肺纤维化BALF中TNF水平及秋水仙碱对它的影响

本研究采用２０ｍｇ／ｍＬ的石棉生理盐水溶液，给大鼠灌肺，分别在第二，四，六，八周处死。用改良的Ｇｏｍｍｏｒ结缔组织特殊染色法染色，在光学显微镜下观察肺组织的病理变化。测其支气管肺泡灌洗液上清中肿瘤坏死因子的生物活性。发现２周ＴＮＦ水平最高，８周有肺纤维化形成；ＢＡＬＦ的肺泡巨噬细胞培养上清中，４８ｈ为ＴＮＦ释放高峰；石棉可刺激ＭＰ释放ＴＮＦ；秋水仙碱可抑制ＭＰ释放ＴＮＦ。     

肺纤维化大鼠炎性细胞因子的对比研究

目的：了解肺纤维化大鼠肺局部细胞因子水平及其与肺泡巨噬细胞的关系。方法：对比观察支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）和肺泡巨噬细胞（ＡＭ）培养上清肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）、血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）的动态变化。二种细胞因子检测分别采用ＥＬＩＳＡ和生物活性法。结果：①ＢＡＬＦ中ＴＮＦ－α于第１ｄ增高，第３ｄ达高峰，其高峰时间先于ＡＭ源ＴＮＦ－α；ＢＡＬＦ中ＴＮＦ－α与其中中性粒细胞数呈正相关；②ＢＡＬＦ中ＰＤＧＦ与ＡＭ源ＰＤＧＦ同步于第７ｄ达高峰，与ＡＭ总数呈正相关。结论：ＡＭ释放高水平ＴＮＦ－α、ＰＤＧＦ；ＢＡＬＦ中也存在ＴＮＦ－α、ＰＤＧＦ，且呈动态变化；ＢＡＬＦ中ＴＮＦ－α可能还来自ＡＭ外的其它细胞，如ＰＭＮ，而ＢＡＬＦ中ＰＤＧＦ则可能主要来源于ＡＭ。     

药物对肺纤维化BALF中TNF和IL—6影响的实验研究

目的：本实验在石棉粉尘灌肺制成大鼠肺纤维化模型的基础上，研究了支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）及白细胞介素６水平。方法：用含有３个不同浓度秋水仙碱的１‰石棉培养基，培养ＢＡＬＦ中肺泡巨噬细胞，观察了２４，４８，７２ｈ培养上清中ＴＮＦ、ＩＬ－６的活性；并用秋水仙碱和刺五加灌胃，用电和光镜观察了肺的病理变化。结果：石棉可刺激Ａｍ分泌ＴＮＦ和ＩＬ－６；秋水仙碱和刺五加可抑制ＴＮＦ和Ｉ     

药物对肺纤维化BALF中TNF和IL-6影响的实验研究

目的：本实验在石棉粉尘灌肺制成大鼠肺纤维化模型的基础上，测定了支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）及白细胞介素６水平。方法：用含有３个不同浓度秋水仙碱的１‰石棉培养基，培养ＢＡＬＦ中肺泡巨噬细胞（Ａｍ），观察了２４，４８，７２ｈ培养上清中ＴＮＦ、ＩＬ－６的活性；并用秋水仙碱和刺五加灌胃，用电镜和光镜观察了肺的病理变化。结果：石棉可刺激Ａｍ分泌ＴＮＦ和ＩＬ－６；秋水仙碱和刺五加可抑制ＴＮＦ和ＩＬ－６的分泌。结论：早期应用秋水仙碱和刺五加治疗组肺的病理检查基本正常，中晚期治疗组病理改变明显，与未治疗组的病理改变相同。     

肺纤维化肺成纤维细胞产生透明质酸的实验动态研究

目的：阐明肺纤维化过程中肺成纤维细胞（ＬＦ）产生透明质酸（ＨＡ）的动态变化及作用。方法：检测和对比博莱霉素（ＢＬＭ）致大鼠肺纤维化不同时期支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）和ＬＦ培养上清中ＨＡ水平。结果：（１）ＢＬＭ组ＬＦ培养上清中ＨＡ水平于第１天明显升高，第３天达高峰，第１４～２８天时降至正常。（２）ＢＬＭ组ＢＡＬＦ中ＨＡ水平于第３天明显升高，第７天达高峰，随后下降，但至第１４天时仍高于正常水平，第２８天降至正常。（３）ＢＬＭ组ＢＡＬＦ和ＬＦ上清中ＨＡ水平与ＢＡＬＦ细胞成分之间均具有明显的正相关；ＢＡＬＦ和ＬＦ培养上清中ＨＡ水平之间也有明显的相关性。结论：ＬＦ在肺纤维化的早期肺泡炎阶段就处于活化状态，产生ＨＡ增多，导致肺内ＨＡ的过多聚积；ＬＦ产生ＨＡ增多和ＢＡＬＦ中ＨＡ水平的增高可反映肺泡炎的强度和疾病的活动性     

哮喘患者肺泡巨噬细胞血栓素 A_2 前列环素、肿瘤坏死因子α、白介素 8、10 的释放及药物调节

测定２６例哮喘患者血浆及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）ＴＸＢ２、６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α、ＴＮＦα、ＩＬ－８、ＩＬ－１０的水平，并对其肺泡巨噬细胞（ＡＭ）进行加药培养。结果显示，哮喘患者血浆、ＢＡＬＦ中ＴＸＢ２、ＴＮＦα、ＩＬ－８水平明显高于正常人，６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α与正常人无差异，ＢＡＬＦ中ＩＬ－１０水平低于正常人。患者ＢＡＬＦ中ＴＸＢ２、ＴＮＦα水平与其ＦＥＶ１、Ｖ５０呈负相关。ＡＭ加入不同的药物培养后，与空白组比较，抗原组ＴＸＢ２、ＴＮＦα的释放增加；治疗浓度氨茶碱组ＴＮＦα释放下降，ＩＬ－１０的释放增强；地塞米松组ＴＸＢ２、ＴＮＦα的释放下降。ＩＬ－１０的释放增强；红霉素组ＴＮＦα、ＩＬ－８的释放下降。提示ＴＸＢ２、ＴＮＦα、ＩＬ－８在哮喘发病中起重要促炎作用，ＩＬ－１０起抗炎作用，氨茶碱、地塞米松、红霉素具有抑制巨噬细胞分泌促炎因子的作用，而抗原具有激发ＡＭ分泌促炎因子的作用。     

肺癌患者肺泡巨噬细胞抗肿瘤免疫功能研究

用镀铜镉还原法、放射免疫法、比色法、酶标双抗体夹心法及逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）研究肺癌患者肺泡巨噬细胞（ＡＭ）抗肿瘤免疫功能状态。结果显示肺癌患者荷瘤侧肺ＢＡＬＦ中ＮＯ，ＡＭ培养上清中ＮＯ和ＴＮＦα活性低于非荷瘤侧肺与对照组，ｓＩＬ－２Ｒ活性高于对照组；经ＧＭ－ＣＳＦ刺激后ＡＭ培养上清中ＮＯ，ＴＮＦα及ＳＯＤ活性增强，ｓＩＬ－２Ｒ水平降低；两组ＡＭ ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ表达强度明显弱于     

肺癌患者肺泡巨噬细胞抗肿瘤免疫功能研究

用镀铜镉还原法、放射免疫法、比色法、酶标双抗体夹心法及逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）研究肺癌患者肺泡巨噬细胞（ＡＭ）抗肿瘤免疫功能状态。结果显示肺癌患者荷瘤侧肺ＢＡＬＦ中ＮＯ，ＡＭ培养上清中ＮＯ和ＴＮＦα活性低于非荷瘤侧肺与对照组，ｓＩＬ－２Ｒ活性高于对照组；经ＧＭ－ＣＳＦ刺激后ＡＭ培养上清中ＮＯ，ＴＮＦα及ＳＯＤ活性增强，ｓＩＬ－２Ｒ水平降低；两组ＡＭｉＮＯＳｍＲＮＡ表达强度明显弱于对照组。表明肺癌患者机体免疫功能及肿瘤局部ＡＭ抗肿瘤功能均存在不均一性缺陷。     

LBP2对大鼠免疫功能影响的体外实验研究

研究了ＬＢＰ２（ｌｙｃｉｕｍｂａｒｂａｒｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－２）对ＳＤ大鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）功能的影响，以探讨ＬＢＰ２的免疫调节机制．ＭΦ吞噬中性红试验研究表明，ＬＢＰ２在体外具有浓度（０３２～２０ｍｇ／Ｌ）依赖性增强大鼠腹腔ＭΦ吞噬中性红的能力．另外，采用生物活性检测法测定了细胞因子的水平，将大鼠ＭΦ用ＬＰＳ（１０ｍｇ／Ｌ）和ＬＢＰ２共同孵育１８～２４ｈ后，培养上清及细胞内ＩＬ－１和ＴＮＦ水平均随ＬＢＰ２浓度的增加而增加，表明ＬＢＰ２对ＭΦ合成和释放ＩＬ－１，ＴＮＦ具有明显促进作用．ＬＢＰ２对ＭΦ功能的影响可能是其免疫调节作用的机制之一．     

白细胞介素-1受体拮抗剂对博莱霉素致大鼠肺纤维化模型的影响

目的：探讨白细胞介素１受体拮抗剂（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１ｒｅｃｅｐｔｏｒａｎｔａｇｏｎｉｓｔ,ＩＬ１ｒａ）治疗博莱霉素（ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ,ＢＬＭ）致大鼠肺纤维化模型的作用机制。方法：利用ＭＴＴ法测定经ＩＬ１ｒａ作用前、后１周时该模型大鼠肺泡巨噬细胞产生肿瘤坏死因子α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒα,ＴＮＦα）,及其培养上清促肺成纤维细胞增殖能力的变化;利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交测定肺泡巨噬细胞ＴＮＦα、血小板衍化生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＰＤＧＦ）ｍＲＮＡ的表达。结果：ＢＬＭ致肺纤维化模型１周时,肺泡巨噬细胞ＴＮＦα的产生及该组细胞上清的促成纤维细胞增殖活性与正常对照组相比均明显增强,而ＩＬ１ｒａ（１０ｍｇ·Ｌ－１）对肺泡巨噬细胞ＴＮＦα的产生及该组细胞上清的促成纤维细胞增殖活性有明显的抑制作用。ＢＬＭ致肺纤维化模型１周时肺泡巨噬细胞ＴＮＦα、ＰＤＧＦｍＲＮＡ的表达较正常对照组增高,而ＩＬ１ｒａ对其表达无明显影响。结论：ＩＬ１ｒａ通过对肺泡巨噬细胞的ＴＮＦα产生及其对成纤维细胞增殖活性的抑制,可能对该模型的肺纤维化起到抑制作用     

博莱霉素致大鼠肺纤维化BALF和肺成纤维细胞培养上清中IL-8活性的动态研究

为阐明在肺纤维化过程中肺成纤维细胞（ＬＦ）产生白介素－８（ＩＬ－８）的动态变化及作用，动态观察并对比博莱霉素（ＢＬＭ）致肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）和ＬＦ培养上清中ＩＬ－８活性。结果：①ＬＦ上清中ＩＬ－８活性于第１天明显增高，第７天达高峰，随后降低，第２８天降到正常。②ＢＡＬＦ中ＩＬ－８活性也于第１天明显升高，但第３天达峰值，随后降低，第２８天降到正常。③ＢＡＬＦ和ＬＦ上清中ＩＬ－８活性之间以及二者与ＢＡＬＦ中细胞总数及分数之间均有明显的正相关。证明ＬＦ在肺纤维化早期产生ＩＬ－８明显增多，是肺内ＩＬ－８活性的主要来源之一。ＢＡＬＦ和ＬＦ上清中ＩＬ－８活性的水平反映了肺泡炎的强度和疾病的活动性。     

博莱霉素致大鼠肺纤维化BALF和肺成纤维细胞培养上清中IL…

为阐明在肺纤维化过程中肺成纤维细胞（ＬＦ）产生白介素－８（ＩＬ－８）的动态变化及作用，动态观察并对比博莱霉素（ＢＬＭ）致肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）和ＬＦ培养上清中ＩＬ－８活性。结果：①ＬＦ上清中ＩＬ－８活性于第１天明显增高，第７天达高峰，随后降低，第２８天降到正常。②ＢＡＬＦ中ＩＬ－８活性也于第１天明显升高，但第３天达峰值，随后降低，第２８天降到正常。③ＢＡＬＦ和ＬＦ上清中ＩＬ－８活     

肺泡腔内纤维连接蛋白,透明质酸积聚于博莱霉素致肺损伤早？…

目的：动态博莱霉素（ＢＬＭ）致肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液＊（ＢＡＬＦ）中纤维连接蛋白（ＦＮ）、透明质酸（ＨＡ）的变化及其与肺内胶原沉积的关系。方法：ＦＮ和ＨＡ测定采用放射免疫法。结果：ＢＡＬＦ中ＦＮＤ早期，显著增高，第７天达高峰，１４天后逐渐下降，至第２８天为０；ＢＡＬＦ中ＨＡ在第３￣７天明显增高，后逐渐降至正常；ＢＡＬＦ中ＦＮ、ＨＡ增加先天肺内胶原合成，结论：ＢＡＬＦ中ＦＮ、ＨＡ增主岢作为肺泡     

肺泡腔内纤维连接蛋白、透明质酸积聚于博莱霉素致肺损伤早期动态观察

目的：动态观察博莱霉素（ＢＬＭ）致肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中纤维连接蛋白（ＦＮ）、透明质酸（ＨＡ）的变化及其与肺内胶原沉积的关系。方法：ＦＮ和ＨＡ测定采用放射免疫法。结果：ＢＡＬＦ中ＦＮ 在早期（第１～７ 天）显著增高，第７ 天达高峰，１４ 天后逐渐下降，至第２８ 天为０；ＢＡＬＦ中ＨＡ 在第３～７ 天明显增高，后逐渐降至正常；ＢＡＬＦ中ＦＮ、ＨＡ 增加先于肺内胶原合成。结论：ＢＡＬＦ中ＦＮ、ＨＡ增高可作为肺泡炎期的标志物     

烹调油烟暴露大鼠支气管肺泡灌洗液成分分析

目的：观察烹调油烟对大鼠支气管肺泡灌洗液（ Ｂ Ａ Ｌ Ｆ）成分的影响。方法：采用亚慢性吸入染毒,给大鼠吸入烹调油烟,测定不同染毒时间后 Ｂ Ａ Ｌ Ｆ中肺泡巨噬细胞（ Ａ Ｍ ）数及部分酶活性的变化。结果：油烟组大鼠 Ｂ Ａ Ｌ Ｆ 中 Ａ Ｍ 数在染毒初期和长时间染毒后均明显低于对照组,而 Ｂ Ａ Ｌ Ｆ中乳酸脱氢酶（ Ｌ Ｄ Ｈ）、酸性磷酸酶（ Ａ Ｃ Ｐ）和碱性磷酸酶（ Ａ Ｋ Ｐ）活性与对照组相比均有不同程度的增加。结论：烹调油烟对 Ａ Ｍ 和肺组织细胞有一定的损伤作用。     

高糖状态对大鼠肺泡巨噬细胞释放NO和TNF的影响

从正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠肺中分离出肺泡巨噬细胞，在体外正常和高糖状态下培养并分别以干扰素（ＩＦＮａ－２ｂ、卡介苗（ＢＣＧ）以及干扰素和卡介苗联合刺激肺泡巨噬细胞，测定其释放一氧化氮（ＮＯ）和肿瘤坏死因子－ａ（ＴＮＦ－ａ）量。结果显示，高糖状态下ＢＣＧ刺激肺泡巨噬细胞时。其ＮＯ和ＴＮＦ－ａ释放量明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）：ＩＦＮａ－２ｂ刺激肺泡巨噬细胞时，其ＮＯ和ＴＮＦ－ａ释放量与对照组无差别（Ｐ＞０．０５）：ＩＦＮａ－２ｂ与ＢＣＧ协同刺激肺泡巨噬细胞时，其ＮＯ和ＴＮＦ－ａ释放量明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）。由此表明高糖状态下。肺泡巨噬细胞释放ＮＯ和ＴＮＦ－ａ减少，可能是导致糖尿病患者肺部易感染的一个重要原因。     

中晚期大肠癌患者外周血单核细胞释放TNF的动态观察

用生物活性测定法观察了ＬＰＳ、ＩＦＮ－γ及ＬＰＳ＋ＩＦＮ－γ诱导正常人和中晚期大肠癌患者（ＰＢＭ）释放ＴＶＦ的动态变化．结果；在上述诱生剂诱导下正常人ＰＢＭ均可释放ＴＮＬ并且存在明显的时间效价关系，以ＬＰＳ＋ＩＦＮ－γ所诱生的ＴＮＦ活性最高。在中晚期大肠癌患者中单独应用ＬＰＳ或ＩＦＮ－γ均不能诱导ＰＢＭ释放ＴＮＦ，而ＬＰＳ和ＩＦＮ－γ联合作用ＰＢＭ后可使其分泌较高水平的ＴＮ；但其ＴＮＦ的动态变化与正常人有明显的不同。上述结果提示：中晚期大肠场患者ＰＢＭ释放ＴＮＦ的能力受到抑制或损害，经适当的诱导可在一定程度上改善和提高ＴＮＦ产量。     

心脉灵液对内毒素休克大鼠血浆和肺溶酶体酶含量的影响

在内毒素休克大白鼠模型上观察到肺系数明显增高，支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬ）中的分子量４０Ｓ萤不素右旋酿酥（ＦＤ—４０Ｓ）含量明显上升，同时血浆及肺组织酸性磷酸酶（ＡＣＰ）增高，与正常对照组相比有明显差异（Ｐ＜０．０１）；用心脉灵液进行治疗，肺系数及ＢＡＬ中ＦＤ—４０Ｓ含量均下降，血浆及肺组织ＡＣＰ也降低，因此说明内毒素引起的肺血管通透性增加与溶酶体酶的释放有密切的关系，而心脉灵液可通过抑制溶酶体的释放而减轻溶酶体酶对肺组织的损伤，从而起到保护肺组织的作用。     

肺纤维化大鼠细胞外基质蛋白的变化

目的：阐明细胞外基质（ＥＣＭ）蛋白在实验性肺纤维化发病中的作用。方法：以大鼠气管内灌注博莱霉素（ＢＬＭ）和生理盐水分为两组，采用放免法和间接免疫荧光法观察纤维联结蛋白（ＦＮ）和层粘连蛋白（ＬＮ）的变化。结果：（１）ＢＬＭ组于灌注后第３～１４天，肺泡巨噬细胞（ＡＭ）分泌ＦＮ增加（Ｐ＜０．０１），肺泡隔内ＦＮ荧光增宽、紊乱；（２）灌注后第３天，支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＬＮ增加，呈渐进性升高，第２８天达峰值（Ｐ＜０．０１），３～７天肺泡隔内ＬＮ荧光增强，晚期明显增粗、紊乱。结论：活化的ＡＭ分泌ＦＮ、ＬＮ，ＦＮ主要参与肺纤维化早期病变的发生与发展，ＬＮ参与了ＢＬＭ肺纤维化的全过程。     

清除循环肿瘤坏死因子对急性肺损伤的影响

目的研究亲和免疫吸附清除循环肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）对内毒素性急性动物的保护作用。方法以６１只新西兰白兔为实验动物，建立内毒素性急性肺损伤模型。随机分为三组：（１）免疫吸附组（２７只），颈静脉注射自制脂多糖（ＬＰＳ）１００×１０８ＣＦＵ／ｋｇ后１小时开始血液灌流，通过含重组肿瘤坏死因子ａ（ｒＨｕＴＮＦ－ａ）单克隆抗体的吸附柱，灌流时间２小时；（２）致伤组（２７只），颈静脉注射ＬＰＳ，无吸附柱，仅有相同血量的体外循环；（３）对照组（７只），颈静脉注射生理盐水２ｍｌ，无吸附柱，仅有体外循环。通过亲和免疫吸附清除循环ＴＮＦ，观察了肺系数、肺通透指数、肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＴＮＦ和白细胞介素８（ＩＬ－８）水平、白细胞数的变化以及对存活率的影响。结果免疫吸附组能有效清除循环ＴＮＦ、ＢＡＬＦ中ＴＮＦ及ＩＬ－８水平较致伤组显著降低（Ｐ＜０．０１）。肺毛细血管通透性等指标明显清除循环ＴＮＦ、ＢＡＬＦ中ＴＮＦ及ＩＬ－８水平较致伤组显著降低（ｐ＜０．０１）。结论免疫吸附清除循环ＴＮＦ，能有效地保护内毒素所致的急性肺损伤。