AngⅡ对人脐静脉内皮细胞CGRP受体组分的调节差异

目的 探讨血管紧张素Ⅱ对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中降钙素基因相关肽(CGRP)受体组分的影响。方法以HUVECs作为实验对象,用无血清培养基同步化24 h后,以Ang Ⅱ非处理细胞为对照组,AngⅡ处理组为不同剂量的AngⅡ处理HUVECs 12 h,流式细胞仪检测细胞增殖率和凋亡率。Western Blot检测CGRP三种受体组分,即降钙素受体样受体(CRLR)、降钙素受体组分蛋白(RCP)和受体修饰蛋白(RAMP)1的蛋白表达。结果与对照组相比,在处理组细胞,AngⅡ呈剂量依赖性地抑制HUVECs增殖和诱导细胞凋亡,同时上调CRLR表达(P<0.01)。而对另外两个受体蛋白而言,AngⅡ(0.01～100 nmol/L)呈剂量依赖性的下调HUVECs的RAMP1的表达和RCP表达(P<0.05)。结论AngⅡ影响人脐静脉内皮细胞CGRP受体组分的表达存在差异,可引起人脐静脉内皮细胞CGRP受体功能改变。     

印迹基因生长因子-受体结合蛋白10在人类卵子及种植前胚胎的表达

目的检测Silver-Russell syndrome(SRS)候选印迹基因-生长因子受体结合蛋白10(Grb10)在人类卵子和种植前胚胎的正常表达,探讨Grb 10与胚胎发育以及辅助生殖的关系.方法应用巢式RT-PCR技术检测印迹基因Grb10在人类卵子及种植前胚胎的表达.结果4细胞、8细胞胚胎、囊胚及卵子中均可测到Grb10基因的表达,2细胞胚胎中未见表达.结论印迹基因Grb10表达于种植前胚胎,与胚胎发育密切相关.     

人肝癌相关新基因编码产物LAPTM4B的鉴定及其生物学特性

目的 :鉴定由肝细胞癌 (HCC)相关新基因LAPTM 4B编码的蛋白质并研究其生物学特性。方法 :以Westernblot、免疫组化及双向电泳鉴定新基因的表达产物 ;以免疫共沉淀等方法研究分子间的相互作用。结果 :LAPTM4B基因编码相对分子质量分别为 35× 10 3 和 2 4× 10 3 、等电点分别为 9.0 7和 4 .6 5的两种异型分子。它们在肝癌组织及肝癌细胞系的表达显著上调 ,而相对分子质量为 35× 10 3 者尤为明显 ,并与细胞分化程度相关。LAPTM4B蛋白可与整合素α 6亚单位及表皮生长因子 (EGF)受体形成信号复合物。结论 :LAPTM4B 35蛋白在人肝癌组织及细胞系过表达 ,并可能通过与细胞表面的整合素受体及EGF受体形成复合物而参与细胞外基质成分所启动的信号转导。     

血管紧张素Ⅱ受体与降钙素基因相关肽受体间相互调节在心血管疾病中的意义

血管紧张素Ⅱ受体(ANGⅡR)和降钙素基因相关肽受体(CGRPR)同属于G蛋白藕联受体家族.研究发现,单独激活ANGⅡR或CGRPR和同时激活两受体对细胞的命运表现出不同甚至相反的作用.目前已知,CGRP受体是由降钙素受体样受体(CRLR)、受体活性修饰蛋白-1(RAMP1)、受体组分蛋白(RCP)3个组分组成.ANGⅡR和CGRPR间的相互作用可能发生在细胞膜的信号转导、细胞浆信号通路以及核内的基因转录等水平.本文综述了ANGⅡR和CGRPR在跨膜信号蛋白(如G蛋白及caveolae/caveoilins)、胞浆-胞核内信号蛋白(如NADPH氧化酶、MAPK家族)水平的相互作用,可望从心血管受体间信号整合改变的新视角来解释心血管疾病的发病机制.     

原癌基因c-erbB-在乳腺癌中的表达

1　c-erb B-基因表达及定位　c-erb B-基因位于细胞染色体上 1 7q2 1位点 ,它编码分子量为1 8.5× 1 0 4的跨膜糖蛋白 ( p1 85 ) ,正常细胞内含有两个拷贝数的 HER/neu原癌基因 ,能帮助维持细胞的正常生长。 HER2 /neu基因扩增拷贝数超过 2 h,会导致细胞膜上 c-erb B-蛋白受体过量 ,并预示原癌基因活动。 c-erb B-蛋白具有酪氨酸激酶受体活性 ,是表皮生长因子 ( EFG)受体家族中的一个成员。蛋白过度表达与肿瘤生长及远处器官的转移有关。因此认为 ,c-erb B-蛋白可作为肿瘤免疫治疗的靶抗原[1,2 ] 。2　c-erb B-表达与肿瘤分级　 Looi…     

印迹基因生长因子-受体结合蛋白10在人类卵子及种植前胚胎的表达

目的 检测Silver-Russell syndrome(SRS)候选印迹基因—生长因子受体结合蛋白10(Grb10)在人类卵子和种植前胚胎的正常表达,探讨Grb10与胚胎发育以及辅助生殖的关系。方法 应用巢式RT-PCR技术检测印迹基因Grb10在人类卵子及种植前胚胎的表达。结果 4细胞、8细胞胚胎、囊胚及卵子中均可测到Grb10基因的表达,2细胞胚胎中未见表达。结论 印迹基因Grb10表达于种植前胚胎,与胚胎发育密切相关。     

β2肾上腺素能受体多态性相关研究进展

随着分子生物学试验技术、方法的发展 ,对 β2肾上腺素能受体 (β2 ＡＲ)的研究取得一定的成果 ,现主要将β2 ＡＲ基因多态性与心血管相关的研究进展作一综述。1　概　　况β2 肾上腺素能受体 (β2 ＡＲ)是与鸟嘌呤核苷蛋白耦联 (Ｇ蛋白耦联 )的 ,肽链至少要反复贯穿膜 7次的受体家族成员之一。β2 ＡＲ在机体多种组织中均有表达 ,包括如心肌细胞、支气管和血管平滑肌细胞、脂肪细胞以及肾脏细胞。通过 β2 ＡＲ激动剂的介导 (如异丙肾上腺素ｉｓｏｐｒｏｔｅｒｅｎｏｌ、肾上腺素 )后 ,表达血管扩张、支气管平滑肌松弛等生理效应。近来对…     

糖皮质激素受体基因多态性和动脉粥样硬化及冠心病的关系

糖皮质激素受体(GR)是糖皮质激素(Gc)发挥重要生理作用的中间物，其功能如同一个转录激活因子。自1968年Munk和Shauburg等人应用放射配体结合分析法首次证实大鼠胸腺细胞中存在GR以来，大量研究证实绝大多数动物或人体细胞内均存在GR，GC与GR结合后，在细胞内调节基因表达，进而产生一系列生物效应。现已发现人糖皮质激素受体(HGR)基因结构的多态性与动脉粥样硬化、冠心病密切相关。     

瘦素受体敲除引起大鼠脑组织小胶质细胞活化

目的 本文利用瘦素受体(LEPR)敲除大鼠,分析瘦素受体基因敲除后大鼠脑中小胶质细胞形态与功能的改变,探究瘦素受体在小胶质细胞中的功能作用.方法 采用RT-PCR,蛋白印迹法,免疫组化法和免疫荧光法,观察大鼠瘦素受体敲除后体内外小胶质细胞活化状态.结果 瘦素受体在小胶质细胞表达,基因敲除可以完全剔除小胶质细胞中LEPR...     

病理妊娠与细胞凋亡

细胞凋亡(apoptosis)是一种由基因控制的细胞自主性死亡方式．又叫细胞程序性死亡(programmed cell death，PCD)。它是由膜受体和细胞浆蛋白所执行的一系列级联反应事件。于1972年由Kerr等首次提出这个概念。目前人们对凋亡的认识已经达到分子和基因水平，涉及凋亡的分子和基因繁多．调控机制复杂。细胞凋亡与组织器官的发育和机体正常生理活动的维持有关，     

骨形成蛋白的研究进展及其临床意义

骨形成蛋白属于转化生长因子 β(ＴＧＦ β)超家族成员 ,在胚胎发生和发育、组织与细胞的分化和增殖等方面起重要作用。其信号传导依赖于两型受体的存在 ,在受体配体复合物中 ,Ⅱ型受体可磷酸化Ⅰ型受体的ＧＳ区 (富含氨基乙酸、丝氨酸、苏氨酸残基 ) ,从而为后继信号的活化奠定了基础。ＢＭＰＲ ⅠＡ介导生长刺激信号 ,而ＢＭＰＲ ⅠＢ则传递生长抑制信号 ,骨形成蛋白 2在肿瘤细胞的凋亡中具有双向作用。本文综述了骨形成蛋白的研究进展及其在肿瘤治疗中的意义。骨形成蛋白 (ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｉｃｐｒｏｔｅｉｎ ,ＢＭＰ)最初因…     

小鼠腹腔巨噬细胞HDL受体结合特性研究(简讯)

以BA-酶联法研究小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)HDL受体的结合特性。将Mφ培养在96孔塑料板的孔内,加入Biotin共价偶联的HDL_3(不含ApoE),保温3 h后加入Avidin-过氧化物酶复合物后,30min后,形成HDL受体-Biotin-HDL-Avidin-过氧化物酶复合物,加入底物(OPD),便可根据底物颜色的变化情况,于490 nm处比色后,定量研究HDL受体的结合特性。本法简便快速,可检测0.3 ng的结合HDL_3。 研究结果表明,HDL_3与受体结合的Kd=3.1×10~(-8) mol/L,B_(max)=167 ng/mg细胞蛋白。HDL_3中含ApoA-Ⅰ的颗粒与受体结合的Kd=6.99×10~(-8) mol/L,B_(max)=135ng/mg细胞蛋白。HDL_3中含ApoA-Ⅱ的颗粒与HDL受体结合的Kd=1.1×10~(-7)mol/L,B_(max)=50ng/mg细胞蛋白。结果提     

肿瘤放疗敏感性与凋亡的相关研究

诱导细胞凋亡是射线治疗肿瘤的一项重要原理,近年来研究显示,凋亡相关基因(p53、Fas、Bcl-2、毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白)、Ⅰ型生长因子受体家族(表皮生长因子受体、人表皮生长因子受体2)、转化生长因子β、整合素αVβ3等在凋亡过程中发挥重要作用,它们的异常表达可以影响肿瘤细胞放疗敏感性。通过各种方式调节上述基因的表达,改变细胞凋亡水平,可以减少放疗抗拒、增加放疗敏感性。     

凋亡抑制因子—Survivin最新研究进展

Survivin是IAP(凋亡抑制蛋白 )家族的最新成员 ,是 1997年耶鲁大学的AltieriDC[1] 等利用效应细胞蛋白酶受体 - 1(effectorcellproteasereceptor 1,EPR 1)cDNA在人类基因组库中筛选分离出来的。由于对凋亡抑制基因的深入研究已成为分子肿瘤学的一个热点 ,且细胞凋亡抑制与恶性     

Notch信号通路在肝癌相关疾病中的研究进展

<正>Notch信号通路是细胞间一条进化保守的通路，由notch受体(notch1-4)、配体(Jag1、Jag2、Deltalike 1(Dll1)、Deltalike 3(Dll3)和 Deltalike 4(Dll4))、细胞内效应分子、DNA结合蛋白及notch的调节分子等成分组成，决定细胞命运、参与胚胎和组织发育、组织功能及修复等生物学过程^[1]。     

HA20-Iys10在大肠埃希菌中的融合表达纯化和凝胶阻滞试验

目的表达和纯化流感病毒血凝素HA2氨基末端20个氨基酸与10个赖氨酸的融合蛋白HA20-Iys10，并观察其与质粒结合的能力。方法用PCR方法构建流感病毒血凝素HA2氨基末端20个氨基酸与10个赖氨酸的融合基因HA20-Iys10，并克隆于pET32a( )原核表达载体。将重组表达质粒pET-HA-K转化大肠埃希菌BL21（DE3)，当A(Abs)600nm达到0．6时，加入终浓度为1mmol／L IPTG诱导目的蛋白的表达。表达产物用亲和层析一步法进行纯化，然后用凝胶阻滞试验观察重组蛋白结合质粒的能力。结果IPTG诱导后可获得相对分子质量约为27000的目的蛋白，表达蛋白以可溶形式存在，占菌体蛋白20％以上。表达菌超声后，表达产物经亲和层析一步纯化后可获得纯度达85％以上目的蛋白。凝胶阻滞试验发现，纯化的重组蛋白在一定条件下可以与质粒结合，使质粒的迁移率明显改变。结论融合蛋白HA20-Iys10有望用于受体介导基因转移，以提高基因转移的效率。     

人表皮角质形成细胞Toll样受体表达

目的 研究人表皮角质形成细胞Toll样受体表达谱.方法 培养人永生化角质形成细胞系HaCaT细胞和正常人表皮角质形成细胞(NHEK),采用分散酶分离表皮.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测10种Toll样受体mRNA表达,流式细胞仪检测HaCaT细胞和NHEK表面Toll样受体2和4蛋白的表达.结果 HaCaT细胞、NHEK以及分离的表皮均有全部10种Toll样受体mRNA表达,其表达强弱各不相同.流式细胞仪检测显示HaCaT细胞和NHEK表面有Toll样受体4蛋白的表达,而Toll样受体2无明显表达.结论 人表皮角质形成细胞中有Toll样受体1～10 mRNA的组成性表达.     

INK4系列抑癌基因(p16、p15、p18、p19)在白血病研究进展

细胞周期与细胞癌变的关系是近年来研究的热门课题之一。细胞周期是细胞生命活动的基本过程，正常情况下，细胞在周期时相变迁中进入增殖、分化、衰老和死亡等生理状态。如果在周期调控异常，细胞将进入病理状态。参与细胞周期调控的因子主要有：细胞周期蛋白(cyclin)、细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase，CDK)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(cyclin-dependent kinase inhibitor，CKI)。     

弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中IP-10及受体CXCR3表达与细胞增殖、侵袭、耐药蛋白表达的相关性

目的:研究弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)病人组织中重组人干扰素诱导蛋白-10(IP-10)及受体CXC亚族趋化因子受体3(CXCR3)的表达及与细胞增殖、侵袭、耐药蛋白表达的相关性.方法:选取60例DLBCL病人资料,30例反应性淋巴结增生病人为对照组,比较2组IP-10、CXCR3、细胞增殖指标Ki67、增殖细胞...     

基质细胞衍生因子-1/受体生物轴相互作用的研究进展

<正>趋化因子又称趋化性细胞因子,是一类能趋化白细胞定向移动的小分子分泌蛋白。其受体是GTP-蛋白偶联的跨膜受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)。基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)归属于A类趋化因子,也叫趋化因子配体12(CXC chemokine ligand-12,CXCL12),是一种小分子量(8~10Kd)细胞因