心钠素对神经肽Y刺激培养的血管平滑肌细胞蛋白合成的影响

为研究高血压时肽类神经激素与血管壁结构改变之关系，应用自发性高血压大鼠（SHR）及Wistar大鼠动脉平滑肌细胞（SMC）培养以及3H－胸腺嘧啶核苷、3H－亮氨酸掺入方法，观察到用神经肽Y（NPY）作用48h后可促进SHR离体培养的血管SMCDNA合成增加28．0％，蛋白会成增加54．6％（与血清对照组比较），而细胞数无明显增加。当同时加入心钠素（ANP）后，正常血压大鼠中DNA和蛋白合成分别下降42．3％和44．3％，而SHR中仅分别降低11．4％和10．6％。结果表明NPY可促进血管SMC肥大（蛋白含量增加40％即表明细胞肥大），ANP可拮抗NPY促细胞肥大效应，但在SHR中ANP对血管SMC的调节作用减弱是引起细胞肥大的重要原因之一。     

沙丁胺醇对大鼠支气管平滑肌细胞容量性钙内流的影响

目的:观察沙丁胺醇对正常和IL-13刺激的大鼠支气管平滑肌细胞(rBSMC)胞质Ca2+信号的影响,探讨沙丁胺醇治疗哮喘的作用机制。方法:体外培养大鼠支气管平滑肌细胞,利用共聚焦显微镜测定胞质Ca2+水平,观察沙丁胺醇作用后正常和IL-13刺激后的rBSMC的钙池Ca2+释放和容量性Ca2+内流(CCE)的变化。结果:IL-13 10μg/L处理24 h后,rASMC的Ca2+释放和Ca2+内流均高于正常对照组;10μmol/L沙丁胺醇不影响正常rASMC的Ca2+释放,但是显著抑制CCE;10μmol/L沙丁胺醇对IL-13刺激后的Ca2+释放和CCE的上升均有抑制作用。结论:沙丁胺醇可以抑制Th2细胞因子刺激后的气道平滑肌细胞的容量性Ca2+内流,从而降低胞质Ca2+水平。提示容量性CCE在气道高反应性的发生以及beta 2受体激动剂的治疗效应中具有重要作用。     

兔血管平滑肌细胞三维培养模型的建立

目的 观察兔血管平滑肌细胞（VSMCs)在三维培养系统中的生物学特性,方法 在兔主动脉中膜来源的VSMCs单层培养系统的基础上,将VSMCs培养在胶原凝胶中,形成VSMCs三维培养系统,并对细胞的形态结构,生长增殖及其影响因素进行研究。结果（1）三维培养VSMCs在凝胶形成后3－4h,形成多个细胞突起,呈星状,后继续伸展,呈梭 ,纺锤形,（2）张力条件下,三维培养VSMCs可呈一定的方向性排列。（3）三维培养VSMCs与经典的单层培养相比,细胞活力无统计学差异,但细胞增殖受到一定程度的抑制。结论 运用VSMCs三维培养系统不仅可以观察和研究细胞的形态结构,生长增殖等方面,还可研究在力条件下的撑特征,对组织工程化血的研究将产生积极的影响。     

内皮素通过增强库容性钙内流促进肺血管平滑肌细胞增生

目的通过观察内皮素-1(ET-1)诱导人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)增生的作用机制及细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)变化,探讨ET-1在肺动脉高压(PAH)发病过程中的作用,为进一步干预治疗提供有效的基础依据。方法体外培养HPASMCs并分为:正常对照组和内皮素组(ET-1:0.01μmol/L,0.1μmol/L,1.0μmol/L)。分别应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和细胞计数检测细胞的增生情况,荧光钙成像法测定[Ca2+]i,运用RealTime-PCR、WesternBlotting检测编码钙库操控性钙通道(SOC)的规范瞬时受体电位1(TRPC1)基因及蛋白表达情况。结果ET-1可促进HPASMCs增生,且ET-1诱导的细胞增生依赖于细胞外Ca2+的内流,ET-1处理的细胞中[Ca2+]i和库容性钙内流(CCE)显著升高,同时TRPC1基因转录与蛋白表达也明显增加。结论ET-1能显著促进肺血管平滑肌细胞增生,其机制可能与上调编码SOC的TRPC1表达、增加库容性钙内流使肺血管平滑肌细胞的[Ca2+]i异常升高有关。     

胰岛素对培养中兔动脉平滑肌细胞的影响

应用细胞培养技术,进行兔主动脉平滑肌细胞的传代培养,取3～7代细胞进行光学、电子显微镜鉴定后,用不同浓度的胰岛素进行刺激,结果经F检验表明:不同培养天数、不同浓度的胰岛素均能刺激平滑肌细胞增殖,且与正常对照组比较均有显著性统计学差异(P<0.01)。其细胞增殖速度与胰岛素浓度呈正相关,提示高胰岛素血症是促进动脉粥样硬化形成的原因之一。     

水蛭素对体外培养的兔血管内皮细胞及平滑肌细胞生长的影响

目的探讨水蛭素对体外培养的兔血管内皮细胞及平滑肌细胞生长的影响及剂量依赖关系。方法用体外培养兔血管内皮细胞及平滑肌细胞第3~5代,加入96孔细胞培养板,同时加入不同浓度的水蛭素0.78、1.56、3.13、6.25、12.5、25 mg/L,每6孔为一个浓度组,1640培养液为空白对照组,共7组,培养48 h后用噻唑蓝比色试验(MTT法)测定各孔贴壁细胞的吸光值(OD)。结果与空白对照组相比,低、中、高浓度水蛭素作用于体外培养的兔血管内皮细胞后,细胞形态无明显改变,贴壁良好,生长无明显抑制作用(P>0.05);而水蛭素作用于兔血管平滑肌细胞后,与空白对照组相比,低浓度水蛭素对平滑肌细胞形态无明显改变,中、高浓度水蛭素作用于平滑肌细胞后,细胞密度有所减小、排列松散,OD值下降,呈现抑制平滑肌细胞的生长(P<0.05)。结论不同浓度水蛭素对体外培养兔血管内皮细胞生长无显著抑制作用;低浓度水蛭素对体外培养兔血管平滑肌细胞生长无明显抑制作用,中、高浓度水蛭素可抑制兔血管平滑肌细胞的生长。     

兔血管平滑肌细胞体外培养及生长特性研究

目的体外分离培养兔血管平滑肌细胞（VSMC）并观察其生长特征。方法采用酶消化结合贴壁法原代培养兔胸主动脉来源的VSMC并传代,倒置显微镜观察和免疫荧光染色法鉴定培养细胞;锥蓝法、绘制生长曲线、MTT法和划痕法分别测定VSMC传代细胞的成活率及其生长、增殖和迁移能力。结果原代培养5d后,VSMC从组织块边缘长出,传代细胞呈典型＂峰-谷＂状生长,胞质内α-平滑肌肌动蛋白免疫荧光染色阳性;细胞成活率为96%;生长曲线近似＂S＂形;细胞生长第3～5d内光密度值变化较明显;无血清培养的VSMC在24h内划痕宽度变化最显著。结论体外培养的兔动脉平滑肌细胞为收缩表型且活性高,生长3～5d细胞增殖活力较强,无血清培养的细胞在24h内迁移能力最强,为心血管疾病研究提供了良好的实验材料。     

兔血管平滑肌细胞体外培养及生长特性研究

目的 体外分离培养兔血管平滑肌细胞(VSMC)并观察其生长特征.方法 采用酶消化结合贴壁法原代培养兔胸主动脉来源的VSMC并传代,倒置显微镜观察和免疫荧光染色法鉴定培养细胞;锥蓝法、绘制生长曲线、MTT法和划痕法分别测定VSMC传代细胞的成活率及其生长、增殖和迁移能力.结果 原代培养5 d后,VSMC从组织块边缘长出,传代细胞呈典型"峰-谷"状生长,胞质内α-平滑肌肌动蛋白免疫荧光染色阳性;细胞成活率为96%;生长曲线近似"S"形;细胞生长第3～5 d内光密度值变化较明显;无血清培养的VSMC在24 h内划痕宽度变化最显著.结论 体外培养的兔动脉平滑肌细胞为收缩表型且活性高,生长3～5 d细胞增殖活力较强,无血清培养的细胞在24 h内迁移能力最强,为心血管疾病研究提供了良好的实验材料.     

不同剂量β射线对新西兰兔血管平滑肌细胞的影响

不同剂量β射线对新西兰兔血管平滑肌细胞的影响张迎光１黄志兰１任冬青２张发科２张绍章２（１第四军医大学西京医院放射诊断科西安７１００３３２第四军医大学防原医学教研室）关键词β射线球囊血管成形术再狭窄血管内支架中图号Ｒ８１７．５血管成形术后再狭窄主要是由...     

3^H标记TdR细胞内照射对兔血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的:探讨不同浓度的3H-TdR细胞内照射对细胞凋亡的影响及抑制免血管平滑肌细胞增殖的可行性.方法:将不同强度的3H标记TdR掺入体外培养的免主动脉平滑肌细胞内共同培养,在不同时期用放射性自显影技术检测3H-TdR在培养的VSMC内外分布情况及聚集部位,用流式细胞学技术观察细胞凋亡的情况及对细胞长情况的影响.结果:放射性自显影图象显示,放射性物质全部分布细胞核内,细胞核外无放射性显影,流式细胞学显示在培养的前3天见细胞凋亡比例升高,而在后5天内无明显变化,细胞生长曲线显示实验组细胞增殖受到明显抑制,呈剂量依赖方式.结论:3H-TdR能顺利通过细胞膜进入细胞内,聚积于细胞核,而且能明显抑制平滑肌细胞增殖,培养早期存在明显细胞凋亡,中晚期无影响,对静止期细胞无影响,可能是同位素辐射治疗预防血管再狭窄的一种新方法.     

谷氨酸毒性对培养PC12细胞钙内流与游离钙的影响

Ｃａ2 + 作为细胞内一种重要的第二信使 ,参与神经细胞的一系列活动 ,对神经细胞的代谢和功能产生广泛的影响 ,细胞内钙超载被称为细胞损伤的“最后共同通路”。谷氨酸是中枢神经系统内含量最多的兴奋性氨基酸 ,有神经兴奋毒性 ,它作用于ＮＭＤＡ受体 ,引起钙内流 ,在神经细胞的继发性损害中谷氨酸释放占重要地位[1 ,2 ] 。ＰＣ12细胞是一种从鼠嗜铬细胞瘤分离的克隆细胞 ,因其在神经生长因子 (Ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ ,ＮＧＦ)存在下 ,细胞形态、结构和功能皆类似于交感神经细胞 ,因而成为近年来神经科学工作者研究神经细胞递…     

益心汤对兔主动脉平滑肌细胞的影响

用临床上治疗冠心病的经验方益心汤观察对培养的兔主动脉平滑肌细胞(简称SMC)增殖的影响。结果用药组 SMC 对倍增长时间为2.17±0.252天,对照组为1.772±0.188天,组间有极显著差异,P<0.001,表明益心汤有抑制培养的兔 SMC 增殖的作用。     

血管紧张素Ⅱ对培养人血管平滑肌细胞钙化的影响

目的:观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对培养人血管平滑肌细胞钙化的影响,以探讨血管钙化发生的机制。方法:体外培养人动脉平滑肌细胞,用β甘油磷酸(βGP)诱导细胞钙化。培养细胞分4组:正常对照组;βGP组:βGP终浓度为10mmol·L-1;AngⅡ组:AngⅡ终浓度为10-7mol·L-1;βGP+AngⅡ组:同时加入相同浓度的βGP和AngⅡ,连续培养10d。采用Vonkossa染色、细胞层钙沉积定量和细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性测定判断钙化程度,用流式细胞仪测细胞周期分布和细胞凋亡率。结果:βGP组细胞Vonkossa染色见大量黑色颗粒状沉积物弥漫分布于细胞层,βGP+AngⅡ组细胞之间散在分布黑色沉着点;βGP+AngⅡ组细胞钙沉积显著低于βGP组[分别为(1.336±0.096)和(2.056±0.441)μmol·L-1,P<0.01];βGP+AngⅡ组细胞内ALP活性显著低于βGP组[分别为(277.57±87.81)和(691.27±128.06)IU·L-1,P<0.01]。正常对照组与AngⅡ组细胞比较,Vonkossa染色、细胞钙沉积量和ALP活性均无显著性差异。流式细胞仪结果显示,βGP+AngⅡ组细胞凋亡率显著低于βGP组,G0/G1期细胞比例降低,S期的比例升高(P<0.05)。结论:10-7mol·L-1的AngⅡ可抑制钙化血管平滑肌细胞的体外钙化进程。其作用可能与抑制ALP活性和促进细胞增殖、抑制凋亡有关。     

血管内皮细胞对血管平滑肌细胞影响的研究进展

血管内皮细胞(VECs)和血管平滑肌细胞(VSMCs)是血管壁的主要组成细胞。VECs能够保护血管内环境、维持血压以及调节血管运动,是维持血管生理功能平衡的关键。VSMCs可通过舒张和收缩改变血管直径使血管保持适当血压。VECs与VSMCs相邻,它能最先感知血液中的刺激影响VSMCs,进而影响血管的生理状态。在病理条件下,VECs发生损伤和功能失调,导致VSMCs表型转换、增殖及凋亡,进而引发多种心血管疾病。目前,VECs对VSMCs的影响受到越来越多学者的关注,而VECs功能失调对VSMCs的影响与动脉粥样硬化形成之间的关系是今后研究的重点。     

毛冬青甲素对兔主动脉平滑肌钙内流的影响

本文用核素45Ca示踪法观察了毛冬青甲素对兔主动脉平滑肌钙离子跨膜流动的影响。结果显示:毛冬青甲素(10~(-4)mol/L)对正常营养液的主动脉平滑肌钙离子内流和外流均无明显影响(p>0.3),但对高钾(140mmol/L)或去甲肾上腺素(10~(-5)mol/L)引起的主动脉平滑肌钙离子内流却有抑制作用(p<0.01)。结果提示毛冬青甲素对平滑肌细胞膜上的电位依赖性钙通道和受体操纵性钙通道均有拮抗作用。     

肉苁蓉对培养正常兔主动脉平滑肌细胞影响的实验研究

我们前期的工作已经证明中药单方肉苁蓉具有与维生素E相似作用,能显著抑制动脉粥样硬化模型兔血管平滑肌细胞(smc)的变性增殖,改善其超微结构变化,降低平滑肌细胞内过氧化脂质(LPO)含量,提高其超氧化物歧化酶(SOD)活性,从而发挥了抗动脉硬化作用^[1].     

球囊血管成形术对兔血管平滑肌细胞增殖周期的影响

本实验对２６只髂动脉粥样硬化模型兔进行球囊血管成形术，应用流式细胞仪检测血管成形术后不同时期成形段血管平滑肌细胞增殖周期动力学改变。结果表明，血管成形术后４８～７２ｈ血管平滑肌细胞Ｓ期、Ｇ２期和Ｍ期细胞数即增加；术后２～４周达高峰；６周后不再增加，但部分血管增殖期细胞仍维持在高水平，提示平滑肌细胞增生是血管成形术后再狭窄的重要原因之一。     

血管内照射对兔血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨188铼(188Re)血管内照射对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响.方法:40只新西兰白兔随机分为对照组(n=20只)和照射组(n=20只),均行腹主动脉球囊内皮拉伤术.照射组内皮拉伤后行188Re血管内照射治疗,管腔下0.5 mm处累计吸收剂量为15 Gy;对照组则不行血管内照射.分别于术后1、3周处死动物,取病理组织学标本进行增殖细胞核抗原(PCNA)和凋亡细胞分析.结果:照射组第1、3周PCNA细胞阳性率分别为(27.69±7.04)%与(20.88±4.55)%,明显低于对照组(42.71±6.11)%、(29.48±10.13)%(P均＜0.05);照射组第3周平滑肌细胞凋亡细胞百分比为(40.16±7.93)%,明显高于对照组(28.50±9.39)%(P=0.018).结论:188Re血管内照射能抑制血管平滑肌细胞增殖,促进血管平滑肌细胞凋亡,从而抑制新生内膜增生,减少PTCA术后再狭窄的发生.