巨噬细胞移动抑制因子在急性坏死性胰腺炎肺损伤中的表达及白介素-10的干预作用

目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在实验性急性坏死性胰腺炎(ANP)肺损伤发病机制中的作用以及ANP早期应用抗炎细胞因子白介素-10(IL-10)对肺组织的保护作用.方法 92只大鼠随机分为对照组、ANP组和lL-10干预组,腹腔注射左旋-精氨酸制作ANP模型,干预组于末次精氨酸注射后第2、5及8h腹腔内注射IL-10 10 ku.各组再分4、12、24和3 h点.观察并比较ANP组与IL-10干预组胰腺、腹腔及肺的大体及组织学改变,检测各组血清MIF水平以及肺组织的MIF表达.结果 ANP时MIF明显升高,应用IL-10干预后各时点血清MIF明显下降(P<0.05).正常对照大鼠肺组织的支气管上皮细胞及肺泡细胞MIF仅为弱表达,ANP时肺组织MIF阳性细胞数增加、染色明显增强,IL-10干预组的肺组织病变程度较ANP组明显减轻.结论 ANP时MIF明显升高,肺组织MIF表达明显增强,提示MIF参与了大鼠ANP相关肺损伤的发病;IL-10对血清及肺组织的MIF水平有抑制作用,可减轻实验性ANP相关肺损伤的损害程度,早期给药对肺组织有保护作用.     

急性坏死性胰腺炎与TNFα,IL-1,IL-6,IL-8的关系及奥曲肽的作用

目的 :探讨急性坏死性胰腺炎 (ANP)大鼠肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素 - 1(IL - 1)、白细胞介素- 6 (IL - 6 )、白细胞介素 - 8(IL - 8)含量的变化及奥曲肽的治疗作用。方法 :30只Wistar大鼠随机分为三组 ,即ANP生理盐水处理组 (ANP NS组 ) ,ANP奥曲肽治疗组 (ANP 奥曲肽组 )和假手术组 (SO组 )。测定血清TNFα ,IL - 1,IL - 6 ,IL - 8含量的变化 ,并于光镜及电镜下观察胰、肺、肝组织标本。结果 :ANP NS组血清TNFα ,IL - 1,IL - 6 ,IL - 8显著增高 ,与ANP 奥曲肽组及假手术组比较具有显著性差异 (P <0 .0 5 )。ANP NS组大鼠的胰、肺、肝严重受损 ,而ANP 奥曲肽组大鼠的胰、肺、肝受损程度轻较。结论 :TNFαIL - 1,IL - 6 ,IL - 8水平增高参与ANP发病机制 ,奥曲肽能抑制其增高 ,对ANP大鼠的胰、肺、肝具有保护作用。     

胃液转流对急性坏死性胰腺炎大鼠血钙和肿瘤坏死因子-α的影响

目的:探讨胃液转流对急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis,ANP)大鼠血清钙和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法:将雄性SD大鼠72只按照随机数字表法分为急性坏死性胰腺炎组(ANP组)、胃液转流组(GB组)和对照组(SO组),每组分12、24 h两个时间点,每个时间点12只。以5%牛磺脱氧胆酸钠逆行胰胆管注射建立ANP模型,GB组在造模前30 min行胃空肠吻合完成胃液转流。观察各组血清钙浓度,采用蛋白免疫印迹技术(Western blot)分析血清TNF-α变化。结果:ANP组各时间点血清钙浓度较SO组均显著下降(P0.01)。GB组血清TNF-α浓度较ANP组显著下调(P0.01),血清钙浓度较ANP组显著升高(P0.01)。结论:行胃液转流人为旷置十二指肠,结果ANP大鼠的低钙血症回升,血清炎症细胞因子TNF-α明显下降。     

细胞内钙调节与递质释放

<正> 在神经元活动过程中,包括递质释放过程,细胞内 Ca■起关键作用。递质释放增加,有赖于细胞外 Ca■内流,而细胞内外Ca■浓度之比为10~-4,胞内 Ca■含量甚微,静息时为10~(-8)～10~(-7)M。似乎有许多机制参与缓冲和调节细胞内游离 Ca■浓度并维持低Ca■水平,从而影响递质释放过程:Ca■与胞浆内蛋白结合,如钙调蛋白(Calmo-dulin,CaM);质膜 Na~+—Ca■交换系统和 Ca■—Mg■—ATP 酶;线粒体 Ca■摄取与 Ca■释放;光滑内质网的 ATp 依赖性Ca■转运等等。本文主要从以下几个方面来讨论细胞内 Ca(?)调节与递质释放的关系。     

大黄素对急性坏死性胰腺炎大鼠肠道损伤的保护作用

目的 研究大黄素对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肠道损伤的保护机制.方法 将30只SD大鼠随机分成3组:假手术(SO)组、ANP组和大黄素治疗组,每组10只.ANP模型采用十二指肠壁穿刺经乳头逆行胰胆管注射3.5%牛磺胆酸钠造模,5.5 h后从十二指肠注入酚红,0.5 h后处死大鼠,测定小肠转运.取小肠组织做病理切片,HE染色观察小肠组织病理改变,免疫组织化学染色检测小肠核因子-κB(NF-κB)的活化;用酶标记免疫吸附测定法(ELISA)检测小肠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β).结果 ANP组小肠转运较SO组降低(P<0.05),大黄素治疗组小肠转运较ANP组增加(P<0.05).SO组肠黏膜无异常,ANP组大鼠肠黏膜水肿、出血及炎症细胞浸润,大黄素治疗组大鼠肠黏膜轻度水肿,黏膜及黏膜下层血管扩张充血及炎症细胞浸润相对ANP组减轻.ANP组小肠黏膜细胞胞核NF-κB p65阳性表达量高于SO组(P<0.05),大黄素治疗组较ANP组降低(P<0.05).ANP组小肠TNF-α、IL-1β含量较SO组增加(P<0.05),大黄素治疗组较ANP组降低但高于SO组(P<0.05).小肠TNF-α、IL-1β与小肠转运呈负相关,r分别为-0.83、-0.76(P<0.05).结论 大黄素可增加小肠转运,抑制ANP大鼠小肠NF-κB活性,降低小肠TNF-α、IL-1β含量,减轻小肠病理损害.     

心房钠尿肽信号通路在小鼠支气管哮喘发病中的作用及其机制

目的探讨心房钠尿肽(ANP)信号通路在小鼠支气管哮喘(BA)发病中的作用及其机制。方法 40只雌性BALB/C小鼠随机分为正常对照组、BA组、ANP组和ANP+A71915组,每组10只;建立BA小鼠模型和ANP在体干预模型,观察各组小鼠支气管炎症改变情况和支气管黏液分泌情况,采用免疫组织化学技术检测肺组织T-bet和GATA-3蛋白的表达。结果 BA组小鼠支气管黏膜充血水肿及支气管周围炎性细胞浸润较正常对照组显著(P<0.01),ANP组小鼠支气管黏膜充血水肿及支气管周围炎性细胞浸润较BA组更严重(P<0.01),ANP+A71915组小鼠支气管黏膜充血水肿及支气管周围炎性细胞浸润较ANP组明显减轻(P<0.01)。BA组小鼠肺组织中GATA-3蛋白阳性表达显著高于正常对照组(P<0.01),ANP组小鼠肺组织中GATA-3蛋白阳性表达显著高于BA组(P<0.01),ANP+A71915组小鼠肺组织中GATA-3蛋白阳性表达显著低于ANP组(P<0.01)。BA组小鼠肺组织中T-bet蛋白表达显著低于正常对照组(P<0.01),ANP组小鼠肺组织中T-bet蛋白表达明显低于BA组(P<0.01),ANP+A71915组小鼠肺组织中T-bet蛋白表达明显高于ANP组(P<0.01)。结论 ANP信号可能通过调控T-bet和GATA-3蛋白的表达参与BA小鼠免疫功能失衡的发病过程。     

穿心莲内酯对大鼠心肌肥厚作用的影响

目的:观察穿心莲内酯抗大鼠心肌肥厚的作用。方法:选取出生1～3 d的Wistar乳鼠32只,体外培养新生Wistar大鼠的心室肌细胞,于培养的第3天,换成无血清培养基继续培养24 h,然后随机分为正常对照组、PTH组(PTH 10~(-7) mol/L)、PTH+穿心莲内酯组(穿心莲内酯10~(-5) mol/L)、PTH+穿心莲内酯+MVA组(MVA 10~(-4) moL/L),每组8只。穿心莲内酯预先孵育1 h,PTH及MVA均孵育24 h。分析PTH对心肌细胞直径、~3H-亮氨酸(Leu)掺入率、单个细胞蛋白含量、心房利钠肽(ANP)、B型利钠肽(BNP)含量的影响;分析穿心莲内酯对肥大心肌的保护作用;分析MVA对穿心莲内酯的拮抗作用;分析各组对心肌细胞K-Ras、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白相对表达量的影响。结果:PTH组心肌细胞直径明显大于正常对照组,~3H-Leu掺入率、单个细胞蛋白含量、ANP含量、BNP含量均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P0.05);PTH+穿心莲内酯组心肌细胞直径明显小于PTH组,~3H-Leu掺入率、单个细胞蛋白含量、ANP含量、BNP含量均低于PTH组,差异均有统计学意义(P0.05);PTH+穿心莲内酯+MVA组心肌细胞直径明显大于PTH+穿心莲内酯组,~3H-Leu掺入率、单个细胞蛋白含量、ANP含量、BNP含量均高于PTH+穿心莲内酯组,差异均有统计学意义(P0.05)。设正常对照组上述指标的相对表达量均为1,PTH组K-Ras、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白的相对表达量均明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(P0.05);PTH+穿心莲内酯组K-Ras、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白的相对表达量均明显低于PTH组,差异均有统计学意义(P0.05);PTH+穿心莲内酯+MVA组K-Ras、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白的相对表达量均高于PTH+穿心莲内酯组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:10~(-5) mol/L穿心莲内酯能有效抑制心肌细胞肥大,同时还能抑制K-Ras、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白的表达,使用MVA后能使K-Ras、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白的表达再次增加。     

地塞米松对急性坏死性胰腺炎大鼠模型血液TNF-α、IL-10和GR的影响

目的 探讨急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠模型血液TNF-α、IL-10和糖皮质激素受体(GK)的变化规律及地塞米松(DEX)干预对上述指标的影响.方法 48只雄性SD大鼠随机分为ANP组(A组,n=16)、DEX治疗组(D组,n=16)和假手术组(S组,n=16).除S组大鼠外,各组均通过逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠制作.ANP模型;D组大鼠术后肌注地塞米松干预.制模后8、12 h分别处死各组一半大鼠,分别观察大鼠胰腺病理改变、血清淀粉酶、TNF-α、IL-10水平和全血有核细胞GR的mRNA表达等指标.结果 ①A组大鼠表现为典型ANP病理改变,包括间质水肿、炎细胞浸润、出血和胰腺坏死;D组大鼠胰腺的炎症反应相对较轻.②A组血清TNF-α、IL-10显著高于S组(P＜0.01),D组血清TNP低于A组而IL-10高于A组(P＜0.01).③在术后8 h和12h,D组血GRmRNA表达显著低于S组(分别P＜0.05,P＜0.01).结论 TNF-α、IL-10以及GR的改变与ANP的炎症反应存在相关性,外源性DEX可能通过影响这些因素达到缓解ANP的作用.     

高速钢珠弹伤时血浆ANP和RAAS变化因素探讨

心房肽(ANP)是心房肌细胞分泌的一类具有强大利尿、利钠作用的活性多肽,它与肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)共同参与调节体内水和电解质代谢。已证实烧伤、出血性休克时血浆ANP浓度升高,RAAS明显改变,但高速弹丸伤时血浆ANP和RAAS有何改变尚无报道。故本实验以高速钢珠弹(重量1.03g,初速1500m/s)分别射击16只犬双后肢,不伤及股骨和大血管,观察伤后8h内犬血浆ANP浓度和RAAS的改变。     

生长抑素对大鼠胰腺腺泡细胞内骨架蛋白F-actin分布和细胞外分泌功能的影响

目的研究生长抑素(somatostatin,SS)对八肽胆囊收缩素(cholecystokinin-octapeptide,CCK-8)刺激的大鼠胰腺腺泡细胞内骨架蛋白F-actin分布变化和细胞外分泌功能的影响。方法分离的19只SD大鼠胰腺腺泡细胞,设空白对照组、不同浓度CCK-8组(10-12、10-11、10-10、10-9、10-8mol/L)、SS组(10-7mol/L)、SS+CCK-8组。SS与不同浓度的CCK-8共同孵育胰腺腺泡细胞30min,用淀粉酶、胰蛋白酶试剂盒检测胰腺腺泡细胞淀粉酶分泌率、胰蛋白酶活性,用激光共聚焦显微镜观察细胞内F-actin分布的变化。结果SS稳定了细胞内骨架蛋白结构,明显提高F-actin近细胞顶部/侧基底部的比值(P<0.05);SS与低浓度的CCK-8(10-11~10-10mol/L)共同孵育胰腺腺泡细胞时,CCK-8诱导的细胞淀粉酶分泌明显被抑制(P<0.05),SS与高浓度CCK-8(10-9~10-8mol/L)共同孵育胰腺腺泡细胞时,缓解了高浓度CCK-8诱导的对细胞淀粉酶分泌的抑制效应;SS降低了CCK-8诱导的胰腺腺泡细胞内胰蛋白酶的活性(P<0...     

心钠素对食管鳞癌增殖和侵袭力的影响及初步机制

目的研究心钠素（atrial natriuretic peptide,ANP）对食管鳞癌细胞增殖和侵袭力的影响,并探讨其作用机制。方法将食管鳞癌细胞Eca109分为12组,即对照组（Control组）,AB组（8-溴环磷酸鸟苷简称cGMP,抗体浓度为1:80滴度稀释）,ANP10组、ANP1组、ANP0.1组、ANP0.01组(ANP浓度分别为10、1、0.1、0.01μmol·L-1),cGMP10组、cGMP1组、cGMP0.1组、cGMP0.01组(cGMP浓度分别为10、1、0.1、0.01μmol·L-1),ANP1+AB（anti-body,AB）组(ANP浓度为1μmol·L-1,cGMP抗体浓度为1:80滴度稀释),cGMP1+AB组(cGMP浓度为1μmol·L-1,cGMP抗体浓度为1:80滴度稀释)。用MTT法测定每组食管鳞癌细胞的增殖情况,用Transwell法检测每组食管鳞癌细胞侵袭力情况,采用Western Bloting检测细胞中Ras蛋白的表达。结果 4种不同浓度ANP(ANP10、1、0.1、0.01μmol·L-1)和cGMP组(cGMP10、1、0.1、0.01μmol·L-1)较其他4组食管鳞癌细胞增殖和侵袭力均明显减弱（P<0.05）,且其他4组间食管鳞癌细胞增殖和侵袭力比较差异无统计学意义（P>0.05）。ANP1和ANP0.1组Ras蛋白表达较Control组、ANP0.01组、ANP1+AB组和AB组下降（P<0.05）。结论 ANP通过cGMP介导抑制食管鳞癌细胞的增殖和侵袭力,并下调食管鳞癌中Ras的表达,从而产生拮抗食管鳞癌作用。     

丹参及β-七叶皂甙钠对烫伤大鼠AⅡ/ANP比值调节作用的实验研究

目的 观察血管紧张素Ⅱ(AⅡ)/心房肤(ANP)比值失衡在烧伤后急性肾损伤(acute renal in-jury,ARI)发病机制中的重要作用,探讨丹参及β-七叶皂甙钠通过调节AⅡ/ANP比值来减轻肾内血管收缩所引起的肾功能损害的治疗作用及其机制,为临床治疗烧伤后AKl提供理论依据.方法 制作30%TBSAⅡ度大鼠烫伤模型,并随机分盐水组(M)、丹参组(S)、β-七叶皂甙钠组(A)及联合组(C,丹参+β-七叶皂 甙钠).另设假烫对照组(N),每组8只.烫伤后24 h取静脉血测血清BUN、Cr、Na及尿Cr、Na,检测血浆及肾组织血管紧张素Ⅱ(AⅡ)、心房肽(ANP)含量.结果 盐水组及治疗各组血浆及肾组织AⅡ、ANP含量均增高,盐水组AⅡ增加幅度明显高于ANP增加幅度,存在明显AⅡ/ANP比值失衡.3个治疗组AⅡ增高幅度明显降低,与盐水组相比AⅡ/ANP比值显著降低,联合组最低.结论 AⅡ/ANP失衡引起肾血管持续收缩,导致肾缺血性损伤,可能参与了烧伤后肾小球滤过功能及肾小管回吸收功能的损害.丹参及β-七叶皂甙钠通过降低AⅡ/ANP的比值,减轻肾内血管的收缩.从而提高肾小球滤过率和改善肾小管的回吸收功能,对烧伤后肾损伤有一定防治作用,联合应用效果更佳.     

姜黄素mPEG-PLGA纳米粒对香烟提取物刺激巨噬细胞RAW264.7所致激素抵抗现象逆转作用的研究

目的制备以单甲氧基聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸共聚物(mPEG-PLGA)为载体的姜黄素纳米粒(CUR-NPs),探讨姜黄素(CUR)和CUR-NPs逆转香烟提取物(CSE)暴露所致的激素抵抗现象,比较CUR-NPs和CUR生物学作用的差异。方法采用乳化溶剂挥发法制备CUR-NPs,激光粒度测定仪和透射电子显微镜分别对CUR-NPs的粒径分布和形貌进行表征。脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞RAW264.7布地奈德(BUD)(10~(-10)~10~(-5)mol/L)干预。LPS+CSE刺激巨噬细胞RAW264.7,BUD(10~(-10)~10~(-5)mol/L)、CUR(10~(-10)~10~(-5)mol/L)、CUR(10~(-7)mol/L)+BUD(10~(-9)~10~(-5)mol/L)、CUR(10~(-9)~10~(-5)mol/L)+BUD(10~(-7)mol/L)、CUR-NPs(10~(-9)~10~(-5)mol/L)+BUD(10~(-7)mol/L)干预,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测巨噬细胞RAW264.7所分泌的IL-8。CES刺激巨噬细胞RAW264.7,BUD(10~(-7)mol/L)、CUR(10~(-7)、10~(-6)mol/L)和CUR-NPs(10~(-7)、10~(-6)mol/L)干预,实时定量PCR检测细胞中组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)mRNA的表达,蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞中HDAC2蛋白的表达。共聚焦显微镜检测巨噬细胞RAW264.7对CUR和CUR-NPs内CUR的摄取量。结果 CUR-NPs外观呈圆形或类圆形,平均粒径为(356.4±146.6)nm。与LPS刺激相比,LPS+CSE共刺激时BUD(10~(-10)~10~(-5)mol/L)对IL-8分泌的最大抑制率显著降低(P0.05),半数抑制浓度(IC50)显著增高(P0.05)。LPS+CSE共刺激时,与BUD(10~(-10)~10~(-5)mol/L)组相比,CUR(10~(-7)mol/L)+BUD(10~(-9)-10~(-5)mol/L)组BUD对IL-8分泌的最大抑制率显著增高(P0.05),IC50显著降低(P0.05)。在LPS+CSE共刺激,CUR和CUR-NPs浓度梯度同为10~(-9)、10~(-8)和10~(-7)mol/L时,CUR-NPs+BUD(10~(-7)mol/L)组对IL-8分泌的抑制率显著高于CUR+BUD(10~(-7)mol/L)组(P0.05)。CSE刺激后细胞中HDAC2的mRNA和蛋白表达量显著降低(P0.05);与CSE组相比,CUR(10~(-7)、10~(-6)mol/L)组及CUR-NPs(10~(-7)、10~(-6)mol/L)组细胞中HDAC2的mRNA和蛋白表达量显著增高(P0.05)。浓度梯度同为10~(-7)mol/L时,CUR-NPs组细胞中HDAC2的mRNA和蛋白表达量高于CUR组(P0.05)。浓度梯度同为10~(-7)mol/L时,巨噬细胞RAW264.7对CUR-NPs内CUR的摄取量显著高于CUR(P0.05)。结论 CUR及CUR-NPs能够逆转CSE暴露所致的激素抵抗,CUR-NPs能够提高细胞对CUR的摄取量在低浓度梯度情况下,CUR-NPs具有更强的逆转激素抵抗的作用。     

通补奇经法复方对人子宫内膜基质细胞功能影响实验研究

目的 :观察通补奇经法中药复方对人子宫内膜基质细胞(Human endometrial stroma cells,h ESCs)相关纤维连接蛋白(蛋白FN)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、催乳素(PRL)及纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)表达的影响。方法 :体外培养h ESCs,采用MTT法发现安全中药复方浓度为10~(-4) mol/L,将实验分为溶剂对照组、甲孕酮(10~(-7) mol/L)组、甲孕酮(10~(-7) mol/L)+中药(10~(-4) mol/L)组、雌二醇(10~(-8) mol/L)组、雌二醇(10~(-8) mol/L)+甲孕酮(10~(-7) mol/L)组、雌二醇(10~(-8) mol/L)+中药试剂(10~(-4) mol/L)组、雌二醇(10~(-8) mol/L)+甲孕酮(10~(-7) mol/L)+中药(10~(-4) mol/L)组,采用ELISA方法检测各组子宫内膜基质细胞功能相关蛋白表达变化。结果 :与溶剂对照组比较,各组FN、IGF-1、PRL蛋白表达量均显著升高(P0.05或P0.01),而PAI-1表达显著减低,与甲孕酮组、雌二醇组分别比较,甲孕酮+中药组、雌二醇+甲孕酮组、雌二醇+中药组、雌二醇+甲孕酮+中药组FN、IGF-1、PRL蛋白表达量均显著升高(P0.05或P0.01),且甲孕酮+中药组、雌二醇+中药组、雌二醇+甲孕酮+中药组FN、IGF-1、PRL蛋白表达均分别高于对应的甲孕酮组、雌二醇组、雌二醇+甲孕酮组(P0.05或P0.01),而PAI-1呈现相反趋势。结论 :通补奇经法中药复方可以促进人子宫内膜基质细胞相关蛋白的表达,其作用效果与甾体类激素相近。     

慢性乙型肝炎患者血清25-羟维生素D_3与外周血T淋巴细胞亚群的相关性研究

目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清25-羟维生素D_3[25(OH)D_3]水平变化,分析其与外周血T淋巴细胞亚群、乙肝病毒DNA(HBV-DNA)载量的相关性。方法:纳入2016年1月—2018年6月入住我院消化内科诊断为CHB患者100例为观察组,并选取同期我院门诊健康体检者100例作为对照组,比较两组T淋巴细胞(CD3~+细胞、CD4~+细胞、CD8~+细胞、CD4~+/CD8~+细胞)比例、25(OH)D_3水平变化。根据血清25(OH)D_3水平将CHB分成25(OH)D_3正常组、25(OH)D_3不足组、25(OH)D_3缺乏组,分析3组乙肝E抗原(HBeAg)阳性率、HBV-DNA载量、CD3~+细胞、CD4~+细胞、CD8~+细胞比例及CD4~+细胞/CD8~+细胞比值变化,同时采用Pearson相关分析CHB患者25(OH)D_3与CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+细胞比例、HBV-DNA的相关性。结果:(1)与对照组比较,CHB组血清25(OH)D_3水平、外周血CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+比例均降低,而外周血CD8~+比例升高(均P<0.01)。(2)随着25(OH)D_3逐渐降低,CHB患者外周血CD8~+比例、HBeAg阳性率、HBV-DNA载量均逐渐升高,而CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+比例逐渐降低(均P<0.01)。(3)Pearson分析显示:CHB患者血清25(OH)D_3与外周血CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+呈明显正相关(r分别为0.721、0.772、0.639,均P<0.01),与外周血CD8~+、HBV-DNA呈明显负相关(r分别为-0.688、-0.812,均P<0.01)。结论:CHB血清25(OH)D_3明显降低,其可能参与了CHB免疫功能调节。     

柴芩承气汤对急性坏死性胰腺炎小鼠血清IL-6、IL-10水平及胰腺病理改变的影响

目的探讨柴芩承气汤(Chai Qin Cheng Qi Decoction,CQCQD)对急性坏死性胰腺炎(acute necrotizingpancreatitis,ANP)小鼠白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平及胰腺病理改变的影响。方法将30只昆明小鼠随机分成对照组、ANP组及CQCQD组,每组10只。ANP模型采用8%L-精氨酸溶液腹腔注射,4.0mg·g-1·1h-1×2制作。CQCQD组予以CQCQD制剂0.1ml/10g灌胃,1次/2h,观察其第6h的血清IL-6、IL-10水平及胰腺病理改变。结果 ANP组血清IL-6水平(1589.63±377.28)pg/ml高于对照组(927.46±210.42)pg/ml,P<0.05,也高于CQCQD组(1107.73±351.62)pg/ml,P<0.05,对照组血清IL-6水平与CQCQD组相比较,无统计学差异(P>0.05)。ANP组血清IL-10水平(920.64±101.68)pg/ml与对照组(1083.77±142.85)pg/ml相比较无统计学差异(P>0.05),ANP组血清IL-10水平低于CQCQD组(1177.84±201.72)pg/ml,P<0.05,对照组血清IL-10水平与CQCQD组相比较,无统计学差异(P>0.05)。ANP组胰腺病理评分(6.20±1.65)高于对照组(1.00±1.11),P<0.01,也高于CQCQD组(4.50±0.54),P<0.05。对照组胰腺病理评分低于CQCQD组(P<0.01)。结论 CQCQD可降低ANP小鼠IL-6水平,升高血清IL-10水平,减轻ANP小鼠胰腺的损伤。     

依地酸二钠钙联合水溶性维生素治疗铅中毒的疗效及对T细胞亚群标志物水平的影响

目的:观察依地酸二钠钙联合注射用水溶性维生素治疗铅中毒的疗效及对T细胞亚群标志物水平的影响。方法:选取铅中毒患者114例,依照抽签法分为观察组及对照组各57例。对照组采取依地酸二钠钙治疗,观察组采取依地酸二钠钙联合注射用水溶性维生素治疗,均持续治疗3 d。比较两组临床疗效、不良反应发生率,以及治疗前、治疗后外周血T细胞亚群标志物(CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+)水平。结果:观察组总有效率92.98%(53/57)高于对照组73.68%(42/57),差异有统计学意义(P<0.05);治疗前两组CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+水平相比,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后观察组CD4~+、CD4~+/CD8~+水平高于对照组,CD8~+水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),两组CD3~+水平差异无统计学意义(P>0.05);观察组不良反应发生率8.77%(5/57)与对照组7.02%(4/57)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:铅中毒患者予以依地酸二钠钙联合注射用水溶性维生素治疗疗效及改善T细胞亚群标志物水平的效果优于依地酸二钠钙治疗。     

续断总皂甙对成骨细胞增殖的影响及细胞毒性检测

目的观察不同浓度的续断总皂甙对成骨细胞毒性及增殖的影响。方法(1)分离、培养小鼠的原代成骨细胞。(2)将续断总皂甙配制不同浓度的培养基(10~(-8)、10~(-7)、10~(-6)、10~(-5)、10~(-4)和10~(-3)g/mL 6组)。(3)细胞毒性的观察:不同浓度含药培养基培养成骨细胞,采用直接计数和四氮唑蓝法(MTT)观察细胞毒性。(4)细胞增殖的分析:用不同含药浓度(10~(-6)、10~(-5)、和10~(-4)g/mL 3组)的培养基培养成骨细胞,采用四氮唑蓝法(MTT)检测细胞增殖能力。结果与空白对照组比较续断总皂甙浓度10~-(6)、10~(-5)和10~(-4)g/m L时,细胞生长数量最多,MTT测定吸光度(A)值最高;成骨细胞的增殖能力最强。结论体外研究续断总皂甙对成骨细胞增殖影响,需要选择合适的浓度,高浓度产生抑制作用,低浓度促进细胞增殖作用不明显,中剂量对成骨细胞增殖的刺激作用最强。     

大鼠急性胰腺炎凋亡相关蛋白Fas、FasL、Bcl-2的表达及意义

目的 :探讨凋亡调控基因Fas、FasL、Bcl 2在大鼠急性胰腺炎中的表达情况及其与胰腺炎严重程度的关系。方法 :通过胰胆管逆行注射不同浓度的脱氧胆酸钠 ,制作急性水肿性胰腺炎 (AEP)和急性坏死性胰腺炎(ANP)模型。用免疫组化法检测Fas、FasL、Bcl 2蛋白的表达。结果 :急性胰腺炎时 ,Fas蛋白主要表达在胰腺腺泡细胞胞膜 ,AEP组和ANP组均明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,且AEP组高于ANP组 (P <0 .0 5 ) ;FasL在各组腺泡细胞胞浆中均有不同程度表达 ;Bcl 2蛋白表达在胰腺导管细胞胞浆 ,对照组Bcl 2蛋白表达弱 ,AEP组和ANP组表达明显增强 ,ANP组高于AEP组 ,统计学处理两组间无明显差异 ,但均显著高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :Fas/FasL系统在大鼠的急性胰腺炎过程中可能参与诱导胰腺腺泡细胞凋亡 ,减轻胰腺炎症反应程度 ;而Bcl 2基因可能参与防止导管细胞凋亡而促进其增生并且形成导管管状复合体     

心钠素及血管加压素在肾病综合征为主水肿性疾病发生中的作用研究

1.目的:充血性心力衰竭(CHF)、肝硬化腹水(LC)以及肾病综合征(NS)在临床上常伴有水肿,为水钠潴留状态最主要的几种临床状况。心钠素(ANP)、血管加压素(AVP)以及肾素-血管紧张素系统(RAS)是参与正常水钠调节的最主要内分泌系统。自80年代中期以来,本课题组在1项国家自然科学基金(39670349水孔蛋白生理病理调节及分子生物学机制研究)、1项卫生部基金(86-88ANP与水肿性疾病临床)及纽约中华医学基金会(CMB90-527水钠代谢障碍及其调节)的资助下,