贲门癌癌旁和无症状人群贲门黏膜活检组织肠上皮化生检测

目的:探讨贲门癌癌旁组织及无症状人群贲门黏膜活检组织肠上皮化生(IM)的分布特征.方法:采用艾显蓝-雪夫(AB-PAS)和高铁二胺-艾显兰(HID-AB)黏液组织化学染色法,对河南贲门癌高发区70例贲门癌癌旁组织和320例无症状人群贲门黏膜活检组织中的IM进行检测.结果:贲门癌癌旁组织的IM检出率38.5%(27/70),高于无症状人群贲门黏膜活检组织中的IM检出率4.4%(14/320)(x2=71.394 5,P＜0.01).贲门癌癌旁组织IM不完全型占92.6%(25/27),完全型IM占7.4%(2/27);无症状人群贲门黏膜的IM不完全型占7.1%(1/14),完全型IM占92.9%(13/14);2者比较,差异有统计学意义(x2=29.015 7,P＜0.01).贲门癌旁组织的IM大肠型占59.2%(16/27),小肠型占40.8%(11/27);无症状人群贲门黏膜的IM小肠型占92.9%(13/14),大肠型占7.1%(1/14);2者比较,差异有统计学意义(x2=10.317 3,P＜0.01).结论:IM可能是河南贲门癌高发区贲门癌癌前病变的一种重要表现形式;不完全型和大肠型IM可能是贲门癌前病变的独特组织学类型.     

90例贲门腺癌p53、bcl—2和PCNA异常表达的病理生物学意义

目的：了解p53、bcl-2蛋白和PCNA的异常表达在不同民族贲门癌发生发展中的作用,为该病的发病学环节提供研究依据。方法：应用免疫组化LSAB法检测90例贲门腺癌和21例非癌组织的p53、bcl-2、PCNA的表达及变化。结果：90例贲门腺癌中p53、bcl-2蛋白、PCNA的表达检出率分别为75．56％（69／90）、87．78％（79／90）、97．78％（88／90）;这些指标在贲门非癌良性组织中的表达检出率分别为4．76％（1／21）、52．38（11／21）、0％（0 ／21） 。阳性表达率在癌和非癌组织间存在显著差异（P＜0．05）。贲门腺癌中bcl-2与p53蛋白之间未发现有相关关系（P＞0．05）。bcl-2与PCNA相关（P＜0．05）。结论：（1）突变型p53、癌基因bcl-2和PCNA的异常表达在贲门癌变过程中具有重要作用。（2）贲门癌组织中p53、bcl-2、PCNA表达在肿瘤分化程度、民族分布方法无统计学差别。     

HPV16/18、p53在新疆贲门腺癌中的表达及其病理生物学意义

目的检测新疆不同民族贲门癌与非癌良性组织中HPV16/18与p53的异常表达是否存在差异,并讨论其意义.方法应用PCR及免疫组化LSAB法检测93例贲门腺癌和21例非癌组织的HPV16/18、p53的阳性检出率. 结果(1)HPV16/18、p53在93例贲门腺癌中的检出率分别为34.41%(32/93)、75.27%(70/93),在贲门非癌良性组织中的阳性检出率分别为0%(0/21)、4.76%(1/21).它们的阳性率在癌和非癌组织间均存在统计学差异(P＜0.01).(2)哈萨克族、维吾尔族、汉族之间HPV16/18、p53阳性率的差别均无统计学意义(P＞0.05).(3)p53 的阳性表达与组织分级无关(P＞0.05),而与淋巴结转移相关(P＜0.05).HPV16/18的阳性表达与贲门腺癌组织学分级及淋巴结转移无明显关系(P＞0.05).(4)贲门腺癌中HPV16/18与p53间未发现有相关关系(P＞0.05).结论(1)HPV16/18蛋白和p53的异常表达在贲门癌变过程中具有重要作用.(2)贲门癌组织中HPV16/18、p53表达在肿瘤分化程度、民族之间未见统计学差别.(3)p53 的阳性表达与淋巴结转移相关(P＜0.05).     

食管癌变过程中p53、BrdU、P21waf1和PCNA 蛋白表达的变化

目的:探讨食管癌及癌前病变组织中p53、P21waf1、PCNA及S期细胞标记指数(BrdU)表达的变化.方法:采用免疫组化ABC法对食管癌高发区无症状食管活检组织179例(正常上皮31例,基底细胞过度增生(BCH)117例,不典型增生(DYS)31例)、食管癌手术切除标本26例以及同一个体食管癌手术标本37例及相应癌旁组织中(正常上皮7例,BCH 29例,DYS 23例)p53、PCNA、BrdU和P21waf1进行检测.结果:不同个体和同一个体病理形态学相似的食管正常、各级癌前病变和癌组织中p53、P21waf1、PCNA和BrdU蛋白表达变化相似.随病变程度加重,PCNA、p53和BrdU阳性细胞数均呈上升趋势,但P21waf1呈下降趋势(P＜0.05).BrdU阳性表达与食管癌患者的年龄、性别、分化程度、肿瘤浸润程度及淋巴结转移均无关(P＞0.05).p53蛋白表达与食管癌患者淋巴结转移有关(P＜0.05),与其他指标无关;P21waf1的表达与细胞分化程度有关(P＜0.05);PCNA的表达与细胞分化程度和淋巴结转移有关(P＜0.05).结论:不同个体和同一个体食管癌变过程中存在相似的分子变化.在食管癌变过程中p53蛋白可能起重要的促进细胞增生的作用;P21waf1可能是一个重要的保护因子.     

贲门癌组织中PCNA、p53和Bcl-2的表达及其意义

目的探讨细胞增殖与细胞凋亡在贲门癌发生发展中的作用。方法60例贲门癌按照病理类型及分化程度分为五组，观察PCNA、p53和Bcl-2在各组癌组织中的分布、表达并进行灰度值及凋亡指数的比较和研究。结果①贲门非黏液性腺癌：P(2NA、p53显示随着癌组织分化程度的降低，其灰度值呈明显的降低趋势；Bcl-2在各组癌组织中呈现灰度值基本一致的阳性表达；凋亡指数在低、未分化癌组织中显著降低；②贲门黏液性腺癌：PCNA在大部分癌细胞中呈阳性表达；p53和Bcl-2在大部分癌细胞中呈阴性表达；凋亡指数在各组贲门癌组织中最低。结论贲门癌组织中PCNA，p53和Bcl-2的分布、表达与癌组织的病理类型及分化程度密切相关。贲门黏膜组织中细胞凋亡机制的抑制将可导致贲门癌的形成。     

贲门癌组织中PCNA、p53和Bc1-2的表达及其意义

目的探讨细胞增殖与细胞凋亡在贲门癌发生发展中的作用。方法60例贲门癌按照病理类型及分化程度分为五组,观察PCNA、p53和Bcl-2在各组癌组织中的分布、表达并进行灰度值及凋亡指数的比较和研究。结果①贲门非黏液性腺癌:PCNA、p53显示随着癌组织分化程度的降低,其灰度值呈明显的降低趋势;Bcl-2在各组癌组织中呈现灰度值基本一致的阳性表达;凋亡指数在低、未分化癌组织中显著降低;②贲门黏液性腺癌:PCNA在大部分癌细胞中呈阳性表达;p53和Bcl-2在大部分癌细胞中呈阴性表达;凋亡指数在各组贲门癌组织中最低。结论贲门癌组织中PCNA,p53和Bcl-2的分布、表达与癌组织的病理类型及分化程度密切相关。贲门黏膜组织中细胞凋亡机制的抑制将可导致贲门癌的形成。     

河南贲门癌高发区贲门腺癌组织化学染色分类与癌旁肠上皮化生的关系

目的:探讨河南贲门癌高发区贲门腺癌(GCA)组织化学染色分类与癌旁肠上皮化生(IM)的关系.方法:采用爱显蓝-雪夫试剂染色法(AB-PAS)和高铁二胺-爱显蓝染色法(HID-AB)检测70例GCA及癌旁IM组织,并分析GCA组织化学染色分类与癌旁IM的关系.结果:肠型GCA、胃型GCA、混合型GCA和干细胞型GCA的检出率分别为37.1%(27/70)、5.7%(4/70)、50.0%(35/70)和7.1%(5/70);含硫化和不含硫化黏蛋白的GCA检出率分别为24.3%(17/70)和75.7%(53/70).肠型GCA癌旁IM的检出率为57.7%(15/26),明显高于非肠型GCA的27.3%(12/44)(χ2=6.383,P=0.012);含硫化黏蛋白的GCA癌旁IM的检出率为64.7%(11/17),不含硫化黏蛋白GCA癌旁IM的检出率为30.2%(16/53),含硫化黏蛋白GCA癌旁IM检出率高于不含硫化黏蛋白的GCA(χ2=6.472,P=0.011);硫化黏蛋白在癌旁IM和其相应的GCA组织中无一致性表达(Kappa=0.129,P=0.484).结论:IM可能是河南贲门癌高发区肠型GCA及含硫化黏蛋白GCA的癌前病变.     

贲门癌癌组织中环氧合酶-2蛋白的表达

目的:检测河南贲门癌高发区贲门癌组织中环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达.方法:应用免疫组化ABC方法检测37例贲门癌患者癌组织、癌旁不典型增生组织和正常组织中COX-2蛋白的表达.结果:贲门正常组织中COX-2蛋白阳性表达率最低,从正常组(1/30,3%)→不典型增生组(4/16,25%)→贲门癌组(16/30,43%),COX-2蛋白阳性表达率呈逐渐升高趋势(x2=10.991,P＜0.05).结论:COX-2可能在贲门上皮癌变过程中起重要作用.     

贲门癌及其癌前病变中细胞增殖与细胞凋亡的比较和研究

目的探讨细胞增殖与细胞凋亡在贲门癌发生发展中的作用。方法应用免疫组化法检测PCNA、p53、Bcl-2在30例贲门癌、10例胃溃疡胃壁组织中的表达和分布，采用病理图像分析的方法进行灰度检测，并对胃壁上皮组织或癌组织中凋亡细胞进行计数。结果观察和比较自胃远端切缘、癌旁至癌灶等胃壁组织中的变化，发现PCNA呈显著的增高趋势，癌灶组织中PCNA呈强阳性表达；p53在正常胃黏膜组织中不表达，在癌灶组织中呈强阳性表达；Bcl-2在癌旁组织中呈强阳性表达，显著高于癌灶组织；细胞凋亡指数在癌灶组织中显著降低。胃溃疡病灶边缘的胃黏膜组织PCNA呈阳性表达，p53呈阴性表达，Bcl-2呈弱阳性表达，细胞凋亡指数显著增高。结论在非典型增生的贲门黏膜组织中，细胞增殖和细胞凋亡均非常活跃，而一旦细胞凋亡受到严重抑制，即可导致贲门癌的发生。     

宫颈鳞癌组织中HPV E6与野生型p53和PinX1表达的关系及其临床意义

目的 探讨宫颈鳞癌、宫颈鳞癌癌旁及正常宫颈组织中HPV E6、野生型p53及PinX1表达及其关系.方法 收集第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科2013年3月至2014年2月17例宫颈鳞癌患者宫颈鳞癌、宫颈鳞癌癌旁组织,选取10例正常宫颈组织作为对照.采用Real-TimePCR、Western blot、免疫组织化学方法检测3组组织中HPV E6、野生型p53和PinX1的mRNA、蛋白的表达及分布.结果 宫颈鳞癌组织中mRNA及蛋白水平结果均显示HPV E6的表达水平显著高于癌旁组织(P＜0.01),而野生型p53和PinX1的表达水平明显低于癌旁及正常组织(P＜0.05).相关性分析提示:宫颈鳞癌组织中野生型p53(R=-0.605,P＜0.01)和PinX1(R=-0.496,P＜0.05)表达水平的下降与HPV E6的表达水平升高存在负相关,野生型p53与PinX1的表达呈正相关(R=0.824,P＜0.01).结论 宫颈鳞癌组织中HPV E6表达上调与野生型p53、PinX1的表达负相关,PinX1的表达与野生型p53密切相关,HPV E6可能通过抑制野生型p53、PinX1导致宫颈鳞癌的发生、发展.     

贲门癌组织Ras相关区域家族1A基因启动子区甲基化检测

目的:探讨贲门腺癌(GCA)发生中Ras相关区域家族1A(RASSF1A)基因启动子区异常甲基化的作用.方法:采用甲基化特异性PCR法检测81例贲门腺癌及其中20例癌旁正常组织RASSF1A基因启动子区甲基化变化特征,并分析RASSF1A基因启动子区甲基化与肿瘤大体分型、分化程度、淋巴结转移、TNM分期等临床病理特征的关系.结果:GCA组织中RASSF1A基因甲基化阳性率(72%,58/81)显著高于癌旁正常组织(5%,1/20)(P＜0.05).GCA组织RASSF1A基因启动子区甲基化与肿瘤大体分型、分化程度、淋巴结转移、TNM分期等临床病理特征无关.结论:RASSF1A基因甲基化是GCA癌变过程中频发的分子事件,可能在GCA发生中起一定作用.     

贲门癌组织RASSF1A基因启动子甲基化测定

目的:检测贲门腺癌组织中RASSF1A基因启动子的甲基化.方法:取42例贲门腺癌患者癌及癌旁正常组织,用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测RASSF1A甲基化.结果:癌旁组织RASSF1A甲基化表达率为2%(1/42),而癌组织中达64%(27/42),2者比较,差异有统计学意义(x2=36.214,P＜0.05).结论:RASSF1A基因启动子区甲基化是贲门癌经常发生的分子事件,可成为对贲门腺癌高危人群进行筛选的一项重要候选指标.     

贲门癌高发区贲门癌组织SLC5A8基因甲基化检测

目的:探讨SLC5A8基因甲基化在贲门癌变过程中的作用.方法:采用甲基化特异性PCR法检测42例贲门腺癌及15例癌旁组织SLC5A8基因的甲基化,采用RT-PCR方法检测42例贲门癌组织SLC5A8基因表达水平.结果:42例GCA组织中有18例(43%)SLC5A8基因甲基化阳性.15例癌旁贲门组织中有2例(13%)甲基化阳性.癌组织的甲基化阳性率(43%)显著高于癌旁正常组织(13%)(P＜0.01).贲门癌组织SLC5A8基因甲基化状况与肿瘤分化程度,肿瘤体积,淋巴结转移情况和远处转移情况等临床病理因素均无相关性.18例SLC5A8基因甲基化阳性标本中仅有3例(17%)检测到SLC5A8基因的表达;而24例SLC5A8基因甲基化阴性标本中有10例(42%)检测到SLC5A8基因的表达;SLC5A8基因甲基化阳性的贲门癌组织中SLC5A8基因表达率显著低于甲基化阴性的贲门癌组织的发生率(P＜0.05).结论:SLC5A8基因甲基化是GCA癌变过程中的重要分子事件,是SLC5A8基因失活的重要机制之一.     

贲门癌组织微粒体环氧化物羟化酶基因多态变化

目的：探讨贲门癌组织微粒体环氧化物羟化酶(mEH)基因多态性改变，进一步深入了解贲门癌高易感性分子基础。方法：利用PCR和PCR—SSCP方法对19例贲门腺癌和72例正常对照组织mEH基因多态性进行了检测。结果：贲门腺癌和正常对照组织中，mEH的Arg／His和His／His基因型合并在一起分别占16％和15％，His等位基因对贲门癌易感性并无明显影响(0R＝0．72)；mEH的His／Tyr和Tyr／Tyr基因型合并在一起分别占58％和57％，Tyr等位基因并未影响个体对贲门癌的易感性(0R＝0．92)。结论 mEH基因多态对贲门癌易感性无明显影响。     

河南贲门癌高发区贲门癌组织ATP7B的表达

目的:了解贲门癌组织中ATP7B的表达情况.方法:采用免疫组化ABC法检测49例河南贲门癌高发区贲门癌及其相应癌旁正常组织中ATP7B的表达.结果:ATP7B在贲门癌组织中阳性表达率为51%(25/49),高于癌旁正常组织中的29%(14/49),差异有统计学意义(x2=5.15,P＜0.05).贲门癌组织ATP7B表达与肿瘤体积、淋巴结转移和远处转移无关,而与肿瘤分化程度有关.结论:ATP7B在贲门癌对铂类抗肿瘤药的先天耐药形成过程中发挥了重要作用,ATP7B可作为贲门癌的预后判断指标.     

SELDI-TOF-MS技术在贲门癌诊断中的初步研究

目的寻找贲门癌肿瘤标记物并建立诊断模型。筛选提示发生淋巴转移的差异蛋白,为临床早期诊断贲门癌及判断预后提供新方法。方法 CM10蛋白芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)检测101例贲门癌患者及118例正常对照者血清蛋白,Biomarker Wizard软件和Biomarker Patterns System(BPS)分析得差异蛋白并建立贲门癌诊断分类树,双盲法验证其准确性。进一步分析对比有、无淋巴转移的贲门癌患者血清蛋白指纹图谱,得到差异蛋白。结果对照分析贲门癌患者和正常对照组的血清蛋白指纹图谱得56个差异蛋白(P<0.05),经BPS软件筛选,以质荷比为5 480.49(P<10-8)的蛋白为主根结点建立贲门癌诊断模型,其灵敏度为95.05%,特异度为95.76%。得到可提示淋巴转移的差异蛋白3 820.87(P<0.05),其灵敏度为84.4%,特异度为82.1%。结论 SELDI-TOF-MS技术可建立有较高灵敏度和特异度的贲门癌诊断模型,筛选出能够提示发生淋巴转移的差异蛋白,有助于贲门癌的早期筛查、诊断和预后判断。     

胃底贲门癌手术入路的探讨

目的探讨胃底贲门癌手术入路的最佳方法。方法将157例胃底贲门癌患者按手术入路分为经腹组(57例)和经胸组(100例),对比两组疗效。结果经腹组平均术中输血(164.91±36.83)ml,手术时间(219.04±10.72)min,住院时间(14.39±1.39)d,淋巴结清除数(6.04±2.84)个,未出现胸腔积液并发症,随访期间(3~60月)复发率22.80%;经胸组平均术中输血(575.50±40.12)ml、手术时间(286.40±7.94)min、住院时间(20.32±0.81)d,淋巴结清除数(3.62±2.56个),术后并发左侧胸腔积液15例,随访期间复发率41.00%,两组疗效有统计学差异。结论与经胸入路手术相比,胃底贲门癌经腹手术平均术中输血少、手术和住院时间短、淋巴结清除率高、肺部并发症少、术后复发率低,具有较好的临床疗效。