血管紧张素Ⅱ对心肌成纤维细胞增殖的影响及机制研究

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在体外对自发性高血压以及正常血压两种乳鼠左心室成纤维细胞(CFB)的促生长作用并通过应用AngⅡ受体I型(ATlR)抑制剂--洛沙坦以探讨AngⅡ的作用途径。方法酶解法制备乳鼠左心室CFB,分为(1)对照组(不加任何药物);(2)不同浓度AngⅡ(10-10～10-6)组(3)10-6M洛沙坦组;(4)10-8MAngⅡ+不同浓度洛沙坦(10-8～10-6M)组。应用3H-TdR、3H-Leu掺入法测定细胞DNA和蛋白质合成率。结果AngⅡ使CFB3H-TdR、aH-Leu掺入率增加,呈剂量依赖性。洛沙坦可抑制AngⅡ的作用。结论AngⅡ在体外具有经细胞表面的AT1R促进CFB增殖的作用。     

双苯氟嗪对血管紧张素Ⅱ诱导新生大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响及其机制研究

目的研究双苯氟嗪(d ipfluzine,D ip)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞(card iac fibrob lasts,CFB)增殖和胶原合成的影响,并探讨其抑制心肌纤维化的机制。方法用消化法培养新生SD大鼠CFB,建立AngⅡ诱导新生大鼠CFB纤维化模型。采用MTT法检测D ip对CFB增殖的影响;羟脯氨酸测定检测CFB胶原含量;流式细胞分析仪技术检测细胞周期及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达;RT-PCR检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白和转化生长因子β1(TGF-β1)的基因表达;免疫组织化学染色方法,观察心肌成纤维细胞经典型蛋白激酶Cα亚型(cPKCα)和细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1)蛋白的表达。结果①在一定浓度范围内,D ip能明显抑制AngⅡ诱导CFB的增殖和胶原合成(P<0.05或P<0.01)。②CFB细胞G0/G1期百分率随D ip浓度增加而增加,S期、G2/M期百分率和增殖指数随D ip浓度增加而减少,与AngⅡ组相比差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。③D ip能降低PCNA蛋白表达,与AngⅡ组相比差异有显著性(P<0.01)。④D ip能够明显降低Ⅰ型、Ⅲ型胶原和TGF-β1mRNA的表达(P<0.05或P<0.01)。⑤免疫组化结果显示D ip(10、100μmol.L-1)组ERK1和cPKCα阳性表达低于AngⅡ组(P<0.05或P<0.01)。结论D ip通过抑制AngⅡ诱导的CFB增殖和胶原的增加而起到了抗心肌纤维化的作用,其抗纤维化作用与其降低TGF-β1基因表达以及抑制cPKCα、ERK1通路有关。     

雷公藤甲素抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的研究

目的：探讨雷公藤甲素对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞（cardi-acfibroblasts,CFb）增殖及α1（Ⅰ）型前胶原合成的影响。方法：建立AngⅡ诱导新生大鼠心肌纤维化细胞模型。采用四氮唑蓝（MTT）比色法测定细胞增殖;分别采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot印迹法检测大鼠心肌成纤维细胞α1（Ⅰ）型前胶原mRNA及蛋白表达。结果：雷公藤甲素以剂量依赖性方式抑制心肌成纤维细胞增殖和α1（Ⅰ）型前胶原合成。结论：雷公藤甲素可以通过抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖和α1（Ⅰ）型前胶原合成从而抑制心肌纤维化。     

血管紧张素Ⅱ介导心肌成纤维细胞增殖的信号转导

目的探讨钙调神经磷酸酶（ＣａＮ）依赖的信号通路在血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）刺激的乳鼠心肌成纤维细胞（ＦＢｓ）增殖中的作用。方法以培养的ＦＢｓ为模型,用ＡｎｇⅡ刺激ＦＢｓ外Ｃａ２＋入流,环抱素Ａ（ＣｓＡ）阻断ＣａＮ信号通路,维拉帕米（Ｖｅｒ）阻断ＦＢｓ钙通道,检测ＦＢｓ　ＣａＮ、丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）、蛋白激酶 Ｃ（ＰＫＣ）活性,用［３Ｈ］－亮氨酸及［３Ｈ］－胸腺嘧啶参入量作为反应 ＦＢｓ增殖的指标。结果Ａｕｇ Ⅱ刺激组ＦＢｓ蛋白核酸合成速率明显增高,与对照组相比差异有显著性（Ｐ＜０．０１）;ＣｓＡ及Ｖｅｒ能明显抑制Ａｎｇ Ⅱ介导的ＦＢｓ蛋白核酸合成速率增高,与ＡｎｇⅡ血刺激组相比差异有显著性（ Ｐ＜ ０． ０１）。同时发现 Ａｎｇ Ⅱ刺激组 ＣａＮ、ＰＫＣ活性与对照 ＦＢｓ相比差异有显著性（ Ｐ＜ ０． ０５或 Ｐ＜０．０１）。 ＣｓＡ和Ｖｅｒ抑制ＡｎｇⅡ介导的 ＦＢｓ ＣａＮ活性增高,Ｖｅｒ抑制Ａｎｇ Ⅱ介导的ＦＢｓＰＫＣ活性的增高。结论 ＣａＮ信号通路在ＡｎｇⅡ刺激的ＦＢｓ增殖中起重要作用,但ＣａＮ信号通路不是ＡｎｇⅡ介导ＦＢｓ的增殖的唯一信号通路,以ＭＡＰＫ为核心的信号通路亦参与了ＡｎｇⅡ刺激的ＦＢｓ增殖。     

硫化氢对心肌成纤维细胞增殖的抑制作用及机制研究

目的 研究硫化氢(H₂S)对心肌成纤维细胞增殖的抑制作用及机制。方法 取新生SD雄性大鼠心脏,采用差速离心法分离心肌成纤维细胞。以硫氢化钠作为H₂S的供体,检测H₂S对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌成纤维细胞增殖、羟脯氨酸含量以及去乙酰化酶3(SIRT3)蛋白表达的影响。用干扰RNA技术下调SIRT3表达后,观察H₂S对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖、羟脯氨酸的含量以及Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和视神经萎缩蛋白1(OPA1)表达的影响。结果 H₂S可抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖,降低羟脯氨酸含量,增强SIRT3蛋白表达(P<0.05)。用干扰RNA技术下调SIRT3表达后,H₂S对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖抑制作用、羟脯氨酸含量降低作用均被抑制,且H₂S降低ColⅠ、ColⅢ表达的作用和增强OPA1表达的作用也明显减弱。结论 H₂S依赖增加SIRT3表达来抑制AngⅡ诱导的...     

熊果酸对血管紧张肽Ⅱ诱导心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

［摘要］目的观察熊果酸对血管紧张肽II（ Ang Ⅱ）诱导心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的影响。方法培养新生大鼠心肌成纤维细胞,噻唑蓝（MTT）法测定细胞增殖,羟脯氨酸法检测胶原含量,［3H］ 脯氨酸掺入法测定胶原合成速率,免疫荧光法观察成纤维细胞形态学改变。Western blot测定还原型辅酶II（NADPH）亚单位p47 phox蛋白表达。结果Ang Ⅱ能够明显上调心肌成纤维细胞增殖、胶原含量、胶原合成速率及p47 phox表达。经熊果酸处理后,以上指标均明显下调。结论熊果酸能减轻Ang Ⅱ诱导心肌成纤维细胞增殖、胶原分泌及合成速率,机制与抑制p47 phox通路有关。     

西红花酸对心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的:探讨西红花酸(crocetin)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFB)增殖和胶原合成的影响及其作用机制。方法:体外培养新生SD大鼠CFB,建立AngⅡ诱导新生大鼠CFB纤维化模型;MTT法检测CFB的增殖;羟脯氨酸测定检测CFB胶原含量;流式细胞分析仪测定细胞周期;实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白、间质胶原酶(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)的基因表达;蛋白免疫印迹(Western Blot)检测细胞P27^kip1(P27)蛋白的表达。结果:(1)在一定浓度范围里,crocetin能抑制AngⅡ引起的CFB增殖和胶原合成,并呈剂量依赖;(2)CFBG0/G1期百分率随crocetin浓度增加而增加,S期、G2/M期百分率和增殖指数随crocetin浓度增加而减少,与AngⅡ组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);(3)Crocetin能明显降低Ⅰ型、Ⅲ型胶原、TIMP1、TGF-β1的表达,提高MMP-2的表达;(4)Crocetin能增加P27蛋白表达。结论:Crocetin通过抑制AngⅡ诱导的CFB增殖和胶原合成起到抗心肌纤维化作用,其机制可能与细胞因子分泌和对基质金属蛋白酶的调节有关。     

高甲状腺激素对大鼠心肌血管紧张素Ⅱ的影响

目的 :研究高甲状腺激素水平下心肌病理改变与心肌血管紧张素Ⅱ的关系。方法 :给大鼠口服甲状腺片 ,平均每只4mg·d-1,连续 6 0d ,观察心肌病理变化 ,检测左心室肌血管紧张素Ⅱ浓度和总含量。结果 :实验组大鼠心肌有明显病理损伤 ;左心室肌血管紧张素Ⅱ浓度和总含量分别为 (170 .6± 33.2 ) pg·(10 0mg) -1、(2 0 85 .3± 175 .1) pg ,显著高于对照组 (130 .2±2 0 .1)pg·(10 0mg) -1、(10 6 7.4± 15 4 .5 )pg(P <0 .0 5 )。结论 :心肌血管紧张素Ⅱ含量升高是高甲状腺激素水平下心肌损伤的原因之一。     

amiloride对自发性高血压大鼠心肌肥厚及血管紧张素Ⅱ的影响

高血压左室肥厚 (ＬＶＨ)时肾素 -血管紧张素系统(ＲＡＳ)发生异常 ,尤其血管紧张素Ⅱ (ＡｎｇⅡ )的升高与ＬＶＨ的发生发展密切相关。以往研究显示 ,自发性高血压大鼠(ＳＨＲ)左室肥厚时Ｎａ+ /Ｈ+ 交换体 (ＮＨＥ)活性增加。ａｍｉｌｏｒｉｄｅ是一种具有Ｎａ+ /Ｈ+ 交换抑制作用的利尿剂 ,在心血管系统中有保护缺血重灌损伤、抗心律失常等作用 ,但对ＳＨＲ心肌肥厚及ＡｎｇⅡ的影响少见报道。本文观察ａｍｉｌｏｒｉｄｅ对ＳＨＲ的ＬＶＨ和ＡｎｇⅡ的影响 ,旨在探讨高血压心肌肥厚的可能机制及防治对策。1　材料与方法1 1　材料　盐酸阿…     

血管紧张素Ⅱ对血管外膜成纤维细胞亚群增殖的影响

<正>血管损伤后发生的管壁结构重塑是血管重建术后再狭窄、动脉粥样硬化等多种心血管疾病发病的共同病理基础。已有研究表明血管外膜并非仅起支撑作用,在血管损伤和高血压中也起重要作用。特别是在某些刺激因子作用下,成纤维细胞表型转化为肌成纤维细胞,表达α-平滑肌肌动蛋白,迁移至内膜下区域和新生内膜中并增殖,同时胶原合成增     

钩藤提取物抑制血管紧张素Ⅱ诱导血管成纤维细胞增殖及胶原合成的研究

目的探讨钩藤碱和异钩藤碱对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管成纤维细胞(VAF)增殖及胶原沉积的抑制效应及相关机制。方法建立AngⅡ诱导VAF增殖模型,通过四甲基偶氮唑盐比色法、扫描电镜技术、流式细胞术、天狼猩红染色法和逆转录聚合酶链反应等观察钩藤碱和异钩藤碱对其增殖活性、细胞形态、细胞周期、细胞凋亡率、细胞c-myc蛋白表达、细胞培养液中羟脯氨酸含量、细胞间胶原蛋白含量、细胞ColⅠmRNA和ColⅢmRNA的影响。结果AngⅡ刺激VAF增殖,钩藤碱和异钩藤碱抑制AngⅡ诱导VAF增殖;在钩藤碱和异钩藤碱作用下VAF处于G0/G1期的细胞数增多、S期的细胞数减少、细胞凋亡率增加、细胞c-myc蛋白表达降低、细胞培养液中羟脯氨酸含量降低、细胞间胶原表达降低、细胞ColⅠmRNA和ColⅢmRNA转录也降低。结论钩藤碱和异钩藤碱对AngⅡ诱导VAF增殖和胶原沉积有抑制效应,部分机制与其阻滞VAF G0/G1期向S期转化、诱导细胞凋亡、下调细胞c-myc蛋白表达和细胞ColⅠmRNA和ColⅢmRNA转录有关。     

血管紧张素Ⅱ致心肌肥大及机制

心肌肥大是一个适应性的生理过程,它可以引起呼吸困难、心绞痛、晕厥、头晕、心悸等症状.无论是血压还是血容量增加都会造成左心室的肥大(LVH),这种肥大是以心脏和血管结构改变以及心肌重建为特征的.左心室肥大过程中细胞的紊乱是心室组织两类主要细胞即心肌细胞和纤维原细胞改变引起的.大部分关于心肌肥大的研究,都常使用培养的新生大鼠心室细胞(NRVMs).在心脏病变过程中,心肌细胞的肥大使心脏变大,同时伴随着单个细胞的增大,使收缩蛋白质如肌球蛋白重链的含量增加,并使诸如编码心钠素(ANF)的胚胎基因等过度表达.     

依普利酮对血管紧张素Ⅱ诱导心脏成纤维细胞增殖的影响

目的：探讨依普利酮（eplerenone,EPL）对血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ）诱导心脏成纤维细胞（cardiac fibroblasts,CFs）增殖的影响。方法：利用Ang Ⅱ刺激CFs建立心肌纤维化的细胞模型,并给予依普利酮、Nrf2抑制剂Brusatol干预,采用CCK-8法检测细胞增殖率,Western blot法检测FN和CTGF、Nrf2和HO-1蛋白表达水平。结果：1 μmol·L^-1 Ang Ⅱ刺激CFs 24 h,细胞增殖率、FN和CTGF蛋白表达显著升高,Nrf2和HO-1蛋白表达显著降低（P<0.05）;给予依普利酮干预后,与Ang Ⅱ组比较,细胞增殖率、FN和CTGF蛋白表达显著降低,Nrf2和HO-1蛋白表达显著上调（P<0.05）;利用Brusatol抑制Nrf2活性,与Ang Ⅱ+EPL组比较,可逆转上述蛋白表达。结论：依普利酮能减轻Ang Ⅱ诱导的心肌纤维化,其可能的机制与激活Nrf2/HO-1信号通路,降低FN和CTGF蛋白表达有关。     

血管紧张素受体拮抗剂对心肌肥厚的防治作用

左室心肌肥厚是引起心血管疾病发生率与死亡率增高的危险因素之一。而血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ，AngⅡ）在心肌肥厚形成中起着重要的作用。AngⅡ受体拮抗剂通过选择性拮抗AngⅡ受体亚型AT1介导的生理效应而具有防治心肌肥厚的作用。本文就其在防治心肌肥厚可能的作用途径进行了综述。同时为寻找新的抗心肌肥厚药物提供了一些思路。     

血管紧张素Ⅱ对肾小管上皮细胞增殖的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对体外培养的肾小管上皮细胞生长的影响。方法用不同浓度(10-6、10-7、10-8、10-9mol/L)AngⅡ刺激体外培养的肾小管上皮细胞,在不同的时间点(24、48、72h)用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖;用不同浓度(10-6、10-7、10-8mol/L)AngⅡ刺激体外培养的肾小管上皮细胞,作用48h后,流式细胞仪检测细胞周期。结果MTT法检测结果显示AngⅡ作用于肾小管上皮细胞后,吸光度(A)值明显增加(P<0.05),10-6mol/LAngⅡ作用后上升最明显(P<0.01),且在48h作用点达到峰值。流式细胞仪结果显示AngⅡ能使肾小管上皮细胞在S期比例增加,DNA合成增加。结论AngⅡ刺激肾小管上皮细胞增殖,48h增殖作用最显著,并在一定范围内呈浓度依赖性。     

血管紧张素转化酶和血管紧张素Ⅱ对低氧促培养的肺内小动脉平滑肌细胞增殖作用的影响

目的：研究局部血管紧张素转化酶及血管紧张素Ⅱ和低氧促进肺动脉平滑肌细胞增殖作用之间的关系。方法：分离培养肺内小动脉平滑肌细胞,测定[^3H]thymidine掺入和细胞计数作为细胞增殖的指标。结果：低氧显著促进培养的肺内小动脉平滑肌细胞增殖,其[^3H]thymidine掺入和细胞计数分别增加166．6％（P＜0．01）和52．0％（P＜0．01）。captopril和losartan预处理可显著抑制低氧对肺内小动脉平滑肌细胞增殖的促进作用,[^3H]thymidine掺入分别被抑制51．3％（P＜0．01）和49．8％（P＜0．01）,细胞计数分别被抑制22．2％（P＜0．01）和17．％（P＜0．01）。而PD－123319基本无明显作用。结论：肺内小动脉平滑肌细胞局部血管紧张素转化酶的过度表达及血管紧张素Ⅱ在低氧促平滑肌细胞增殖中发挥重要作用。     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂研究进展

高血压是一种常见病、多发病,常见的抗高血压药物分为5类（交感神经抑制剂,血管扩张药,利尿降压药,钙拮抗剂,肾素－血管紧张素拮抗剂）。血管紧张素Ⅱ能引起小动脉收缩,使血管阻力增加;调节醛固酮的分泌（释放增加）,使水、钠重吸收增强,血容量上升;引起心输出量增加;使儿茶酚胺睡或,在交感神经末梢则使去甲肾上腺素释放增加,使平肌细胞增生。血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂可以在受体水平对抗血管紧张素Ⅱ的病理生理效应。重点介绍了血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂氯沙坦、缬沙坦、厄贝沙坦、坎地沙坦酯、他素沙坦、依普罗沙坦、替米沙坦的合成。     

氟伐他汀对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨氟伐他汀对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌成纤维细胞（CFs）增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法将CFs随机分为A、B、C、D、E、F、G、H、I、J和K组。A组未给予氟伐他汀和AngⅡ处理;B组用0.1μmol·L^-1 AngⅡ刺激细胞6 h; C、D、E组在0.1μmol·L^-1 AngⅡ刺激细胞6 h后,再分别用0.1,1.0和10.0μmol·L^-1氟伐他汀处理12 h; F组将miR-NC转染至0.1μmol·L^-1 AngⅡ处理6 h后的CFs细胞中;G组将miR-590-5p转染至0.1μmol·L^-1 AngⅡ处理6 h后的CFs细胞中;H、I、J、K组分别将anti-miR-NC、anti-miR-590-5p、pcDNA3.1和pcDNA3.1-STAT3转染至1.0μmol·L^-1氟伐他汀和0.1μmol·L^-1AngⅡ处理12 h后的CFs细胞中。用噻唑蓝法检测细胞增殖,用Transwell法检...     

苦参碱对血管紧张素Ⅱ诱导HFL-I增殖和胶原合成的影响

目的:研究苦参碱(matrine,Mat)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人胚肺成纤维细胞(HFL-I)增殖和胶原合成的影响,探讨其抑制纤维化的机制。方法:以AngⅡ诱导HFL-I为研究对象,不同浓度的Mat作用48 h后,采用四氮唑盐(MTT)法检测Mat对HFL-I增殖的影响;羟脯氨酸测定HFL-I胶原合成量。结果:在一定范围内,苦参碱以浓度依赖性方式抑制AngⅡ诱导的HFL-I增殖和胶原合成(P<0.01)。结论:苦参碱通过抑制AngⅡ诱导的HFL-I增殖和胶原合成增加,从而发挥有效的抗纤维化作用。     

血管紧张素转化酶基因多态性与血管紧张素转化酶和血管紧张素Ⅱ水平的关系

目的探讨原发性高血压患者血管紧张素转化酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性与血清ACE和血管紧张素Ⅱ浓度的关系。方法应用PCR技术测定518例高血压患者的ACE基因型,并测定其ACE、血管紧张素Ⅱ浓度。结果II、ID、DD型患者血浆ACE浓度分别为(33.84±15.99)U/L、(41.1±16.80)U/L、(50.34±18.92)U/L,三种基因型之间的差异有统计学意义(P<0.05);血浆血管紧张素Ⅱ浓度在三种基因型之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论ACE基因多态性与血浆ACE浓度相关,而与血浆血管紧张素Ⅱ浓度无关。