低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)与骨质疏松症

从低密度脂蛋白受体相关蛋白 5 (L RP5 )基因的发现及分子结构、组织分布及功能等几个方面 ,综述 L RP5与骨质密度及骨质疏松症之间的关系 ,旨在阐明 L RP5基因与骨质疏松症发病密切相关 ,为进一步研究和开发治疗骨质疏松症药物提供研究思路     

低密度脂蛋白受体相关蛋白5基因的基因组结构

目的 确定2低密度脂蛋白受体相关蛋白5（low density lipoprotein receptor related protein,5 LRP5）的基因组结构。方法 以LRP5基因的cDNA序列为线索，采用计算机杂交方法首先通过对比分析该基因的cDNA序列和基因组序列，初步确定LRP5基因的基因组结构，按分析得到的基因组结构设计引物，扩增并测定外显子序列和外显子内含子接头序列，确定该基因的基因组结构。结果 LRP5基因的基因组DNA全长为131.6kb，含4有23个外显子和22个内含子；在编码序列中检测到3个单核苷酸多态，即位于第2外显子的A459G，位于第10外显子的C2220T和位于第21外显子的G4416C；LRP5基因含有4个已知的短串联重复序列，即D11S1917，D11S4087，D11S1337和D11S4178，它们分别位于该基因的5'端和第1，4，13内含子内。结论 LRP5基因的基因组结构的确定，为分析该基因突变和功能研究奠定了基础。     

低密度脂蛋白受体相关蛋白5与骨量相关性的研究进展

骨最受多种遗传及环境因素共同影响,其中遗传因素对骨密度的影响大于60%.近年的研究显示,低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)与成骨细胞分化、骨密度和/或骨质疏松性骨折关系密切.LRP5参与的骨量调控机制为骨质疏松症等疾病提供了新的治疗靶点,针对以上机制研制特异性激动剂或拈抗剂对开发新型抗骨质疏松药物具有重要意义.     

LRP1B：一个新的候选抑癌基因

LRP1B基因是一个新的候选肿瘤抑制基因，已有研究发现该基因在基因及转录水平上发生的改变引起近40％的非小细胞肺癌细胞系LRP1B蛋白失活。基因编码的蛋白LRP1B与低密度脂蛋白受体家族中的巨大脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)十分相似，它可能通过拮抗细胞外uPA系统水解蛋白、降解EMC及阻止细胞移动而抑制肿瘤细胞浸润和转移。     

低密度脂蛋白受体相关蛋白5在骨中发挥调节骨量的作用

人类骨骼受低密度脂蛋白受体相关蛋白5(low-density lipoprotein receptor-related protein 5,LRP5)的影响。有研究发现,骨质疏松症-假神经胶质瘤综合征(osteoporosis-pseudoglioma syndrome)的个体携带功能缺失的Lrp5基因突变,而Lrp5基因的杂合子错义突变则在显性遗传的骨量增多(high bone mass,HBM)个体中被发现。为探讨Lrp5如何影响骨性质,Cui等繁育了一系列Lrp5基因敲入(knock-in)或敲除(knockout)小鼠,结果发现:(1)遗传性敲入致HBM的Lrp5等位基因使小鼠骨量增多。(2)在骨细胞中敲入致HBM的Lrp5等位基因也同样能增加骨量。(3)在     

LRP1B:一个新的候选抑癌基因

LRP1B基因是一个新的候选肿瘤抑制基因,已有研究发现该基因在基因及转录水平上发生的改变引起近40％的非小细胞肺癌细胞系LRP1B蛋白失活。基因编码的蛋白LRP1B与低密度脂蛋白受体家族中的巨大脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)十分相似,它可能通过拮抗细胞外uPA系统水解蛋白、降解EMC及阻止细胞移动而抑制肿瘤细胞浸润和转移。     

子宫内膜癌中LRP16的表达及临床病理分析

目的 探讨LRP16在子宫内膜癌中的表达及下调LRP16表达对子宫内膜癌增殖和侵袭、转移的影响。方法 采用免疫组化法EliVision检测LRP16蛋白在子宫内膜癌中的表达，分析其与临床病理特征的关系，并复习相关文献。构建LRP16-shRNA表达载体，建立下调LRP16基因表达的子宫内膜癌细胞株(ISK);采用CCK-8和Transwell试验分析转染前、后细胞增殖和迁移、侵袭能力的差异。结果 子宫内膜癌组织中LRP16蛋白的阳性率为86.25%,正常子宫内膜组织中LRP16蛋白阳性率为13.33%,两组相比差异有显著性(P<0.01);LRP16基因表达下调后子宫内膜癌细胞的生长与对照组相比明显减慢。体外观察LRP16基因表达下调后，子宫内膜癌细胞的迁移和侵袭能力与对照组相比显著减弱。结论 LRP16基因在子宫内膜癌组织中表达增高，LRP16表达与临床病理特征相关；下调LRP16基因后，子宫内膜癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力受到明显抑制。     

乙型肝炎与载脂蛋白基因多态性相关性研究

目的探讨ApoAI-75Mspl、ApoB—Msp1、ApoCllI—Sst1、LRP5、ApoE基因多态性与乙型肝炎血清标志物不同模式之间的内在相关性。方法将乙型肝炎血清标志物不同模式分为9组,每组80人,共720人份,采用SnaPshot法检测上述基因的多态性,最后用测序法佐证检测结果的准确性。结果ApoAI-75Msp1、ApoE基因在乙型肝炎血清标志物不同模式之间差异有统计学意义（P〈0．05）,ApoCIII-Sst1、ApoB．Msp1、LRP5基因则差异无统计学意义（P〉0．05）。结论ApoAI-75Msp1、ApoE基因多态性与乙型肝炎血清标志物不同模式有相关性,ApoCIII-Sstl、ApoB—Msp1、LRP5与乙型肝炎血清标志物不同模式无相关性。     

细胞膜表面蛋白系统与肺癌多药耐药基因研究进展

本文综述了多药耐药（MDR1）、基因、多药耐药相关蛋白（MRP）基因和肺耐药蛋白（LRP）基因在肺癌中的变化。在不同类型肺癌中这三种基因均可表达，但水平不同。MDR1在耐药中的作用尚有质疑，而MRP，LRP与非小细胞肺癌（NSCLC）的耐药明显相关，且LRP是一种更好的耐药预警指标。     

乙型肝炎与载脂蛋白基因多态性相关性研究

目的 探讨ApoAⅠ-75 Msp1、ApoB-Msp1、ApoCⅢ-Sst1、LRP5、ApoE基因多态性与乙型肝炎血清标志物不同模式之间的内在相关性.方法 将乙型肝炎血清标志物不同模式分为9组,每组80人,共720人份,采用SnaPshot法检测上述基因的多态性,最后用测序法佐证检测结果的准确性.结果 ApoAⅠ-75 Msp1、ApoE基因在乙型肝炎血清标志物不同模式之间差异有统计学意义(P＜0.05),ApoCⅢ-Sst1、ApoB-Msp1、LRP5基因则差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ApoAⅠ-75Msp1、ApoE基因多态性与乙型肝炎血清标志物不同模式有相关性,ApoCⅢ-Sst1、ApoB-Msp1、LRP5与乙型肝炎血清标志物不同模式无相关性.     

一个骨质疏松-假性神经性胶质瘤综合征家系的LRP5基因变异分析CSCD

目的明确1个两例先天性失明患者家系的遗传学病因,为患者的临床诊断以及家系遗传咨询提供依据。方法采集患者及其表型正常父母和姐姐的外周血样,提取基因组DNA。应用全外显子组测序法筛查.Sanger测序法验证LRP5基因变异位点。通过蛋白质功能软件预测.PubMed和相关数据库检索变异位点的致病性。结合患者临床表现和测序结果,根据《遗传变异分类标准与指南》判断候选变异的致病性。结果两例患者均先天性失明且均有多次骨折史,小眼球畸形、角膜不同程度浑浊。1例患者智力正常,另1例存在语言障碍。2例患者LRP5基因均存在c.1007_1015delGTAAGGCAG(p.Cys336X)、c.4400G>A(p.Arg1467Gln)和c.4600C>T(p.Arg1534X)杂合变异。.患者母亲检测到c.1007_1015delGTAAGGCAG杂合变异,父亲检测到c.4400G>A.c.4600C>T杂合变异,姐姐未检测到变异。根据美国医学遗传学与基因组学学会遗传变异分类标准与指南,LRP5基因c.1007_1015delGTAAGGCAG(p.Cys336X)和c.4600C>T(p.Arg1534X)变异均判定为致病(PVS1+PM2+PM3,PVS1+PS1+PM2)。结论LRP5基因c.1007_1015delGTAAGGCAG(p.Cys336X)和c.4600C>T(p.Arg1534X)复合杂合变异可能是该家系两例患者骨质疏松-假性神经胶质瘤综合征的致病原因。     

重庆地区绝经妇女骨质疏松症与维生素D受体基因多态性的关系

目的：探讨在重庆市区生活10年以上的汉族绝经妇女骨质疏松症与维生素D受体基因多态性的关系。方法：用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性技术检测了40例绝经后患骨质疏松症的妇女和21名同龄绝经后无骨质疏松症的妇女的维生素D受体基因多态性。结果：骨质疏松组维生素D受体基因型bb、Bb、BB频率分别为82．5％、17．5％及0，无骨质疏松组分别为85．71％、14．29％及0，两组差异无显著性（P＞0．05）。结论：就目前调查例数看，重庆地区汉族妇女骨质疏松与BB基因型无明显相关性。     

一个渗出性玻璃体视网膜病变家系致病基因突变的鉴定CSCD

目的对一个家族性渗出性玻璃体视网膜病变家系进行致病基因的突变分析,为家系的遗传学咨询及产前诊断提供依据。方法采集该家系成员临床信息及外周血,对先证者进行晶状体视网膜病变相关基因Panel PCR扩增,经高通量测序技术对扩增产物进行测序分析,经一代验证鉴定该家系基因突变位点并采集胎儿羊水DNA进行产前诊断。结果检测出先证者存在两个杂合突变：LRP5基因c.1695dupC和ZNF408基因c．552-563del （--AGTGGTGACAGA--）,证实均来源于其患病母亲。ZNF408基因c．552-563del为非移码突变,家系中未患病者存在该突变,考虑其为非致病突变。经检索ExAC外显子组整合数据库、dbSNP和人类基因突变数据库,LRP5基因c.1695dupC突变未见报道。产前诊断发现胎儿携带与先证者相同突变位点。结论应用高通量及一代测序技术联合提高突变位点检出效率并能提供可靠的产前诊断。LRP5基因c.1695dupC为新发移码突变,该突变的报道增加了家族性渗出性玻璃体视网膜病变突变谱,为进一步理解、诊断该疾病提供遗传学基础。     

早生白发者易患骨质疏松症

早生白发者易患骨质疏松症美国波士顿医学中心研究人员最近进行的研究表明，４０岁前白发达５０％的人比其他人发生骨质疏松症的可能性增加４倍。研究人员推测，白发与骨质疏松症相关可能是因为与控制过早白发和骨密的基因有关系。他们认为，上述相关的发现有助于白发或有...     

微小RNA-195-5p通过调控LRP6抑制滋养细胞增殖和转移

目的 探讨微小RNA-195-5p对滋养细胞HTR-8/SVneo增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法 体外培养滋养细胞HTR-8/SVneo,将miR-195-5p模拟物转染进滋养细胞HTR-8/SVneo中,实时定量PCR方法检测各组细胞miR-195-5p和LRP6 mRNA的表达,CCK-8方法检测HTR-8/SVneo细胞增殖能力,Transwell实验检测HTR-8/SVneo细胞迁移和侵袭能力。结果 miR-195-5p模拟物可显著促进HTR-8/SVneo细胞中miR-195-5p的表达,并抑制LRP6 mRNA的表达(P<0.05);双荧光素酶实验表明miR-195-5p可直接靶向LRP6;转染miR-195-5p模拟物后,HTR-8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭能力降低。结论 miR-195-5p可能通过抑制LRP6表达抑制HTR-8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭。     

靶向阻断LRP提高肺腺癌细胞对紫杉醇的敏感性

目的利用小干扰RNA(siRNA)技术沉默肺腺癌细胞肺耐药相关蛋白基因(LRP),探讨其对肺腺癌紫杉醇耐药株(A549/TXL20)紫杉醇(TXL)敏感性的影响。方法逐步增加药物浓度法建立A549紫杉醇耐药细胞株(A549/TXL20),用小干扰RNA技术沉默LRP在A549/TXL20细胞中的表达,以MTT法检测紫杉醇对A549/TXL20细胞的半数抑制浓度(IC50);以q PCR检测细胞中LRP mRNA的表达,Western blot检测细胞中LRP蛋白的水平,裸鼠腋窝皮下注射转染后的A549/TXL20细胞,建立裸鼠移植瘤模型,观察LRP靶向siRNA对人肺腺癌耐药细胞株A549/TXL20移植瘤耐药的影响。结果肺腺癌紫杉醇耐药株(A549/TXL20)对紫杉醇的敏感性明显增强(P0.01),A549/TXL20细胞中LRP mRNA及蛋白表达显著增加(P0.01);siRNA沉默A549/TXL20细胞LRP基因后,与空白组和空质粒组比较,LRP mRNA及蛋白表达均被抑制(P0.01);小干扰RNA可提高荷瘤裸鼠对紫杉醇的敏感性。结论 siRNA可有效沉默A549/TXL20肺腺癌耐药细胞株LRP基因的表达,提高耐药的肺腺癌细胞对紫杉醇的敏感性。     

肠源性TPH1、LRP5表达及血清5-HT水平与雄性大鼠增龄性骨量丢失相关

目的 观察不同月龄SD雄性大鼠十二指肠TPH1、LRP5表达水平及血清5-HT水平,分析其在增龄中的变化及增龄性骨量丢失的相关性.方法 分别选取2、6、12、15和18月龄大鼠各6只,共30只,按照月龄分组以模拟增龄性模型.分别用RT-PCR法、Western blot法检测十二指肠TPH1和LRP5的mRNA和蛋白表达,用ELISA方法检测血清5-HT水平,双能骨密度仪测定大鼠离体股骨骨密度.结果 十二指肠TPH1 mRNA和蛋白表达及血清5-HT水平随年龄的增长而增加,与增龄性骨量丢失呈负相关性(P ＜0.001).结论 肠源性5-HT及其关键合成限速酶TPH1表达在增龄性骨量丢失中发挥着重要作用,可能成为老年性骨质疏松潜在治疗干预靶.     

原发性肝癌粘附分子基因的表达与化疗敏感的相关性研究

目的：探讨原发性肝癌粘附因子基因的表达与化疗敏感的相关性。方法： 取64例肝癌切除组织行ATP-TCA法肿瘤体外药敏试验，以RT-PCR法半定量检测肝癌多种粘附因子、多药耐药基因表达情况。 结果： 肝癌组织E-cadherin, ICAM-1, CD44, CD44V, α5,β1基因mRNA的表达量分别为1.24±0.54, 0.96±0.37, 0.62±0.73, 0.86±0.33, 0.97±0.49, 1.41±0.24，其中CD44与E-cadherin、β1的表达量有显著差异。多药耐药基因MDR1、MRP、GST-π、LRP、TOPOⅡ的表达量分别为1.17±0.47、1.59±0.33、1.18±0.48、1.03±0.48、1.00±0.31。各粘附分子基因的表达与多药耐药基因的表达有一定的相关性：其中ICAM-1、α5的表达与MDR1的表达呈正相关，E-cadherin、CD44的表达与MDR1的表达呈负相关； E-cadherin的表达与MRP的表达呈负相关；ICAM-1的表达与LRP的表达呈正相关，E-钙粘连素、CD44的表达与LRP的表达呈负相关。肝癌化疗疗效与粘附分子基因mRNA表达量的关系：在化疗有效组E-cadherin、CD44的mRNA表达量高于无效组，ICAM-1、CD44V、α5、β1的mRNA表达量低于无效组。两组差别无显著意义。结论： 在肝癌部分粘附分子的基因mRNA的表达与部分多药耐药基因mRNA的表达相关，与化疗的疗效有关。     

缺氧对滋养细胞HTR-8/SVneo自噬的影响及机制研究

目的 探索缺氧对子痫前期滋养细胞HTR-8/SVneo自噬的影响及可能机制。方法 收集80例子痫前期、50例正常孕妇胎盘组织。选取HTR-8/SVneo(NC组)，构建缺氧/复氧（H/R）模型（H/R组），转染pcDNA3.1-低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6)，并用自噬抑制剂Baf-A1、β-catenin抑制剂PKF115-584处理。分为pcDNA3.1-NC组、pcDNA3.1-LRP6组、pcDNA3.1-LRP6+Baf-A1组、pcDNA3.1-LRP6+PKF115-584组。自噬双标腺病毒（mRFP-GFP-LC3）观察自噬流，反转录PCR(RT-PCR)检测LRP6基因mRNA水平，Westernblot检测自噬相关蛋白3I(LC3-I)、自噬相关蛋白3Ⅱ（LC3-Ⅱ）、Beclin1、LRP6、Unc-51-like autophagy activating kinase 1(ULK1)、β-catenin、c-Myc、Rab7及p62蛋白水平，免疫组化检测胎盘组织中LRP6表达。结果 子痫前期孕妇胎盘组织LRP6阳性率、LRP6基因mRNA表达水平低于对照组...     

绝经后骨质疏松小鼠骨髓间充质干细胞免疫相关因子抗体芯片检测及关键差异基因分析

背景：近年来，绝经后骨质疏松症骨骼与免疫系统之间相互作用机制的研究已成为热点，但关键免疫相关因子表达改变对绝经后骨质疏松症的影响尚不明确，仍需进一步探索。目的：通过生物信息学方法探讨绝经后骨质疏松症小鼠骨髓间充质干细胞免疫相关因子差异化表达情况。方法：通过卵巢切除手术构建绝经后骨质疏松症小鼠模型，采用全骨髓贴壁法获取骨髓间充质干细胞并稳定传代至第2代，使用RayBio L-Series Mouse Antibody Array 308 Glass Slide Kit免疫相关因子抗体芯片检测卵巢切除组及假手术组小鼠骨髓间充质干细胞中存在差异表达的蛋白，对检测结果进行GO、KEGG富集分析及PPI网络分析，通过MCC、EPC及MNC算法所得值筛选共同的Hub基因。结果与结论：共获得68个差异表达基因。GO分析发现差异表达基因富集于免疫系统过程、胞外区、信号受体结合等条目。KEGG分析发现差异基因主要富集于细胞因子-细胞因子受体的相互作用、肿瘤坏死因子信号通路和趋化因子信号通路等条目。通过对68个差异表达基因构建PPI网络分析进一步筛选得到了8个Hub基因，绘制小提琴图和相关性矩阵发现8个H...