Salubrinal保护心肌细胞内质网应激凋亡的实验研究

目的探讨Salubrinal对衣霉素诱导的乳鼠原代心肌细胞凋亡的保护作用及机制。方法采用消化贴壁法获得乳鼠原代心肌细胞,分别给与不同浓度的Salubrinal（10μmol、20μmol、40μmol）预处理,30min后加入TM（5μg/ml）,继续培养24h后通过流式细胞和TUNEL检测方法对乳鼠心肌细胞凋亡进行检测;Western印迹法检测凋亡过程中Caspase-12蛋白酶的表达变化。结果经Salubrinal预处理的细胞同单独使用衣霉素相比,细胞凋亡率和细胞凋亡指数均显著下降;Caspase-12表达明显减少。结论Salubrinal对衣霉素诱导的乳鼠原代心肌细胞凋亡具有保护作用,其机制可能是通过抑制内质网应激凋亡通路。     

经颅注射无水乙醇建立大鼠脑损伤模型初步探讨

目的探讨如何经颅注射无水乙醇建立大鼠脑损伤模型。方法10只SD大鼠,采用经颅注射无水乙醇建立大鼠脑损伤模型。结果大鼠脑损伤模型成功率为100％。10只脑损伤大鼠,均存活。10只假手术组大鼠也全部存活。实验组及假手术组术后4周体重无显著差异（376．1±11．5g vs 353．2±10．3g;P=1．534）。日饮食量也无显著差异（23．4±3．1gVS19．8±2．3g;P=0．723）。通过脑核磁共振、病理HE染色、及脑组织切片TTC染色检测可以证实建模成功。结论经颅注射无水乙醇建立大鼠脑损伤模型较传统大鼠脑损伤模型的建立操作简单、模型成功率高,结果可靠。     

不同鼠龄Wistar大鼠肝组织内网状纤维分布的计量形态学研究

目的　研究不同鼠龄肝网状纤维形态计量的差异。方法　以Gomori银网状纤维染色法及图像分析技术 ,观察并测定了 3月龄 (Ⅰ组 )、13月龄 (Ⅱ组 )、2 5月龄 (Ⅲ组 )、33月龄 (Ⅳ组 )Wistar大鼠肝组织之门管区、中央静脉及窦周隙内网状纤维的灰度、面积比及体密度。结果　门管区网状纤维灰度值在 3月龄组、13月龄组分别与33月龄组差异有显著性 (P <0 0 1、P <0 .0 5 ) ,窦周隙网状纤维面积比及体密度在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组均分别与Ⅰ组间差异有显著性 (P <0 .0 5、P <0 .0 1) ;每组内网状纤维体密度在门管区中央静脉及窦周隙的百分比在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别与Ⅰ组间差异有非常显著性 (P <0 0 0 1) ,每组内不同部位体密度分布比例 ,以Ⅰ组窦周隙网状纤维体密度百分比最大 ,而在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组内均以门管区百分比最大。结论　从 13月龄开始老化过程中窦周隙网状纤维有减少 ,33月龄组门管区网状纤维嗜银性有减弱     

大鼠肝移植缺血再灌注损伤对肝细胞凋亡、胀亡及再生的影响

目的：通过对大鼠原位肝移植缺血再灌注损伤所致肝细胞两种细胞死亡方式的动态研究，结合细胞再生情况。探讨减轻此类损伤的途径．方法：SD大鼠随机分为5组，对照组(n=5)麻醉后开腹取材；其余4组(n=40，每组5对)建立大鼠同种异体原位肝移植模型，分别于术后0、1、12和72h取材．(1)流式细胞仪上机检测Annexinv与碘化丙锭混匀双染色的肝细胞，计数正常、胀亡、凋亡、坏死4种细胞百分数；(2)流式细胞仪检测G1期、S期、G2期肝细胞，计算增殖指数．结果：与对照组比较，供肝冷缺血1h后凋亡细胞显著增多，再灌注后继续增多，并于72h逐渐下降；坏死和胀亡细胞变化不大．G-2期细胞、增殖指数于再灌注后显著增加，在72h仍处于高峰．结论：肝移植过程中细胞凋亡是肝细胞死亡的主要形式，肝移植后存在细胞增殖，增强肝细胞的再生能力也是减轻损伤的一种途径．再灌注期凋亡的作用和机制均值得进一步研究．     

癫痫脑损伤与内质网应激的研究进展

近年来的研究表明,单次癫痫发作即可产生脑损伤。其主要的病理改变是神经元程序性死亡和神经胶质增生;其原因是细胞内外环境的改变,诱导内质网应激启动自适应性保护通路即未折叠蛋白反应。当长时间且强烈的内质网稳态失衡时,可启动内质网应激反应性凋亡通路,这一系列细胞内信号转导和相关基因的激活被视为一条新的细胞信号路径,为癫痫脑损伤防治的研究提供了新方向。     

诺贝得对大鼠实验性肝损伤的保护作用

目的：探讨中药制剂诺贝得对大鼠实验性肝损伤的影响。方法：建立四氯化碳（ＣＣＬ４）诱导的大鼠实验性肝损伤模型,观察诺贝得对大鼠血清丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）、天冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）、碱性磷酸酶（ＡＫＰ）活性的影响以及大鼠肝组织甘油三酯（ＴＧ）、蛋白质（Ｐ）含量和组织学的变化情况。结果：诺贝得组ＡＬＴ、ＡＳＴ和ＡＫＰ值以及ＴＧ和Ｐ含量均较肝损伤组明显降低（Ｐ＜０．０１）,肝组织损伤程度轻。结论：诺贝得对     

保肝护脑针法治疗脑缺血再灌注损伤的机制研究

目的探讨保肝护脑针法对脑缺血再灌注大鼠的治疗作用。方法将SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺对照组、保肝护脑针法组。线栓法制作缺血再灌注大鼠模型,测试大鼠行为学、血清谷草转氨酶(AST)、血清还原型谷胱甘肽(GSH)和血清总抗氧化能力(T-AOC),并观察肝细胞线粒体形态变化。结果模型组、针刺对照组和保肝护脑针法组缺血2 h(电针治疗前)时神经功能缺损评分无显著差异;经10次电针治疗结束后:与模型组相比,针刺对照组和保肝护脑针法组神经功能缺损评分有极显著差异(P<0.01);与针刺对照组相比,保肝护脑针法组神经功能缺损评分变化更为显著(P<0.05)。电针治疗前,与假手术组、针刺对照组和保肝护脑针法组比较,模型组血清AST水平显著增高(P<0.01),而血清GSH和T-AOC明显降低(P<0.01);经10次电针治疗结束后:与模型组相比,针刺对照组和保肝护脑针法组血清AST水平明显降低(P<0.01),同时血清GSH和T-AOC显著升高(P<0.01);与针刺对照组相比,保肝护脑针法组血清AST、GSH和T-AOC各项变化更为显著(P<0.05)。电镜观察肝细胞线粒体形态改变:假手术组肝细胞线粒体形态正常,模型组肝细胞线粒体明显肿胀,针刺对照组肝细胞线粒体轻度肿胀,保肝护脑针法组肝细胞线粒体形态近乎正常。结论保肝护脑针法对脑缺血再灌注大鼠的治疗效果较单纯头穴针刺更为显著,其治疗机理与抗氧应激密切相关。     

中西医结合治疗萎缩性阴道炎41例

目的探讨中西医结合治疗萎缩性阴道炎的临床疗效。方法将82例萎缩性阴道炎患者分为两组,各41例,治疗组予氯喹那多/普罗雌烯阴道片加用中药外治,对照组单予氯喹那多/普罗雌烯阴道片治疗。结果治疗组治愈率为95.1%,对照组治愈率为90.2%,两组比较无显著性差异(P>0.05),治疗组复发率10.3%,对照组复发率为35.1%,两组比较有极显著性差异(P<0.01)。结论中西医结合治疗萎缩性阴道炎疗效好,复发率低。     

一例心脏死亡供体无偿捐献供肝行原位肝移植的经验和体会

目的 总结心脏死亡供体器官捐献具体流程和经验.方法 对1例潜在器官捐献者经脑死亡评估和供体器官功能评估后,纳入心脏死亡器官捐献(Donation after Cardiac Death,DCD)程序,并严格按照心脏死亡器官捐献程序进行工作.结果 本例供体成功完成了肝脏捐献及获取流程,所获取供肝成功植入受体.结论 成功获取心脏死亡供体捐献的器官,为推广心脏死亡供体器官的捐献积累了经验.     

白茅根对酒精中毒小鼠肝及脑损伤的保护作用研究

目的:从抗氧化和清除自由基的角度综合探讨白茅根对酒精中毒所致肝和脑损伤的保护作用。方法:采用白酒灌胃建立酒精中毒模型,酒精中毒模型建立成功的小鼠分为酒精中毒模型组和白茅根治疗组。白茅根治疗组用白茅根提取液按中等剂量12g/kg给小鼠灌胃,连续灌胃21d;各组到相对应的时间点后测定肝及脑组织中SOD活力、MDA含量和抑制羟自由基能力。结果:与正常对照组相比,酒精中毒模型组小鼠肝及脑组织中SOD活力和抑制羟自由基能力均显著降低(P<0.01),MDA含量则明显升高(P<0.01);经用白茅根治疗后SOD活力和抑制羟自由基能力均显著升高(P<0.01),MDA含量则显著降低(P<0.01)。结论:白茅根可以降低羟自由基,提高机体抗氧化能力,提示白茅根对酒精中毒所致的肝和脑损伤具有保护作用。     

肝炎颗粒对肝损伤的保护及免疫促进作用研究

目的:探讨肝炎颗粒对肝损伤的保护作用及免疫促进作用。方法:设对照组和药物组,采用四氯化碳(CCl4)和硫代乙酰胺(TAA)灌胃造成实验动物肝损伤,检测各组动物血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)水平,观察肝组织病理学变化;检验各组动物巨噬细胞的吞噬作用和血清溶血素水平。结果:肝炎颗粒能降低肝损伤所致实验动物血清ALT、AST、ALP升高的水平,其中高剂量组有显著性差异(P<0.05),肝组织损伤明显缓解;肝炎颗粒还能提高小鼠碳粒廓清指数和血清溶血素水平(P<0.05,P<0.01)。结论:肝炎颗粒对肝损伤有较好的保护作用及免疫促进作用。     

血红素氧合酶-1对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨血红素氧合酶-1(HO-1)对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法:SD大鼠30只,建立二套袖法原位肝移植模型。随机分为3组:对照组,无任何处理;CoPP处理组,供肝收获前24h供体腹腔注射HO-1诱导剂CoPP5mg/kg。;ZnPP处理组,腹腔注射抑制剂ZnPP20mg/kg。移植后第三天检测肝脏移植物肝功能,免疫组织化学方法检测肝脏移植物HO-1的表达情况。TUNEL法检测凋亡变化。以Suzuki标准评分来反映肝脏移植物的缺血再灌注损伤程度。结果:①CoPP组ALT,AST较对照组和ZnPP组明显降低(P<0.01)。②HO-1表达:CoPP组明显高于其他组(P<0.05)。③移植物凋亡阳性细胞百分率:CoPP组明显低于对照组和ZnPP组(P<0.05)。④肝脏移植物病理变化:CoPP组和与对照组,ZnPP组比较,炎症细胞浸润少,肝细胞损伤轻。肝脏移植物Suzuki评分,CoPP组(0.76±0.59)明显低于对照组(1.32±0.74)与ZnPP组(1.80±0.70),有显著统计学差异(P<0.05)。结论:HO-1对肝脏移植物缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与抗炎症与抗凋亡有关。     

七叶皂甙钠抗大鼠视网膜缺血-再灌注后视网膜细胞凋亡的保护作用

目的 在大鼠视网膜缺血-再灌注损伤模型上,研究七叶皂甙钠对视网膜缺血-再灌注损伤后视网膜内细胞凋亡的影响.方法 60只大鼠随机分为对照组及七叶皂甙钠组,每组30只.通过结扎大鼠左颈总动脉1 h,然后再灌注.七叶皂甙钠组腹腔注射七叶皂甙钠1.5 mg/kg,对照组腹腔注射生理盐水1 mL/kg,分别检测1、6、12、24、48、72 h各时段大鼠视网膜内的细胞凋亡,每时段大鼠各5只.结果 再灌注后,细胞凋亡主要出现于视网膜的神经节细胞层和内核层,偶尔在外核层可见凋亡细胞.再灌注后1、6、12、24、48、72 h对照组细胞凋亡平均发生率分别为1.8±0.1,7.1±0.2,18.2±1.4,34.7±2.1,22.6±0.9,16.3±0.4,而在七叶皂甙钠组分别为1.7±0.2,4.2±0.6,11.9±1.1,17.8±0.9,13.5±0.7,6.8±0.4,七叶皂甙钠对细胞凋亡的平均保护效应为38.1%.结论 七叶皂甙钠可以抑制再灌注后细胞凋亡的发生,对大鼠视网膜具有保护作用.     

缺血后处理对缺血-再灌注肝脏的抗损伤作用研究

目的：探讨缺血后处理（ischemic postconditioning，I-post）对缺血-再灌注（ischemia-reperfusion．I／R）大鼠肝脏的抗损伤作用。方法：建立SD大鼠肝部分I／R损伤模型；实验分为6组：假手术组、单纯缺血组、I／R组、I-post1组、I-post2组和I-post3组；测定血清ALT、AST的活性和肝组织MDA、GSH含量以及SOD、GSH-PX、MPO的活性；观察肝脏病理组织形态学变化和I-post后大鼠的存活率。结果：与I／R组相比，I-post1组和I-post2组大鼠血清ALT和AST活性明显降低（P＜0．05），I-post2组更明显；I-post2组肝组织MDA、MPO显著降低，而SOD、GSH-PX和GSH则明显增加（P＜0．05）；I-post2组大鼠存活率高于I／R组。结论：缺血后处理对缺血-再灌注大鼠肝脏有明显的抗损伤作用，其可能与降低活性氧的产生、保护肝脏抗氧化系统和减轻中性粒细胞聚集程度有关。     

汉防己甲素对脂质过氧化肝损伤的保护作用

本文报告用汉防己甲素治疗ＣＣｌ４诱导大鼠肝纤维化的实验研究，并以生理盐水作对照。结果表明治疗组肝组织、血清脂质过氧化物含量及血清丙氨酸转肽酶明显低于对照组，而血清胆碱酯酶则高于对照组（Ｐ＜０．０５）。治疗组肝组织中肝细胞变性及坏死显著轻于对照组，提示汉防已甲素具有防治脂质过氧化肝损伤的作用。     

大鼠侧位液压冲击脑损伤动物模型的建立及病理学改变

为了能够精确地建立轻、中、重液压冲击分级脑损伤动物模型,我们设计了侧位液压冲击脑损伤装置。该装置由不锈钢储液管、压缩空气、减压设备及计算机等组成,可以精确地控制冲击气压的大小、记录冲击时脑组织所承受的压力、显示压力曲线、液压冲击后可以迅速释放系统内的压力,国内、外均未见报道。侧位液压冲击脑损伤随冲击压力的增加而加重,以冲击侧大脑半球为最重,也可波及对侧及脑底部。     

川芎嗪预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤能量代谢的保护作用

目的探讨川芎嗪预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(IRI)后肝脏能量代谢的影响。方法将120只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、实验组和对照组3组,实验组和对照组制作70%大鼠肝脏IRI模型,实验组大鼠在IRI前3d,每日腹腔注射川芎嗪注射液2mL,各组大鼠分别于术后1h、6h、24h、72h取肝组织观察组织形态学变化,检测肝细胞线粒体呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P/O)和肝组织三磷酸腺苷(ATP)含量变化。结果①术后各个相应时相点实验组肝组织病理损伤均较对照组轻;②术后1h、6h、24h对照组肝细胞线粒体RCR及P/O均低于实验组(P均<0.05),72h均恢复正常(P>0.05);③实验组术后各相应时相点肝细胞ATP含量均高于对照组(P<0.05),并且恢复正常也比对照组较早。结论川芎嗪预处理能够改善肝脏能量代谢,提高缺血再灌注后肝脏的抗损伤能力。     

葛根素对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的:研究葛根素对培养SD乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤的拮抗作用。方法:葛根素(50和100mg/L)预处理24h后作用于乳鼠心肌细胞A/R损伤模型,运用MTT法测定细胞存活率,比色法测定细胞培养液中LDH和细胞内SOD活性及MDA含量。运用流式细胞术Annexin V-PI双染法测定细胞凋亡变化。结果:与A/R模型组比较,葛根素明显提高细胞存活率,增加胞内SOD活性,降低培养液中LDH释放量和胞内MDA含量;同时降低细胞的凋亡率。结论:葛根素对A/R损伤心肌细胞具有保护作用,其机制可能与清除自由基的产生有关。     

小牛血去蛋白注射液对大鼠脑创伤后能量代谢的影响

目的研究小牛血去蛋白注射液（Actovegin，Ac）预处理对于大鼠脑创伤（traumatic brain injury，TBI）后能量代谢的影响，探讨其对脑创伤保护作用的可能机制，从而为其临床应用提供实验依据。方法将40只大鼠随机分为4组，每组大鼠伤前腹腔注射Ac或等容积生理盐水连续7天后制造大鼠脑创伤模型。伤后4小时每组各取10只大鼠采血，测定糖及乳酸含量。采血后将大鼠迅速断头，于伤侧大脑病灶周围取一块脑组织，测糖、乳酸、ATP、ADP及AMP含量并计算能荷（EC）。结果与假手术组相比，创伤组血糖含量明显升高，脑糖降低，血及脑中乳酸含量升高，脑组织ATP、ADP、AMP含量及EC下降。而Ac逆转上述变化，且高剂量作用更加明显。结论AC对大鼠脑创伤有保护作用，且呈剂量反应关系，其作用是通过促进细胞能量代谢而实现的。     

Apparently Recovering Breath Function in Brain Death

Background:

Criteria for determining brain death (BD) vary between China and the United States. We reported the results of an investigation designed to compare procedures to determine BD in two countries.

Methods:

The latest criteria in the United states were published in 2010. The latest criteria in China were published in 2009. We used these two types of BD criteria to evaluate patients who were considered to be BD. The time, cost, and accuracy of the diagnosis were compared.

Results:

From January 1, 2012 to October 8, 2013, there were 37 patients which were applied for BD evaluation in the Neurological Intensive Care Unit of Beijing Tiantan Hospital. The cause of coma were known as subarachnoid hemorrhage (18 patients, 48.6%), intracerebral hemorrhage (8 patients, 21.6%), cerebral ischemia (9 patients, 24.3%), brain stem tumor (1 patient, 2.7%), and intracranial infection (1 patient, 2.7%). The clinical examinations were done for all of the patients except 1 patient who had low blood pressure. Three patients had brainstem reflexes that were excluded from BD. Twenty-five patients had apnea tests, and 20 tests were completed that were all positive. Confirmatory tests were completed differently: Transcranial Doppler (30 patients, positive rate 86.7%), electroencephalogram (25 patients, positive rate 100%), and somatosensory evoked potential (16 patients, positive rate 100%). Thirty-three patients were diagnosed BD by criteria of the United States. Only 9 patients were diagnosed BD by Chinese criteria. The use of time and money in the USA criteria was obviously fewer than those in Chinese criteria (P = 0.000).

Conclusion:

Compared with BD criteria of the United States, Chinese criteria were stricter, lower positive rate, more cost in money and time, and more reliable by families and doctors.