回收率95.65%～106.5%,RSD 1.2%～5.5%。结论 该方法准确、灵敏、快速,可用于百合知母汤的质量控制。     

UPLC-MS/MS同时测定桂枝茯苓胶囊中6种三萜酸类成分的含量

建立超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS/MS)同时测定桂枝茯苓胶囊中6种三萜酸类成分含量的分析方法。采用Agilent Porosheell 120 SB-C_(18)柱(4.6 mm×150 mm,2.7μm);流动相为0.1%甲酸水溶液-甲醇,梯度洗脱,流速0.4 m L·min~(-1),柱温30℃;进样量5μL。质谱条件采用电喷雾离子(ESI)源,多重反应监测(MRM)扫描,定量离子对为m/z 527.8→465.5(茯苓酸),m/z 525.6→465.6(去氢茯苓酸),m/z 483.4→337.3(去氢土莫酸),m/z 481.5→419.5(猪苓酸C),m/z467.4→337.1(去氢齿孔酸),m/z 453.4→337.0(松苓新酸)。结果显示,6种三萜酸类成分在进样质量浓度范围内呈现良好的线性关系(r0.996 8),精密度RSD6.2%;重复性RSD5.9%,平均回收率分别为97.90%,100.2%,99.60%,101.7%,102.6%,103.0%。该方法准确、快速、重复性好,实现了中药成方制剂中茯苓三萜酸类成分的定量测定,可为桂枝茯苓胶囊的质量控制提供参考方法;并为含茯苓的中药成方制剂中建立含量测定方法提供参考。     

UPLC-MS/MS法同时测定小绿叶止咳糖浆中8种成分的含量

目的 建立UPLC-MS/MS法同时测定小绿叶止咳糖浆中常春藤皂苷C、常春藤皂苷B、α-常春藤皂苷、芦丁、秦皮甲素、金丝桃苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、绿原酸的含量。方法 分析采用Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.7μm);流动相0.05%甲酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温40℃;电喷雾离子源;正负离子扫描;多反应监测模式。结果 8种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.999 0),平均加样回收率96.61%～101.28%,RSD 1.78%～3.82%。结论 该方法快速准确,稳定灵敏,可用于小绿叶止咳糖浆的质量控制。     

UPLC-MS/MS法同时测定血必净注射液中8种成分

目的建立超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS/MS)法同时测定血必净注射液(红花、赤芍、川芎等)中没食子酸、苦参碱、丹参素、羟基红花黄色素A、咖啡酸、芍药苷、阿魏酸、木犀草苷的含有量。方法该药物5%乙腈提取液的分析采用ACQUITY UPLC~BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min;柱温40℃。再对所测定含有量进行聚类分析。结果 8种成分在各自范围内线性关系良好(r0.996 0),平均加样回收率95%~104%,RSD均小于3%。10批样品中各成分含有量总体稳定,但没食子酸和芍药苷有一定差异。结论不同批次血必净注射液的质量仍参差不齐,应加以关注。     

人参花醇提物中的皂苷类化学成分

目的:研究人参Panax ginseng C.A.Meyer(Araliaceae)花中的皂苷类成分。方法:采用多种色谱技术对人参花的醇提物进行分离纯化,并根据理化性质和波谱学数据对化合物进行结构鉴定。结果:从人参花70%乙醇水溶液提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为人参皂苷Re(1)、20(R)-人参皂苷Rg1(2)、20(S)-人参皂苷Rh1(3)、20(R)-人参皂苷Rh1(4)、人参皂苷Rd(5)、人参皂苷F1(6)、人参皂苷F5(7)、人参皂苷F3(8)、20(S)-原人参三醇(9)、达玛-20(21),24-二烯-3β,6α,12β-三醇(10)和达玛-(E)-20(22),24-二烯-3β,6α,12β-三醇(11)。结论:化合物3、9~11为首次从人参花中分离得到。     

Saponin Accumulation in Flower Buds of Panax notoginseng

Objective Panax notoginseng is an important Chinese medicinal plant. Saponin accumulation is higher in the flower buds than in the other parts of P. notoginseng. However, the flower bud compositions have not yet been quantified. The aim of this study is to investigate the formation and accumulation of saponins in the flower buds of P. notoginseng from different populations and at different growth years. Methods Fourteen types of P. notoginseng with different growing durations and from different areas of Wenshan County, Yunnan Province were collected. We separated P. notoginseng individually into the flower buds, stems, leaves, and roots at the places where it has the highest saponin content. An efficient high-performance liquid chromatography(HPLC) method was developed for simultaneously quantifying two active saponins, ginsenoside Rb1 and ginsenoside Rb3, in the flower buds of P. notoginseng. The total saponin content was determined by using a quantitative vanillin-sulfuric acid colorimetric method. HPLC method was used to establish the fingerprints of 13 saponins and then quantify the composition in the whole plant of P. notoginseng. Results The saponin contents of different parts differ significantly, and the total saponin content and those of Rb1 and Rb3 do not entirely correlated. The flower buds of P. notoginseng contain 27.79% of total saponins, which is the highest saponin content in the whole plant. Fingerprint result showed that different saponins were appeared in different parts of the plant, i.e. flower buds, stems, leaves, and roots.Conclusion The saponin contents from the flower buds of P. notoginseng vary depending on the growth area and duration. The fingerprints show that the saponin contents and compositions vary depending on the part of P. notoginseng. These results are useful for the pharmacological evaluation and quality control of P. notoginseng.     

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??OBJECTIVE To develop and validate a sensitive and specific ultra-performance liquid chromatography-tandemmass spectrometric (LC-MS/MS) method for the assay of diosgenin in rat plasma. METHODS Tanshinone ??A was employed as internal standard. Diosgenin was determined after the methanol-mediated plasma protein precipitation. The separation was performed on the Phenomenex kinetex xb C₁₈ column (2.1 mm??50 mm,2.6 ??m) gradiently eluted with the mobile phase consisting of methanol(containing 0.1% formic acid)-0.1% aqueous formic acid. The flow rate was 0.2 mL??min^-1, the column temperature was maintained at 40 ??, and the injection volume was 5 ??L. A triple quadrupole mass spectrometer equipped with electrospray ionization source was used as detector in a positive ion mode. Multiple reaction monitoring (MRM) mode was applied with the transition of m/z 415.2??271.1 and m/z 295.1??249.1 for diosgenin and internal standard, respectively. RESULTS For diosgenin the standard curve was linear from 10 to 500 ng??mL^-1(r=0.998 3), the limit of quantitative limit was 10 ng??mL^-1, the intra- and inter-assay variabilities were below 15%, the accuracies were between 96.1% and 102.3%, the average extract recoveries ranged from 73.8% to 75.2%, and the matrix effects was between 85.8% and 91.7%. For the internal standard, the extract recovery and matrix effects were 83.8% and 92.4%, respectively. The rats were administered orally with diosgenin (100 mg??kg^-1). The peak concentration of diosgenin was (344.067??34.48) ng??mL^-1, the time for peak concentration was (4.167??2.041) h, the half-time was (14.85??10.53) h, and the area under concentration-time curve from zero to 72 h was (4 965.648??1 036.129) ??g??h??L^-1. CONCLUSION This assay is specific, simple, sensitive and rapid, which can be applied in the pharmacokinetic study of diosgenin in rats.     

UPLC-MS/MS法测定苦楝皮、川楝子及其制品中川楝素含量

目的:基于UPLC-MS/MS方法建立苦楝皮、川楝子、炒川楝子中川楝素的定性鉴别及含量测定方法。方法:供试样品经甲醇加热回流后,采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),以BEH-C18为分析柱,流动相为0.1%甲酸水-乙腈(60∶40),电喷雾电离(ESI-),采用一级、二级扫描及多重反应监测(MRM)模式,对川楝子、炒川楝子、苦楝皮中川楝素进行快速定性定量检测。结果:所建方法能快速定性、定量检测川楝素,定性离子对为m/z 573→531和m/z 573→425,川楝素在50~1000 ng·m L~(-1)线性良好,平均加样回收率为97.6%,方法检出限为60μg·g~(-1)。结论:所建方法快速、灵敏,适用于川楝子、炒川楝子、苦楝皮中川楝素的快速定性鉴别及含量测定。     

超高效液相色谱-串联四级杆质谱测定肝素中硝基呋喃代谢物残留

 目的 建立超高效液相色谱-串联四级杆质谱测定动物源性药物肝素中4种硝基呋喃代谢物残留的方法。方法 样品在酸性条件下水解,经2-硝基苯甲醛(2 - NBA) 37 ℃衍生化16 h,乙酸乙酯提取后,采用电喷雾电离,正离子扫描,多反应监测模式（MRM）检测,内标法定量测定。结果 硝基呋喃代谢物线性范围分别在0.1～10.0 μg·L^-1之间;r分别在0.994～0.996之间;检出浓度分别在0.08～0.226 μg·kg^-1之间;回收率分别在82.4%～109.7%之间。结论 该方法快速、准确、灵敏,可作为肝素中4种硝基呋喃代谢物的测定。     

三七注射液指纹图谱的LC／MS测定

采用LC／MS技术测定了中药三七（包括药材,中间体及针剂成品）的指纹图谱,通过实验比较,确定75％,乙醇作为较适宜的提取溶剂,对中间体和成品则直接进样分析,并比较了三者的相关性。     

薄层扫描法测定辛夷中辛夷脂素的含量

目的建立辛夷药材中辛夷脂素的含量测定方法。方法采用双波长薄层扫描法,测定波长285 nm,参比波长360nm。结果线性范围1~8μg(r=0.998),回收率102.16%。结论方法准确,重现性好,可用于辛夷药材的质量评价。     

UPLC-MS/MS测定心悦胶囊中6个皂苷类成分的含量

目的 采用超高效液相色谱-质谱法（UPLC-MS/MS）建立心悦胶囊中主要成分人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、拟人参皂苷F₁₁、人参皂苷Rd和20(S)-人参皂苷F₁的含量测定方法。方法 使用Waters ACQUITY BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^–1,柱温为40 ℃,电喷雾电离源,多反应离子监测扫描方式进行检测。结果 6个成分分别在质量浓度为9.638~963.800、9.839~983.900、9.951~995.100、5.270~1 054.000、9.608~960.800、4.905~981.000 ng·mL^–1时与峰面积线性关系良好（r>0.998）,平均加样回收率（RSD）分别为96.9%（2.2%）、100.1%（1.5%）、97.2%（1.8%）、98.5%（2.3%）、96.6%（2.8%）、100.2%（3.5%)。结论 所建立的方法快速、准确、灵敏度高,可用于心悦胶囊中西洋参茎叶总皂苷的质量控制。     

基于UPLC-MS/MS同时测定番泻叶中吡咯里西啶生物碱的含量

目的:通过超高效液相串联质谱(UPLC-MS/MS)方法测定番泻叶中吡咯里西啶生物碱(PA)的含量,为番泻叶的安全评估奠定基础。方法:以95%甲醇水为溶剂对番泻叶药材进行超声提取,阳离子交换固相萃取小柱净化富集。采用Zorbax Eclipse Plus C_(18)(150 mm×3.0 mm,1.8μm)色谱柱,流动相为甲醇-水-0.1%甲酸,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min~(-1);电喷雾离子源,正离子多反应监测模式。结果:14个PA化合物具有较好的线性关系(r0.990 5),各化合物回收率为80.60%～103.22%,精密度和准确度良好,方法检出限和定量限分别为0.1～0.5、0.2～1.0μg·L~(-1)。从12批番泻叶主要检测出5种PA,且PA的总质量分数为7.06～187.97μg·kg~(-1)。根据最高日摄入量计算,5批番泻叶药材中的PA摄入量超过0.42μg·d~(-1)。结论:本研究首次通过UPLC-MS/MS检测到了番泻叶中的PA,通过对其日摄入量的分析,为番泻叶的安全评价提供参考。     

UPLC-MS/MS测定二妙散提取物中14种成分的含量

目的:建立同时测定二妙散提取物中14种成分(小檗碱,黄柏碱,巴马汀,木兰花碱,药根碱,四氢小檗碱,四氢巴马汀,绿原酸,阿魏酸,黄柏内酯,黄柏酮,白术内酯Ⅰ,白术内酯Ⅱ,白术内酯Ⅲ)含量的UPLC-MS/MS分析方法。方法:采用Waters Acquity BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),0.1%甲酸(A)-甲醇(B)作为流动相进行梯度洗脱(0~1.0 min,10%B;1.0~8.0 min,10%~60%B;8.0~9.0 min,60%~90%B;9.0~13.0 min,90%B;13.0~13.1 min,90%~10%B;13.1~15.0 min,10%B),流速0.3 m L·min~(-1),进样量5μL;质谱条件采用多反应离子监测扫描模式(MRM)及正离子电喷雾模式,优化三重四级杆质谱仪参数和14种指标性成分的质谱参数进行检测;数据处理采用独立样本t检验。结果:在一定浓度范围内,14种成分的线性关系良好(r0.999 5);平均加样回收率在95%~110%,RSD≤5%;不同批次的提取物之间各成分含量差异较小;配伍后有利于黄柏碱、木兰花碱、白术内酯类成分的溶出(P0.05),显示出配伍的优越性。结论:该方法灵敏度高、稳定可靠、重复性良好,为综合评价二妙散的质量提供一定的依据。