17β-雌二醇和二噁英对子宫内膜间质细胞表达趋化因子IL-8及其受体CXCR1 的调控作用

解析内外环境因素对子宫内膜间质细胞表达IL-8及其自分泌作用的调控。采用免疫组化法比较子宫内膜异位症患者异位灶和在位内膜CXCRI翻译水平表达；流式细胞术分析17β-雌二醇和二嗯英单独或联合作用对子宫内膜间质细胞表面CXCRI表达的调控作用；ELISA法分析17β-雌二醇和二嗯英单独或联合作用对子宫内膜间质细胞分泌IL-8的影响。结果显示CXCRI在子宫内膜异位症患者异位灶组织高表达。17β-雌二醇和二嗯英单独作用均抑制子宫内膜间质细胞表面CX—CR1的表达以及IL-8的分泌。二者联合作用能够上调CXCR1的表达，上调幅度与雌二醇浓度呈正相关；但进一步抑制了IL-8的分泌。雌激素与二嗯英对子宫内膜间质细胞复合作用抑制其IL-8的分泌及其自分泌作用；子宫内膜异位症患者腹腔液高水平IL-8并非由内外雌激素样物质直接作用于异位灶子宫内膜间质细胞所致。     

17β-雌二醇和二噁英对子宫内膜间质细胞表达趋化因子IL-8及其受体CXCR1的调控作用

解析内外环境因素对子宫内膜间质细胞表达IL-8及其自分泌作用的调控。采用免疫组化法比较子宫内膜异位症患者异位灶和在位内膜CXCR1翻译水平表达;流式细胞术分析17β-雌二醇和二噁英单独或联合作用对子宫内膜间质细胞表面CXCR1表达的调控作用;ELISA法分析17β-雌二醇和二噁英单独或联合作用对子宫内膜间质细胞分泌IL-8的影响。结果显示CXCR1在子宫内膜异位症患者异位灶组织高表达。17β-雌二醇和二噁英单独作用均抑制子宫内膜间质细胞表面CX-CR1的表达以及IL-8的分泌。二者联合作用能够上调CXCR1的表达,上调幅度与雌二醇浓度呈正相关;但进一步抑制了IL-8的分泌。雌激素与二噁英对子宫内膜间质细胞复合作用抑制其IL-8的分泌及其自分泌作用;子宫内膜异位症患者腹腔液高水平IL-8并非由内外雌激素样物质直接作用于异位灶子宫内膜间质细胞所致。     

人早孕期绒毛组织和滋养细胞趋化因子受体转录水平

目的：研究早孕期绒毛组织及滋养细胞18种趋化因子受体的转录水平，以揭示趋化因子受体在母一胎界面生理性调节作用。方法：提取人早孕期绒毛组织及滋养细胞总RNA，半定量RT-PCR检测绒毛组织和滋养细胞18种趋化因子受体mRNA的表达水平。结果：CXCR4及CXCR6在绒毛组织中普遍高表达；CCR6、CCR7、XCR1及CX3CR1呈普遍中等表达；CCR1～CCR5、CCR8～CCR10、CXCR1～CXCR3在部分绒毛组织中表达，部分绒毛组织不表达或表达量很低；早孕人绒毛组织不表达CXCR5。早孕期滋养细胞表达CCR1、CCR3～CCR5、CCR8～CCR9、CXCR1～CXCR4、CXCR6、XCR1、CX3CR1；不表达CCR2、CCR6、CCR7、CCR10及CXCR5。结论：早孕期绒毛组织及滋养细胞表达多种趋化因子受体，它们在正常妊娠中具有重要的生理学意义。     

启动子区DNA去甲基化增强子宫内膜异位症患者子宫内膜基质细胞MMP-9的表达

目的研究子宫内膜异位症中基质金属蛋白酶9(MMP-9)基因表达的DNA甲基化调控机制。方法采用甲基化特异性PCR检测在位与异位子宫内膜组织中MMP-9 mRNA的表达,采用免疫组织化学染色检测在位与异位子宫内膜组织中MMP-9蛋白的表达。原代培养子宫内膜异位基质细胞,细胞经5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-dC)处理后,分析MMP-9基因的表达及其启动子甲基化状态。结果异位子宫内膜组织中MMP-9 mRNA和蛋白的表达高于在位子宫内膜组织。异位子宫内膜组织中MMP-9基因启动子区DNA甲基化水平低于在位子宫内膜组织。5-Aza-dC处理异位子宫内膜细胞后,MMP-9的表达水平升高,MMP-9基因启动子区出现明显的去甲基化。结论 MMP-9基因启动子区DNA去甲基化增强子宫内膜异位症患者异位内膜基质细胞中MMP-9的表达。     

GnRHⅡ蛋白在子宫内膜异位症患者中的表达及意义

目的：检测GnRHⅡ蛋白在子宫内膜异位症患者异位子宫内膜、在位子宫内膜和正常子宫内膜中的表达情况,同时分析其表达是否与子宫内膜月经周期有关。方法：采用免疫组织化学SP法检测GnRHⅡ蛋白在异位内膜、在位内膜及正常子宫内膜组织中的表达情况,并分析和比较其表达是否有差异。结果：GnRHⅡ蛋白在子宫内膜异位症患者异位、在位子宫内膜及正常子宫内膜中均有表达,阳性表达定位于子宫内膜腺体及间质细胞的细胞质;GnRHⅡ蛋白在异位内膜、在位内膜及对照组正常内膜的表达依次增强,两两比较差异有统计学意义（P＜0.05）;GnRHⅡ蛋白在正常子宫内膜分泌期表达强于增生期（P＜0.05）,且以分泌早中期最强,显著强于增生期和分泌晚期（P＜0.01）,而异位组或在位组的分泌期与增生期比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：GnRHⅡ蛋白在子宫内膜异位症的发病中以及在人类月经生理方面可能起重要作用。     

胎盘生长因子(PLGF)及其受体血管内皮生长因子受体-1(VEGFR-1)在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的探讨胎盘生长因子(PLGF)及其受体血管内皮生长因子受体-1(VEGFR-1)与子宫内膜异位症(endom etriosis,EMS)发病的相关性。方法用免疫组织化学染色法检测28例子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜和异位子宫内膜(增生期、分泌期各14例),以及28例正常子宫内膜(增生期15例,分泌期13例)中PLGF及其受体VEGFR-1的表达。结果PLGF、VEGFR-1在各组内膜中均有表达,分泌期表达高于增生期,有显著差异。EMS的异位子宫内膜中的表达显著高于其在位子宫内膜和正常子宫内膜;EMS的在位子宫内膜和正常子宫内膜之间比较无明显差异。结论PLGF、VEGFR-1可能参与子宫内膜异位症的发病过程。     

骨桥蛋白及其受体异常表达在子宫内膜异位

目的 探讨骨桥蛋白(OPN)及其受体整合素αvβ3在子宫内膜异位症发生、发展中的作用.方法 随机选取经手术治疗的89例子宫内膜异位症患者的异位和在位内膜作为实验组,同期非内异症患者子宫内膜作为对照组,SP免疫组化法对上述病例的骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3的表达水平进行检测;并对两者进行相关性分析.结果 子宫内膜异位症患者的异位内膜中骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3的表达高于其在位内膜的表达,子宫内膜异位症患者的在位内膜中骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3的表达高于对照组子宫内膜中的表达;骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3两者在子宫内膜异位症中的表达呈正相关.结论 在子宫内膜异位症中存在着OPN、整合素αvβ3的高表达,两者可能协同在子宫内膜异位症的发生发展中起着重要作用.     

TGF-β1在子宫内膜异位症与子宫内膜癌中的表达及生物学行为相关性研究

目的研究转化生长因子β-（TGF-β1在子宫内膜异位症、子宫内膜癌中的表达，探讨其表达与子宫内膜异位症发生及子宫内膜异位症和子宫内膜癌生物学行为的相关性。方法采用免疫组织化学方法检测10例子宫内膜异位症在位内膜、异位内膜，10例子宫内膜癌，10例对照组正常子宫内膜TGF-β1表达。结果TGF-β1在子宫内膜异位症异位内膜组中的表达显著高于子宫内膜异位症在位内膜组及对照组（P〈0．05、P〈0．05）；TGF—β1在子宫内膜癌组中的表达显著高于对照组（P〈0．05）；TGF-β1在子宫内膜异位症异位内膜组中的表达与子宫内膜癌组中的表达差异无显著性（P〉0．05）。结论TGF-β1的异常表达可能与子宫内膜异位症的发生有关；且可能与子宫内膜异位症具有和子宫内膜癌相似的生物学行为有关。     

TGFβ1与EGFR在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的检测转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1,TGF-β1）以及表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）在子宫内膜异位症中的表达,探讨两者在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测子宫内膜异位症患者在位内膜（10例）、异位内膜（10例）、正常子宫内膜（10例）中TGF-β1和EGFR的表达情况。结果TGF-β1在子宫内膜异位症异位内膜组中的表达显著高于子宫内膜异位症在位内膜组及对照组（P〈0.05）,TGF-β1在子宫内膜异位症在位内膜组及对照组中的表达无显著性差异（P〉0.05）;EGRF在子宫内膜异位症异位内膜组及在位内膜组中的表达显著低于对照组（P〈0.05）,EGFR在子宫内膜异位症异位内膜组及在位内膜组中的表达无显著性差异（P〉0.05）。结论TGF-β1及EGFR的异常表达可能与子宫内膜异位症的发生发展有关。     

生存素在子宫内膜异位症中的表达特点

目的 探讨生存素在子宫内膜异位症病灶及在位内膜中的表达情况及相关因素。方法 采用免疫组化抗生物素蛋白-过氧化物酶染色法（SP法）检测38例2002年12月至2004年9月在我院妇科住院的未经治疗的子宫内膜异位症患者的异位及在位内膜标本中生存素的表达，以同期因子宫肌瘤或宫颈病变接受手术的生育期妇女的子宫内膜作为对照。结果 病例组异位内膜与在位内膜均有生存素的表达并且缺乏周期性变化（P〉0．05），异位内膜腺上皮生存素表达的强度高于在位内膜（P〈0．05）。结论 子宫内膜异位症的异住及在位内膜均表达生存素，而且在位内膜间质及异住内膜腺上皮表达也缺乏周期性。     

Expression of interleukin-8 receptors in endometriosis

BACKGROUND: Although the etiology of endometriosis is not well understood, chemokines and their receptors are believed to play a role in its pathogenesis. Therefore, we aimed to investigate the expression and localization of interleukin-8 (IL-8) receptors CXCR1 and CXCR2 in eutopic and ectopic endometrial tissues of women with endometriosis, and in endometrium of women without endometriosis. METHODS: Ectopic (n = 27) and homologous eutopic endometrium (n = 25) from women with endometriosis and endometrium from women without endometriosis (n = 27) were used for immunohistochemical analysis of CXCR1 and CXCR2. RESULTS: In normal endometrium, epithelial CXCR1 and CXCR2 immunostaining intensities were similar in the proliferative and secretory phase. Stromal CXCR1 expression was less then epithelial expression and did not show cyclical difference. No stromal CXCR2 expression was observed. In eutopic endometrium of women with endometriosis compared to endometrium of women without endometriosis, there was a significant increase in both proliferative and secretory phases for epithelial CXCR2 expression, and in proliferative phase for CXCR1 expression (P < 0.05). Both receptor immunoreactivities were significantly increased in the epithelial cells of ectopic endometrial tissues compared to that of normal endometrium (P < 0.05). CONCLUSIONS: These findings suggest that IL-8 and its receptors may be involved in the pathogenesis of endometriosis.     

Vascular endothelial growth factor A and C gene expression in endometriosis

Angiogenesis is essential for the pathogenesis of endometriosis. Gene expression levels of vascular endothelial growth factor (VEGF) A and C in 10 eutopic endometrial, 23 normal peritoneal, and 62 endometriotic tissues surgically obtained from 47 women with endometriosis (group 2) were compared with those in 12 control eutopic endometrial and 9 normal peritoneal tissues from 15 women without endometriosis (group 1). VEGF-A mRNA expression levels in eutopic endometrium of group 2 were higher than those of group 1 throughout the menstrual cycle (P <0.01) and increased in the secretory phase. VEGF-A gene expression in peritoneal endometriotic lesion was statistically higher than that in normal peritoneum (P <0.01) and similar to that in eutopic endometrium of group 2. In contrast, gene expression levels of VEGF-C were relatively lower than those of VEGF-A in each lesion, and no cyclic variation was found. VEGF-A and C mRNA expression levels were significantly higher in ovarian endometriomas >6 cm in size than in those <6 cm in size. Immunohistochemical expression of VEGF-A and C was detected in the cytoplasm of glandular epithelial and stromal cells of ovarian endometrioma. These results suggest that endometriosis may arise from eutopic endometrium with higher levels of angiogenic activity possibly induced by VEGF-A in women with endometriosis. Moreover, VEGF-C as well as VEGF-A may be involved in the pathogenesis of ovarian endometrioma.     

雌激素受体不同亚型在卵巢子宫内膜异位症在位内膜与异位内膜中的表达及其意义

目的 研究雌激素受体(ER)不同亚型在子宫内膜异位症的在位和异位内膜中的表达,以寻找其在不同病灶中的分布规律,探讨子宫内膜异位症的发病机制.方法 收集解放军总医院2004年1月-2006年12月行手术治疗的卵巢子宫内膜异位症石蜡标本,包括卵巢子宫内膜异位囊肿60例及其在位内膜60例(增生期各30例、分泌期各30例)以及正常子宫内膜30例(增生期和分泌期各15例).采用免疫组织化学(EnVision)方法检测上述组织中ERα和ERβ的表达.染色结果半定量化,并分析比较各种组织间的表达差异.结果 各组中,ERα和ERβ在腺上皮的表达与它们在间质细胞中的表达呈正相关.ERα蛋白在不同部位的表达:在位内膜ERα的表达(腺上皮和间质细胞阳性率分别为73.3%和76.7%)高于卵巢子宫内膜异位囊肿(腺上皮和问质细胞阳性率分别为43.4%和46.7%)和正常内膜的表达(腺上皮和间质细胞阳性率分别为56.7%和50.0%),均P<0.05.ERβ蛋白在不同部位的表达:卵巢子宫内膜异位囊肿(腺上皮和间质细胞阳性率分别为90.0%和76.7%)高于在位子宫内膜的表达(腺上皮和间质细胞阳性率分别为68.0%和63.3%),后者又高于正常子宫内膜(腺上皮和间质细胞阳性率分别为36.7%和26.7%),P均<0.05.在位内膜的ERα和ERβ蛋白表达在增殖期均高于分泌期,P均<0.05;异位内膜增殖期和分泌期的表达差异无统计学意义.ERα和ERβ蛋白在不同部位表达的比较:在正常内膜中ERα的表达略高于ERβ,但差异无统计学意义,P>0.05;卵巢子宫内膜异位囊肿中ERβ的表达高于ERα,P<0.05;而在位内膜中两种亚型表达差异无统计学意义.结论 子宫内膜异位症患者在位子宫内膜及异位内膜均有ERα和ERβ的表达,但与正常子宫内膜相比,在卵巢子宫内膜异位囊肿中ERβ表达占优势,而ERα表达受限.ERα和ERβ在不同组织中的分布及表达水平与子宫内膜异位症的发生和发展有着密切关系.     

基质金属蛋白酶-2、3及其组织抑制剂TIMP-1在子宫内膜异位症中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-3)及其抑制剂(TIMP-1)在子宫内膜异位症发生及发展中的作用.方法采用免疫组化SP法分别测定MMP-2、MMP-3 、TIMP-1在卵巢子宫内膜异位症异位内膜60例(A组),子宫腺肌症异位内膜40例(B组),子宫肌瘤子宫内膜30例(对照组C)的表达强度.结果 A、B组中MMP-2、MMP-3的表达强度明显高于对照组(P<0.05)而TIMP-1的表达明显低于对照组(P<0.05);A、B组间MMP-2、MMP-3 、TIMP-1 的表达无明显差异(P>0.05).结论在子宫内膜异位症中MMP-2、MMP-3的过度表达及TIMP-1的低表达可能与内异症的发生与发展有关.     

Differential expression and localization of de-novo synthesized endometriotic haptoglobin in endometrium and endometriotic lesions

Endometriosis protein-I (ENDO-I) mRNA expression and protein localization were evaluated using in-situ hybridization and immunohistochemistry in endometriotic lesions and eutopic endometrium from women with endometriosis, and in eutopic endometrium from women without endometriosis (controls). When present, ENDO-I mRNA and protein were observed in the functionalis zone of endometrial stroma and the stroma of endometriotic lesions. Expression and localization differences were scored and statistically analysed. During the secretory stage, ENDO-I mRNA expression by endometriotic lesions and eutopic endometrium from women with disease was significantly greater than ENDO-I mRNA expression by proliferative stage eutopic endometrium from women with disease or eutopic endometrium from controls, regardless of cycle stage (P < 0.001). More ENDO-I protein was localized in endometriotic lesions and eutopic endometrium from women with disease than in eutopic endometrium from controls, regardless of cycle stage (P < 0.001). Differential expression and localization of ENDO-I may help develop minimally invasive diagnostic strategies for endometriosis. Further, as ENDO-I shares nucleotide sequence and amino acid sequence with hepatic haptoglobin-which in certain disease states is immunosuppressive and angiogenic-differences in ENDO-I expression and localization in the peritoneal cavity may contribute to the pathogenesis of endometriosis and/or facilitate development of unprecedented diagnostic or therapeutic approaches for management of this enigmatic disease.     

子宫内膜异位症TGF-β_1及其基因的表达及意义

目的研究子宫内膜异位症中转化生长因子β1（TGF-β1）及其基因表达,探讨TGF-β1在子宫内膜异位症中的作用机制。方法 54例子宫内膜异位症异位内膜、在位内膜,50例对照组正常子宫内膜中,采用免疫组化方法检测TGF-β1的表达,SYBR Green实时定量聚合酶链反应（RQ-PCR）检测TGF-β1 mRNA的表达量。结果 TGF-β1在子宫内膜异位症异位内膜组中的蛋白表达显著高于在位内膜组及对照组（P〈0.05、P〈0.05）;TGF-β1在子宫内膜异位症在位内膜组中的表达与对照组中的表达无显著性差异（P〉0.05）;TGF-β1mRNA在子宫内膜异位症异位内膜中的表达量显著高于在位内膜组和对照组（P〈0.05、P〈0.05）,TGF-β1mRNA在位内膜组的表达量与对照组中的表达量无显著性差异（P〉0.05）。结论 TGF-β1可能参与子宫内膜异位症的发病机制,影响其发生发展。     

Transcriptional expression of survivin and its splice variants in endometriosis

Survivin is a novel inhibitor of apoptosis (IAP), and the two splice variants of survivin (survivin-2B and survivin-EX3) have been identified. Gene expression levels of survivin, survivin-2B and survivin-EX3 in 56 ectopic (16 peritoneal red and 16 peritoneal black lesions and 24 ovarian endometriomata) and 13 eutopic endometrial tissues surgically obtained from 42 women with endometriosis (group A) were compared with those in 16 control eutopic endometrium from 16 women without endometriosis (group B) by quantitative RT-PCR analysis. Survivin mRNA expression levels in ectopic endometriotic tissues were significantly higher than those in eutopic endometrium of groups A and B over the whole cycle. Red peritoneal lesions had higher gene expression levels of survivin than black lesions. In contrast, all tissue samples examined showed relatively lower gene expression levels of survivin-2B and survivin-EX3. No cyclic variation was found in survivin and the two splice variants, both in ectopic and in eutopic endometrium. Although there was no significant difference in the ratio of survivin-2B/survivin between ectopic and eutopic endometrium, the ratio of survivin-EX3/survivin in peritoneal endometriotic lesions was significantly higher than that of eutopic endometrium of groups A and B. These results suggest that survivin and survivin-EX3 may be closely linked to escape from apoptosis and the development of endometriosis.