正常大鼠腹膜透析模型中腹膜血管新生与HIF-1α及VEGF的表达研究

目的：探讨正常大鼠腹膜透析模型中HIF-1α及VEGF对腹膜血管新生。方法：建立正常大鼠腹膜透析模型,随机分组为正常组、假手术组、1.5%腹透液组及4.25%腹透液组,采用RT—PCR、免疫组化技术研究HIF-1α及VEGF在腹膜组织中的表达,同时观察腹膜血管新生改变。结果：在两组腹透组中HIF-1α及VEGF基因表达明显增高,与正常组及假手术组相比较有差异,并且腹膜血管新生改变。结论：HIF-1α及VEGF在慢性肾衰竭腹膜透析模型腹膜组织中存在基因表达,可能通过促进腹膜血管新生,参与腹膜透析超滤改变。     

腹膜厚度与腹膜溶质转运功能的相关性

目的 探讨腹膜透析患者腹膜厚度与基线溶质转运功能的关系,分析腹膜转运功能的影响因素.方法 入选2017年1月至2019年6月福建省龙岩市第二医院肾内科收治的非糖尿病终末期肾脏病(ESRD)患者为研究对象.腹膜透析置管术前用彩色超声仪测量患者壁层腹膜厚度.腹膜透析治疗后1个月行标准腹膜平衡试验(PET)检查,以4h腹透液的矫正肌酐与2h血清肌酐的比值(D/Pcr)作为基线溶质转运指标,并按照D/Pcr评估结果分为高/高平均转运(H)组(D/Pcr≥0.65)和低/低平均转运(L)组(D/Pcr< 0.65).比较两组患者临床资料、壁层腹膜厚度和腹膜透析相关指标的差异;二元Logistic回归法分析腹膜转运功能的影响因素.结果 共纳入70例非糖尿病ESRD患者,H组患者腹膜超滤量显著低于L组;腹膜内生肌酐清除率(Ccr)和腹膜厚度显著高于L组(均P<0.05).Pearson及Spearman相关性分析结果显示,腹膜透析患者壁层腹膜厚度与溶质转运指标D/Pcr(r=0.673)、腹膜内生肌酐清除率(Ccr,r=0.261)呈正相关,与腹膜透析超滤量呈负相关(r=-0.365,均P<0.05).偏相关分析结果显示,腹膜厚度与溶质转运指标D/Pcr (r=0.539)、腹膜Ccr(r=0.338)呈正相关(均P<0.05).二元Logistic回归分析结果显示,腹膜增厚是腹膜转运功能的危险因素(OR=1.175,95%CI1.009~ 1.369,P=0.038).结论 非糖尿病腹膜透析患者壁层腹膜厚度与基线溶质转运指标呈正相关,腹膜增厚是影响腹膜转运功能的危险因素.     

前列地尔注入高糖腹膜透析液对实验大鼠腹膜纤维化的影响

目的探讨前列地尔加入高糖腹膜透析液对大鼠腹膜纤维化的影响和可能的机制。方法采用高糖腹膜透析液+脂多糖腹腔注射制备大鼠腹膜纤维化模型。将大鼠随机分为对照组、模型组、前列地尔低剂量组、前列地尔中剂量组和前列地尔高剂量组。3个前列地尔治疗组是在造模同时每日腹腔内注射含不同剂量前列地尔的腹透液。6周后各组大鼠行2 h腹膜平衡试验,检测0 h腹膜透析液葡萄糖浓度(D_0),2 h透出液葡萄糖浓度(D_2),透析液肌酐浓度(D),血浆肌酐浓度(Pcr),计算D/Pcr和D_2/D_0,测量超滤量。留取血液及腹膜透析液标本,用ELISA法分别测定血液及腹膜透析液中转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β),单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP--1)、白介素6(interleukin-6,IL-6)含量。留取壁层腹膜组织行病理切片做HE及Masson染色,新生血管计数采用免疫组化法检测CD31的表达率;免疫组化法测定腹膜组织TLR4、TGF-β的表达率。结果前列地尔治疗组与模型组相比,超滤量及D_2/D_0均明显增加,而D/Pcr则明显降低,腹透液血液中TGF-β的含量以及血液中IL-6的含量降低、腹膜组织中Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)、TGF-β的表达降低,腹膜新生血管密度减少;前列地尔中剂量组在超滤量、D/Pcr、新生血管密度、腹透液及血液TGF-β水平、腹膜组织中TLR4表达均与优于低剂量组,且与高剂量组无显著性差异;前列地尔高剂量组仅在腹膜组织中TGF-β的表达以及血液中IL-6的水平下调方面优于其他治疗组,且与对照组无显著性差异。结论前列地尔可以有效的防治腹膜纤维化的进程,中剂量前列地尔注入高糖腹透液对大鼠腹膜纤维化的干预最佳。     

参芎注射液对大鼠腹膜间皮细胞紧密连接的影响

目的:观察高糖腹膜透析液和添加参芎注射液的腹膜透析液对腹膜间皮细胞(PMC)紧密连接形态结构和紧密连接相关蛋白封闭蛋白-1(ZO-1)表达的影响。方法:SD大鼠随机分为4组,空白组、模型组和参芎注射液低剂量、高剂量干预组,4周后检测4组SD大鼠的腹透超滤量、腹膜转运功能。并应用光镜、透射电镜和免疫组织化学染色法观察各组的腹膜厚度,紧密连接结构的改变和ZO-1蛋白水平表达的变化。结果:各组之间比较超滤量、D/Pcr、D4/D0、腹膜厚度及ZO-1表达率差异均有统计学意义(P<0.05),腹透液中添加参芎注射液能改善大鼠的腹透超滤量,减轻腹膜的增厚,改善腹膜的转运功能,且高剂量干预组优于低剂量干预组(P<0.05)。结论:高糖腹膜透析液可引起PMC的损伤,影响紧密连接和ZO-1的表达,参芎对PMC及其紧密连接等结构有一定的保护作用。     

高糖与炎症因子及黄芪对人腹膜间皮细胞毒性的影响

目的:研究不同浓度的含糖腹透液、多种炎症因子以及二者的共同作用对人腹膜间皮细胞损伤的影响,并探索中药黄芪对此的干预作用.方法:用乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定细胞毒性,观察各种因素(不同浓度的含糖腹透液与炎症因子的组合、多种炎症因子及其组合和中药黄芪)对体外培养人腹膜间皮细胞株损伤的影响.结果:4.25%腹透液使细胞破坏明显增加,P＜0.05;4.25%腹透液+TNF-α或(LPS+TNF-α+IL-1β)进一步加剧细胞损伤,P＜0.05和P＜0.01.黄芪明显减少细胞破坏,在1.5%腹透液情况下,P＜0.001;在TNF-α和LPS+TNF-α+IL-1β情况下,P＜0.05.结论:黄芪减少腹膜间皮细胞损伤,在炎症因子或含糖腹透液条件下,黄芪仍有保护间皮细胞的作用.     

可溶性酪氨酸激酶2融合蛋白对尿毒症腹膜透析大鼠腹膜形态和功能的影响

目的 研究可溶性酪氨酸激酶2融合蛋白（sTie-2-Fc）对尿毒症腹膜透析大鼠腹膜血管新生、溶质转运和超滤功能的影响。 方法 32只雄性Wistar大鼠按数字随机法分为假手术组、尿毒症组、尿毒症腹透组和sTie-2-Fc干预组（均n=8）。尿毒症腹透组和sTie-2-Fc干预组大鼠经腹透管每天2次腹腔灌注4.25%葡萄糖透析液（3 ml/100 g体质量）共4周,sTie-2-Fc干预组大鼠每次灌注时在透析液中加入1 μg sTie-2-Fc。各组大鼠处死前行腹膜平衡试验,检测腹膜转运和超滤功能,取大网膜标本行抗CD31免疫组化染色并计血管数。 结果 与假手术组大鼠相比,尿毒症组大鼠的2 h腹透液和血肌酐比值（D/Pcr）增高（0.78±0.05比0.70±0.09,P = 0.028）,腹透液2 h与0 h葡萄糖比值（D/D0）降低（0.69±0.05比0.76±0.07,P = 0.033）,腹膜超滤量（UF,ml）减少（2.29±0.50比4.58±1.64,P = 0.005）,腹膜血管数量增加[（5.8±3.0）/HP比（1.6±0.5）/HP,P < 0.01]。尿毒症腹透组大鼠的溶质转运较尿毒症组大鼠进一步增高（D/Pcr: 0.89±0.05比0.78±0.05,P < 0.01;D/D0:0.47±0.09 比0.69±0.05, P < 0.01）,UF（ml）减少（0.40±0.59比2.29±0.50,P = 0.005）,腹膜血管数量增多[（16.7±1.2）/HP比（5.8±3.0）/HP,P < 0.01]。干预组大鼠使用sTie-2-Fc后,UF（ml）较尿毒症腹透组大鼠显著增加（1.56±0.48比0.40±0.59,P = 0.014）,腹膜血管数量显著减少[（9.2±1.2）/HP比（16.7±1.2）/HP,P ＜ 0.01],但两组大鼠的D/Pcr和D/D0差异均无统计学意义。 结论 sTie-2-Fc使尿毒症腹透大鼠腹膜血管新生减少,超滤增加,有利于保护腹膜结构和功能,可能是防治腹透后腹膜结构和功能改变的另一靶点。     

扶肾颗粒对腹膜透析相关性腹膜纤维化的影响及其作用机制的实验研究

目的:通过对腹膜透析大鼠进行干预,观察扶肾颗粒对腹膜纤维化相关细胞因子的影响及其作用机制探讨。方法:SPF级健康雄性SD大鼠75只,体重180～200g,适应性饲养1周后,依大鼠体重分层,随机分为:正常对照组(A组,n=15),无任何处理,腹腔注射生理盐水,100ml.kg-1.d-1,连续4周;肾衰5/6切除+1.5%PD组(B组,n=15);肾衰5/6切除+1.5%PD+扶肾颗粒组(C组,n=15);肾衰5/6切除+4.25%PD组(D组,n=15);肾衰5/6切除+4.25%PD+扶肾颗粒组(E组,n=15),除A组外,各组均制成肾衰模型,其中B、C组予腹腔注射1.5%LPDS,100ml.kg-1.d-1,连续4周;D、E组予腹腔注射4.25%LPDS,100ml.kg-1.d-1,连续4周,自透析开始,对C组和E组予灌服扶肾颗粒,以200gSD大鼠计算,灌胃剂量1.8ml/d。其余各组予灌服2ml生理盐水,共灌服4周。观察各组实验动物的大体状态、体重变化、腹膜滤过功能及血清纤维化调控因子表达变化。结果:在治疗4周后,除正常对照组(A组)外,其余各组均体现为负超滤,但是,同浓度透析治疗组中,应用扶肾颗粒干预组其超滤情况明显优于未应用扶肾颗粒组(P<0.05),其作用显著,同时,葡萄糖转运量方面亦体现为相似结果。与正常对照组比较(A组),其余各模型组相关促纤维化因子表达水平均明显升高(P<0.01)。TGF-β1方面,D组的表达水平明显较其他各组升高(P<0.05)。CTGF及IL-6方面,结果与TGF-β1相似。VEGF方面,E组较D组明显降低(P<0.05)。随着透析治疗的进行,HGF与BMP-7表达水平均反应性升高,各模型组二者水平均较正常对照组明显升高(P<0.01)。HGF方面,C组较B组明显升高(P<0.01)。BMP-7方面,E组较D组明显升高(P<0.05)。结论:扶肾颗粒可减轻腹透大鼠的肾功能损伤,保护残余肾功能,改善腹透大鼠的超滤量及葡萄糖转运量,抑制促纤维化因子TGF-β1、CTGF、IL-6、CTGF等表达,调高抗纤维化因子HGF、BMP-7的表达,进而起到抑制腹膜透析相关腹膜纤维化的发生,改善腹膜透析效能。     

三七总皂苷对腹膜纤维化大鼠转化生长因子-β_1的影响

目的：探讨三七总皂苷对腹膜纤维化大鼠转化生长因子-β1的影响。方法：21只惠斯脱（WISTAR）大鼠分成三组：（1）对照组（n=7）：每日腹腔内加入一次生理盐水100 ml/kg;（2）模型组（n=7）：每日腹腔内加入一次4.25%葡萄糖腹透液100 ml/kg,同时在第1、3、5、7天联合脂多糖腹腔注射,按0.6 mg/kg;（3）试验组（n=7）：每日腹腔内加入一次4.25%葡萄糖腹透液100 ml/kg同时每天加入一次三七总皂苷35 mg/kg,在第1、3、5、7天联合脂多糖腹腔注射,按0.6 mg/kg;透析4周后行1 h腹膜平衡试验,并分别测定透析液和血浆尿素氮的比值（D/P）、葡萄糖重吸收值（D1/D0）、超滤容积,透析液中白细胞总数、用ELISA方法行腹膜透析液转化生长因子-β1（TGF-β1）。结果：模型组、试验组与对照组相比较,超滤量均显著下降（P〈0.05）;而透析液中TGF-β1、表达均显著增多,腹膜组织增厚也均显著增多（P〈0.05）。试验组与模型组比较,其超滤量明显改善（P〈0.05）,而透析液中TGF-β1显著减少（P〈0.05）,腹膜组织增厚明显改善（P〈0.05）。结论：PNS可以通过下调腹膜分泌TGF-β1,从而改善试验性腹膜纤维化,在一定程度上保护腹膜功能。     

缺氧诱导因子-1α在肾间质纤维化中的表达及意义

目的：探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）致肾间质纤维化的作用。方法：60只雄性SD大鼠随机分为假手术组（SOR）和单侧输尿管梗阻（UUO）模型组。术后第3天,第7天,第14天各处死大鼠10只,肾组织行HE染色并观察病理变化。采用免疫组织化学和荧光定量逆转录聚合酶链反应（Q-RT-PCR）法检测肾脏组织中HIF-1α、CTGF、TGF-β1蛋白和mRNA表达。结果：与假手术组相比,模型组大鼠肾脏病理损害进行性加重;HIF-1α、CTGF、TGF-β1蛋白表达随梗阻时间的延长逐渐增加;与假手术组相比HIF-lα、CTGF、TGF-β1mRNA表达明显增加（P〈0.05）;相关分析显示,模型组第3天HIF-lαmRNA表达与CTGFmRNA,TGF-β1mRNA表达分别呈正相关（r=0.748,0.659,P〈0.05）,模型组第7天组HIF-1αmRNA分别和CTGFmRNA、TGF-β1mRNA呈正相关（分别为r=0.663,0.645,P〈0.05）,模型组第14天组HIF-1αmRNA分别和CTGFmRNA、TGF-β1mRNA呈正相关（分别为r=0.515,0.752,P〈0.05）。结论：HIF-1α可能通过调节CTGF、TGF-β1的表达参与了肾间质纤维化发生和发展的过程。     

缺氧诱导因子-1α表达水平与分泌性中耳炎患者炎症水平的关系

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平与分泌性中耳炎患者炎症水平的关系及其临床意义。方法选取2017年6月到2022年6月新乡市中心医院收治的44例急性中耳炎患者和同期44例健康体检者作为研究对象, 收集中耳积液和外周血, 采用蛋白质印迹法(Western blot)和酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组研究者和不同性质中耳炎患者中耳积液和血清中HIF-1α和炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平;采用Pearson法分析HIF-1α、TNF-α、IL-1β与分泌性中耳炎患者病程的相关性。组间数据比较采用t检验。结果对照组血清HIF-1α表达水平(1.02±0.15)明显低于观察组耳积液和血清HIF-1α表达水平(1.79±0.15、2.26±0.15), 差异有统计学意义(t=28.730、17.460, P<0.05)。对照组血清TNF-α和IL-6表达水平[(9.94±1.49)、(10.99±2.81) ng/ml]明显低于观察组耳积液和血清TNF-α和IL-6表达水平[(86.02±8.59)、(47.25±8.65)...     

RhoA-Rock信号通路在转化生长因子β1诱导大鼠腹膜间皮细胞转分化中的作用

目的　探讨RhoA-Rock信号通路在转化生长因子β1（TGF-β1）诱导大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）转分化中的作用。 方法　体外培养SD大鼠原代腹膜间皮细胞,静止24 h后,采用随机数字表法随机分为以下4组：正常对照组、TGF-β1（10 μg/L）刺激组、TGF-β1（10 μg/L）＋Y-27632（Rock特异性抑制剂,10 μmol/L）组（Y-27632预处理2 h）、Y-27632（10 μmol/L）组。用TGF-β1（10 μg/L）刺激RPMC不同时间,观察α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,E钙黏素（E-cadherin）、Ⅰ型胶原（ColⅠ）的表达。RT-PCR法检测E-cadherin、α-SMA 和ColⅠmRNA表达。Western印迹法检测RhoA（包括总RhoA及活化的RhoA）、E-cadherin、α-SMA、ColⅠ和波形蛋白（vimentin）表达。活化的RhoA由膜蛋白提取试剂盒提取。 结果 （1）TGF-β1（10 μg/L）刺激RPMC能诱导RhoA活化,于10 min开始出现活性升高,为对照组的（2.57±0.52）倍（P < 0.05）;1 h达高峰,为对照组的（4.35±0.41）倍（P < 0.05）。（2）TGF-β1（10 μg/L）刺激RPMC能导致E-cadherin mRNA和蛋白表达下调,α-SMA、ColⅠmRNA和蛋白表达上调,呈时间依赖性。（3）Rock特异性抑制剂Y-27632能显著下调α-SMA、ColⅠmRNA的表达,较TGF-β1刺激组各降低了53.8%和55.7%（均P < 0.05）,并且能下调α-SMA、ColⅠ和vimentin蛋白的表达,较TGF-β1刺激组分别降低了42.6%、60.1%和58.1%（均P < 0.05）,但不能上调E-cadherin mRNA和蛋白的表达。 结论　TGF-β1可通过RhoA-Rock信号通路介导大鼠腹膜间皮细胞转分化,抑制该通路可作为防治腹膜纤维化的潜在靶点。     

腹膜透出液乳铁蛋白水平对腹膜透析相关性腹膜炎的诊断价值初步探讨

目的:探讨腹透液乳铁蛋白(lactoferrin, Lf)水平在腹膜透析相关性腹膜炎(peritoneal dialysis-associated peritonitis, PDAP)诊断、治疗及预后中的作用。方法:纳入2019年09月—2022年09月在天门市第一人民医院肾内科就诊的腹膜透析患者的临床资料。使用人乳铁蛋白酶联免疫吸附测定试剂盒检测腹透液Lf水平。根据患者是否发生腹膜炎分为对照组、腹膜炎组。收集患者的性别、年龄、病原菌、转归等临床资料及相关实验室资料。采用Logistic回归法分析腹透液Lf与PDAP的关系；应用受试者工作特征曲线(ROC)分析腹透液Lf对PDAP的预测价值，并比较不同类型病原菌感染的腹透液Lf水平。结果:与对照组相比，腹膜炎组患者腹透液Lf水平明显升高(P<0.001),多因素Logistic回归分析提示，腹透液Lf升高是腹膜透析患者发生PDAP的独立相关因素(P<0.001),腹透液Lf预测腹膜透析患者PDAP的曲线下面积为0.946(95%CI 0.917～0.975,P<0.001),特异度为89.1%,敏感度为89.4%。与革...     

腹膜透析患者癌症相关抗原125水平与腹膜转运功能关系的研究

目的:检测腹膜透析患者腹透液中癌症相关抗原125(CA125)水平及腹膜转运功能,并探讨二者之间关系及其临床意义.方法:电化学发光法测定过夜腹透液中CA125浓度,行腹膜平衡试验检测腹膜转运功能.结果:腹透短期组、腹透中期组、腹透长期组三者的腹透液中CA125水平及4 h D/PCr相比较皆有统计学差异(P<0.05或P<0.01);腹透腹膜炎中、低发组观察前后两指标皆无统计学差异,也无明显的相关性,而腹透腹膜炎高发组观察前后两指标有统计学差异;观察各组两指标皆呈非显著性负相关.结论:腹膜透析患者癌症相关抗原125水平与腹膜转运功能关系不大.     

褪黑素对大鼠腹膜透析相关性腹膜纤维化的影响

目的观察褪黑素(melatonin,MT)对大鼠腹膜透析相关性腹膜纤维化的影响。方法将38只雄性SD大鼠分为对照组(6只)、腹膜纤维化模型组(8只)、模型+低剂量MT(5mg·kg~(-1)·d~(-1))腹腔给药组(8只)、模型+中剂量MT(10mg·kg~(-1)·d~(-1))腹腔给药组(8只)、模型+高剂量MT(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))腹腔给药组(8只)。腹腔注射4.25%腹膜透析液100 ml·kg~(-1)·d~(-1)建立腹膜纤维化大鼠模型。实验第28天行4h腹膜平衡实验(peritoneal equilibration test,PET),量取超滤量(ultrafiltration,UF),检测腹透液尿素氮浓度(dialysate urea nitrogen concentration,D)、血浆尿素氮浓度(plasma urea nitrogen concentration,Purea)、初始腹膜透析液葡萄糖浓度(D0)、4 h后透出液葡萄糖浓度(D4),并计算D/Purea、D4/D0。取大鼠壁层腹膜组织行HE和Masson染色,采用免疫组化方法检测转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1),胶原Ⅰ(collagenⅠ,Col-Ⅰ)和α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达。结果 4 h PET显示模型组与对照组相比,UF和D4/D0明显减少(P0.05),D/Purea明显增加(P0.05);MT各给药组与模型组比较,UF和D4/D0明显增加(P0.05),D/Purea明显减少(P0.05);HE和Masson染色显示对照组腹膜菲薄,间皮细胞连接紧密,模型组腹膜明显增厚,部分可见间皮细胞缺失,间皮下可见胶原沉积,MT各给药组上述腹膜病理改变较模型组明显减轻;免疫组化显示模型组TGF-β1、Col-Ⅰ、α-SMA表达明显高于对照组(P0.05),MT各给药组表达明显低于模型组(P0.05)。结论 MT能通过改善腹膜的结构和功能来发挥其对抗大鼠腹膜纤维化的作用并能抑制TGF-β1、Col-Ⅰ和α-SMA表达。     

高迁移率族蛋白1在肠道病毒71型手足口病患者中的表达及临床价值

目的:分析不同分期肠道病毒71型(EV71)手足口病(HFMD)患儿高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平的表达变化,研究HMGB1在HFMD重症化中的临床价值及其相关作用机制。方法:将2018年5月至2019年12月西安市儿童医院感染科收治住院的EV71型HFMD患儿共130例纳入研究(研究组),其中普通型90例(轻症组)、重症40例(重症组)。以儿保科同期体检的50例健康儿童纳入对照组,采用Real time-PCR检测各组儿童外周血单核细胞HMGB1 mRNA表达水平,同时用ELISA方法检测血浆HMGB1和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)及白细胞介素-6(IL-6)水平,比较血浆高水平HMGB1和低水平HMGB1患儿重症发生率并分析HMGB1与细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-6(IL-6)间的相关性。结果:HFMD轻症组和重症组患儿和对照组HMGB1 mRNA表达水平和血浆HMGB1含量差异有统计学意义(F=54.629、P<0.001,F=127.924、P<0.001)。受试者工作特征曲线提示,当HMGB1为13090 pg/ml时约登指数最大,对应的敏感度和特异度分别为80.9%和73.5%。高HMGB1患儿重症发生率(44.6%、33/74)显著高于低HMGB1患儿(12.5%、7/56),差异有统计学意义(χ^(2)=26.986、P<0.001)。三组研究对象TNF-α(F=11.284、P<0.001)、TGF-β(F=57.346、P<0.001)及IL-6(F=45.362、P<0.001)差异均有统计学意义,重症组较轻症组患儿升高更为显著(TNF-α:t=7.503、P=0.035;TGF-β:t=9.307、P=0.017;IL-6:t=25.618、P<0.001)。入组HFMD患儿血浆中HMGB1含量与TNF-α、TGF-β及IL-6水平均呈正相关(r=0.642、0.775、0.825,P均<0.001)。结论:HFMD患儿HMGB1水平升高,以重症患儿HMGB1水平升高更显著;HMGB1可能通过调控IL-6、TGF-β和TNF-α等细胞因子参与手足口病重症的发生、发展过程。     

血管生成素2与腹膜透析时腹膜血管新生的关系

目的 观察血管生成素2（Angpt-2）和腹膜透析（腹透）时腹膜血管新生的关系。 方法 5/6肾切除制作尿毒症大鼠模型,成模后在腹腔内植入腹透管,根据大鼠体质量每天经腹透管注入定量腹透液（4.25%,Dineal）。按腹透时间分为未腹透组、腹透10 d组、28 d组及56 d组。假手术非尿毒症非透析大鼠为对照组。大网膜抗CD31免疫组化染色后作血管计数,观察腹膜血管新生。用实时定量PCR和Western 印迹分别检测腹膜Angpt-2和血管内皮生长因子（VEGF）表达量变化,同时检测腹膜血管数和Angpt-2、VEGF表达量的关系。 结果 未腹透组、腹透10 d、28 d及56 d组腹膜血管数显著高于对照组[（5±3）、（10±5）、（17±5）及（19±4）比（1±1） 个/HP,均P < 0.05]。腹透28 d组腹膜血管数显著高于腹透10 d组（P < 0.05）,但与56 d组差异无统计学意义。未腹透组或腹透各组腹膜Angpt-2和VEGF表达显著高于对照组（均P < 0.01）,而Angpt-2和VEGF表达量并未随透析时间延长而增加。Angpt-2和VEGF表达量和腹膜血管数呈正相关（r = 0.7756,P < 0.01;r = 0.5223,P < 0.05）。 结论 尿毒症状态和腹透促进腹膜血管新生。腹膜Angpt-2表达增加和腹膜血管新生呈正相关。Angpt-2将可能成为治疗腹膜血管新生的另一靶点     

腹膜透析患者肾素血管紧张素Ⅱ水平变化及其在腹膜纤维化中的意义

目的 探讨持续性非卧床腹膜透析（CAPD）患者血浆及腹腔局部肾素血管紧张素系统（RAS）的变化及其在腹膜纤维化中的意义。 方法 选取腹透感染组和非感染组CAPD患者25例，非感染患者根据透析龄分为≥6月组和＜6月组。应用放射免疫法检测CAPD患者腹透透出液和血浆中肾素及血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的浓度。以不同浓度D-葡萄糖（0.3%、1.5%、2.5%）、甘露醇（1.5%、2.5%）及AngⅡ（0、1、10、100、1000 nmol/L）刺激大鼠腹膜间皮细胞（RPMC），放射免疫法检测细胞上清液AngⅡ浓度变化；实时定量PCR方法观察AngⅡ 1型受体（AT1）、血管紧张素转化酶（ACE）、转化生长因子β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）mRNA的表达； Western印迹法检测TGF-β1及CTGF蛋白的表达；ELISA法检测上清液中TGF-β1的变化。 结果 CAPD患者腹透透出液中未检测到肾素。感染及≥6月组的CAPD患者透出液中AngⅡ的浓度分别为（151.99±114） pmol/L和（14.17±41.5） pmol/L，分别为非感染[（7.98±12.69） pmol/L]及＜6月组[（2.18±5.62） pmol/L]的19倍及6.5倍（P < 0.01或P < 0.05）。高糖腹透液（2.5％）注入4 h后，CAPD患者循环中肾素及AngⅡ浓度分别为[（4.30±8.48）和（54.19±34.43） pmol/L]，是基础水平的4.06倍和1.21倍（P < 0.01）。高糖组（2.5％）RPMC AT1、ACE mRNA和上清液AngⅡ浓度分别为低糖组（0.3％）的2.61、2.62和2.01倍（P <0.05）。AngⅡ可在mRNA和蛋白水平上调RPMC表达TGF-β1与CTGF，呈剂量依赖性，100 nmol/L组TGF-β1 mRNA及蛋白水平分别为对照组的2.8和2.19倍（P < 0.05）；1000 nmol/L组CTGF mRNA及蛋白水平分别为对照组的4.48倍和2.82倍（P < 0.05）。AngⅡ促进RPMC分泌TGF-β1，呈时间依赖性，刺激24 h组TGF-β1的表达量为基础值的3.65倍（P < 0.05）。 结论 CAPD尤其是腹透感染或长期腹透患者存在RAS活化状态。RAS的主要效应因子AngⅡ可通过上调间皮细胞表达和分泌致纤维化细胞因子参与腹膜纤维化。阻断RAS可能成为预防和治疗腹膜纤维化的新靶点。     

TGF-β1对大鼠腹膜间皮细胞ROS和NADPH氧化酶亚基p67phox表达的影响及黄芪的干预作用

目的:探讨TGF-β1对大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)活性氧(ROS)和NADPH氧化酶亚基p67phox表达的影响及黄芪注射液(AGI)对其的干预作用。方法:体外培养SD大鼠原代腹膜间皮细胞至第二代,静止24h后,随机分为:正常对照组(A组),AGI(2g/ml)组(B组),TGF-β1(10ng/ml)组(C组),TGF-β1+AGI(2g/ml)组(D组,AGI预处理1h)。用荧光染料(DCF)及激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧(ROS)。RT-PCR检测NADPH氧化酶亚基p67phox mRNA的表达;Western印迹检测p67phox的蛋白表达。结果:TGF-β1可显著增加大鼠腹膜间皮细胞ROS产生,刺激20min后,ROS的表达较对照组显著上升(P<0.05)。AGI可显著抑制TGF-β1刺激后ROS的产生(P<0.05);大鼠腹膜间皮细胞经TGF-β1刺激后,NADPH氧化酶亚基p67phox mRNA和蛋白的表达均上升,AGI可抑制TGF-β1诱导的p67phox mRNA和蛋白的表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TGF-β1可诱导大鼠腹膜间皮细胞产生的ROS增加、NADPH氧化酶亚基p67phox表达上调;AGI可抑制NADPH氧化酶的表达和活性ROS的产生,从而为AGI防治腹膜纤维化提供了理论依据。     

丝裂素活化蛋白激酶信号通路在人腹膜纤维化的作用

目的 探讨丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对转化生长因子(TGF)β1致人腹膜间皮细胞(HPMC)高表达纤连蛋白(FN)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI)1的调控作用。方法 采用胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞,建立稳定的体外培养模型。用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)评估TGF-β1和细胞外信号调节激素(ERK)及p38阻断剂对HPMC的增殖作用。采用酶联免疫双抗夹心法检测HPMC培养液中FN、PAI-1的蛋白质水平。采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测HPMC细胞内FN、PAI-1mRNA的表达。结果 (1)TGF-β1能刺激HPMC增殖(P<0.05),且呈剂量时间依赖性,加ERK阻断剂组或p38阻断剂组较TGF-β1组有明显抑制作用(P<0.01)。(2)TGF-β1能引起HPMC FN、PAI-1蛋白水平显著增高(P<0.01);加ERK阻断剂组或p38阻断剂组能使上述高表达受到抑制(P<0.01)。(3)TGF-β1能使HPMC FN、PAI-1mRNA表达上调,加ERK阻断剂组或p38阻断剂组能使上调水平受到抑制。结论 MAPK对TGF-β1致人腹膜间皮细胞高表达FN和PAI-1起调控作用,为临床防治腹膜纤维化提供新的思路。     

TNF-α、TGF-β_1在慢性非细菌性前列腺炎患者前列腺液中的表达及意义

目的探讨TNF-α和TGF-β1在慢性非细菌性前列腺炎患者前列腺液中的表达及临床意义。方法采用双抗体夹心法对20例炎症型慢性非细菌性前列腺炎即炎症型慢性骨盆疼痛综合征(Ⅲa型),20例非炎症型慢性非细菌性前列腺炎即非炎症型慢性骨盆疼痛综合征(Ⅲb型),10例健康对照者前列腺液(EPS)中TNF-α、TGF-β1含量进行测定。采用美国国立卫生院慢性前列腺炎症状评分(NIH-CPSI)进行相关性研究。结果①TNF-α在Ⅲa型患者EPS中表达水平[(152.44±83.06)pg/ml]明显高于Ⅲb型组[(93.15±57.26)pg/ml]和健康对照组[(78.99±53.51)pg/ml],P<0.05。但在Ⅲb型和健康对照组之间差异无统计学意义,P>0.05。②TGF-β1在Ⅲa型组[(8477.50±4612.45)pg/ml]和Ⅲb型组[(7946.50±5044.06)pg/ml]表达水平均明显高于健康对照组[(2462.50±985.31)pg/ml],P<0.01。但在Ⅲa和Ⅲb型之间差异无统计学意义,P>0.05。③前列腺液中TNF-α、TGF-β1的水平与慢性前列腺炎症状评分无相关性(r=0.23,P>0.05;r=0.31,P>0.05)。结论前列腺液中细胞因子(TNF-α、TGF-β1)在慢性前列腺炎的病理学改变中起重要作用,可作为慢性前列腺炎的诊断依据之一。