血清乙肝DNA荧光定量PCR测定的临床应用

目的　了解乙型肝炎患者血清标志物 (即两对半 )与乙型肝炎病毒核酸定量之间的关系。方法　用ELISA法检测 45 1例乙型肝炎患者两对半同时荧光定量聚合酶链反应〔FQ -PCR〕检测技术HBVDNAL浓度 ,并对其结果进行分析比较。结果　多种两对半结果模式均检测到HBVDNA ,其中乙型肝炎大三阳患者血清HBVDNA检出率为 97.5 % ,平均拷贝数为 3 .0 6× 10 4 copies/L ;小三阳患者血清HBVDNA检出率为 63 .3 % ,平均拷贝数为 7.0 1× 10 3copies/L。结论　传统的两对半检测并不能正确反映乙肝患者的病情发展状况 ,同时进行乙型肝炎血清标志物的检测及HBVDNA的定量PCR检测 ,更有利于临床对HBV感染的诊断、对治疗方案的选择及疗效判定     

乙型肝炎患者血清HBV DNA定量检测

近年来 ,定量ＰＣＲ检测技术不仅用于科研领域 ,也成为临床检验重要的检测手段。现将 16 9例乙型肝炎(以下简称乙肝 )患者的血清ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ定量检测结果 ,结合临床资料 ,报告如下。1　材料和方法1.1　检测对象　 2 0 0 0年 10月至2 0 0 1年 2月 ,在我院住院治疗的各型乙肝患者共 16 9例 ,其中男 118例 ,女5 1例 ,平均年龄 37.3岁。按 2 0 0 0年全国病毒性肝炎治疗方案的诊断标准分型 ,急性肝炎 14例 ,慢性肝炎轻度47例 ,慢性肝炎中度 6 4例 ,慢性肝炎重度 16例 ,重型肝炎 8例 ,肝硬化 2 0例。1.2　检测方法　 16 9例乙肝患者均作Ｈ…     

HBV DNA定量与乙肝感染血清标志物结果分析

目的探讨HBVDNA定量与乙型肝炎病毒感染血清标志物检测结果的相关性。方法用荧光定量分析仪测定HBVDNA;ELISA方法检测乙肝血清标志物。结果乙肝感染血清标志物阳性经ELISA检测得8个组合模式,HBVDNA定量168例阳性,阳性检出率为61．7％。结论HBVDNA定量检测在临床上对乙肝诊断和治疗方面具有重要意义．但不能代替乙肝血清标志物的检测,否则可能出现漏诊。     

HBV－DNA与HBVm检测结果对比分析

目的: 了解乙型肝炎病毒 (HBV)感染者体内 HBV- DNA含量 , 并探讨其临床意义 . 方法: 本文采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ- PCR)和 ELISA两种方法同时检测了 822份血清 , 并对结果进行了对比分析 , 结果: 266例 HBsAg(+ )、 HBeAg(+ )、 HBcAg(+ )组的血清 HBV- DNA检出率为 87. 22% (232例 ), 平均拷贝数为 1. 72× 109.ml; 211例 HBsAg(+ )、 HBeAb(+ )、 HBvAb(+ )组血清 HBV- DNA检出率为 21. 27% (47例 ), 平均拷贝数为 6. 66× 108/ml, 190例 HBsAg(+ )、 HBcAb(+ )组血清 HBV- DNA检出率为 37.37% (71例 ), 平均拷贝数为 4.56× 108/ml; 47例 HBVm全阴性组血清 HBV- DNA检出率为 8.51% (4例 ), 平均拷贝数为 1.54× 108/ml. 结论: HBVm阴性的病人也可能有 HBV- DNA阳性 , 因此为临床提供 HBV感染、复制及传染性的判断以及指导治疗 , HBV- DNA定量 PCR检测具有重要的意义 .     

乙型病毒性肝炎血清HBV DNA定量检测的临床意义

聚合酶链反应（ＰＣＲ）是检测乙型肝炎病毒血症的敏感技术，我们用定量ＰＣＲ检测１４８例乙型病毒性肝炎（乙肝）患者血清ＨＢＶＤＮＡ，并对其中部分病例作前Ｃ区１８９６位变异的检测，以探讨它们的临床意义。１　材料与方法１１　对象　１４８例均为我院１９９８年７月～１９９９年３月住院的单纯乙肝患者，男１０９例，女３９例，年龄３～６１岁，平均３２８岁。其中急性肝炎１６例，慢性肝炎轻度４０例，中度５４例，重度１７例；重症肝炎１６例，静止期肝硬化５例。诊断参照１９９５年北京全国传染病寄生虫病学术会议修订的标准…     

乙型病毒性肝炎血清HBV DNA定量检测

聚合酶链反应（ＰＣＲ）是检测乙型肝炎病毒血症的敏感技术，我们用定量ＰＣＲ检测１４８例乙型病毒性肝炎（乙肝）患者血清 ＨＢＶ　ＤＮＡ，并对其中部分病例作前 Ｃ区 １８％位变异的检测， 以探讨他们的临床意义。１　材料与方法１．１　对象 １４８例均为我院１９９８年７月～１９９９年３月住院的单纯乙肝患者，男１０９例，女３９例，年龄３～６１岁，平均３２．８岁，其中急性肝炎１６例，慢性肝炎轻度４０例，中度５４例，重度１７例，重症肝炎１６例，静止期肝硬化５例。诊断参照１９９５年北京全国传染病寄生虫病学术会议修订的…     

209例儿童血清HBV标志物与HBV DNA检测分析

目的：探讨儿童乙型肝炎病毒（HBV）血清标志物与HBV-DNA含量的关系。方法：采用酶联免疫法（ELISA）对收集到的209份血清进行HBV M检测,再应用荧光定量PCR法进行HBV-DNA含量检测。结果：209份血清标本中129例（61.7%）HBV DNA阳性。HBV DNA阳性率在HBV M模式1（HBsAg＋、HBeAg＋、HBcAb＋）、模式2（HBsAg＋、HBeAb＋、HBcAb＋）、模式3（HBsAg＋、HBcAb＋）及模式4（HBsAb＋、HBeAb＋/-、HBcAb＋）中分别为96.5%、35.2%、45.7%、14.3%,各组比较,有显著性差异（χ2=88.556,P=0.000）。结论：儿童乙肝患者的多种血清标志物模式中都存在HBV-DNA复制,以HBeAg阳性者HBV-DNA复制水平最高。     

乙型病毒性肝炎血清HBV DNA的定量研究

我国是乙型病毒性肝炎的高发区。乙型肝炎病毒感染的诊断主要依赖于血清特异性抗原抗体和HBVDNA的检测，其中HBVDNA是直接反映机体内HBV的存在和复制的标志，也是传染性的指标。近年来开展了HBVDNA的定量检测，进一步为临床的诊治提供了依据和帮助。本文就乙型肝炎血清HBVDNA的     

DNA芯片检测乙型肝炎病毒基因多态性

目的：建立DNA芯片检测乙型肝炎病毒（hepatitis Bvirus，HBV）基因多态性的研究方法井对实验条件进行优化。方法：设计多条寡核苷酸探针，在硅烷化芯片的特定位置上，用点样仪将探针固定，并与PCR扩增的HBV基因相应区段杂交，杂交结果影印至硝酸纤维素膜，经BCIP／NBT避光显色，用放大镜观察杂交信号呈暗紫色圆点，根据特定位置上杂交信号的有无和与之相应的探针序列来判定基因突变的类型。结果：通过1次杂交反应可检测HBV前C／C区（nt1896／1814）、BCP区（nt1762／1764）和P区（nt528／552）等多个位点的变异，与测序分析结果完全一致，具有较好的检测灵敏度和重复性。结论：DNA芯片检测HBV基因常见突变位点多态性，操作简便易行，技术要求不高，具有临床推广应用价值，而且可以方便地通过向寡核苷酸探针阵列中添加相应探针，扩大基因芯片的检测应用范围，为临床检测提供了新的方法。     

351例HBV—DNA定量结果与HBV—M检测分析

目的 用FQ-PCR检测血样中乙型肝炎病毒NDA拷贝数，了解用ELISA法检测HBV-M不同的标志物组合时，其对应的HBV-DNA阴、阳性及阳性的拷贝数。方法 采用荧光定量聚合酶链更应(FQ-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测351例血样。结果 149例HBsAg( )、HBeAg( )、抗-HBc( )，其HBV-DNA阳性为148例，定量结果对数值的靶值为7．91；89例HB-sAg( )、抗-HBe( )、抗-HBc( )，其HBV-DNA阳性为55例，定量结果对数值为4．73；20例抗-HBc( )，其HBV-DNA阳性为2例，定量结果对数值的靶值为3．22；而10例HBV-M全(-)的HBV-DNA也全(-)。结论 FQ-PCR能快速、特异、灵敏地定量检测血液及各种体液中病原体的DNA或RNA，对疾病的诊断，治疗过程的监测，愈后监控及药效评价等都具有很高的实用价值。     

应用聚合酶链反应检测HBV—DNA的临床价值

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ法对５３０例乙肝患者（含１１８例病毒携带者）血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ和乙肝病毒标志物进行检测，ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率分别为１）ＨＢｓＡｇ“＋”、ＨＢｅＡｇ“＋”和抗－ＨＢｃ“＋”组为９６．８５％；２）ＨＢｓＡｇ“＋”、抗－ＨＢｅ“＋”和抗－ＨＢｃ“＋”组为４４．１２％；３）ＨＢｓＡｇ“＋”和抗－ＨＢｃ“＋”组为３５．８９％；４）ＨＢＶ标志物均阴性为１３．１１％；５）     

乙肝血清标志物与HBV—DNA定量检测结果分析

目的：对乙肝血清标志物与HBV-DNA定量检测结果进行分析。方法：对489例乙型肝炎患者依据乙肝血清标志物分为1组150例,2组239例,3组100例,并进行HBV-DNA定量检测。结果：乙肝血清标志物HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性组阳性率为100%,HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性组阳性率为84.10%,HBsAg、抗-HBe阳性组阳性率为52.00%。结论：乙型肝炎患者仅仅采用ELISA方法检测5项乙肝血清标志物对乙肝患者传染性强弱判断和乙肝病毒复制和是否需要治疗是远远不够的,易造成部分慢性乙型病毒性肝炎的漏诊。应用定量PCR检测HBV-DNA对监测乙型肝炎病毒感染的病情发展优于乙肝血清标志物血清学检测指标。     

血清HBV DNA定量检测的临床应用价值

目的了解慢性乙肝患者HBVDNA定量检测结果与HbsAg，抗msAg，HbeAg，抗HbeAg和抗HBc检测以及肝穿免疫组化HbsAg和HbcAg检测结果的相互关系。方法临床确诊的慢性乙肝患者173例，经ELISA测定HBV-M（HBsAg，抗Hbs，HbeAg，抗Hbe和抗HBc）后，采用HBV DNA PCR分子杂交定量检测技术，测定患者血清HBV DNA含量，并对部分患者进行了肝穿免疫组化HbsAg和HbcAg测定。结果 173例慢性乙肝患者HBV DNA定量结果，阳性率为83．24％。其中：（1）HbsAg（＋），HbeAg（＋），抗HbcAs（＋）患者78例，HBV DNA定量检1测结果〉10E4拷贝／L 76例，总阳性率97．44％。（2）HbsAg（＋），抗HbeAg（＋）和抗Hbc（＋）27例，HBV DNA定量检测结果，〉10E4拷贝／L 16例，总阳性率59．25％。（3）HbsAg（＋），抗Hbc（＋）16例，HBV DNA定量检测结果〉10E4拷贝/L 8例，总阳性率50．0％。（4）HbsAg（-），其他均阳性10例，HBV DNA定量检测结果总阳性率100％。（5）HbsAg（＋），抗Hbs（＋），和抗HBc（＋）26例，HBV DNA定量检测结果，〉10E4拷贝/L 22例，总阳性率84．62％。（6）抗Hbs（＋），其余均阴性11例，HBV DNA定量检测结果，〉10E4拷贝／L 7例，总阳性率63．64％。（7）其他5例。其中共20例患者进行了肝穿免疫组化HbsAg和HbcAs检测，结果阳性率为90％，与HBV DNA定量结果吻合率90％。结论乙肝患者HBV DNA定量检测结果可以直观的反应患者血清中HBV DNA含量，可以作为慢性乙肝患者发病情况和治疗效果观察的良好指标。     

乙型肝炎病毒感染者HBV DNA与血清病毒标志物的关系

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV)感染者HBVDNA检出情况及其与血清病毒标志物的关系。方法　采用实时荧光定量PCR(FQ PCR)检测 2 0 0份HBV感染者血清中HBVDNA含量 ,同时用全自动免疫分析仪检测HBV 5项血清标志物。结果　 2 0 0份血清中 ,乙型肝炎病毒标志物不同组合组的HBVDNA阳性率有差异 ,HBsAg、HBeAg和 (或 )HBcAb阳性组阳性率约为 98.1% ,其中 96 %以上HBVDNA≥ 10 4copy/ml;HBsAg、HBcAb和 (或 )HBeAb阳性组HBVDNA阳性率约为 76 .5 % ,但其中 90 %以上HBVDNA≤ 10 4copy/ml;单纯HBV抗体阳性组HBVDNA阳性率约为13.0 % ,但均为HBVDNA≤ 10 3 copy/ml。三组间HBVDNA阳性率及分布均有明显差异 (P <0 .0 5 )。而且HBVDNA含量与疾病严重程度相关。结论　FQ PCR检测HBVDNA含量结合血清病毒标志物的检测结果对乙型肝炎的临床诊断与病情判断有重要意义     

慢性乙肝患者血清及外周血单个核细胞HBV DNA的检测

乙型肝炎病毒 (HBV)因其对人类的危害重大而受到重视 ,慢性乙肝 (CHB)患者肝脏存在不同程度的炎症 ,有的甚至发展为肝硬变乃至肝癌 [1 ,2 ] 。笔者于 2 0 0 1年 2～ 9月期间 ,采用荧光定量 PCR(FQ - PCR)技术对 6 6例 CHB患者血清、外周血单个核细胞 (PBMC)的 HBV DNA含量进行检测 ,以探讨 HBV在 CHB患者血清及 PBMC的分布情况及意义。1　临床资料1.1　对象　我院临床确诊的住院及门诊 CHB患者共 6 6例 ,男性 38例 ,女性 2 8例 ,年龄 31± 10岁 (19～ 6 7岁 )。所有CHB患者均 HBs Ag(+) ,而甲型、丙型、丁型、戊型肝炎病…     

荧光定量PCR检测慢性乙型肝炎HBV—DNA的临床应用

目的探讨血清HBV-DNA检测在慢性乙型肝炎病程中的临床价值及重叠HCV感染时的影响。方法采用荧光定量PCR技术检测89例慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA含量及与血清乙肝标志物的检测结果相比较。结果89例慢性HBV感染者中最高为3.65×108cop ies/m l,6例阴性。全部病例若按<105、105~107、>107等将病毒量分为低、中、高三度,则低滴度占16.87%、中滴度占56.63%和高滴度占26.50%。HBeAg阳性的慢性肝炎及ASC病毒血症水平较高,抗-HBe阳性的慢性肝炎及肝硬化病人血清HBV-DNA水平较低;重叠HCV感染者血清HBV-DNA水平显著低于单纯HBV感染者。结论HBV-DNA定量可作为估计肝脏炎症程度的间接指标并指导抗病毒治疗时机的选择。     

乙型肝炎病毒血清标志物与HBV—DNA含量间的关系探讨

目的 :探讨乙型肝炎病毒血清标志物与HBV -DNA含量间的关系 ,为临床的诊断、治疗、预防提供参考。方法 :运用酶联免疫吸附法及实时荧光定量PCR检测患者的乙肝六标及HBV -DNA含量 ,用统计学方法对本院及国内近五年医学期刊的相关报导的资料进行汇总、分析。结果 :检测的 775名患者中有 3 3 1人为大三阳 ,92 5%检出HBV -DNA ,含量为 7 49± 1 12 ,HBcAb检出率 95 2 3 >HBsAg85 94,几乎血清标志物的各种组合均有HBV -DNA检出。结论 :①血清学标志物检测为大三阳 ,基本可以确定有HBV复制 ;②对于献血员筛选 ,有条件的地区最好同时进行乙肝两对半及HBV -DNA检测 ;③对于HBV感染者的复诊 ,尤其是为了观察药物疗效的患者 ,只需进行HBV -DNA检测