补体与急性肾损伤

多种因素可导致急性肾损伤,而补体的活化在急性肾损伤的发生和发展中起重要作用。在急性肾损伤时,补体系统可通过经典途径、甘露聚糖结合凝集素途径和旁路途径被激活,其中旁路途径发挥着最关键的作用。补体系统激活后,膜攻击复合物发挥溶解细胞的效应,与C3a、C5a等下游分子一起损伤肾脏。补体调节蛋白可抑制补体系统的过度活化,其功能受损会导致一系列肾脏疾病或加重肾脏损伤。本文对补体在急性肾损伤中的作用进行综述,为临床针对急性肾损伤的特异性治疗提供新的思路。     

寄生虫钙网蛋白及其在虫体与宿主相互作用中的功能

钙网蛋白(Calreticulin, CRT)是一种一级结构高度保守的Ca~(2+)结合蛋白,存在于高等生物除红细胞外的所有细胞中,属于内质网(ER)滞留蛋白家族,同时也存在于细胞表面、胞质、胞核等非ER区,具有N、P、C三个结构和功能区。CRT具有多种生物学功能,比如参与钙离子储存与信号转导、细胞凋亡与粘附、降低T细胞和NK细胞穿孔素裂解活性等。某些物种包括寄生虫CRT还能够通过与补体组分C1q结合,抑制C1q依赖的补体经典途径活化。本文综述了CRT蛋白的结构组成以及近年来其在寄生虫感染与宿主免疫过程中所发挥的潜在功能,为寄生虫病的防控提供新策略和新思路。     

阿尔茨海默病患者血清补体C5a、NLRP3水平变化及其意义

目的 观察阿尔茨海默病(AD)患者血清补体C5a、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)水平变化,并探讨其是否参与炎症反应及认知功能损伤.方法 198例AD患者为观察组,82例同期体检健康者为对照组.采用酶联免疫吸附法检测血清补体C5a、NLRP3、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、IL-...     

C5a-C5aR在脓毒症中的作用

脓毒症中补体系统的过度激活导致大量C5a的产生,并诱导其受体(C5aR)在细胞上的表达异常,C5a-C5aR相互作用调节炎症介质的表达、干扰凝血通路和诱导中性粒细胞功能障碍,最终导致器官功能损伤.     

补体C3、C4、备解素及补体调节蛋白CD55、CD59与颈动脉内膜中层厚度的关系研究

目的:探讨补体及补体调节蛋白与颈动脉内膜中层厚度(IMT)的关系。方法:选高脂血症患者57例(高脂血症组),正常对照20人(正常对照组),测定补体C3、C4、备解素(Pf)水平、补体凋节蛋白CD55、CD59的表达及颈动脉IMT,分析其关系。结果:与正常对照组比较,高脂血症组补体C3、C4及备解素、颈动脉IMI、明显升高,补体调节蛋白CD55阳性淋巴细胞平均荧光强度减低;IMT与年龄、收缩压、腰臀比值、高敏C反应蛋白正相关,与补体调节蛋白CD55阳性淋巴细胞平均荧光强度负相关,与补体C3、C4、备解素及补体调节蛋白CD59不相关。结论:颈动脉IMT增厚与补体调节蛋白CD55表达降低相关,而与补体C3、C4、备解素、补体调节蛋白CD59无直接关系。     

HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者红细胞天然免疫黏附功能与血清sCR1变化的相关性

进入血液中的病原体或机体产生的抗原-抗体复合物,将直接或间接激活补体C3,产生C3b、C4b等补体片段,这些片段将病原颗粒或循环免疫复合物与红细胞表达的补体受体1型分子(CR1)连接成免疫复合体,然后通过FC段或补体C端与吞噬细胞的FCR或CR结合,从而活化吞噬细胞[1],释放蛋白水解酶,将CR1连同黏附的抗原或病原体—同切下形成可溶性CR1(sCR1).sCR1作为大颗粒抗原复合体最终要在肝脏和脾脏中被彻底代谢,因此循环中sCRI水平的升高及其程度不仅是免疫清除的标志,同时也是评估肝脏代谢功能的指标.有文献报道肝病患者血清sCR1含量的变化是评价肝功能损伤程度的直接标志[2-3].本研究对96例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者红细胞天然免疫黏附功能(RNIAF)与血清sCR1浓度变化进行比较,并观察其动态变化关系.     

高脂血症患者血清补体C3、C4、备解素和白细胞补体调节蛋白CD35、CD55、CD59的表达

目的:探讨高脂血症患者血清补体和外周血白细胞补体调节蛋白的表达及其在动脉粥样硬化中的意义。方法:选高脂血症患者46例(高脂血症组),年龄、性别、体重指数匹配的正常人20例作为正常对照组,用免疫散射比浊法测血清补体C3、C4、备解素(Pf);用流式细胞术测定外周血中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞CD35、CD55、CD59的表达,观察上述指标在高脂血症组中的变化,分析影响因素。结果:高脂血症组血清C3、C4、Pf水平较正常对照组明显升高(P<0.01);补体C3、C4水平与血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)明显正相关(P<0.01),Pf与TC、LDLC正相关(P<0.01)。CD35阳性淋巴细胞、单核细胞、粒细胞百分率较正常对照组升高(P<0.05),CD35阳性淋巴细胞、粒细胞百分率与TG呈正相关(P<0.05～0.01);CD55阳性淋巴细胞平均荧光强度较正常对照组下降(P<0.05);CD59阳性淋巴细胞、单核细胞百分率较正常对照组下降(P<0.05)。结论:高脂血症患者血清补体C3、C4、Pf升高,白细胞补体调节蛋白表达改变,补体及补体调节蛋白的改变与血脂水平相关,表明脂代谢紊乱可影响补体及补体调节蛋白的表达,提示补体及补体调节蛋白可能参与动脉粥样硬化的病理生理过程。     

C反应蛋白与心房颤动

心房颤动是临床上较常见的一种心律失常,其发生机制尚未完全阐明。近年来随着对心房颤动的深入研究,认为C反应蛋白在心房颤动的发生和发展中起着重要的作用。C反应蛋白导致心房颤动的机制可能为:(1)C反应蛋白能激活经典补体途径,从而在心房颤动的触发和维持中起到直接的作用。C反应蛋白通过与受损细胞的磷脂组分的结合,抑制肌膜内囊泡中钠和钙离子的交换,引起心房的电重构,从而导致膜功能障碍和心律不齐的发展。(2)C反应蛋白作为典型的炎症标志物,提示心房中受损的心肌细胞发生炎症反应,使心房肌细胞变性、坏死,引起心房肌间质纤维化,并导致心房结构变化和心房重构,为心房颤动的发生和维持提供了结构基础。     

分枝杆菌肝素结合血凝素研究进展

结核病是由分枝杆菌感染引起的世界范围内流行的人畜共患病。肝素结合血凝素(heparin-binding adhesin,HBHA)是分枝杆菌表达的一种蛋白质,致病性分枝杆菌的HBHA蛋白具有黏附上皮细胞、扩散感染范围等功能。其发挥黏附功能的C端结构域能够刺激机体产生有效的Th1细胞免疫反应;HBHA特异的黏膜免疫反应能够提供一定的保护效果。这提示HBHA具有制作为疫苗的潜力。而且,HBHA蛋白在活动性结核病患者和潜伏感染者中引发的免疫反应存在差异,这使其可以成为新的诊断抗原。此外,在细胞水平上,HBHA可以利用补体系统进入巨噬细胞,促使巨噬细胞向M1极化,同时能够逃避自噬并诱发线粒体损伤和内质网应激介导功能,这为结核病的致病机制提供了更多的解释。HBHA与宿主之间相互作用认识的积累,可以为HBHA的应用性研究提供依据。     

补体C7在结直肠癌组织中的表达及其对结肠癌细胞株增殖的影响

目的检测补体C7在结直肠癌组织中的蛋白表达,探讨补体C7对人结肠癌细胞株HCT-116、LoVo增殖的影响及其可能的机制。方法利用免疫组织化学方法分别检测50例结直肠癌患者癌组织及癌旁组织中补体C7蛋白分布与表达水平;将过表达C7质粒和C7-siRNA分别转染人结肠癌细胞株HCT-116和LoVo细胞,通过CCK-8检测C7对这两种细胞增殖的影响;通过Western blotting检测HCT-116在PI3K抑制剂LY294002处理后C7的变化。结果结直肠癌组织中补体C7蛋白表达水平明显高于癌旁组织。与空载质粒组和NC-siRNA组相比,C7过表达组细胞增殖能力明显增强,C7-siRNA组细胞增殖能力明显减弱; LY294002处理结肠癌细胞后C7蛋白表达量明显降低。结论补体C7在结直肠癌组织中明显高表达,抑制结肠癌LoVo细胞中C7基因可降低癌细胞增殖,其机制与PI3K/AKT信号通路的调控有关。     

雷公藤内酯醇对人肾小管上皮细胞补体C3的抑制

近年的研究表明[1,2 ] ,肾脏局部固有细胞尤其是肾小管上皮细胞 ,在病理因素诱导下过度产生和激活的补体 ,在肾免疫损伤中发挥重要作用 ,阻断这一作用将对保护肾功能、延缓肾病恶化具有重要意义。雷公藤内酯醇 (T4)是雷公藤二萜化合物中免疫抑制活性最强的单体 ,本研究通过观察其对肿瘤坏死因子 (TNF)α诱导人近端肾小管上皮细胞补体C3 mRNA和蛋白的影响 ,探讨雷公藤在分子水平治疗肾病的免疫抑制机制 ,并与免疫抑制剂环孢素A(CsA)和FK5 0 6比较 ,进一步探讨雷公藤的临床应用意义。一、材料和方法1 肾小管上皮细胞培养和TNFα对肾小…     

急性主动脉夹层患者补体活化及补体C3a受体表达的临床意义

目的:揭示急性主动脉夹层发生中,是否存在补体系统活化及补体活化产物C3a受体的表达变化。方法:收集2015年1月至2015年7月,在北京安贞医院接受体检的正常人、腹主动脉瘤手术以及急性主动脉夹层手术患者血液各5例,进行微量样本多指标流式蛋白定量试验,测定其补体系统活化产物过敏毒素C3a、C4a和C5a的水平;收集2015年1月至2015年7月,在北京安贞医院接受主动脉弓部替换术患者的升主动脉组织5例及心脏移植供受体正常的升主动脉组织5例,进行免疫组化组织染色,并提取蛋白,检测C3a受体的表达。结果:微量样本多指标流式蛋白定量试验结果显示,腹主动脉瘤和急性主动脉夹层患者血浆中补体活化产物C3a、C4a和C5a含量显著高于正常对照组(P0.01),这说明补体活化不仅在腹主动脉瘤,急性主动夹层患者循环系统也存在。免疫印迹结果显示急性主动脉夹层患者标本中C3a受体蛋白表达量显著高于正常对照组(P0.05)。免疫组化染色发现,与正常升主动脉壁相比较,急性主动脉夹层标本的C3a受体表达显著增高(P0.01)。结论:急性主动脉夹层患者体内存在补体系统活化C3a-C3a受体信号通路,可能参与主动脉夹层的发生发展。     

牛支原体核糖磷酸焦磷酸激酶的黏附功能分析

目的分析牛支原体(Mycoplasma bovis)核糖磷酸焦磷酸激酶(ribose-phosphate pyrophosphokinase, prsA)对宿主细胞的黏附功能。方法参照牛支原体HB0801株prsA基因序列设计特异性引物,PCR扩增获得牛支原体武威分离株prsA基因,构建原核表达载体pET-prsA,转化入大肠埃希菌Rosetta(DE3)感受态细胞后加入IPTG诱导表达His-prsA。表达产物纯化后免疫新西兰兔,制备抗血清,应用Western blot和间接ELISA分析prsA蛋白在牛支原体细胞中的分布;通过抗体依赖补体杀菌试验分析多抗血清介导的补体杀支原体活性;利用黏附及黏附抑制试验分析prsA蛋白的宿主细胞黏附功能。结果 SDS-PAGE显示,pET-prsA转染DE3细胞表达的重组蛋白His-prsA分子质量单位约36 ku,且主要以可溶性形式表达;间接ELISA检测重组His-prsA免疫兔血清抗体效价为1∶24 000;Western blot和ELISA结果表明,prsA蛋白存在于牛支原体细胞膜和细胞浆,且细胞浆中较多;抗体依赖的补体杀菌试验结果表明,prsA抗血清具有杀牛支原体活性;黏附及黏附抑制试验证实prsA蛋白与牛支原体黏附宿主细胞有关。结论牛支原体prsA蛋白具有良好的免疫原性和宿主细胞黏附功能,为深入研究牛支原体的致病机制奠定了基础。     

抗增殖蛋白抗肿瘤及抗衰老的研究进展

抗增殖蛋白Prohibitin(PHB)是一种有效的肿瘤抑制蛋白,因其具有明显的抗细胞增殖、抗肿瘤作用而得名[1].PHB广泛分布于细菌、植物、酵母、原虫及哺乳类等各种生物细胞中,具有高度的结构保守性和种族同源性.PHB主要定位于细胞线粒体内膜、细胞核和细胞膜,它通过调节细胞增殖、凋亡与分化和调控激素及其受体活性而发挥抗肿瘤作用;通过分子伴侣角色,参与能量代谢发挥抗衰老作用;通过参与T、B淋巴细胞的信号转导及与补体C3的结合,调节机体的免疫应答.PHB的不同定位和多种功能,提示其可能参与多种疾病的发生与发展,本文就PHB的命名分类、结构定位、功能机制以及与肿瘤和衰老相关性疾病的关系做一综述,进而使PHB成为抗肿瘤和抗衰老治疗的新希望被深入研究.     

高糖因素在人肾小球内皮细胞补体凝集素途径激活机制的作用

目的观察高浓度葡萄糖对人肾小球内皮细胞(HRGEC)表面补体凝集素途径(LCP)相关信号通路蛋白表达的影响。方法将HRGEC分3组:高糖组、正常糖组和甘露醇组,分析HRGEC细胞表面甘露聚糖结合凝集素(MBL)、C3及C5b-9沉积的变化。结果 HRGEC表面MBL和C3沉积随糖作用时间的延长而增加,72 h达峰值(P0.05),随糖浓度的升高而增加,60 mmol/L达峰值(P0.05);高糖组HRGEC表面MBL、C3及C5b-9沉积均明显高于正常糖组和甘露醇组(P0.05)。结论葡萄糖可随时间及浓度依赖性促进HRGEC表面MBL和C3沉积;高浓度葡萄糖刺激可能氧化应激诱导HRGEC表面糖基化发生改变,激活LCP途径,引发HRGEC表面C5b-9沉积的增加。     

慢性HBV感染者外周血淋巴细胞亚群及血清IgG和补体检测的临床意义

目的探讨慢性HBV感染者疾病不同阶段外周血淋巴细胞亚群及免疫球蛋白IgG和补体C3、C4的变化特点。方法将80例慢性HBV感染者及20例健康体检查作为研究对象,根据病情将80例慢性HBV感染者分为慢乙肝组,肝硬化组,慢加急性肝衰竭组,健康体检者为对照组。采用流式细胞术检测所有研究对象的外周血T淋巴细胞亚群及CD3-CD19~+细胞(B细胞),采用免疫散射法测定血清IgG和补体C3、C4含量;并进行组间比较分析。结果对照组、慢乙肝组、肝硬化组、慢加急性肝衰竭组患者外周血CD3~+T细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞百分比顺序递减,B细胞百分比顺序上升,慢乙肝组、肝硬化组及慢加急性肝衰竭组患者CD3~+T细胞百分比均显著低于较对照组,B细胞百分比均高于对照组,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。对照组、慢乙肝组、肝硬化组及慢加急性肝衰竭组血清IgG顺序升高,补体(C3、C4)含量顺序下降,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论慢性HBV感染者体内存在淋巴细胞亚群失衡和细胞免疫功能紊乱,体液免疫也发生明显改变,外周血淋巴细胞亚群及血清IgG和补体检测对于了解患者免疫状态,判断病情发展阶段以及预测预后有一定临床应用价值。     

免疫相关蛋白在烟雾病患者硬脑膜血管壁中的表达

目的探讨免疫相关蛋白与烟雾病的关系。方法术中留取25例烟雾病患者(烟雾病组)和5例颅内海绵状血管瘤患者(对照组)的硬脑膜标本,采用免疫组织化学法(SP法)检测硬脑膜血管壁IgG、IgM、补体C3及血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的表达,采用HE染色观察血管的病理学改变。结果①HE染色显示,两组的硬脑膜血管壁均主要由内皮细胞和外层的周细胞构成,无中膜结构。与对照组比较,烟雾病组有部分内皮细胞核深染,向管腔轻度突起。②烟雾病组硬脑膜血管壁的IgG、IgM、补体C3阳性表达发生率分别为92%(23/25)、84%(21/25)及84%(21/25),对照组分别为20%(1/5)、20%(1/5)及40%(2/5),两组比较差异有统计学意义P<0.01或P<0.05。对照组硬脑膜血管即使有IgG、IgM、补体C3阳性表达,也均为弱阳性(+)表达。烟雾病组硬脑膜血管VCAM-1阳性表达发生率为14%(3/21),对照组为0,差异无统计学意义。结论免疫相关蛋白可能参与烟雾病患者的血管损伤。     

血清胆碱酯酶和补体C3在肝硬化诊断中的临床价值

背景：血清胆碱酯酶（CHE）和补体C3由肝细胞合成,在肝硬化时其合成受到影响。因此血清CHE和补体C3有可能成为评估肝硬化患者肝功能损伤的辅助指标。目的：探讨血清CHE、补体C3在肝硬化诊断中的临床价值。方法：对我院2006年1月～2008年12月住院和门诊的262例肝硬化患者和92例正常对照者的血清CHE、补体C3及血清白蛋白水平进行对照分析。结果：与正常对照组相比,肝硬化组患者血清CHE、补体C3水平显著降低（R0．01）,血清白蛋白水平亦显著降低（P〈0．05）;血清CHE、补体C3水平在不同Child—Pugh分级的肝硬化患者之间差异均有统计学意义（P〈0．01）：血清CHE、补体C3水平随着Child-Pugh分级由A级至C级变化而逐渐降低。结论：血清CHE和补体C,与肝功能损伤严重程度相关,结合Child-Pugh分级可更好地反映肝脏储备功能,并有利于帮助判断预后。     

硫氧还蛋白和硫氧还蛋白相互作用蛋白与糖尿病及其并发症关系的研究进展

硫氧还蛋白系统是由硫氧还蛋白、NADPH和硫氧还蛋白还原酶三部分组成的氧化还原敏感的多功能小分子蛋白系统。硫氧还蛋白系统在细胞内外行使着多种功能,如调节细胞氧化还原状态以对抗氧化应激,激活转录因子如NF-κB和AP-1促生长,以及与ASK-1作用抑制细胞凋亡等。硫氧还蛋白相互作用蛋白\硫氧还蛋白结合蛋白2\维生素D3上调蛋白1为硫氧还蛋白结合蛋白之一,是硫氧还蛋白功能和表达的一种负性调节因子,通过抑制硫氧还蛋白系统功能而发挥介导氧化应激、诱导细胞凋亡及对抗细胞增殖等作用。高糖可以通过相互作用蛋白启动子上的CREs(碳水化合物反应元件)刺激硫氧还蛋白相互作用蛋白的产生而抑制硫氧还蛋白,进而促进氧化应激,损伤胰岛B细胞;诱导B细胞凋亡增加,促进糖尿病及其并发症的发生。因此,硫氧还蛋白相互作用蛋白或许在糖毒性和B细胞凋亡、糖尿病及其并发症之间起着重要作用。     

细胞免疫及体液免疫在ITP发生发展中的作用及其机制探讨

目的用ELISA法检测60例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者(观察组)血小板相关抗体PAIgG、PAIgA、PAIgM,免疫比浊法(ITM)测定补体C3、C4,流式细胞仪直接免疫法检测外周血淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD 16 CD56)水平,并与30例健康人(对照组)比较。结果与对照组比较,观察组血小板相关抗体PAIgG、PAIgA、PAIgM均显著升高,补体C3显著降低,C4无明显变化;外周血淋巴细胞亚群CD3显著降低,CD8增高,CD4/CD8下降,CD16 CD56降低。证实T细胞免疫调节机制紊乱、淋巴细胞功能和比例失调在ITP的发生中起非常重要的作用。