骨电镜标本微波快速脱钙终点的测定

骨电镜标本微波快速脱钙终点的测定杨传红，赖晃文，唐庚云，姜秀英广州军区广州总医院医学实验科，广州市，５１００１０关键词骨；脱钙，微波；电子显微镜目前骨常规脱钙方法时间太长，超微结构保存不良，不利于临床病理的快速诊断。我们用微波（Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ，Ｍ...     

EDTA微波快速脱钙法

1材料和方法1．1材料固定后松质骨修成0．7cm×0．5cm×0．2cm；惠而浦微波炉AVM600型，功率900W，分七档；5种脱钙液：中性EDTA、PlankRycho液、10％硝酸．水溶液、Thoma’s液、Bouin＇s液。1．2方法微波设定在二档（160w），辐射smin，测量脱钙液温度，间隙Zmin，重复辐射3～4次后，以针顺利刺入骨组织为脱钙的标准。酸性脱钙液脱钙后，用5％硫酸钠水溶液碱化处理，微波辐射二档smin。中性EDTA脱钙无需碱化．常规石蜡制片，HE染色和免疫组化染色。2结果和讨论2．1经EDTA微波辐射脱钙的骨组织，石蜡切片完整，染色鲜艳，组织细胞…     

光波-微波辐射技术在骨组织快速脱钙与免疫组化染色中的应用

目的探讨光波．微波辐射技术在骨组织快速脱钙与免疫组化染色中的作用。方法用8％硝酸分别在单纯微波、单纯光波、光波,微波组合Ⅰ和光波-微波组合Ⅱ的条件下脱钙，同时以室温脱钙作为对照；应用光波-微波-LSAB免疫组织化学染色技术检测不同脱钙条件下ANP、CD31、CD34、5-HT、S-100、NF、GFAP和Vimentin的表达。结果8％硝酸室温脱钙时间最长，光波．微波组合脱钙时间最短；微波组、光波组、光波．微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色均明显比对照组好；光波．微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色均明显优于单纯微波、单纯光波法；光波-微波组合Ⅱ-LSAB免疫组织化学染色技术比常规免疫组织化学染色所用时间短、染色效果好。结论光波．微波辐射脱钙及免疫组化染色所用的时间明显缩短，染色效果好。     

应用微波辐射脱钙技术改善骨组织免疫组化染色效果

应用微波辐射EDTA脱钙技术，革新传统的强酸脱钙法，缩短了脱钙时间，达到了完全保存骨组织形态结构及抗原物质的传统方法难以达到目的，增哟了免疫组化染色效果。     

3种脱钙液对牙体牙周联合切片H-E染色效果的对比

目的对不同脱钙液在牙体牙周联合组织HE染色切片的效果进行比较，并初步探讨了乙二胺四乙酸二钠（EDTA）-微波技术在牙体牙周联合组织切片脱钙过程中的应用。方法取成年健康Beagle犬下颌骨牙体牙周联合组织做为标本，采用10％硝酸溶液、Krinstensen’S液、EDTA-微波辐射3种不同的脱钙方法进行脱钙，在完成组织脱钙后进行H—E染色，并在显微镜下观察组织结构及染色效果。结果EDTA-微波辐射完成组织脱钙约需53h，H—E染色效果良好，牙髓细胞、成牙本质细胞、牙周膜细胞和牙本质小管组织结构清晰；Krinstens—en’s液完成组织脱钙约需1500h，H—E染色效果较好，组织结构较清晰；10％硝酸溶液完成组织脱钙约需360h，H—E染色对比度差，组织结构模糊不清。结论应用EDTA-微波辐射技术能在相对较短的时间内完成牙体牙周联合组织的脱钙，并在H—E染色切片中较好地保存了牙体牙周组织的结构。     

EDTA微波脱钙骨的免疫组化染色

目的：改进传统骨组织的脱钙方法，改善免疫组化效果。方法：采用20％EDTA微波脱钙法对兔骨组织进行脱钙。结果：EDTA微波脱钙法能够更好的保持骨组织结构和组织中的抗原物质，得到更好的免疫组化切片。结论：EDTA微波脱钙法优于传统脱钙法，更适合于骨组织脱钙和免疫组化制片。     

一种适用于微波内的快速脱钙液—HAS液

为缩短病变骨及钙化标本的切片时间，我们应用盐酸、醋酸和水杨酸制成混合脱钙剂（ＨＡＳ）用于微波内脱钙，并同传统脱钙剂（５％硝酸，Ｊｅｎｋｉｎｓ液）的脱钙作用进行了比较。１材料与方法１．１．１标本采用我院１９９６年１１月～１９９７年１０月手术切除病变骨及...     

甲酸脱钙液加微波辐射对大鼠磨牙及牙槽骨脱钙效果的研究

本文对大鼠牙齿及其依附之上下颌牙槽骨在组织学、组织化学研究中的几种脱钙,方法进行比较。结果表明用微波辐射可大大缩短甲酸脱钙液的脱钙时间,而且对组织的各种成分保存良好。脱钙后可进行各种组织学和组织化学染色。     

胚胎骨骨诱导活性的实验研究

制备人胎骨全脱钙与部分脱钙骨基质明胶（简称ＢＭＧ），并分别做成颗粒（直径０．５～１ｃｍ）和粉末（直径＜２５０μｍ），同时制备少许未脱钙的胎骨颗粒，植入大鼠双侧后肢的股肌陷窝内，猪骨ＢＭＧ作为对照。通过组织学切片来比较各组植入物的诱导成骨活性。结果显示：（１）胎骨ＢＭＧ成骨过程早且量多，免疫排斥反应低；（２）未脱钙的胚胎骨无诱导成骨活性；（３）猪骨ＢＭＧ有一定的成骨能力，但时间较晚，量少，早期有明显的免疫反应；（４）全脱钙和部分脱钙胎骨的诱导成骨活性接近（Ｐ＞０．０５）；（５）粉末脱钙胎骨ＢＭＧ的诱导成骨活性降低；（６）酒精消毒ＢＭＧ效果可行     

改良硝酸脱钙方法的研究及应用

目的探讨低温微波-硝酸快速脱钙方法对骨、牙齿及其他钙化组织的脱钙效果。方法实验组采用＂低温微波-硝酸快速脱钙＂方法脱钙,对照组采用室温（20℃）硝酸脱钙液脱钙,硝酸脱钙液的浓度均为10%。应用HE染色,显微镜下观察染色效果。结果低温微波-硝酸快速脱钙方法与室温（20℃）硝酸脱钙液脱钙比较,前者能得到一张高质量的HE切片。结论低温微波-硝酸快速脱钙能在短时间内获得满意的染色效果。     

"低温微波-硝酸快速脱钙"技术研究及应用

目的 探讨低温微波-硝酸快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法 根据实验条件分为4组：①低温(10℃)微波硝酸；②室温(20℃)微波硝酸；③室温(20℃)硝酸，硝酸脱钙液的浓度分别是5％、8％、10％和13％；④10％乙烯二胺四乙酸钠(EDTA)脱钙液。应用免疫组织化学LSAB染色，光镜观察免疫组化染色结果。结果 以硝酸作为脱钙剂时，①组和④组的阳性细胞相近，均显著高于②、③组，经8％和10％硝酸脱钙的免疫组化染色阳性细胞明显多于5％和13％的硝酸。低温微波硝酸快速脱钙技术能显著缩短脱钙时间。结论 低温微波．硝酸快速脱钙能在短时间内获得满意的染色效果。     

室温、恒温与微波骨组织脱钙实验方法的比较

为了探求简单、便捷、快速、有效的骨组织脱钙法,比较室温、恒温与微波三种脱钙实验方法的效果,选择同一新西兰兔双侧桡骨,选取A、B、C 3种脱钙液,分别于室温、37℃恒温水浴、10%(相对微波发射能量)微波、30%(相对微温发射能量)微波条件下进行脱钙,两种微波脱钙温控在37℃。每小时更换一次脱钙液,分别收集脱钙液,至脱钙终点,将每个脱钙骨标本的全部脱钙液,用原子吸收分光光度计测量钙脱出量,并将脱钙骨标本常规处理切片进行光镜观察。比较3种脱钙液分别在4种脱钙条件下,脱钙骨标本到达脱钙终点的时间、钙脱出量、光镜观片效果。结果,A、B、C 3种脱钙液分别在4种脱钙条件下,①到达终点的时间:室温组与恒温、10%微波、30%微波组之间的差异有统计学意义(P<0.05);恒温组、10%微波、30%微波组间的差异无统计学意义(P>0.05);②终点钙脱出量:用原子分光光度计测得钙脱出量为56.43～66.51mg/100mg标本骨,每种脱钙液室温组、恒温组、10%微波、30%微波组间进行比较无统计学意义(P>0.05)。恒温脱钙法与微波脱钙法到达脱钙终点的时间是室温脱钙法的1/12～1/6;三种脱钙法脱钙效果无差异,脱钙后切片光镜观片三者清晰度均满意,但恒温脱钙法较微波脱钙法操作简单,设备要求不高。     

骨髓活检组织的免疫组织化学和核酸原位杂交研究

目的：建立既适用于常规病理检验又可进行免疫组化及核酸原位杂交研究的骨髓活组织检查方法。方法：活检标本１０例，用ＬｏｗｙＦＭＡ液固定、脱钙，石蜡包埋。切片行常规染色、ＴＧＦ－β１和ＭＩＰ－１α免疫组化及地高辛标记ＤＮＡ探针ｍＲＮＡ原位杂交。结果：ＨＥ染色、鼠源性单抗和兔源性多抗的免疫组化及不同长度探针的ｍＲＮＡ析位杂交均取得理想的效果。结论：ＬｏｗｙＦＭＡ液固定、脱钙后石蜡包埋的骨髓活检组织不仅能满     

临床病理检验中不同骨组织脱钙液效果的比较

目的 对两种脱钙方法进行比较,获得简单、便捷、快速适用于临床病理制片的脱钙方法. 方法 观察两种脱钙液:5％硝酸脱钙液(硝酸5ml加入95 ml蒸馏水)和快速脱钙液(含36％-38％盐酸8ml、冰醋酸5ml、水杨酸10 g、蒸馏水87ml),在常温及微波条件下对骨组织脱钙及HE切片染色效果的影响. 结果 常温条件下,5％硝酸使组织结构有些破坏,染色效果不佳.微波条件下,使用快速脱钙液对骨组织结构损伤小,染色效果佳,适合于临床病理的骨组织制片. 结论 标本经快速脱钙液处理后,其切片质量大大提高并远远优于普通脱钙液.     

微波照射电镜标本制作

微波照射电镜标本制作尤立平，宫泽七郎（中医皮科）１仪器和方法１．１仪器制作微波（ｍｉｃｒｏｗａｖｅ，ＭＷ）照射电镜标本用日本电子（株）ＮＩＳＳＨＩＮ－ＥＭＭＷＦ２型微波装置，功率５００Ｗ，照射时间和休止时间可随意设定，可连续照射或间歇照射。其内安装有...     

骨组织切片染色方法的改良

骨组织检查可分为骨组织切片法和骨组织磨片法两种，磨片法因组织厚薄不均匀，并对骨的各层结构有损坏而应用较少，因此，常常使用１０％硝酸酒精脱钙和石蜡切片ＨＥ染色，但结构显示受一定限制。笔者用５％硝酸甲醛脱钙后Ｍａｌｌｏｒｙ染色获得良好效果，现报告如下。１　材料和方法新鲜羊骨一段锯成２ｃｍ长，置于５０～６０℃水浴４～５天使骨组织上附着软组织脱落干净，流水冲洗２４小时，凉干，用５％硝酸甲醛脱钙２～３天后再放入稀铵水１小时（隔半小时换一次），流水冲洗２４小时，直至大头针易刺进。常规脱水、透明、包埋、切片，…     

辐射凝固治疗血管瘤16例

辐射凝固治疗血管瘤１６例银川市口腔医院皮肤科刘涛血管瘤治疗方法甚多，但疗效不一。我科应用多功能微波治疗仪，辐射凝固治疗血管瘤１６例，均取得满意疗效。１资料和方法１．１材料：应用中国医用激光培训中心提供的多功能微波治疗仪，采用频率为２４６０±５０ＭＨ－...     

不同脱钙条件对骨组织免疫组织化学染色抗原性的影响

目的:探讨不同脱钙条件对骨组织免疫组织化学染色抗原活性的影响。方法:用8%硝酸分别在冰箱(4℃)、室温(2 0℃)、温箱(37℃)、温箱(6 0℃)、超声波、微波、光波、光波/微波组合Ⅰ组、光波/微波组合Ⅱ组条件下脱钙,应用LSAB免疫组织化学染色技术检测ANP、5 HT、S 1 0 0、NF、GFAP、CD3 1 、CD3 4 和Vimentin的表达,并对其染色结果进行图像分析和统计学处理。结果:8%硝酸脱钙从4℃、2 0℃、37℃到6 0℃随着脱钙液温度的温度升高,脱钙时间逐渐缩短,光波、微波和超声波中脱钙所用的时间比2 0℃、37℃、6 0℃明显缩短,比光波/微波组合Ⅰ、Ⅱ中所用的时间长。光波/微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色结果均明显比2 0℃、37℃、6 0℃、微波组、光波组和超声波组的好(P <0 .0 1 ) ,而光波/微波组合Ⅰ组和Ⅱ组之间,微波组、光波组和超声波组之间的免疫组化染色结果均无明显差异(P >0 .0 5 )。结论:光波/微波组合Ⅱ 8%硝酸脱钙所用时间最短,免疫组化染色效果最好。     

骨组织脱钙过程中脱钙量的观察

目的观察3种脱钙液在脱钙过程中不同时段和终点钙的脱出量。方法取6月龄健康新西兰兔双侧桡骨,用3种脱钙液分别在室温和微波条件下进行脱钙,每小时末更换一次脱钙液、用电子天平称重,分别收集脱钙液,用原子分光光度仪分别测定钙含量。结果3种脱钙液在室温和微波脱钙过程中,钙累计脱出率逐渐增加,3小时后钙脱出率减小,骨脱钙后的重量比脱钙前减少40%-48%;不同时间段脱钙率:第1小时脱钙率最高,随着时间的增加每小时脱钙率逐渐减少,接近终点时曲线变平稳。终点钙脱出量为54-69mg/100mg标本骨,组间比较无显著性差异(P>0.05)。结论脱钙过程中钙脱出量呈规律性变化:随着脱钙时间的延长逐渐增加,与时间呈正相关;第1小时钙脱出率最高,随后每小时钙脱出率逐渐较少。     

脱钙液加微波技术在骨组织脱钙中的应用

骨和含钙组织脱钙法是影响临床病理检查时间和效果的一个较为重要的环节。以前种种脱钙技术时间均较长，组织细胞结构很难保持完整清晰，从而影响病理学的诊断和研究，也难以保证在规定的时间发出报告，直接影响了患者的治疗。随着微波技术在病理检验中的普遍应用，我们在工作中尝试使用微波技术对骨和含钙组织进行脱钙处理。为此，我们做了这方面的实验。