不同热、冷缺血时间对供肝胆道保存的影响

目的：探讨不同热、冷缺血时间对供肝胆道的影响。方法：将经历不同热缺血时间的ＳＤ大鼠肝脏用４℃ＵＷ液（ｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷｉｓｃｏｎｓｉｎ）经门静脉灌注，胆管用４℃ＵＷ液或Ｒｉｎｇｅｒ液逆行灌注后置４℃ＵＷ液中保存一定时限。光镜观察胆道粘膜。结果：ＵＷ液灌注组：热缺血时间在３ｍｉｎ以内胆道经历１２ｈ冷缺血后无明显改变；热缺血时间达５ｍｉｎ的胆道在经历１２ｈ冷缺血后出现严重的损伤。用Ｒｉｎｇｅｒ液进行胆道灌洗效果欠佳。结论：①ＵＷ液对供肝胆道有保护作用。②关于供肝胆道的保存时限：热缺血时间不应超过５ｍｉｎ；若热缺血时间在３ｍｉｎ以内，冷缺血时间可延长至１２ｈ；热缺血时间达５ｍｉｎ，则冷缺血时间不应超过８ｈ。     

维生素B_1防护小鼠顺铂肾毒性的形态学研究

小鼠多次ｉｍ维生素Ｂ１，可显著降低肾毒性剂量顺铂（３０μｍｏｌ．ｋｇ－１）引起的肾组织损伤。实验结果，顺铂组光镜下肾小管上皮呈现变性或坏死，电镜下肾小管上皮细胞多见线粒体肿胀，甚至出现核溶解及局部胞质溶解。而维生素Ｂ１顺铂组光镜下肾小管接近正常，电镜下仅见个别线粒体肿胀。     

家兔急性缺血再灌流性肾损伤的实验研究

目的：探讨肾缺血再灌流损伤发生的机制。方法：采用家兔急性肾缺血再灌流损伤模型，实验分缺血再灌流（IR）组和对照（control）组。均去右肾，检测在缺血1小时后再灌流24小时时肾组织中过氧化脂质（LPO）、血清中肌研（Cr）和尿素氮（BUN）含量；光镜下肾组织中白细胞（WBC）和肾小管坏死数目；电镜下肾组织超微结构改变。结果：IR组以上指标同对照组比较，差异显著（P＜0.01）；IR组肾组织细胞发生明显变性、坏死改变，而对照组肾组织超微结构正常。结论：肾组织中WBC和氧自由基增多在缺血再灌流性肾损伤中起着重要的作用。     

缺血预处理抗缺血再灌流性肾组织损伤的电镜观察

目的：通过观察肾组织电镜下结构改变探讨血预处理（ＩＰＣ）在肾缺血再灌流（ＩＲ）损伤中的作用，以及ＩＰＣ２、３、４次对ＩＲ肾作用是否具有差异性。方法：在６３只日本大耳白兔，彩用肾动脉夹闭造成肾损伤动物模型，ＩＰＣ＋ＩＲ组在缺血前分别预处理２、３、４次，单纯缺血再８灌流组仅手法模拟。结论：ＩＰＣ可减轻ＩＲ所造成的肾组织损伤，ＩＰＣ２，３，４次间作用无明显差异。     

增龄对大鼠肾缺血再灌注肾小管上皮细胞凋亡的影响

采用原位末端转移酶标记技术（ＴＵＮＥＬ）标记法,结合肾组织切片ＨＥ染色,观察并比较３个月与２４个月大鼠肾缺血再灌注不同时相损伤所激发的细胞凋亡现象。结果发现肾缺血再灌注１２、４８ｈ后,各年龄组大鼠肾小管上皮细胞凋亡水平均明显高于正常对照大鼠（Ｐ＜０．００１）;且于正常和缺血再灌注各时相组,２４月龄组的肾小管上皮细胞凋亡水平均明显高于３月龄大鼠（Ｐ＜０．０１）。提示肾小管上皮细胞凋亡是缺血再灌注后肾小管细胞死亡的一种主要方式,随年龄增长机体可通过细胞凋亡的调节机制增加细胞凋亡水平,达到清除损伤、衰老细胞的目的     

逆行灌注法对供肾保护作用的实验研究

目的 探讨一种新的供肾摘取时的灌注方法。方法 实验1：将30只兔肾以常规手术方法摘取后，随机分为两组。第1组为逆行灌注组，即灌注时从肾静脉灌入灌注液，从肾动脉流出的方法灌洗肾脏。第2组为传统灌注组，即从肾动脉灌入灌注液，从肾静脉流出的方法灌注肾脏。供肾摘取方法、摘取时灌注压力、供肾的保存方式和保存温度以及两组供肾取材的时间、标本处理方法两组均相同。对两组供肾0、12、24小时后的病理组织在光镜和电镜下进行观察比较。实验2：另取6只羊肾随机分为A、B两组，每组3只。以相同的方法灌洗后，A组以逆行灌注法造影(从静脉到动脉)，B组以动脉灌注方法造影(从动脉到静脉)。血管造影时，造影剂及其温度相同，灌注压力也均为100cmH2O。观察两组肾脏充盈时间、灌注质量及血管影像学差异。结果 实验l：兔肾摘取后立即取材观察，1组和2组的兔肾组织结构在光镜及电镜下观察基本保持正常。保存到24小时，两组兔肾在光镜下可见仍基本保持正常结构。电镜下1组和2组所见也无差别，肾小管上皮细胞线粒体嵴基本正常，核膜清晰可见，染色质分布尚均匀，未见内质网明显改变。肾小球毛细血管内皮窗孔增大，基膜完整，足细胞足突排列整齐，紧靠基膜。实验2：血管造影可见，逆行灌注组肾脏充分充盈所需时间分别为5秒、6秒、7秒。而B组肾脏充分充盈所需时间分别为8秒、12秒、12秒。A组灌注质量明显优于B组。结论 在供肾摘取过程中逆行灌注方法和传统灌注方法一样，能够灌洗供肾，减少供肾缺血性损伤，在组织及形态结构上保护供肾，是一种有效可行的供肾灌注方法。     

硝酸镧生物膜超微标记示踪在肾缺血再灌流损伤研究中的应用

在兔肾缺血再灌流动物模型中采用硝酸镧生物膜超微标记示踪法对肾小管细胞膜和线粒体膜的通透性进行了观察，并结合肾组织中ＬＰＯ和Ｈ２Ｏ含量的变化，对肾缺血再灌流损伤的发病机理进行了讨论。     

肠缺血再灌注导致血浆降钙素基因相关肽水平增高

经ＲＩＡ分析发现在大鼠肠缺血再灌注后血浆中卫钙素基因相关肽（ＣＧＰＲ）较损伤前平均增加３．５倍，经假手术相应水平增加２．２倍，肺灌洗液中损伤组比假手术组又损增加３９％。磷脂酶Ａ２阻断剂三氟拉嗪和环氧化酶抑制剂消炎痛预先腹腔治疗可增加ＣＧＲＰ在血浆中的浓度，百同时肺灌液中ＣＧＲＰ的含量减少，但体外局部用药二者可明显促进正常肺组织释放ＣＧＲＰ。结果表明，肠缺血／再灌注（Ｉ／Ｒ）诱导血浆中ＣＧＲＰ增国。     

海洛因依赖大鼠肾病理改变

目的:研究海洛因对肾脏损伤的病理改变。方法:建立海洛因依赖大鼠模型,对肾组织分别行HE、PAS、PASM染色后光镜观察肾小球、肾小管病变情况。结果:当前计量下所有大鼠肾均见肾小球轻度缺血和肾小管上皮轻度损害,部分病例见蛋白管型。结论:海洛因对肾脏的急性损伤,表现为肾小球轻度缺血和肾小管上皮的轻度损害。     

肢体缺血再灌注致肠损伤及丹参的保护作用

目的：通过动物实验观察丹参作肢体缺血再灌注所致肠损伤的保护作用。方法：８０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成正常对照组，缺血３ｈ和缺血３ｈ用丹参３个组。实验组于缺血再灌注１，２，３和２４ｈ取材光镜对比观察和组织学评估。结果：肢体缺血和再灌注后，实验组肠粘膜固有层毛细血管扩张、充血、大量多核白细胞浸润。大肠和小肠粘膜厚度和隐窝深度明显减少（Ｐ〈０．０１），小肠绒毛高度相对增加（Ｐ〈０．０１）。隐窝细胞有变性坏死，用丹参组的病变明显轻于未用丹参组。结论：丹参能有效地减轻肢体缺血再灌注所致的肠损伤。     

逆行灌注法对供肾保护作用的实验研究

目的探讨一种新的供肾摘取时的灌注方法。方法实验1:将30只兔肾以常规手术方法摘取后,随机分为两组。第1组为逆行灌注组,即灌注时从肾静脉灌入灌注液,从肾动脉流出的方法灌洗肾脏。第2组为传统灌注组,即从肾动脉灌入灌注液,从肾静脉流出的方法灌注肾脏。供肾摘取方法、摘取时灌注压力、供肾的保存方式和保存温度以及两组供肾取材的时间、标本处理方法两组均相同。对两组供肾0、12、24小时后的病理组织在光镜和电镜下进行观察比较。实验2:另取6只羊肾随机分为A、B两组,每组3只。以相同的方法灌洗后,A组以逆行灌注法造影(从静脉到动脉),B组以动脉灌注方法造影(从动脉到静脉)。血管造影时,造影剂及其温度相同,灌注压力也均为100cmH_2O。观察两组肾脏充盈时间、灌注质量及血管影像学差异。结果实验1:兔肾摘取后立即取材观察,1组和2组的兔肾组织结构在光镜及电镜下观察基本保持正常。保存到24小时,两组兔肾在光镜下可见仍基本保持正常结构。电镜下1组和2组所见也无差别,肾小管上皮细胞线粒体嵴基本正常,核膜清晰可见,染色质分布尚均匀,未见内质网明显改变。肾小球毛细血管内皮窗孔增大,基膜完整,足细胞足突排列整齐,紧靠基膜。实验2:血管造影可见,逆行灌注组肾脏充分充盈所需时间分别为5秒、6秒、7秒。而B组肾脏充分充盈所需时间分别为8秒、12秒、12秒。A组灌注质量明显优于B组。结论在供肾摘取过程中逆行灌注方法和传统灌注方法一样,能够灌洗供肾,减少供肾缺血性损伤,在组织及形态结构上保护供肾,是一种有效可行的供肾灌注方法。     

低温灌洗UW液和Euro—Collins液保存离体鼠肺效果？…

目的 比较ＵＷ液和Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ液的肺保存效果。方法 选用２１只Ｗｉｓｔａｒ大鼠，应用１０℃ＵＷ液和Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ液同时分别进行左、右肺动脉内灌洗，灌洗前主肺动脉内快速推注ＰＧＥ１。灌洗结束后干肺充气状态下切取左、右肺，并迅速分别置于１０℃的ＵＷ液有Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ液中保存。分别于０，２，４，６ｈ取材，在光镜及电镜下观察肺组织形态学变化，并互相比较，以判定组织活力，一肺     

低温保存同种心脏瓣膜活性及临床应用的研究

取正常成人心脏瓣膜３６个，置于低浓度广谱抗生素的营养液（ＲＰ－ＭＩ１６４０细胞培养液）中灭菌４８ｈ，－８０℃冰箱初冻，置于液氮中长期保存。灭菌前后瓣膜细菌培养阴性率分别为９４．３％和１００％，解冻后经光镜、电镜检查证实瓣组织细胞结构正常，组织培养葡萄糖消耗率测定示瓣组织存活良好。临床同种心脏瓣膜原位移植３例，随访６～３０个月，瓣功能良好     

急性缺血再灌流肾损伤的机理研究

探讨急性缺血再灌流肾损伤的机理。方法１８只日本大耳白兔随机分为对照组，ＩＲ组。采用左肾切除，右肾动静脉夹闭１ｈ再灌流３ｈ致肾损伤模型。结果：ＩＲ组血和肾组织中丙二醛及肾组织中ＷＢＣ滞留烤，肾小管计分和Ｎａ＋、Ｃａ＾２＋肖度较对照组显著升高。     

烫伤早期大鼠肾皮质细胞氧自由基、Ca~（2＋）细胞化学和Ca~（2＋）－Mg~（2＋）－ATP酶活性的变化

研究重度烫伤大鼠肾皮质细胞膜（质膜、内质网及线粒体膜）Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性、细胞内Ｃａ２＋定位和半定量及肾皮质内Ｈ２Ｏ２（氧自由基）定位，以探讨烫伤早期肾损伤的机制。方法：化学法和细胞化学法。结果：发现肾小管细胞内Ｃａ２＋浓度升高在烫伤后６０ｍｉｎ达到高峰，Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性在６０或１２０ｍｉｎ为最低，并与亚细胞结构的损伤程度显著相关。烫伤后３０ｍｉｎ肾皮质间质毛细血管及肾小球毛细血管壁出现Ｈ２Ｏ２细胞化学阳性沉积物，６０ｍｉｎ时消失。以上变化在观察时间内（５ｈ）具有可恢复性。结论：严重烫伤时肾缺血，皮质毛细血管内皮细胞受氧自由基损伤，改变了血管通透性，引起组织水肿，继而Ｃａ２＋泵活性下降，Ｃａ２＋过载，进一步影响细胞结构和功能。     

超氧化物歧化酶,阿魏酸钠抗肝缺血再灌注损伤的对比研究

目的：比较外源性超氧化物歧化酶（ＳＯＤ与阿魏酸钠（ＳＦ）对肝缺血再灌注损伤的保护作用，方法：将２４只成年雄性ＳＤ大鼠随机分为对照组，ＳＦ保护组和ＳＯＤ保护组，通过阻断大鼠肝门１ｈ后再开放建立肝缺血再灌注损伤模型，在肝缺血前及肝再灌注２ｈ时测肝组织丙二醛（ＭＤＡ），ＳＯＤ和测血ＡＬＴ，ＡＳＴ。并取行组织作光镜及电镜观察，结果：再灌注２ｈ时ＳＦ保护肝组织内ＳＯＤ消耗明显多于ＳＯＤ保护组（Ｐ〈０．０１）     

酒精性肝肾损害大鼠肾组织中转化生长因子-β_1的表达

目的探讨酒精引起的大鼠肝肾损伤模型中肾脏的病理学改变及肾组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达。方法以酒精灌胃法制备大鼠酒精性肝肾损伤模型，以光镜和电镜观察肾组织病理改变；免疫组化染色观察肾组织中TGF-β1的表达。结果光镜下HE染色可见模型组肾组织在相应阶段出现肾小管间质内炎性细胞浸润、上皮细胞空泡变性肿胀及管腔闭塞等；电镜下模型组肾组织在相应阶段出现间质内的纤维成分增多；免疫组化染色模型组肾小管上皮细胞内TGF-β1呈阳性表达，随酒精负荷时间的增加阳性表达增加（P〈0．01）。结论大鼠酒精性肾损伤以肾小管-间质的炎性改变及形成肾间质纤维化为主要病理特征；酒精性肾损伤模型机制可能与肾组织中TGF-β1的阳性表达明显增加有关。     

表皮生长因子对肾缺血再灌流修复的影响

探讨肾缺血再灌流损伤修复过程中颌下腺、胰腺、肾脏产生的表皮生长因子（ＥＧＦ）的作用及作用机制。方法选用大鼠右肾切除、左肾缺血６０ｍｉｎ继之再灌流不同时间模型,观察颌下腺切除后对肾功能和形态恢复的影响。用免疫组化和ＷｅｓｔｅｒｍＢｌｏｔ方法观察肾缺血再灌流损伤修复过程中肾组织增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）,胰腺、颌下腺、肾脏和血清ＥＧＦ以及肾组织ＥＧＦ受体（ＥＧＦＲ）表达的变化。结果颌下腺切除后,损伤后的肾功能和肾组织形态结构恢复到正常的时间明显延长。ＰＣＮＡ免疫组化显示,６０ｍｉｎ肾缺血再灌流２４ｈ出现再生,再灌流３ｄ再生修复达到高峰,再灌流７ｄ基本消失。与此相对应,颌下腺、胰腺在再灌流１、３ｄ时ＥＧＦ表达明显增强,血清ＥＧＦ含量增多,肾组织ＥＧＦＲ表达明显增强;再灌流７ｄ时,颌下腺、胰腺ＥＧＦ表达、血清ＥＧＦ含量及肾组织ＥＧＦＲ表达均基本恢复正常。结论颌下腺、胰腺所产生的ＥＧＦ在损伤后肾小管上皮的修复中可能起重要作用,ＥＧＦ可能通过ＥＧＦＲ介导机制促进损伤肾小管上皮的修复     

气管上皮损伤修复过程中粘液分泌细胞的超微结构研究

用改良的静脉留置针将地鼠气管腹侧面粘膜刮除，经时取材，用光、电镜观察气管上皮修复过程中粘液分泌细胞的超微结构，以探索粘液分泌细胞在气管上皮修复中的作用。结果：损伤后６ｈ边缘部上皮细胞开始增殖变为扁平状并向损伤面爬行；２４ｈ覆盖损伤面。电镜下这些细胞表面无纤毛或仅有少量微绒毛，胞浆内有大小不等散在的粘液颗粒和较多的粗面内质网，与光镜下含有细小或融合性的ＰＡＳ（＋）颗粒相一致。３６ｈ后，损伤面由３～５层表皮样化生细胞构成，核周出现蛋白丝状物围绕，部分胞浆内仍有少量粘液颗粒。７２ｈ后，细胞出现短而细的纤毛或出现较多的粘液空泡。２周后恢复正常结构。认为：粘液分泌细胞不是终末细胞，而是损伤后参与修复的主要细胞之一。     

缺血时间对肾脏影响的实验研究

目的：研究不同热缺血时间大鼠肾脏的变化及移植肾的存活情况，方法：选择不同热缺血时间点（零时、15min,30min,60min)，观察缺血后光镜下和透射电镜下肾脏组织的病理改变以及肾组织谷胱肽过氧化物酶（GSH－PH），Na^ -K^ ATP酶和Ca^2 -ATP酶活性，丙二醛（MDA）水平的变化，也测定缺血后肾静脉血和肾组织乳酸脱氢酶（LDH）的水平。并在不同热缺血时间，分别进行大鼠肾移植，观察手术后的存活率和肾功能的变化，结果：随缺血时间的增加，肾脏病理改变逐渐加重，在缺血30min肾组织内GSH－PX，Na^ -K^ ATP酶，Ca^2 -ATP酶的活力明显下降，而LDH在缺血15min后就已经明显升高，缺血30min开始肾组织内MDA水平就已明显增高，不同热缺血时间的肾脏进行大鼠肾移植，随着缺血时间的延长，所需要的灌注液使用量增加，术后24h血肌酐的水平升高，而灌洗的效果，以及术后的存活率均下降，结论：单纯低温保存在鼠肾移植热缺血时间以不超过30min为宜。