铁皮石斛试管苗快速生长与栽培研究及多糖含量测定

铁皮石斛（ＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｃａｎｄｉｄｕｍＷａｌｌ．ｅｘＬｉｎｄｌ）是一种名贵的中草药,具有润喉消毒、生律益胃、清热养阴等功效,其主要成分石斛多糖具有增加机体免疫力等功能,铁皮石斛被誉为石斛的上品。由于铁皮石斛自然繁殖力很低,自然资源日趋枯竭,国内许多科研人员进行铁皮石斛试管苗的研究［１～３］。我们对铁皮石斛进行了快速繁殖和栽培研究,并根据文献资料［４］,对铁皮石斛栽培苗与原药材进行多糖含量比较。１　材料１．１　植物激素对铁皮石斛试管苗生长的影响试验　选用原球茎分化得到的小苗,苗高约０．５ｃ…     

铁皮石斛试管培养物多糖含量测定

目的:比较铁皮石斛试管培养物与原药材的多糖含量.方法:用比色法测定石斛多糖的含量.结果:铁皮石斛原药材含多糖量最高,其次是原球茎和试管苗.结论:铁皮石斛原球茎多糖含量比试管苗多糖含量高.     

铁皮石斛多糖的研究

 目的 研究铁皮石斛多糖DT2,DT3的化学结构。方法 运用糖组成分析、甲基化分析及NMR等方法确定多糖的结构。结果 DT2,DT3的数均分子量分别为7.4×10⁵,5.4×10⁵,主要含有葡萄糖、半乳糖、木糖及少量阿拉伯糖和甘露糖,摩尔比分别为5.9:1.0:1.0:0.8:0.5和7.9:1.3:1.0:0.5:0.7。结论 这两个多糖为首次从铁皮石斛中分离得到。     

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎多糖含量的影响

目的：研究MF24真菌诱导子对铁皮石斛原球茎多糖含量的影响。方法 用不同方法制备的MF24真菌诱导子,以不同的剂量,在铁皮石斛原球茎生长的不同时间加入,并继续培养不同时间,观察诱导子对原球茎多糖含量的影响。结果 将MF24液体发酵的菌丝体作为诱导子（方法4）,以250mL·L-1（诱导子·培养基-1）的剂量（高剂量）加入培养基时, 铁皮石斛原球茎多糖含量最高（5.63%）,与对照（3.16%）相比提高了78.2%。在原球茎培养的第14d,以高剂量加入方法4制备的诱导子,继续培养2d,获得的多糖含量最高（5.92%）,与平均值（4.59%）相比提高了29.0%。结论：在铁皮石斛原球茎培养的后期加入MF24液体发酵菌丝体制备的诱导子,有利于提高原球茎的多糖含量。     

铁皮石斛氨基酸组分分析

石斛是一种名贵中药,全株供药用,滋阴、益胃、生津止渴、强壮及退低烧等功效,而“霍山石斛”向来被视为石斛中的珍品,近年的研究已证实铁皮石斛(Dendrobium candidum)是“霍山石斛”的原植物之一。 关于石斛药用有效成分的研究,半个多世纪以来国内外学者在生物碱方面做了大量的工     

3,5-二硝基水杨酸法测定铁皮石斛中多糖的含量

目的:建立铁皮石斛中多糖的含量测定方法。方法:对3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)测定方法的各影响因素进行考察,确定最佳条件,测定铁皮石斛中的还原糖和水溶性总糖的含量,并计算出多糖的含量。结果:检测波长520nm,显色剂用量6.0mL,沸水浴中保持15min。样品经DNS试剂显色后于520nm处测定吸收度,在此波长处溶液的吸光度与葡萄糖含量呈良好线性关系,线性范围:0.1～0.8mg·mL-1(r=0.9997),加样回收率为98.05%～103.18%。铁皮石斛总多糖含量17.76%～29.19%。结论:经过系统的方法学考察,所建立的方法具有操作简便、稳定、可重复的特点,可用于铁皮石斛药材及其多糖类保健品的质量控制。     

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎多糖含量的影响

目的：研究MF24真菌诱导子对铁皮石斛原球茎多糖含量的影响。方法用不同方法制备的MF24真菌诱导子,以不同的剂量,在铁皮石斛原球茎生长的不同时间加入,并继续培养不同时间,观察诱导子对原球茎多糖含量的影响。结果将MF24液体发酵的菌丝体作为诱导子（方法4）,以250mL·L^-1（诱导子·培养基。）的剂量（高剂量）加入培养基时,铁皮石斛原球茎多糖含量最高（5．63％）,与对照（3．16％）相比提高了78．2％。在原球茎培养的第14d,以高剂量加入方法4制备的诱导子,继续培养2d,获得的多糖含量最高（5．92％）,与平均值（4．59％）相比提高了29．0％。结论：在铁皮石斛原球茎培养的后期加入MF24液体发酵菌丝体制备的诱导子,有利于提高原球茎的多糖含量。     

铁皮石斛快繁及多糖含量测定

目的测定铁皮石斛组培苗的多糖含量。方法对铁皮石斛进行组织培养,用苯酚-硫酸法测定铁皮石斛组培苗的多糖含量。结果铁皮石斛组培苗的多糖含量为25.09%。结论铁皮石斛组培苗的多糖含量达到2010版《中华人民共和国药典》的规定标准,具有一定的药用价值。     

铁皮石斛原球茎多糖的研究

 目的 研究铁皮石斛原球茎多糖的理化性质。方法 经过水提醇沉、脱蛋白和透析等步骤获得铁皮石斛粗多糖（CDO）和原球茎粗多糖（CDOP）;CDOP经过纤维素DE-52和葡聚糖凝胶Sephadex G-200柱层析获得6个均一多糖;用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定均一多糖的纯度及相对分子质量;用气相色谱法（GC）分析粗多糖和均一多糖的单糖组成;用高碘酸氧化-Smith降解反应研究均一多糖的一级结构。结果 CDO主要由甘露糖和葡萄糖组成,物质的量比为4.29∶1.00;CDOP主要由半乳糖、阿拉伯糖和葡萄糖组成,物质的量比为2.80∶1.00∶0.61。从CDOP中获得了6个质量均一的多糖,分别为DOPW-1（78×103）、DOPW-2（37×103）、DOPS1-1（287×103）、DOPS1-2（351×103）、DOPS1-3（335×103）和DOPS1-4（171×103）;它们的单糖组成及物质的量比等特点与DOP的相同;各均一多糖分子中的1→3糖苷键均主要由半乳糖组成,还含有阿拉伯糖、葡萄糖和鼠李糖;除DOPS1-4外,各均一多糖的一级结构中均不存在1→4糖苷键。结论 这6个均一多糖为首次从铁皮石斛原球茎中得到。     

“永生源”铁皮石斛中多糖含量测定方法的比较研究

目的：筛选铁皮石斛中多糖含量测定的最佳方法。方法：分别采用苯酚-浓硫酸比色法和3,5-二硝基水杨酸比色法（DNS 法）测定铁皮石斛中多糖的含量。结果：苯酚-浓硫酸法测定铁皮石斛中多糖含量偏高。结论：DNS 法较为适合铁皮石斛中多糖含量测定,且所建立的方法操作简便、稳定、可重复,可用于铁皮石斛药材及其多糖类保健品的质量控制。     

我国近5年铁皮石斛多糖研究概况

铁皮石斛是我国传统的名贵中药,其药用价值备受历代医者推崇,享有救命仙草的美称.现代药理研究表明铁皮石斛多糖具有广泛的生物活性,故成为了现代的研究热点,近几年对其研究特别活跃,相关的研究成果报道也增加很快.查阅最近5年国内关于铁皮石斛多糖的文献资料,并对这些文献资料进行整理、分析和归纳,系统地总结了国内近5年关于铁皮...     

铁皮石斛附生树种对多糖含量的影响

为了揭示附生树种对铁皮石斛多糖含量的影响,通过采集野外与设施地不同树种上附生的铁皮石斛,并用苯酚-硫酸法测定铁皮石斛多糖含量。结果表明,不同附生树种铁皮石斛多糖含量差异极显著,但多糖含量与附生树种树皮形态、树皮中的营养相关性不显著,而与附生树种上铁皮石斛接受的光强有关。树种通过对光照调控的生物特性对其附生的铁皮石斛多糖含量产生的影响。     

超声法提取铁皮石斛多糖工艺的研究

目的:探索铁皮石斛多糖的超声波提取工艺条件.方法:考察提取温度、固液比、提取时间和超声频率4个因素对铁皮石斛多糖提取得率的影响.在单因素实验的基础上,通过正交试验优化提取工艺.结果:综合确定的优化提取工艺条件为:1∶ 30的料液比,50℃超声水浴,45 kHz超声频率,提取1.5 h,在此条件下铁皮石斛多糖的平均提取得率为15.3%,结论:超声提取法的多糖得率大于常规水提法,更加高效.     

声波刺激对铁皮石斛组培苗多糖含量的影响

目的:测定特定的声波刺激对铁皮石斛组培苗多糖含量的影响程度。方法:以苯酚-硫酸比色法测定多糖的含量。结果:连续刺激24天后多糖含量明显高于对照组。结论:特定的声波刺激可以明显地促进铁皮石斛多糖的合成,对石斛多糖代谢途径有显著的影响。     

正交实验法优化铁皮石斛多糖的提取工艺

目的 建立铁皮石斛多糖的提取工艺.方法 通过单因素实验及正交实验研究料液比、提取温度、提取时间、提取次数对铁皮石斛多糖提取率的影响,采用DNS法测定其多糖的含量.结果 铁皮石斛多糖提取最佳工艺条件为料液比1∶40,浸提温度70℃,浸提时间2h,浸提2次.结论 该工艺简单、合理,多糖提取率高.     

铁皮石斛多糖提取工艺及脱蛋白方法研究

目的:考察铁皮石斛多糖最佳提取工艺及脱蛋白方法。方法:采用单因素考察和正交试验研究铁皮石斛多糖的最佳提取工艺,并比较盐酸法和三氯乙酸法脱蛋白工艺。结果:铁皮石斛多糖的最佳提取条件为:温度70℃、料液比1∶40、提取时间4 h、提取次数1次,各因素的影响顺序为:温度>时间>提取次数>料液比,盐酸法在p H=3时蛋白脱除率效果最佳。结论:优化的提取工艺稳定可行,铁皮石斛粗多糖的得率可以达到4.67%,盐酸法p H=3时脱蛋白,多糖含量高,更适合于实际生产。     

铁皮石斛水溶性多糖含量的动态研究

目的研究铁皮石斛不同采收期和不同生长期水溶性多糖的含量变化规律,以期确定最佳采收期。方法采用3,5-二硝基水杨酸比色法,以葡萄糖为对照测定。结果水溶性多糖含量,冬季采收含量较高,开花前含量最高;开花期,呈现明显的下降趋势;花期后,又开始回升。随着生长期的延长,呈现先升高后下降的趋势。结论以生长期在1～2年间,并在开花前的1～3个月,应为最佳采收期。     

喀斯特地区树栽与棚栽铁皮石斛中多糖重金属含量比较

目的：分析贵州喀斯特地区仿野生活树附生栽培与大棚栽培铁皮石斛中多糖、5种重金属[铅（Pb）、镉（Cd）、砷（As）、铜（Cu）、汞（Hg）]含量差异及相关性。探讨国内主产区铁皮石斛中4种重金属（Pb、Cd、As、Cu）的分布特征,为铁皮石斛品质评价及食用安全性提供参考。方法：采用苯酚-硫酸法测定铁皮石斛中多糖含量;采用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定Pb、Cd、As、Cu含量;采用原子荧光光谱法测定Hg含量。查阅国内近10年有关ICP-MS测定铁皮石斛中4种重金属含量的文献报道,对文献中4种重金属含量数据进行整理、分析和归纳。采用SPSS 26.0对数据进行相关性和差异性统计分析。结果：研究区内树栽和棚栽铁皮石斛中多糖质量分数均大于25%,棚栽铁皮石斛中多糖含量显著高于树栽铁皮石斛;棚栽铁皮石斛中Cu含量与多糖含量呈显著正相关;树栽铁皮石斛中Cd含量高于棚栽铁皮石斛。研究区内铁皮石斛中5种重金属及全国主产区铁皮石斛中4种重金属平均含量均在安全限量范围内。结论：活树附生栽培与大棚栽培铁皮石斛中多糖和Cd含量差异有统计学意义。重金属对铁皮石斛的污染风险较低。     

正交实验优选铁皮石斛多糖提取工艺的研究

目的:通过对铁皮石斛多糖提取方法的实验研究,寻找效果较好的提取条件,为铁皮石斛的开发研究提供参考资料。方法:以水为提取剂,在不同微波功率条件、固液比、浸提时间及提取剂的pH值等条件下进行正交实验,来确定各因素不同水平对石斛多糖提取量的影响。结果:在微波功率400W,pH值为8,微波作用时间6m in;1:50的条件下多糖提取量为17.48%。结论:微波辅助提取铁皮石斛多糖的方法得到了较高的多糖提取率。     

响应曲面法优化铁皮石斛多糖提取条件

目的：应用响应曲面法优化铁皮石斛多糖提取的最佳工艺条件,为应用于生产提供参考。方法：在单因素试验的基础上,采用响应曲面法的中心组合设计,考察分析提取温度、提取时间、提取次数、液料比4个主要因素对石斛多糖提取率的影响,对铁皮石斛多糖的提取工艺参数进行优化分析。结果：铁皮石斛多糖提取的最优条件为：提取温度为100℃、提取时间为2．5h、料液比1：17．2（m／V）、提取次数为3次。在此条件下,理论计算提取率达到51．12％,实测提取率为51．08％,与模型高度拟合。结论：该工艺便捷、快速、易操作、得率较高,可用于铁皮石斛多糖的提取。