闵行区部分农副产品副溶血性弧菌监测及PFGE分型研究

目的:了解上海市闵行区农贸市场和超市中部分农副产品副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的污染状况、毒力基因携带及基因分型情况,并进行耐药性研究,为副溶血性弧菌食源性疾病的预警提供基础数据。方法:按国标GB/T4789.7-2008对样品进行副溶血性弧菌的分离、生化鉴定;PCR扩增进行tdh、trh 2种毒力基因的检测;脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行聚类分析;用K-B法进行抗生素耐药性研究。结果:373份样品中共检出副溶血性弧菌38株,食品污染率为10.2%;所检出菌株均不携带tdh、trh 2种毒力基因;PFGE共分为38种带型,呈现明显多态性;分离菌株对氨苄西林、奥格门汀耐药较严重,对氨苄西林的耐药率高达92.1%,对环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素、阿米卡星、甲氧苄啶、氯霉素、四环素、头孢类抗生素100%敏感。结论:闵行地区部分食品中存有副溶血性弧菌交叉污染,检出菌株间遗传同源关系较远;存有副溶血性弧菌耐药菌株。     

2013年中国三省贝类及环境中副溶血性弧菌分离株耐药特征分析

目的研究四川、福建和广西贝类及其养殖环境中分离的副溶血性弧菌的耐药特征。方法采用微量肉汤稀释法测定186株副溶血性弧菌对8种抗生素包括氨苄西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、四环素、氯霉素、环丙沙星和复方新诺明的耐药性。结果 186株副溶血性弧菌总耐药率为69.35%,主要耐受的抗生素为氨苄西林,氨苄西林的最小抑菌浓度(MIC)值的几何均数大于耐药解释标准。4株菌表现为多重耐药/中介。所有菌株对头孢噻肟、头孢他啶、氯霉素、环丙沙星等4种抗生素100%敏感。按照分离省份、采样环节和样品种类分类分析,副溶血性弧菌分离株的氨苄西林耐药谱3个采样环节中养殖场的耐药率最高为73.68%,3个省份中四川菌株的耐药率最高为70.94%,但差异均没有统计学意义。58份样品中,有44份样品分离出2株及以上菌株,样品分离菌株的耐药谱多态率为77.27%(34/44)。结论贝类及其养殖环境中副溶血性弧菌的氨苄西林耐药率较高,养殖环境可能是副溶血性弧菌耐药性的主要来源,需加强贝类养殖过程的副溶血性弧菌耐药性的监测和控制。     

临安市水产品中副溶血性弧菌的污染情况与耐药情况分析

目的了解临安地区市售水产品中副溶血性弧菌污染情况,并对毒力基因和药敏进行检测,为防治因副溶血性弧菌引起的食源性疾病提供依据。方法随机采集市售水产品205份,采用PCR方法对分离的副溶血性弧菌进行tdh、trh基因扩增,并进行血清分型和药敏实验。结果 205份水产品中有19份样品分离出副溶血性弧菌,总检出率为9.3%,其中虾类检出率最高为15.4%;19株菌检出4株tdh阳性,1株trh阳性;19株水产品中分离出的副溶血性弧菌对氨苄西林耐药率达到100.0%,有2株耐菌株耐2种以上抗生素,对环丙沙星、头孢噻肟、诺氟沙星、复方新诺明4种抗生素完全敏感。结论临安市售水产品副溶血性弧菌污染已达一定程度,同时存在耐药情况,水产品污染状况应该引起有关部门的重视。     

浙江省某地海产品中副溶血性弧菌污染及耐药性分析

【目的】了解浙江省某区市售海产品中副溶血性弧菌污染状况及耐药性,为防控副溶血性弧菌引起的食源性疾病提供基础数据。【方法】根据GB 4789.7—2013标准对海产品中副溶血性弧菌进行分离鉴定,利用实时荧光聚合酶链反应(PCR)法鉴定毒力基因,采用K-B法进行药敏试验。【结果】从210份样品中检出副溶血性弧菌阳性样本55份,检出率为26.19%,不同海产品种类检出率差异较大,腹足类和双壳类污染较为严重。分离所得的55株副溶血性弧菌均不含毒力基因tdh和trh,所有菌株均检出2种特异性基因tlh和toxR。大部分菌株对氨苄西林和阿莫西林耐药,耐药率均为96.36%。所有菌株对氨苄西林/舒巴坦、四环素、环丙沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星、氯霉素完全敏感。【结论】市售海产品普遍存在副溶血性弧菌污染,分离菌株存在一定程度的耐药情况,应加强海产品副溶血性弧菌污染状况监测,规范养殖和临床抗生素使用。     

青岛市售贝类副溶血性弧菌污染状况及耐药性分析

目的:对青岛市售贝类中副溶血性弧菌进行污染状况调查,并对分离菌株进行毒力基因检测和耐药性分析,为贝类产品的食用安全及食源性疾病的防控提供依据。方法:根据GB/T 4789.7-2008标准对贝类中副溶血性弧菌进行分离鉴定,PCR法检测毒力基因,K-B法进行药敏试验。结果:143份样品中82份检出副溶血性弧菌,检出率达57.3%,不同品种和不同季节检出率差异显著。从阳性样品中分离到98株副溶血性弧菌,所有菌株均不含毒力基因tdh和trh,大部分菌株对氨苄西林和阿莫西林耐药,耐药率分别为92.9%和71.4%,所有菌株对头孢曲松、头孢吡肟、庆大霉素、卡那霉素、诺氟沙星、环丙沙星、萘啶酸、吡哌酸、氯霉素和呋喃妥因100%敏感。结论:青岛市售贝类副溶血性弧菌污染较严重,存在一定程度的耐药情况,应加强对水产品副溶血性弧菌的监控和抗生素的使用管理。     

132株副溶血性弧菌毒力基因及耐药性分析

目的了解2014年-2017年桐乡市副溶血性弧菌分离株毒力基因携带与耐药性情况,为临床更为有效用药提供数据上的支持。方法利用RT-PCR技术对其分离株进行毒力(tlh、tdh、trh)检测;采用纸片扩散法操作,测定其对22种抗生素的耐药性。结果在132株副溶血性弧菌中,毒力基因tlh、tdh和trh阳性携带率分别为100.00%(132/132)、57.58%(76/132)和0.00%(0/132);对氨苄西林、头孢唑啉、哌拉西林、复方新诺明的耐药率分别为31.5%、23.5%、12.5%、12.5%,对除碳青霉烯类和喹诺酮类外的6大类抗生素均有耐药性,而其中对β-内酰胺类抗生素和叶酸代谢途径抑制剂及氯霉素的耐药性相对较高。多重耐药方面,对2种以上抗生素耐药的有15株,占11.90%。结论126株副溶血性弧菌分离株主要携带毒力基因为tlh、tdh。除氨苄西林等9类抗生素外,其余13类在副溶血性弧菌感染的治疗中可作为首选。     

2006年-2013年四川省副溶血性弧菌毒力基因及耐药分析

目的研究四川省副溶血性弧菌毒力基因携带及抗生素的耐药情况,为副溶血性弧菌疾病防治提供科学依据。方法运用多重荧光定量PCR对2006年-2013年共计290株副溶血性弧菌,进行耐热直接溶血素基因(tdh)和相关溶血素基因(trh)检测,用肉汤稀释法测定8种抗生素的耐药性。结果 290株菌中有22.4%的菌株仅携带tdh基因,0.7%的菌株仅携带trh基因,0.3%的菌株同时携带tdh和trh毒力基因。59株临床分离株中57株均仅携带tdh基因,检出率为96.6%。290株副溶血性弧菌仅有11株(3.8%的菌株)出现耐药。结论四川省副溶血性弧菌临床分离株多携带tdh毒力基因,食品分离株毒力基因携带率低,副溶血性弧菌分离株对抗生素敏感性较高,大多数现行临床使用的抗生素药物都是有效的,菌株的毒力基因携带与否和耐药无必然联系。     

泰州市112份水产品中副溶血性弧菌检出状况及耐药性分析

目的 了解泰州市市售水产品副溶血性弧菌污染状况及对常用抗菌药物的敏感性,为有效的预防副溶血性弧菌食物中毒提供实验依据。方法 根据《食品微生物学检验 副溶血性弧菌检验》( GB/T 4789.7—2010)对112份水产品样品进行副溶血性弧菌检测,分离菌株的药敏实验采用K - B法。结果 112份样品38份检出副溶血性弧菌,副溶血性弧菌的检出率为 33.9%。副溶血性弧菌分离株对氨苄西林耐药率为52.6%,对头孢西丁、头孢噻肟、四环素、环丙沙星、庆大霉素、氯霉素、萘啶酸、复方新诺明敏感率为100.0%。结论 市售水产品中副溶血性弧菌污染较严重,并有部分菌株耐药。     

泰州市市售食品食源性致病菌谱及耐药状况分析

目的:了解泰州市市售食品中常见食源性致病菌的污染状况和对抗生素的耐药情况。方法:采集市售的各类食品样品,按照国家规定的标准检验方法进行食源性致病菌的分离培养、生化及血清学鉴定和药敏试验,并依据CLSI(美国临床实验室标准委员会)规定判断结果。结果:533份各类食品样共检出沙门菌33株,检出率为6.59%;单核细胞增生李斯特菌50株,检出率为11.63%;副溶血性弧菌17株,检出率为28.30%;金黄色葡萄球菌27株,检出率为18.12%。未检出大肠杆菌O157:H7、阪崎杆菌和空肠弯曲菌。沙门菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌对抗生素普遍耐药,单核细胞增生李斯特菌对抗生素的耐药性相对较低,但对氨苄西林、萘啶酸、四环素有一定的耐药性。结论:泰州市市售食品存在食源性致病菌的污染,主要污染的食源性致病菌为单核细胞增生李斯特菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌和副溶血性弧菌。污染食品的食源性致病菌对抗生素普遍存在耐药。     

不同来源的副溶血性弧菌毒素基因检测和耐药性分析

目的了解常熟地区副溶血性弧菌中毒素基因的分布和耐药性情况,为指导用药提供依据。方法利用实时荧光PCR方法,对常熟地区2013—2014年分离的211株副溶血性弧菌进行毒素基因检测;对2014年分离的134株副溶血性弧菌进行耐药性分析。结果在211株副溶血性弧菌中,检测出毒素基因阳性98株,占46.4%。其中,来源为食物中毒的菌株60株,检测出毒素基因阳性41株(68.3%);来源为食源性疾病哨点监测的菌株74株,检测出毒素基因阳性57株(77.0%);来源于环境水或水产品的菌株77株,未检测到毒素基因。20种药物的耐药性检测发现,97.76%的副溶血性弧菌对氨苄西林耐药,部分菌株对头孢呋辛、头孢噻吩、阿米卡星耐药,少数菌株对四环素、庆大霉素和复方新诺明耐药,对其他抗生素均敏感。结论不同来源的副溶血性弧菌菌株毒素基因阳性比例有显著差异;除氨苄西林外,其他抗生素对副溶血性弧菌导致的腹泻有部分或较好的疗效。     

不同来源副溶血性弧菌分离株的耐药性和毒力分析

目的:了解广东省副溶血性弧菌水产品分离株与食物中毒分离株携带毒力基因和耐药情况及差异。方法:对132株副溶血性弧菌用纸片扩散法进行耐药检测,对487株副溶血性弧菌以PCR方法进行毒力基因测定。结果:副溶血性弧菌菌株对14种抗生素都有耐药。同时对5种以上抗生素耐药的有60株,占45.5%。多重耐药株的构成比以海虾分离株和食物中毒株为主,占50%。耐药谱分析结果显示,副溶血性弧菌分离株对青霉素类、庆大霉素、连霉素等,普遍有较高的耐药率。487株副溶血性弧菌的tdh和trh基因检测,食品分离株毒力基因的携带率明显低于食物中毒分离株。而食物中毒分离株中以携带tdh基因为多,占93.75%。结论:为防止超级耐药株的产生,应尽快立法加强对兽药使用的监控。复合PCR基因检测能缩短检测周期,有应用前景。     

河北省水产品中副溶血弧菌主动监测

[目的]了解河北省水产品中副溶血弧菌分布及耐药性。[方法]检测参照GB／T478—2003，药敏实验采用K-B琼脂纸片扩散法。[结果]95份样品检出51株副溶血性弧菌，阳性率53．7％，样品类别及地区之间的阳性率差异无统计学意义。51株副溶血性弧菌对头孢克罗、诺氟沙星敏感率为100％；其他16种抗生素部分耐药。[结论]河北省水产品中副溶血弧菌污染比较严重，同时显示一定程度的耐药。     

2010-2013年湖南省市售水产品中副溶血性弧菌污染状况及病原特征分析

目的 了解湖南省市售水产品中副溶血性弧菌污染状况和病原特征。 方法 2010-2013年在湖南省14个市的集贸市场和超市,按照无菌采样原则采集动物性水产品1 263份,分离副溶血性弧菌,进行毒力基因、耐药表型和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型。 结果 1 263份水产品中,221份样品检出副溶血性弧菌,检出率为17.50%。3株副溶血性弧菌检出trh基因,1株检出tdh基因,毒力基因携带率为1.81%。分离菌株对氨苄青霉素耐药率最高,达30.32%。其次为对氯霉素(1.81%)、复方新诺明(1.36%)和四环素(0.45%),未发现多重耐药菌株。分离菌株经NotⅠ酶切后,脉冲场凝胶电泳带型相对分散。 结论 2010-2013年湖南省市售水产品中副溶血性弧菌污染率高,部分菌株携带毒力基因,并具有一定的耐药性。     

肠道门诊副溶血性弧菌血清学分型与耐药情况分析

目的统计本院肠道门诊分离出的副溶血性弧菌血清学分型及临床耐药数据,为临床用药提供参考。方法对本院肠道门诊腹泻患者大便标本进行副溶血性弧菌鉴定及耐药性检测分析。结果 398例腹泻患者粪便标本共检测出副溶血性弧菌35例,检出率为8.79%;血清学分型为5种血清型,其中以O3型最高,占71.43%;副溶血性弧菌对青霉素、阿莫西林和氨苄西林耐药率较高,分别为88.57%、82.86%和45.71%,对其他抗生素总体较为敏感。结论本院肠道门诊腹泻患者副溶血性弧菌检出率相对较高,其中以O3血清型居多,临床医师应充分了解副溶血性弧菌耐药性变化和分布情况,根据实验数据合理选择治疗药物。     

副溶血性弧菌160株血清群型分布和耐药性分析

[目的]了解上海市浦东新区副溶血性弧菌群型分布及耐药情况。[方法]采用血清玻片凝集试验对160株副溶血性弧菌进行血清分型;采用改良K-B法进行耐药性测定。[结果]59株食物中毒分离株完全分型56株,分型率为94.92%,共分出7种血清型,O3∶K6(77.97%)居首位。101株水产品分离株完全分型32株,分型率为31.68%,共分出22种血清型,无优势血清型。药敏试验显示,副溶血性弧菌对氨苄西林高度耐药,对阿莫西林/克拉维酸、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢他啶、氯霉素100.00%敏感。[结论]O3∶K6型是引起本区副溶血性弧菌食物中毒的主要血清型;水产品分离株血清型呈多样性,与食物中毒分离株不一致。本地区副溶血性弧菌没有产生广泛的耐药性变异。     

贵阳市市售水产品中副溶血性弧菌的污染状况和耐药性研究

目的了解贵阳市市售水产品中副溶血性弧菌污染状况,进一步对毒力基因和药敏进行检测,为防治副溶血性弧菌引起的食源性疾病提供依据。方法随机采集市售水产品149份,用PCR方法对分离出的副溶血性弧菌进行tdh、trh基因扩增,并进行药敏试验。结果 149份水产品中有28份样品分离出副溶血性弧菌;28株菌检出1株tdh阳性,所有菌株trh阴性;19株菌对氨苄西林耐药,耐药率为67.86%,有1株菌出现多重耐药,所有菌株对氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星、呋喃妥因、复方新诺明敏感。结论贵阳市售水产品副溶血性弧菌污染已达一定程度,同时存在耐药情况,应加强水产品卫生监督及抗生素使用管理。     

北京市房山区腹泻病例分离副溶血性弧菌的分子流行病学特征

目的了解2016年北京市房山区腹泻病例副溶血性弧菌分离株的血清型、毒力基因、耐药性及PFGE分子分型特征。方法依照GB 4789.7-2013《食品安全国家标准食品微生物学检验副容血性弧菌检验》进行副溶血性弧菌生化鉴定,使用玻片血清凝集法进行血清分型,实时荧光聚合酶链式反应(PCR)测定毒力基因,微量肉汤稀释法进行药敏试验,脉冲场凝胶电泳进行分子分型及聚类分析。结果在检出的20株副溶血性弧菌中,O3:K6血清型占60%。所有菌株均携带tlh、tdh基因,trh基因的携带率为10%,tdh~+trh~-为优势基因型。抗生素敏感性结果显示,90%的菌株对至少1种抗生素耐药,其中多重耐药菌株5株。耐药率高的前3种抗生素分别是:头孢唑林(85%)、庆大霉素(75%)、氨苄西林(30%)。PFGE分型共得到10种带型,5株菌的PFGE带型一致,为优势带型。副溶血弧菌的血清型和PFGE带型之间具有高度的一致性。结论本地区副溶血性弧菌以tdh~+,trh~-的O3:K6型别为主,对头孢唑林、庆大霉素、氨苄西林等早期用药耐药率高,应慎重使用。     

深圳市水产品中副溶血性弧菌污染现状及耐药性分析

目的了解深圳地区不同季节水产品中副溶血性弧菌污染程度和耐药性,为控制副溶血性弧菌相关的食源性疾病提供依据。方法定期从市场抽取水产品,副溶血性弧菌的分离根据国标GB／T4789．7—2003进行,用GNID革兰阴性菌鉴定板进行生化鉴定,用法国梅里埃ATBFungs药敏反应板进行药敏实验。结果294份样品中检出副溶血性弧菌113株,检出率38．44％。夏秋季副溶血性弧菌的污染率明显高于冬春季（X2=5．62,P〈0．05。）。副溶血性弧菌对氨苄西林（AMP）、替卡西林（TIC）、头孢唑啉（KZ）的耐药率分别为65．47％、51．33％和43．36％。结论深圳水产品中副溶血性弧菌污染严重,在治疗相关食源性疾病时应合理用药。     

2013年济南市售牡蛎和毛蚶中副溶血性弧菌污染水平调查

目的了解济南市零售和餐饮环节,贝类海产品牡蛎和毛蚶中副溶血性弧菌污染水平及毒力基因携带情况。方法 2013年夏秋季节,从市场、餐馆采集牡蛎和毛蚶样品52份,采用多重荧光MPN-PCR法对副溶血性弧菌的污染水平进行定量检测,并对毒力基因(tdh、trh、orf8)携带情况进行调查。结果副溶血性弧菌在牡蛎和毛蚶中的检出率为46.15%(24/52);其中污染水平≥110 MPN/g的样品占33.33%(8/24);毒力基因阳性者有28株,以orf8为主(18株),tdh、trh各5株。结论济南市市售牡蛎和毛蚶中,致病性副溶血性弧菌污染水平较高,提示存在一定的食品安全风险。     

2014－2016年厦门市思明区海产品中副溶血性弧菌动态监测

目的 掌握厦门市思明区2014－2016年5－10月份市售海产品中副溶血性弧菌的污染状况以及分离菌株的血清型、耐药性与毒力基因携带状况,为食品安全监管、食源性疾病防控提供参考。 方法 2014－2016年5－10月份自思明区农贸市场与超市采集海产品样品分离副溶血弧菌,对分离菌株进行血清学分群、药物敏感试验以及毒力基因tdh和trh检测。 结果 180份样品共检出副溶血性弧菌菌株146株,检出率为81.11%,各类海产品检出率差异无统计学意义;7－9月份检出率均较5月份高。分离菌株血清群分布广泛,呈多样化状况,且以O2(27.27%)、O1(22.60%)、O4(15.75%)、O3(10.96%)为主。所有分离株均对氨苄西林耐药,对头孢曲松等16种抗生素敏感。仅检出一株菌株携带tdh毒力基因,毒力基因检出率为0.68%。 结论 2014－2016年厦门市思明区5－10月份海产品存在严重的副溶血性弧菌污染;分离株血清型以O2、O1、O4、O3为主,呈多样性;毒力基因携带率不高;分离株均对大部分抗菌药物敏感。