BDNF及受体TrkB在大鼠小脑的表达研究

目的:研究BDNF及其受体TrkB在大鼠小脑时空分布变化。方法:进行免疫组织化学实验,观察BDNF及TrkB在正常大鼠发育期、成年期和老龄期小脑内的定位分布及时间变化。结果:发育期小脑皮质的外颗粒层、梨状细胞层和内颗粒层均有BDNF表达,梨状细胞层的阳性Purkinje细胞染色明显。成年期内颗粒层阳性细胞逐渐增多,梨状细胞层的Purkinje细胞BDNF表达及阳性细胞数量达高峰。老年期阳性细胞染色强度呈增龄减低,Purkinje细胞发生了轻度的退行性变,TrkB表达在小脑皮质分布模式类似BDNF的表达。结论:BDNF及TrkB表达的时空变化始终与小脑皮质的发生发育过程相关。生后0天,二者在小脑皮质外颗粒层、梨状细胞层和内颗粒层均有较强表达,以梨状细胞层为主。第10天左右,小脑皮质发育为典型的三层结构,Purkinje细胞表达BDNF及TrkB最为显著。成年后,表达水平保持较稳定。老龄后明显减弱,BDNF及TrkB阳性Purkinje细胞发生轻度的退行性改变。     

脑源性神经营养因子在创伤后鼠脑中的表达

目的 通过对鼠脑机械创伤后测定脑皮层及海马CA2区脑源性神经营养因子（Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的含量变化说明BDNF是否对脑创伤神经元有保护作用。方法 建立鼠脑创伤模型,取鼠脑用免疫组化方法测定创伤后不同时间BDNF表达含量变化。与设立的假手术对照组相比较,并进行组间比较。结果 创伤后鼠脑与假手术组比较,创伤组BDNF明显表达,时间为伤后12h,在2h为表达高峰期（P＜0．01）。结论 BDNF对脑创伤后神经元有保护作用。     

脑源性神经营养因子与颞叶癫痫

脑源性神经营养因子(BDNF)激活其受体酪氨酸受体激酶B,使海马兴奋性增高,从而促使颞叶癫痫产生。简要综述BDNF与颞叶癫痫之间的相互关系及机制。     

脑源性神经营养因子与脑损伤的研究现状

近年来众多研究表明作为神经营养素家族成员之一的脑源性神经营养因子在脑损伤的修复中具有重要的作用。现简要介绍脑源性神经营养因子的结构、分布、信号转导以及生物学作用与机制,阐述其对脑外伤、脑缺血、癫痫等各种病理情况下的表达及对脑损伤后神经干细胞增殖、迁移、分化的影响,以期促进对此的认识和进一步研究。     

肠三叶因子对新生鼠坏死性小肠结肠炎模型ERK表达的影响

目的:研究肠三叶因子(intestinaltrefoilfactor,ITF)对坏死性小肠结肠炎(necrotizingenterocolitis,NEC)新生大鼠的肠粘膜组织中细胞外信号调节激酶(extracellularsignalregulatedkinase,ERK)表达的影响,探讨ITF对NEC保护作用的信号途径;及ERK新生鼠肠组织中的活化及胞内分布规律,探讨其在NEC发病机制中的作用。方法:建立NEC模型,第4d处死,取肠组织待检。新生鼠40只随机分为5组,每组8只,A组为NEC模型后予以腹腔注射ITF0.5mg;B组为NEC模型后予以皮下注射ITF0.2mg;C、D组为NEC模型后分别予以腹腔和皮下注射生理盐水别为0.5ml和0.2ml;E组为正常对照组。取近回盲部1～2cm肠道组织固定包埋、切片、HE染色做病理学检查及免疫组化观察ERK的表达。结果:A、B组组织匀浆中ERK的面密度值各为87.68±19.24、82.65±21.35,较C、D组(30.23±7.79、30.74±8.19)明显升高(P<0.01),C、D组与E组(5.41±1.46)比较也有升高(P<0.05);并且随着ERK的激活伴随着明显的核转位。A、B组间及C、D组间ERK含量无显著差异(P>0.05);病理切片显示C、D组HE染色切片见肠壁损伤轻重不一,可见全肠粘膜绒毛坏死,病理评分的中位积分为3分;A、B组肠上皮细胞少量脱落,顶端绒毛坏死,病理评分的中位积分为1分。结论:通过腹腔和皮下注射ITF可以减轻NE     

Aurora B激酶在软骨肉瘤中的表达及临床意义

目的:检测Aurora B激酶在软骨肉瘤中的表达及将其作为软骨肉瘤新的预后指标及分子治疗靶点的可行性.方法:用免疫组织化学SP法,研究软骨肉瘤(69例)和软骨瘤(39例)组织中Aurora B激酶的表达情况,并探讨Aurora B激酶的表达与软骨肉瘤各临床病理特征的关系.结果:Aurora B激酶在软骨肉瘤中的表达明显高于在软骨瘤中的表达,差异有统计学意义(P＜0.01);Aurora B激酶在软骨肉瘤普通类型低级别组的表达低于在中、高级别组的表达,差异有统计学意义(P＜0.01);Aurora B激酶在软骨肉瘤的复发组与非复发组、转移组与非转移组中的表达,差异也有统计学意义(P＜0.05),而与年龄、性别临床参数无统计相关性(P＞0.05).结论:Aurora B激酶可能通过某种机制参与软骨肉瘤的发生、发展过程,研究Aurora B激酶阳性表达可以作为软骨肉瘤预后预测的新指标及软骨肉瘤治疗的分子靶点.     

脑源性神经营养因子及酪氨酸激酶受体B在大鼠小脑的表达

目的研究脑源性神经营养因子及酪氨酸激酶受体B在大鼠小脑的时空分布变化。方法采用免疫组织化学方法实验,观察脑源性神经营养因子及酪氨酸激酶受体B在正常大鼠发育期、成年期和老龄期小脑内的定位分布及时间变化。结果发育期小脑皮质的外颗粒层、梨状细胞层和内颗粒层均有BDNF表达,梨状细胞层的阳性Purkinje细胞染色明显。成年期内颗粒层阳性细胞逐渐增多,梨状细胞层的Purkinje细胞BDNF表达及阳性细胞数量达高峰。老年期阳性细胞染色强度呈增龄减低,Purkinje细胞发生了轻度的退行性变,TrkB表达在小脑皮质分布模式类似BDNF的表达。结论小脑皮质BDNF及TrkB的时空表达基本一致。表达高峰为生后20天。老龄期呈增龄性下降,细胞出现退行性改变。     

地黄饮子对脑缺血后大鼠海马BDNF的影响

目的研究地黄饮子对大鼠持续性脑缺血后海马内脑源性神经营养因子(BDNF)的影响.方法用线栓法建立大鼠脑缺血模型,以免疫组化技术显示地黄饮子在缺血后对海马区BDNF的影响.结果在大鼠脑缺血区有BDNF阳性神经元表达,缺血组和给药组海马区神经元随缺血时间的延长,存活细胞数目均逐渐减少,而给药组存活的神经细胞数目较缺血组多.结论地黄饮子可通过促进BDNF表达,抑制细胞死亡,促进脑缺血后海马神经元的存活和修复.     

氟西汀对抑郁大鼠模型海马CA1区、CA3区及齿状回区神经生长因子表达的影响

目的:建立慢性温和不可预见性应激(CUMS)大鼠抑郁模型,研究氟西汀对CUMS大鼠海马CA1区、CA3区及齿状回区神经生长因子(NGF)表达的影响。方法:采用CUMS方法建立抑郁大鼠模型。氟西汀(3mg/kg)在造模完成后灌胃给药,每天一次,连续21d。旷场实验、强迫游泳实验检测大鼠行为学变化;免疫组化检测海马CA1、CA3及齿状回NGF的分布与表达。结果:与正常组相比,模型组大鼠水平运动和垂直运动减少(P<0.01),静止不动的时间较正常组增加(P<0.01)。海马CA1区、CA3区及齿状回区NGF表达强度低,阳性颗粒数目少,且着色浅淡。与模型组比较,氟西汀能明显改善CUMS大鼠的抑郁行为,增高CUMS大鼠海马NGF、细胞阳性表达。结论:抑郁大鼠海马NGF含量的高低与抑郁症的发生发展密切相关,促进海马细胞NGF蛋白的表达,保护神经的可塑性可能是氟西汀抗抑郁的机制之一。     

PEA3和GDNF在小鼠纹状体的表达

目的:观察多瘤促活化因子(PEA3)和胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)蛋白在出生后小鼠纹状体神经纤维中的表达变化及相关性,为进一步探讨多巴胺能神经元疾病的治疗方法提供实验依据。方法:分别取正常鼠龄为1,5,10,20,30,40 d昆明小鼠各5只,断头处死,迅速取出大脑,冠状面切取纹状体所在部位1 cm厚的组织块。常规固定、脱水、石蜡包埋,连续切片,免疫组织化学SABC方法,DAB染色。结果:本实验观察到PEA3免疫阳性反应纤维数目在出生后1,5,10,20 d持续上升,在30,40 d下降并保持在一定水平,GDNF蛋白免疫反应阳性纤维数目在出生后1,5,10,20 d保持在一定水平,在30,40 d下降,各组间的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:出生后,GDNF在纹状体多巴胺能神经纤维发育过程中发挥作用,并且可能以PEA3作为其下游作用靶。这种作用方式在第20天以前可能是GDNF作用于纹状体神经纤维发育过程的主要途径。     

卒中后抑郁模型大鼠海马BDNFmRNA的表达及舍曲林的干预作用

目的 分析卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)模型大鼠海马脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)蛋白及mRNA表达水平,及抗抑郁剂舍曲林干预后BDNF表达水平的变化,初步探讨BDNF在PSD发生中的作用.方法 大脑中动脉阻塞(Mi...     

电针对坐骨神经损伤大鼠BDNF、NGF和GAP-43表达的影响

目的 观察电针对大鼠坐骨神经损伤的保护作用,探究其作用机制。方法 取雄性SD大鼠,随机分成假手术组、模型组、电针组。除假手术组外,其他各组采用钳夹法复制坐骨神经损伤模型,2 d后对电针组大鼠“足三里”和“环跳”进行电针治疗,7 d为1个疗程,共治疗2个疗程,并分别在7 d和14 d对大鼠坐骨神经功能进行评价,治疗结束后,采用免疫组织化学法对坐骨神经中脑源性神经营养因子（brain derived nerve growth factor,BDNF）、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和生长相关蛋白-43（growth associated protein-43,GAP-43）进行检测,同时在光镜下观察坐骨神经的病理变化。结果 与模型组比较,电针组大鼠坐骨神经功能指数（sciatic nerve function index,SFI）明显增加,最大诱发电位和神经传导速度（nerve conduction velocity,NCV）明显加快,潜伏期明显缩短。病理检查显示电针组神经纤维排列相对整齐,空泡样变性减少,可见到施万细胞的增殖。坐骨神经中BDNF、NGF和GAP-43表达明显上调。结论 电针治疗能促进大鼠坐骨神经损伤修复,可能与其上调BDNF、NGF和GAP-43表达有关。     

角质细胞生长因子对人卵巢癌细胞系CAOV3酪氨酸蛋白激酶活性及表达的影响

目的观察角质细胞生长因子(KGF)对人卵巢上皮性癌细胞系CAOV3增殖及酪氨酸蛋白激酶(TPK)活性及表达的影响。方法培养人卵巢上皮性癌细胞系CAOV3,用四甲基偶氮蓝(MTT)比色法测定不同浓度KGF对细胞增殖的影响;通过免疫沉淀法纯化蛋白并用TPK试剂盒测定TPK活性;免疫印迹法(Western-blot)测定TPK表达。结果实验组CAOV3细胞增殖率、TPK活性及表达均大于对照组(P<0·05)。结论KGF可以促使人卵巢上皮性癌细胞系CAOV3增殖,机制与其增强TPK活性及表达有关。     

TrK A在成年猫脊髓的表达

为探讨ｔｒｋＡ在成年猫脊髓的分布,用成年健康雄猫的腰段脊髓制作 ２０μｄ厚冰冻切片并行ＡＢＣ免疫组化染色,ＤＡＢ棕色反应显色。结果：ｔｒｋＡ的阳性反应物主要分布在脊髓背角Ⅱ板层的神经膨体,灰质一些神经元以及白质轴索内。结果提示这些部位存在ｔｒｋＡ。     

Rho A/Rho激酶信号通路参与慢性应激大鼠抑郁模型结肠动力的改变

目的:检测Rho A、Rock1、Rock2在抑郁大鼠结肠组织中mRNA及蛋白的表达,探讨Rho A/Rho激酶信号通路在抑郁大鼠结肠动力障碍中的可能机制.方法:通过慢性应激建立大鼠抑郁模型,正常组作对照,应用Real Time Q-PCR和Western blot检测Rho A、Rock1、Rock2在结肠组织中mRNA及蛋白的表达.结果:抑郁组结肠组织中的Rho A、Rock1、Rock2的mRNA及蛋白表达明显降低,与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:RhoA/Rho激酶信号通路在抑郁大鼠结肠动力障碍起着重要作用,但其作用机制仍需进一步的实验研究.     

叶酸辅助舍曲林对抑郁症患者血清脑源性神经营养因子及同型半胱氨酸的影响研究

背景　抑郁症患者体内血清叶酸水平与其发病程度存在一定关系。叶酸作为增效剂能够明显改善抑郁症患者的临床症状,但其机制未明。目的　探讨叶酸辅助舍曲林对抑郁症患者血清脑源性神经营养因子（BDNF）、同型半胱氨酸（Hcy）的影响。方法　选取2017年1月-2018年1月在湖北省武汉市第二精神病医院精神科接受治疗的100名符合研究标准的抑郁症住院患者为研究对象,依据随机数字表法将其分为对照组（50例）和研究组（50例）。对照组患者采用常规舍曲林治疗,研究组患者在常规舍曲林治疗基础上增服叶酸。两组患者均治疗8周。比较治疗前及治疗后两组患者血清叶酸、BDNF、Hcy、星型胶质源性蛋白（S100B）、髓鞘碱性蛋白（MBP）、特异性烯醇化酶（NSE）、胰岛素生长因子-1（IGF-1）水平,汉密尔顿抑郁量表（HAMD）、汉密尔顿焦虑量表（HAMA）评分,临床疗效。并采用副反应量表（TESS）评定不良反应发生情况。结果　治疗后研究组患者血清叶酸、BDNF水平高于对照组,血清Hcy水平低于对照组（P<0.05）。研究组患者治疗后血清叶酸水平高于治疗前（P<0.05）。治疗后研究组患者血清S100B、NSE水平低于对照组（P<0.05）;治疗后两组患者血清MBP、IGF-1水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）。两组患者治疗后血清S100B、NSE水平低于治疗前（P<0.05）。治疗后研究组患者HAMD、HAMA评分低于对照组（P<0.05）。两组患者治疗后HAMD、HAMA评分均低于治疗前（P<0.05）。研究组患者有效率为96.0%（48/50）,高于对照组的82.0%（41/50）（χ2=5.005,P<0.05）。研究组患者不良反应发生率为16.0%（8/50）,对照组患者不良反应发生率为14.0%（7/50）,两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义（χ2=0.078,P>0.05）。结论　叶酸辅助舍曲林能够有效提高抑郁症患者血清叶酸、BDNF水平,降低血清Hcy、S100B、NSE水平。     

散发性阿尔茨海默病患者脑源性神经营养因子基因Val66Met多态性与载脂蛋白基因多态性关联性分析

目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)基因Val66Met、载脂蛋白E(APOE)基因多态性在散发性阿尔茨海默病(sporadic Alzheimer disease,sAD)发病机制中的作用。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测80例sAD患者和86例健康人中BDNF基因Val66Met和APOE基因多态性分布,并通过比值比(OR)对这两种基因与AD之间进行关联性分析。结果BDNF基因Val66Met多态性与sAD的发病风险显著相关;Met/Met基因型与Val等位基因携带者的OR=2.87,95%CI=1.31~6.28。SAD患者与APOE基因的ε4等位基因正关联,APOEε4与非ε4的OR=3.87,95%CI=1.91~7.88。在APOEε4中携带BDNF Met等位基因的OR=3.95,95%CI=1.40~11.16。结论BDNF基因Val66Met多态性可能是sAD发病的遗传危险因素,BDNF基因Val66Met多态性与APOE基因多态性之间有协同作用,APOEε4等位基因与BDNF Met等位基因同时存在时,患AD的危险性显著提高。     

通督调神针刺法对血管性轻度认知障碍患者血清脑源性神经营养因子和血浆同型半胱氨酸的影响

目的 观察通督调神针刺法对血管性轻度认知障碍患者的疗效,以及对血清脑源性神经营养因子（brain derived neural nutrition factor,BDNF）、血浆同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）水平的影响。方法 将61例血管性轻度认知障碍患者随机分为治疗组（31例）和对照组（30例）,对照组患者口服药物多奈哌齐治疗2个月,治疗组除口服多奈哌齐外还予通督调神针刺法治疗4个疗程。采用简易智力状态检查（mini-mental state examination,MMSE）量表、蒙特利尔认知评估（Montreal cognitive assessment,MoCA）量表评价患者治疗前后认知水平变化,采用酶联免疫吸附法检测血清BDNF水平,循环酶法检测血浆Hcy水平。结果 与治疗前比较,治疗后两组患者MMSE评分、MoCA评分均明显增加（P＜0.05）;治疗组与对照组MMSE和MoCA评分差值比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。与治疗前比较,两组患者治疗后血清BDNF水平显著升高,血浆Hcy水平显著降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）;治疗组血清BDNF水平升高程度、血浆Hcy水平降低程度均显著大于对照组（P＜0.05）。两组基于MMSE评分的疗效比较,治疗组优于对照组（P＜0.05）。结论 通督调神针刺能够提升血管性轻度认知功能障碍患者的认知功能评分,提高相关细胞因子的表达水平,降低相关危险因素的影响。     

肝细胞生长因子在肺纤维化模型中的表达及意义

目的:研究肝细胞生长因子(HGF)在大鼠肺纤维化模型中的表达及意义,探讨肺纤维化可能的发病机制。方法:40只Wistar大鼠随机分成模型组及对照组。前者经气管内灌注博莱霉素诱导肺纤维化,后者灌注生理盐水。两组于气管内灌注后第7,14,28,42d各处死5只,原位杂交法检测HGFmRNA在肺内的表达,酶联免疫吸附法检测HGF蛋白在肺组织及血清中的表达。结果:模型组肺组织HGFmRNA表达及蛋白含量在第7d达高峰,之后下降,第28,42d时低于正常对照(P<0.05,P<0.01)。模型组血清HGF在第7d开始升高达峰,后降低,但仍高于正常对照(P<0.05)。结论:HGF在肺纤维化组织中的表达早期升高,中晚期降低,而血清中的含量始终高于正常组。HGF参与了肺纤维化的发病过程。     

卵巢癌中核因子-κB与血管内皮生长因子及IL-2的表达

目的通过测定卵巢癌组织核因子-κB（NF-κB）与血管内皮生长因子（VEGF）及IL-2的表达,探讨NF-κB通道的激活及其与肿瘤血管形成的关系。方法收集本院2008年~2014年卵巢癌患者47例,Ⅰ期组12例,Ⅱ期组20例,Ⅲ/Ⅳ期组15例,选择正常卵巢20例为对照组。采用免疫组织化学方法（SABC）测定NF-κB、VEGF和IL-2的表达,并用SPSS 19.0软件对数据进行统计学分析。结果 1）对照组可见少量NF-κB、VEGF和IL-2蛋白的表达;与对照组比较,Ⅰ期组、Ⅱ期组和Ⅲ/Ⅳ期组NF-κB、VEGF和IL-2表达均增多（P〈0.05）;与Ⅰ期组比较,Ⅱ期组和Ⅲ/Ⅳ期组NF-κB、VEGF表达均增多（P〈0.05）,IL-2表达均减少（P〈0.05）;与Ⅱ期组比较,Ⅲ/Ⅳ期组NF-κB、VEGF表达增多（P〈0.05）,IL-2表达均减少（P〈0.05）。2）Ⅰ期组、Ⅱ期组和Ⅲ/Ⅳ期组NF-κB与VEGF呈正相关（P〈0.05）,与IL-2呈负相关（P〈0.05）。结论卵巢癌相关蛋白NF-κB可通过上调VEGF的表达及下调IL-2的表达共同调节肿瘤血管的生成。