用微血管内皮细胞体外扩增的骨髓造血干细胞重建大剂量化疗后的？…

目的 探索造血干细胞体外培养扩增的新方法。 方法 采用磁性细胞分离技术纯化小鼠骨髓血管内皮细胞,将其与骨髓造血细胞一起培养。培养的骨髓细胞移植给大剂量化疗后的小鼠,观察其造血重建功能。 结果 纯化的血管内皮细胞具有鹅卵石样细胞形态,表达多种内皮细胞相关抗原如ＣＤ３１,ＣＤ３４,ＩＣＡＭ－１,ＶＣＡＭ－１和凝集素ＢＳ－１结合位点。将内皮细胞与骨髓造血细胞共同培养后,骨髓细胞数明显增加,其中６０％为原     

用微血管内皮细胞体外扩增的骨髓造血干细胞重建大剂量化疗后的小鼠造血功能

目的探索造血干细胞体外培养扩增的新方法。方法采用磁性细胞分离技术纯化小鼠骨髓血管内皮细胞,将其与骨髓造血细胞一起培养。培养的骨髓细胞移植给大剂量化疗后的小鼠,观察其造血重建功能。结果纯化的血管内皮细胞具有鹅卵石样细胞形态,表达多种内皮细胞相关抗原如ＣＤ３１,ＣＤ３４,ＩＣＡＭ１,ＶＣＡＭ１和凝集素ＢＳ１结合位点。将内皮细胞与骨髓造血细胞共同培养后,骨髓细胞数明显增加,其中６０％为原始的造血细胞,后者移植后能有效重建血功能。结论骨髓微血管内皮细胞能促进造血干细胞体外扩增,并有效阻止其分化。扩增的造血干细胞具有造血重建功能。     

人突变DHFR基因高效逆转录病毒载体及其在小鼠造血细胞的表达

本文用转染了人突变DHFR基因逆转录病毒载体的新一代产病毒细胞AM12-S31,研究了其耐药特性、产生的病毒滴度及DHFR基因在小鼠造血细胞的表达.MTT法显示AM12-S31细胞对G418和氨甲喋呤耐受,对照细胞AM12对G418和MTX敏感.产生的病毒滴度为7.8×10~4～4.2×10~5CFU/ml,且为无复制活性病毒.将AM12-S31上清转染小鼠骨髓造血细胞后进行体内、外研究.CFU-GM分析显示:于不同C418浓度均有阳性克隆,而AM12上清转染组则无耐G418克隆.将转染后骨髓细胞从尾静脉回输给经致死剂量(900 rad)照射小鼠,MTX筛选(第一周为4mg/kg,每周二次;以后各周10mg/kg,每周二次),结果:实验组小鼠白细胞计数和红细胞压积逐渐恢复正常;对照组小鼠 30天内全部死亡.PCR分析耐G418 CFU-GM克隆和实验组小鼠骨髓细胞,均检测到标志基因Neo~R的存在.因此,初步研究表明该产病毒细胞能够产生高滴度、安全有效的非复制型逆转录病毒,并能成功转染小鼠造血细胞、表达目的基因,使在MTX筛选条件下重建小鼠造血功能.该研究为进一步开展耐药基因治疗打下了基础.     

外周血造血干细胞移植的研究现状与展望

1986年，Korbling报道了自体外周血干细胞移植支持化疗治疗Burkitt’s淋巴瘤，揭开了外周血于细胞移植（PBSCT）应用于临床的序幕。近年来，PBSCT逐渐成为治疗血液病和恶性实体瘤的有效方法之一，并以其特有的优点有取代骨髓移植的趋势，现就PBSCT的研究现状、存在问题及前景作一阐述。一、PBSCT的现状l·PBSCT治疗实体瘤在过去10年中，PIEIR7支持大剂量化疗治疗对化疗、放疗敏感的恶性实体瘤，取得了可喜的成绩。世界各地多中心、多协作组大量病例报道，都显示出良好的疗效与前景，成为治疗实体瘤的有效手段之一。目前临床报…     

造血干细胞移植治疗白血病的现状与展望

造血干细胞移植治疗白血病的现状与展望北京医科大学血液病研究所（１０００４４）陆道培，刘开彦造血干细胞移植是目前治疗白血病最为有效的方法，骨髓移植（ＢＭＴ）的本质是造血干细胞移植。因此，根据造血干细胞的来源不同，可将造血干细胞移植分为：（１）ＢＭＴ，包...     

CD44与造血干细胞归巢的相关性研究进展

CD44属于粘附分子家族的Ⅰ型跨膜糖蛋白,是一种骨髓细胞外基质糖胺聚糖-透明质酸(HA)的主要受体.CD44最初叫淋巴细胞归巢受体,因与淋巴细胞归巢有关而得名.     

胚胎干细胞及其向造血干细胞的定向诱导分化

干细胞是具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体 ,如造血干细胞、神经干细胞、皮肤干细胞、肠上皮干细胞、间充质干细胞 ( mesen- chy-mal stem cell,MSC)和胚胎干细胞等。在各种干细胞的研究和应用中 ,胚胎干细胞最引人注目。胚胎干细胞 ( embryonic stem cell,简称 ES细胞 )是胚胎或原生殖细胞 ( primordial germ cell,PGC)经体外分化抑制培养而筛选出的具有发育全能性的细胞。它在发育阶段上类似于早期胚胎的内细胞团细胞 ( in-ner cellmass,ICM细胞 ) ,具有与早期胚胎相似的分化潜能和正常二倍体核型 ,兼有胚胎细胞和体…     

人内皮细胞对正常人和再生障碍性贫血患者粒系造血的研究

以人脐静脉内皮细胞作铺层，进行体外CFU－GM半固体培养，观察内皮细胞对正常人和再生障碍性贫血患者粒系造血的影响。在有内皮细胞的各培养体系，CFU－GM的产率均显著高于无内皮细胞的对照体系。在无内皮细胞存在的体系中，需添加GM－CSF才能表现出对粒系造血的刺激作用。对15例初诊慢性再障患者骨髓粒系祖细胞的培养结果表明，无内皮细胞存在时，无论向培养体系中加何种细胞因子均无集落形成，而在有内皮细胞的双层培养中，部分患者骨髓培养中有CFU－GM集落形成。研究结果表明内皮细胞对正常人和再障患者粒系造血均有明显影响。     

供者外周血干细胞动员采集198例临床分析

 目的　研究外周血造血干细胞移植（PBSCT）供者外周血干细胞动员采集的方法及其效果。方法　198名健康供者每天皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）（5～10）μg／kg进行外周血干细胞动员,第5天开始采集。采用血细胞分析仪行单个核细胞（MNC）计数,流式细胞术（FCM）行CD+34 细胞计数。分析供者性别、身高、年龄、采集当天外周血白细胞（WBC）计数对动员采集效果的影响。结果　所有供者均成功动员采集,采集当天的MNC计数平均为（4.19±1.96）×108／kg,CD+34 细胞计数平均为（2.98±1.40）×106／kg;MNC和CD+34细胞计数与供者性别、身高、年龄无关;采集当天外周血WBC计数与MNC、CD+34 细胞计数呈正相关（r＝0.9201,P＝0.0035;r＝0.8420,P＝0.0149）;采集当天外周血WBC计数≥20.0×109／L的供者比＜20.0×109／L的供者采集效果更显著（F＝4.688,P＝0.0013;F＝4.622,P＝0.0006）。结论　rhG-CSF动员的健康供者采集当天外周血WBC计数是一项预测CD+34细胞采集数量的简单、可行的指标。     

正常供者外周血造血干细胞动员效果及影响因素

 目的　探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员正常供者外周血造血干细胞的效果、毒副作用及影响因素。方法　对59名异基因造血干细胞正常供者采用G-CSF 皮下注射3 ~ 5 d,使用COBE Spectra血细胞分离机采集外周血干细胞,流式细胞术检测采集物中CD+34细胞数。结果　所有供者第一次采集的单个核细胞（MNC）及CD+34细胞量平均值分别为4.4（1.12～13.06）×108／kg供者体重及3.78（1.14～12.92）×106／kg供者体重。患者不良反应轻微。男性供者、年龄小于45岁者及采集前白细胞计数高者采集所得CD+34细胞数较高。结论　G-CSF作为正常供者动员剂安全有效。患者性别、年龄及采集前白细胞计数可作为预测因素。     

造血干细胞动员的进展

使用动员的外周血干细胞(PBSC)已经在很大程度上取代了骨髓作为干细胞源用于异基因和自体干细胞移植.粒细胞集落刺激因子(G-CSF)加或不加化疗是最常用的干细胞动员方案.一些供者或患者,特别是动员前经高强度治疗的患者,用这一方案不能动员到干细胞目标值.新动员剂和新疗法的产生能够改进造血干细胞的动员.     

自体或异体间充质干细胞移植对造血重建的影响

目的 初步探讨自体或异体间充质干细胞(MSC)移植对造血重建的影响.方法 采用含血清培养体系培养扩增自体或供者骨髓以及来自胚胎的MSC,例1为系统性红斑狼疮(SLE);例2为非霍奇金淋巴瘤(NHL),患者在造血干细胞移植(HSCT)前先输注自体MSC,然后进行自体HSCT;例3为阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH),在HSCT前先输注供者MSC,然后进行同基因异体HSCT;例4为慢性粒细胞白血病(CML),行异基因HSCT;例5为淋巴瘤行自体HSCT,在移植后造血恢复缓慢(分别为+129天,+78天)移植来自胚胎的MSC.结果 例1、例2和例3患者MSC和HSCT联合无明显不良反应.中性粒细胞≥0.5×109/L和血小板≥20×109/L的时间分别为移植后1、10、10和1、8、33 d.粒细胞缺乏时间分别为0、7、12 d;输注来自胚胎MSC的患者(例4、例5),1个月内造血仍无恢复,MSC移植失败.结论 MSC移植时机掌握很重要,与HSCT同时进行,可以促进造血重建,而在移植后一些造血重建缓慢的患者再进行MSC移植的疗效还有待进一步研究.

Abstract：

Objective To investigate the impact of auto and allogenic mesenchymal stem cells (MSC) transplantation on hematopoietic reconstitution. Methods MSC from auto, donor bone marrow or embryonic tissue were cultured and expanded in vitro in the serum culture system. Five patients received hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) were investigated. Case 1 of systemic lupus erythematosus and Case 2 of non-hodgkin' s lymphoma (NHL) received auto MSC transplant before auto-HSCT. Case 3 of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria received HLA-identical allogenic MSC transplant before HLA-identical allo-HSCT.Case 4 of chronic myelocytic leukemia and Case 5 of NHL had delayed hematopoietic reconstitution (129th and 78th day, respectively) after allo- and auto-HSCT, respectively, and received MSC from embryonic tissue.Results Case 1, 2 and 3 had no manifested side effects after MSC transplantation combined with HSCT.Neutrophil count of case 1, 2, and 3 were over 0.5 ×109/L at 1st, 10th and 10th day, respectively, platelet count were over 20 ×109/L at 1st, 8th and 33th day, respectively, and agranulocytosis at Ost, 7th and 12th day, respectively. The treatment of embryonic tissue MSC transplant was confirmed to fail for Case 4 and 5.Conclusion The time of MSC transplant has a great impact on hematopoietic reconstitution. MSC transplantation and HSCT performed simultaneously can improve hematopoietic reconstitution. However, the impact of MSC on patients with delayed hematopoietic reconstitution after HSCT needs further study.     

间充质干细胞在造血干细胞移植中的应用

 间充质干细胞是一种能够从各种人成体组织分离出来的非造血多能干细胞,近年来,许多研究表明间充质干细胞具有免疫调节能力及促进组织重建等功能。就其在造血干细胞移植中的应用,如急慢性移植物抗宿主病（GVHD）、GVHD造成的移植失败、纯红细胞再生障碍性贫血及免疫性血小板减少性紫癜、出血性膀胱炎作以综述。     

多种造血细胞因子在人类羊膜间充质干细胞中表达的意义

 目的　研究体外培养的人羊膜间充质干细胞（MSC）细胞因子分泌特征,探讨其在造血中的分子生物学基础。方法　采用RT-PCR方法在mRNA水平上检测人羊膜MSC细胞因子的分泌。结果　体外传代培养的人羊膜MSC能表达LIF、SCF、M-CSF、G-CSF、GM-CSF、IL-3、IL-6、IL-11等多种重要的造血细胞因子。结论　人羊膜MSC可以分泌丰富的造血细胞因子,可能在造血支持和提高造血干细胞移植成功率方面发挥重要作用。     

铁过载对造血干细胞移植的影响

铁过载与造血干细胞移植（HSCT）预后关系密切。移植前铁过载可能增加患者HSCT后发生感染、肝静脉闭塞病（VOD）及肝损伤的风险,降低患者移植后总生存（OS）率、无事件生存（EFS）率。移植后铁过载可能降低患者的OS率。祛铁治疗有可能使HSCT患者获益。     

自体外周造血干细胞移植后造血重建中外周血细胞的动态变化

目的　为了解自体外周造血干细胞移植 (APBSCT)后 ,造血重建中血细胞变化规律。方法　对11例行APBSCT术后患者每天进行血常规检查 ,并进行分析。结果　APBSCT术后 ,外周血细胞MONO、NEU、WBC、PLT依次降低至最低点 ,而按照MONO、WBC、NEU、PLT依次恢复正常 ,特别是MONO最先降至最低点而在随后的恢复期又最先恢复正常。结论　APBSCT术后外周血细胞的动态变化 ,有利于病情的观察 ,并指导临床治疗。     

造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征的研究进展

 人类白细胞抗原（HLA）匹配同胞供者造血干细胞移植是治疗骨髓增生异常综合征（MDS）最有效的方法,其疗效在过去十几年里有明显的提高。在缺乏同胞供者来源时,无关供者移植、脐带血移植、自体造血干细胞移植可以作为替代的治疗选择。现对MDS患者移植适应证、影响移植疗效的因素（包括年龄、移植时机、移植前诱导缓解化疗、预处理方案、造血干细胞来源等）进行综述。     

造血干细胞移植治疗恶性血液病临床研究

 目的 探讨造血干细胞移植（HSCT）治疗恶性血液病的临床疗效及并发症的防治。方法51例急慢性白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤患者中,36例选择自体造血干细胞移植（auto-HSCT）,15例接受异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）,包括HLA不全相合3例及非血缘关系移植4例,混合移植2例;预处理自体移植主要选用CBV,BEAC方案,异基因移植采用BU／CY2及改良的BU／CY方案;移植物抗宿主病（GVHD）的预防采用CsA+MTX或CsA+MTX＋MMF方案。结果 51例患者中49例获得造血重建,在auto-HSCT和allo-HSCT后WBC≥1.0×109／L的中位时间分别为13 d和17 d,血小板≥20×109／L的中位时间分别为21和25 d;40 ％出现aGVHD,26.7 ％出现cGVHD;3.9 %出现HVOD;出血性膀胱炎发生率5.9 ％;CMV感染发生率33.3 ％;62.7 ％出现黏膜炎;54.9 ％出现不同部位的感染;移植相关死亡率3.5 %,随访3～95个月,移植后复发11例,其中auto-HSCT 9例,allo-HSCT 2例。结论 HSCT是目前治疗恶性血液病的最佳方法,但移植期间需要进一步探索如何减少其相关并发症,以提高血液肿瘤的治愈率及延长患者的无病生存时间。