氧化苦参碱诱导结肠癌细胞株SW1116凋亡的实验研究

目的：探讨氧化苦参碱（OM）抗肿瘤的作用机制，为OM在抗结肠癌方面的应用提供理论依据。方法：采用流式细胞仪检测不同浓度的OM对结肠癌细胞凋亡率及其细胞周期分布的影响。结果：OM具有一定的诱导结肠癌细胞凋亡的作用。可使S期细胞数目减少，随着OM剂量的加大，结肠癌细胞凋亡率增高，与剂量呈正相关。随药物浓度及作用时间的变化。细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高。结论：OM具有一定的抗结肠癌作用，其机制与抑制癌细胞的增殖及促进癌细胞的凋亡有关。     

结肠癌中CXCL12与其配体CXCR4的表达及意义

目的:探讨趋化因子受体CXCL12及其配体CXCR4在结肠癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化检测CXCL12、CXCR4蛋白在结肠癌组织及癌旁正常组织中的表达情况,分析其与临床病理特征之间的关系。结果:CX-CL12与CXCR4蛋白在结肠癌组的表达与癌旁正常组织中的表达存显著统计学差异(P<0.01)。结肠癌中CXCLl2与CX-CR4蛋白的阳性表达与肿瘤组织学分级呈负相关(P<0.01),与肿瘤分期呈正相关(P<0.01)。结论:CXCLl2及其配体CXCR4的表达与结肠癌的发生发展密切相关,将为临床结肠癌的治疗及预后判断提供新的思路。     

卵巢癌趋化因子受体CXCR4的表达及意义

目的　探讨趋化因子受体及配体CXCR4 /CXCL12 (SDF - 1)在上皮性卵巢癌细胞中的表达及在肿瘤转移中的作用。方法　采用RT -PCR和WesternB1ot对 15例上皮性卵巢癌组织、卵巢癌细胞系CAOV3中CXCR4和腹膜后淋巴结组织中SDF - 1在mRNA和蛋白水平的表达进行检测 ,并比较趋化因子作用前后CXCR4的变化。ELISA检测上皮性卵巢癌腹水中趋化因子CXCL12的含量。以Boyden小室检测重组人SDF - 1、上皮性卵巢癌腹水对卵巢癌细胞的趋化活性。结果　 (1)在上皮性卵巢癌组织及CAOV3细胞中CXCR4在mRNA及蛋白水平显著表达 ,趋化因子作用后CXCR4的含量明显减少 ,差异有显著性 (P<0 0 5 )。 (2 )卵巢癌性腹水及腹膜后腔淋巴结组织均含较高水平的CXCL12。 (3)重组人CXCL12、卵巢癌性腹水均可诱导上皮性卵巢癌细胞的迁移 ,与对照组相比有显著性差异 (P <0 0 1)。结论　CXCR4 /CX CL12受体配体系统可通过诱导癌细胞的迁移在上皮性卵巢癌的转移中起重要作用。     

芹菜素对人CIK细胞杀伤结肠癌SW1116细胞的影响

目的观察芹菜素对人结肠癌细胞SW1116及CIK细胞的作用,探讨芹菜素对人CIK细胞杀伤结肠癌SW1116细胞的影响。方法不同浓度的芹菜素分别诱导人CIK细胞和结肠癌细胞SW1116细胞24、48、72 h,四甲基偶唑蓝(MTT)法检测上述两种细胞的生长。乳酸脱氢酶释放法检测CIK细胞对结肠癌SW1116细胞杀伤活性。结果体外培养10 d后,CIK细胞比例由3.12%增加到17.55%。与对照组比较,浓度1.17～4.7μmol/L芹菜素作用后的CIK细胞的增殖率显著提高(P<0.05),浓度37.5～600μmol/L的芹菜素对SW1116细胞生长抑制率显著提高(P<0.05),三个时间段比较均无明显差异。浓度2.35～9.4μmol/L的芹菜素作用48 h后,CIK细胞对结肠癌SW1116细胞的杀伤活性显著高于对照组(P<0.05)。结论芹菜素在一定浓度范围内可促进CIK细胞的生长,明显提高CIK细胞对SW1116细胞的杀伤作用,且抑制结肠癌SW1116细胞的生长。     

Kiss-1高表达抑制结肠癌侵袭与转移能力的影响

目的　探讨Kiss-1高表达对结肠癌SW480细胞侵袭与转移能力的影响,初步明确Kiss-1基因对基质金属蛋白酶-9（matrix　metalloproteinase-9,MMP-9）和MMP-2表达的影响。　方法　用脂质体转染方法将质粒pEGFP-N1-Kiss-1及pEGFP-N1空载体质粒瞬时导入结肠癌SW480细胞,细胞随机分三组：空白对照组、阴性对照组、实验组。应用Transwell实验检测结肠癌细胞的侵袭能力、Western-blot和Real-time　PCR分别从蛋白和mRNA水平检测Kiss-1表达对MMP-9、MMP-2表达的影响。　结果　成功将pEGFP-N1-Kiss-1重组质粒瞬时导入结肠癌SW480细胞。Transwell实验检测出实验组较阴性对照组和空白对照组能明显降低SW480细胞侵袭能力的作用（P<0.05）。Western　blot和Real-time　PCR检测出实验组Kiss-1　蛋白和mRNA表达水平较阴性对照组或空白对照组显著增加,而实验组MMP-9、MMP-2蛋白和mRNA表达水平显著降低,其差异均具有统计学意义（P<0.05）。　结论　Kiss-1抑制MMP-9和MMP-2的表达,其调控机制可能与抑制结肠癌的侵袭和转移能力有关。     

HMGA2在结肠癌组织中的表达及意义

目的 探讨高迁移率族蛋白A2（high mobility group AT-hook 2, HMGA2）在结肠癌组织的表达及意义。方法选取2011年5月至2012年12月接受手术治疗的114例结肠癌患者,采用免疫组化法检测114例结肠癌组织及45例癌旁组织中HMGA2的表达,分析其与临床病理参数及患者生存预后的关系。结果在114例结肠癌组织中,HMGA2阳性表达率（89.5%,102/114）明显高于癌旁组织（6.7%,3/45）（P＜0.001）;HMGA2表达与结肠癌患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤浸润深度无相关性（P＞0.05）,与组织学分级（P＜0.001）、淋巴结转移（P＜0.001）、远处转移（P＜0.001）和TNM分期（P＝0.014）相关。HMGA2低表达组总体生存率（75.0%）高于HMGA2高表达组（44.6%）（χ2=5.736,P＝0.017）。结论HMGA2可能在结肠癌发生发展过程中起到重要作用,它与结肠癌的侵袭、转移和预后相关,HMGA2的表达检测可作为判断结肠癌患者预后的一种方法。     

人结肠癌细胞株CW-2干细胞生物学特性研究

 目的从人结肠癌细胞株CW-2中分离癌干细胞,并观察其生物学特性。方法采用多重联合法分离人结肠癌干细胞,
应用流式细胞仪检测分离后细胞中CD44⁺EpCAM⁺癌干细胞含量;细胞周期检测、体外侵袭实验、体内成瘤实验对癌干细胞进行
生物学特性研究。结果分离后细胞中CD44⁺EpCAM⁺癌干细胞含量为89.57%;CD44⁺EpCAM⁺癌干细胞的增殖能力、侵袭能力、
致瘤能力均强于非癌干细胞,各组间差异有统计学意义（p <0.05）。结论CD44⁺EpCAM⁺癌干细胞具有低增殖性、高侵袭性、高
致瘤性,并可通过多重联合分离获得。     

羽扇豆醇对人共刺激细胞及结肠癌细胞株 SW480的影响

目的：共刺激细胞是一种对肿瘤细胞有杀伤作用的 NK样T细胞,既往研究表明羽扇豆醇作为一种天然植物提取物,能改变NK细胞、γδT细胞的生长及其对肿瘤细胞的作用。文中主要探讨羽扇豆醇对人共刺激细胞杀伤结肠癌细胞株 SW480的影响。方法取健康人外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子诱导为共刺激细胞;不同浓度的羽扇豆醇在作用于共刺激细胞及结肠癌细胞株不同时间段后,甲基偶唑蓝（ MTT）法检测羽扇豆醇对共刺激细胞及结肠癌细胞株 SW480生长的影响;乳酸脱氢酶（ LDH）法检测共刺激细胞对结肠癌细胞株SW480的杀伤活性。结果羽扇豆醇浓度在0．1～200．0μg/mL时对共刺激细胞的生长有促进作用,对结肠癌细胞株SW480有抑制作用;羽扇豆醇诱导后,共刺激细胞对SW480的杀伤活性增强,浓度为12．5 mg/L时与空白对照比较的差异有统计学意义（76％vs 40％, P＜0．05）。结论羽扇豆醇能促进共刺激细胞的增殖,抑制结肠癌细胞株SW480的生长,并能增加SW480对共刺激细胞的敏感性,增强共刺激细胞对SW480细胞株的杀伤能力。     

半枝莲对人大肠癌细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用

目的探讨半枝莲(SBD)在体外对人大肠癌HT-29细胞增殖抑制、诱导凋亡作用及可能的作用机制。方法应用MTT法(噻唑蓝比色试验)检测不同浓度的SBD对体外培养的人大肠癌HT-29细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪技术测定SBD对HT-29细胞凋亡及细胞周期分布的影响。结果HT-29细胞经SBD(浓度范围10~320 mg/L)作用后细胞生长明显受到抑制,呈现明显的剂量依赖效应关系和时间依赖效应关系,最高抑制率为93.869%(P<0.01);SBD在20mg/L、80mg/L、320mg/L 3种浓度下作用48h均可诱导HT-29细胞凋亡,流式细胞仪技术检测其凋亡率分别为7.6%、16.2%、和34.5%,有明显的剂量依赖效应关系;同时,SBD使细胞周期分布发生明显变化,表现为S期细胞比例上升,G0/G1期和G2/M期细胞比例下降。结论SBD能抑制HT-29细胞增殖,而且能诱导HT-29细胞凋亡,其作用机制可能与影响癌细胞细胞周期的分布有关。     

bcl-2和p53在丹皮酚诱导人结直肠癌HT-29细胞凋亡中的作用及其机制

目的 探讨bcl-2和p53在丹皮酚（paeonol，Pae）诱导入结直肠癌HT-29细胞凋亡过程中的作用及可能的作用机制。方法 应用透射电镜技术和原位末端标记（TUNEL）法观察不同浓度的Pae对HT-29细胞凋亡的诱导作用，应用免疫细胞化学技术检测用药前、后凋亡相关基因bcl-2及p53表达的变化，并与对照组比较。结果 透射电镜观察到Pae作用后HT-29细胞出现典型的细胞凋亡形态；Pae在15．63mg／L、62．50mg／L、250．00mg／L3种浓度下作用48h均可诱导HT-29细胞凋亡，TUNEL法显示各组凋亡指数（AI）间差别有显著性意义（P〈0．05）；免疫细胞化学染色显示Pae作用后HT-29细胞bcl-2及p53蛋白表达显著降低。结论 Pae能抑制HT-29细胞增殖并诱导其凋亡，其作用可能与下调bcl-2及p53蛋白的表达有关。     

Rac1b小干扰RNA对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响

目的 观察Rac1b小干扰RNA(Si-Rac1b)对结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响.方法 Si-Rac1b在lipofectamineTM2000介导下转染筛选出的Rac1b高表达的结直肠癌细胞SW1116,分别从RNA和蛋白水平检测转染细胞Rac1b的表达,采用细胞增殖实验,损伤刮擦实验,体外侵袭实验(T...     

趋化性细胞因子受体CXCR4与肺癌侵袭和转移的关系

目的 探讨趋化性细胞因子受体CXCR4在肺癌中的表达及其意义.方法 收集72例非小细胞肺癌患者手术标本,用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中CXCR4的表达和微血管密度,分析CXCR4的表达水平与临床病理特征和预后的关系,12例正常肺组织作为对照.结果 72例非小细胞肺癌组织中,46例CXCR4蛋白表达阳性,阳性率为63.9%;12例正常肺组织中,仅2例CXCR4弱阳性表达,阳性率为16.7%,两者比较,差异有显著性意义(P＜0.05).肺癌组织CXCR4阳性表达与N分期、微血管密度、复发/转移和生存时间密切相关(均P＜0.05).结论 CXCR4可能促进肺癌的侵袭、转移以及血管生成并影响其预后.     

Estabishment of A Human Liver Cancer Cell Line Transfected with IL-2 cDNA and Its Biologic Activity

Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｉｎｄｕｃｅａｎｔｉ ｔｕｍｏｒａｃｔｉｖｉｔｙ ,ｓｃｉ ｅｎｔｉｓｔｓｓｉｎｃｅｌｏｎｇａｇｏｈａｖｅａｔｔｅｍｐｔｅｄｔｏｉｎｔｅ ｇｒａｔｅｃｅｌｌｇｅｎｏｍｉｃＤＮＡｉｎｔｏｔｕｍｏｒｃｅｌｌｖｉａｇｅ ｎｏｍｉｃｍｅｃｈａｎｉｓｍｔｏｍａｋｅｉｔｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｌｙｅｘ ｐｒｅｓｓｌｏｃａｌｌｙ .ＩｎｔｈｉｓｓｕｒｖｅｙｈｕｍａｎｌｉｖｅｒｃｅｌｌＳＭＭＣ 772 1ｗａｓｃｏｃｕｌｔｕｒｅｄｗｉｔｈｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｒｅｔｒｏｖｉｒａｌｖｅｃｔｏｒＬＮＣ ＩＬ2 .Ｔｈｅ…     

Bcl-2基因siRNA的筛选及对胃癌细胞MGC-803增殖的影响作用

目的:筛选有效抑制Bcl-2基因表达的siRNA序列,研究Bcl-2特异性siRNA对胃癌细胞的抑制作用。方法:设计并合成4对针对Bcl-2的siRNA序列,通过LipofectamineTM2000转染入人胃癌细胞MGC-803后,应用实时定量PCR和Western Blot法分别检测siRNA对细胞内Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平抑制效果,且经CCK-8法检测siRNA对胃癌细胞增值影响。结果:与对照组相比,所设计4对siRNA中siBcl-2抑制Bcl-2 mRNA和蛋白表达效果最佳,抑制率分别为88%和63%,且siBcl-2在转染后第96 h对癌细胞增殖有显著抑制效果。结论:成功筛选出1对能有效抑制Bcl-2基因表达的siRNA序列,为胃癌基因治疗提供实验依据。     

CXCR4基因RNA干扰对人肝癌细胞系SMMC7721体外粘附、迁移的影响

目的研究CXCR4基因RNA干扰对肝癌细胞系SMMC7721体外增殖、粘附能力的影响。方法psiR—NA．CXCR4真核表达载体转染SMMC7721细胞,Trans well法检测细胞的体外迁移能力,12（;5检测细胞的粘附能力。结果psiRNA-CXCR4真核表达载体转染SMMC7721细胞后,明显沉默了SMMC7721mRNA表达,转染后48h抑制效率最高。SMMC7721细胞体外增殖、迁移能力受到抑制（P〈0．05）。结论CXCR4基因RNA干扰在体外可明显沉默肝癌细胞系SMMC7721CXCR4基因的表达,抑制肝癌细胞系SMMC7721的生长和转移。     

趋化因子受体CXCR4在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的探讨CXCR4在肺癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法检测84例肺癌组织、20例正常肺组织中CXCR4的表达,其中84例肺癌中包括36例淋巴结转移。结果 CXCR4蛋白在肺正常组织表达较低,在84例肺癌组织中的阳性表达率高达60.7%(51/84)。CXCR4的表达与肺癌患者的年龄、性别无关,而与分化程度、TNM分期、病理类型和淋巴结转移有相关性。低分化组肺癌组织CXCR4阳性表达率(78.95%)明显高于高中分化组(45.65%)。临床Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期的肺癌组织CXCR4蛋白阳性表达率分别为50.81%和86.96%;伴淋巴结转移组肺癌CXCR4蛋白阳性表达率为77.78%,没有淋巴结转移组阳性表达率为47.92%;而病理类型中腺癌的阳性表达较高(86.36%)。结论肺癌组织中高表达的CXCR4很可能是促进肺癌侵袭和转移的一个重要分子。     

CXCL12/CXCR4信号转导通路在大肠癌转移分子机制中的研究进展

目的：归纳趋化因子CXCL12及其受体CXCR4所构成的信号转导通路在大肠癌转移中可能存在的分子机制。方法：采用文献回顾的方法,收集近10年来发表在各类杂志的关于CXCL12/CXCR4信号转导通路干预大肠癌转移的文献,对其可能存在的作用机制进行整理。结果：趋化因子CXCL12及其受体CXCR4所构成的信号转导通路在促进大肠癌细胞增殖、迁移、侵袭,细胞外基质降解及肿瘤血管新生中发挥着重要作用。结论：CXCL12/CXCR4信号转导通路可望成为大肠癌转移基因治疗的新靶点,但其具体作用的相关转导通路和调节机制还未完全明确,有待进一步研究。     

趋化因子及其受体CXCL16/CXCR6体外促前列腺癌增殖、侵袭作用

目的:探讨趋化因子及其受体CXCL16/CXCR6在人前列腺癌细胞系体外增殖侵袭中的作用。方法:免疫细胞化学技术检测CXCL16/CXCR6在人前列腺癌细胞系DU145中的表达;MTT法分析CXCL16/CXCR6对DU145细胞的促增殖作用;迁移、侵袭实验分析CXCL16对DU145细胞体外侵袭能力的调节作用。结果:DU145既表达CX-CR6蛋白,也表达CXCL16蛋白;外源性CXCL16可明显提高DU145细胞体外增殖活力和促进DU145细胞的体外迁移、侵袭能力,CXCL16中和抗体可以有效消除CXCL16对细胞的促侵袭作用,但CXCL12或CXCR4中和抗体不能阻断CXCL16的促侵袭作用。结论:CXCL16/CXCR6可能是参与前列腺癌转移的重要趋化因子配受体对。