HPLC法测定白斑颗粒中补骨脂素、异补骨脂素的含量

目的:建立HPLC法测定白斑颗粒中补骨脂素和异补骨脂素含量的方法。方法:采用HPLC法测定白斑颗粒中补骨脂素和异补骨脂素含量,以Hypersil C18(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.2%冰醋酸(25:75)为流动相,流速:0.8ml/min,柱温:35℃,检测波长为245nm。按外标法定量。结果:白斑颗粒中补骨脂素和异补骨脂素的线性范围均为2.5～25μg/ml(r=0.999),平均回收率均约为98%,RSD均小于2%(n=5)。结论:为白斑颗粒中药物的定性与定量分析提供了准确、灵敏的方法。     

HPLC测定白癜风胶囊中补骨脂素、异补骨脂素的含量

目的 :建立用HPLC法测定白癜风胶囊中补骨脂素、异补骨脂素的含量。方法 :色谱柱 :KromasilC18柱 (5 μm ,4 .6× 2 5 0mm) ;流动相 :甲醇 -水 (5 5 :5 0 ) ,流速 :1.0ml/min ;柱温 :35℃ ;检测波长 :2 4 5nm。以补骨脂素、异补骨脂素为对照品 ,外标法定量。结果 :补骨脂素的线性范围为 0 .0 39～ 0 .197μg(r =0 .9999) ,异补骨脂素的线性范围为 0 .0 4 3～ 0 .2 14 μg(r =0 .9999) ,平均回收率 99.2 % ,RSD =0 .4 6 %。结论 :本法简便 ,结果准确 ,可用于该制剂的质量控制。     

薄层扫描法测定咳喘平片中补骨脂素和异补骨脂素的含量

1 实验部分 1.1.1 试剂咳喘平片剂4批由南通中药厂提供;补骨脂素和异补骨脂素标准品,购于卫生部药品生物制品检定所;展开剂:正已烷(AR)——乙酸乙酯(AR)(8:2); 1.1.2 仪器 CS—930薄层扫描仪(日本岛津); 1.1.3 标准品溶液的配制分别精密称取补骨脂素和异补骨脂素标准品0.926mg和0.688mg,于10ml容量瓶中,用乙酸乙酯溶解,振摇,加乙酸乙酯至刻度。     

骨疏灵胶囊中异补骨脂素的含量测定

【目的】通过测定骨疏灵胶囊中异补骨脂素的含量以控制制剂内在质量。【方法】采用高效液相色谱法,以甲醇．水(V甲醇：V水=48：52)为流动相,流速1.1mL/min,色谱柱为C18柱,检测波长为245nm。【结果】异补骨脂素在0．0342—0．2736μg线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为92.11％(RSD=1．89％,n=5),方法重现性好(RSD=2．05％)。【结论】以高效液相色谱法检测骨疏灵胶囊中的异补骨脂素含量,可避免制剂中其他化学成分的干扰,专属性好,且操作简便。     

退白汤中补骨脂素和异补骨脂素含量测定方法研究

目的:建立双波长薄层扫描法测定退白汤中补骨脂素和异补骨脂素含量的方法。方法:选用补骨脂素λS=272nm,λR=305nm;异补骨脂素λS=275nm,λR=310nm;以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15:2:1)为展开剂,并在365nm紫外灯下检视。结果:补骨脂素在0.27~1.62μg呈良好的线性关系(γ=0.9987),平均回收率99.46%,RSD=1.34%(n=5);异补骨脂素在0.25~1.50μg呈良好的线性关系(γ=0.9992),平均回收率99.60%,RSD=1.37%(n=5)。结论:本法简便、快捷,可用于退白汤中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定。     

补骨脂素对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞体外作用的比较研究

[目的] 观察并比较补骨脂素对人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞的抑制作用.[方法] 以不同浓度的补骨脂素(25.000、12.500、6.250、3.125μg/mL)对人乳腺癌细胞株MCF-7[雌激素受体(ER)阳性]和MDA-MB-231(ER阴性)进行体外抑制实验,运用流式细胞仪观察细胞的周期变化,Annexin V和碘化丙锭(PI)双染法观察细胞凋亡情况,基因芯片检测补骨脂素对两种人乳腺癌细胞基因表达谱的影响.[结果] 补骨脂素对人乳腺癌细胞株MCF-7有显著抑制作用(P<0.05),半数抑制浓度(IC50)为15.160 μg/ml;作用24 h后,S期细胞明显减少,G1、G2期细胞增加,早期凋亡细胞明显增多.而补骨脂素对MDA-MB-231细胞无明显抑制作用,仅早期凋亡细胞增多.人类全基因组寡核苷酸微阵列芯片杂交结果显示,补骨脂素可以使MCF-7细胞出现1 053个差异表达基因,其中表达上调的有456个,表达下调的有657个.[结论] 补骨脂素对ER阳性的乳腺癌MCF-7细胞具有一定的抑制作用,其抑制肿瘤细胞生长的机理可能与将肿瘤细胞阻止在G2期相关.     

HPLC法测定五指毛桃中补骨脂素、佛手柑内醋、芹菜素的含量

目的 建立同时测定五指毛桃中补骨脂素、佛手柑内酯、芹菜素含量的高效液相色谱方法.方法 应用Hypersil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(60:40),流速为1.0ml/min,检测波长为268.7nm,柱温为30℃.结果 补骨脂素的线性范围为10.0～30.0μg/ml(r=0.9998),样品的加样回收率为99.7%,RSD1.99%;佛手柑内酯的线性范围为15.0～45.0μg/ml(r=0.9998),样品的加样回收率为99.9%,RSD1.71%;芹菜素的线性范围为5.0～15.0μg/ml(r=0.9992),样品的加样回收率为100.3%,RSD1.78%.结论 本方法简便快速,回收率、重复性良好,可用于五指毛桃中补骨脂素、佛手柑内酯、芹菜素的含量分析.     

氟比洛芬口崩片在健康家兔体内的药代动力学研究

目的 研究氟比洛芬口崩片在兔体内的药代动力学特征.方法 6只受试兔随机分成2组:单剂量交叉口服氟比洛芬口崩片1片(50 mg/片)和普通片1片(50 mg/片),于一定时间采集血样,用高效液相色谱法测定24 h内的血浆药物浓度.采用DAS2.0软件对有关参数进行方差分析.结果 氟比洛芬口崩片和普通片T_(1/2)(h)分别为(7.072±1.102)和(6.338±1.913),C_(max)(μg/ml)分别为(11.473±0.542)和(11.558±0.437),T_(max)(h)分别为(0.292±0.102)和(0.917±0.129),auc(0-t)(μg/ml·h)分别为(77.441±10.677)和(76.741±11.890),AUC(0-∞)(μg/ml·h)分别为(84.836±12.588)和(83.305±16.980).氟比洛芬口崩片平均相对生物利用度为102.7%.结论 氟比洛芬口崩片与普通片具有生物学等效性.     

吲哚美辛对荷瘤BALB/c小鼠的抗肿瘤作用

用荷S_(180)腹水肉瘤的BALB/c小鼠为动物肿瘤模型,检测其血浆中PGE_2的水平,用吲哚美辛(消炎痛,IN)肌肉注射及灌服的方法观察对S_(180)腹水肉瘤的作用。结果荷瘤小鼠血浆PGE_2为2414pg/ml,比正常对照组高1081ps/ml(P<0.05);经IN作用的荷瘤小鼠血浆PGE_2在218pg/ml以下,明显低于荷瘤对照及正常对照组(P>0.01),NK细胞杀伤活性增强,肿瘤明显小于不用药的荷瘤对照组(P<0.05)。提示PGE_2与肿瘤的发生与发展有关,IN具有抑制肿瘤生长的作用。     

补骨脂素对HL60/HT耐药细胞的逆转作用及对细胞内钙离子浓度的影响

目的研究补骨脂素对HL60/HT耐药细胞的逆转作用及对耐药细胞内Ca2 浓度的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用MTT法测定补骨脂素对细胞增殖的抑制作用,高效液相色谱法检测细胞内三尖杉酯碱(HT)的量,激光共聚焦显微镜测定细胞内不同时段和不同时间点的Ca2 浓度。结果补骨脂素在1~20μmol/L能不同程度降低HT对HL60/HT细胞的IC50,并不同程度提高细胞内HT的量;1~20μmol/L补骨脂素作用不同时段(24、48、96h),HL60/HT细胞内Ca2 浓度与作用时间成负相关,10和20μmol/L补骨脂素作用HL60/HT不同时间(5、10、15、20、25min),细胞内Ca2 浓度与作用成负相关性。结论补骨脂素能逆转HL60/HT细胞的多药耐药,其作用机制与影响耐药细胞内Ca2 浓度、增加细胞内HT的量有关。     

静注异丙酚、咪唑安定对血流动力学及呼吸功能的影响

目的：比较静注异丙酚和咪唑安定对血流动力学及呼吸功能的影响。方法：60例ASAⅠ~Ⅱ吸择期手术患者随机分为异丙酚组（P组，n=30）和咪唑安定组（M组，n=30），静注等效剂量的异丙酚和咪唑安定，观察时血流动力学和呼吸功能的影响。结果：异丙酚组MAP HR SVRI的下降幅度明显大于咪唑安定组，CI两组之间无显著性差异。给药后呼吸暂停发生率及持续时间、PaCO2上升幅度异丙酚组亦明显高于咪唑安定组。结论：咪唑安定对心血管和呼吸系统的抑制轻于异丙酚。     

角化脱屑型手足癣的诊断和治疗

目的：寻找更好的方法诊断和治疗角化脱屑型手足癣。方法：对１７４例临床拟诊为角化脱屑型手足癣的患者采用改良ＫＯＮＣＰＡ法进行真菌学检查，并与ＫＯＨ法、真菌培养法进行对照。受试患者随机予以伊曲康唑０．２ｇ，２／ｄ，用７ｄ（Ⅰ组）；０．２ｇ，２／ｄ，用１４ｄ（Ⅱ组）；特比萘芬０．２５ｇ，１／ｄ，用１４ｄ（Ⅲ组）；质量分数为０．０１的萘替芬霜外用３０ｄ（Ⅳ组）及０．０１（质量分数）特比萘芬霜外用３０ｄ（Ⅴ组）进行治疗。结果：ＫＯＨ法检查真菌阳性率为６２．４％，真菌培养法为８６．７８％，改良ＫＯＮＣＰＡ法为１００％（Ｐ＜０．００１）。Ⅰ组治愈８例（８／３０），有效１３例（１３／３０）；Ⅱ组治愈３１例（３１／５１），有效４２例（４２／５１）；Ⅲ组治愈２２例（２２／３３），有效３２例（３２／３３）；Ⅳ组治愈２２例（２２／３６），有效３５例（３５／３６）；Ⅴ组治愈１７例（１７／２４），有效２４例（２４／２４）。结论：（１）改良ＫＯＮＣＰＡ法明显优于ＫＯＨ法与真菌培养法；（２）萘替芬霜或特比萘芬霜可作为首选药；（３）伊曲康唑０．２ｇ，２／ｄ，１４ｄ疗法明显优于７ｄ疗法；（４）特比萘芬治疗角化脱屑型手足癣临床疗效优于伊曲康唑     

大肠肿瘤组织印片和切片DNA及AgNOR蛋白定量的对比观察

用Ｆｅｕｌｇｅｎ－ＡｇＮＯＲ结合染色方法对大肠肿瘤组织印片和切片细胞的ＤＮＡ和ＡｇＮＯＲ蛋白进行染色，用图像分析进行同一细胞二者含量同步检测。结果表明，在ＤＮＡ和ＡｇＮＯＲ含量的检测中，印片样品比组织切片样品更能精确、真实地反映ＡｇＮＯＲ与ＤＮＡ含量在大肠癌发生过程中相关性变化。印片样品方法简单、出结果快，并能推广到脱落细胞和穿刺取材细胞的ＤＮＡ和ＡｇＮＯＲ含量的同步测定。     

丙型肝炎分子生物学、血清学诊断方法的研究和临床应用

Using techniques of molecular biology and serology, we research on the establishment of HCV diagnotic quality control standard, HCV diagnostic materials, anti-HCV EIA diagnostic method, detection of serum HCV RNA,detection of HCV RNA in liver tissue by in situ PCR, and the establishment of monoclonal hybridoma cell line of HCV C33c and NS5a. Successfully prepared diagnostic kits have applied in screening of blood donor, clinical diagnosis,observation of treatment effect and research on pathogenesis of hepatitis C. After the use of these reagents, the transmission rate of HCV through blood product has been dramatically reduced.     

用聚合酶链反应技术检测流产和死胎组织的巨细胞病毒与弓形虫

作者通过人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）分离、套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）及限制酶切分析、弓形虫分离及一次性ＰＣＲ，对不明原因的流产、死胎组织进行ＨＣＭＶ与弓形虫检测。结果发现，２８份流产、死胎组织中，１例死胎肺组织ＨＣＭＶＤＮＡ阳性，但病毒分离阴性；１例胎儿心、肺、脑、肝、肾、眼组织弓形虫ＤＮＡ阳性，其脑、肺、眼、肝组织经动物接种后，在小白鼠腹水中找到弓形虫滋养体，但心、肾结果阴性。结果提示：临床上有些不明原因的流产、死胎可能是由于胎儿感染ＨＣＭＶ或弓形虫所致。ＰＣＲ技术较常规病原体分离敏感、快速，适合于ＨＣＭＶ／弓形虫感染所致流产、死胎的早期诊断。     

戊二醛脱毒前后的百日咳杆菌外膜蛋白及其组分的毒性与免疫原性

应用TritonX-100抽提和Sephadex G-100层析获得百日咳杆菌外膜蛋白(OMP)及其5个组分(OMP_1～OMP_5).OMP_1～OMP_4均具有促白细胞增多、组胺敏感和胰岛活化蛋白的活性.OMP及其各组分对中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)具有毒性作用,可使该细胞聚集生长、~3H-TdR掺入量下降,及核糖体大量脱落和膜旁颗粒减少等现象.OMP组分OMP_1～OMP_4经0.3%戊二醛处理后,上述生物学活性均明显下降,CHO细胞不出现聚集生长,~3H-TdR掺入量明显高于未脱毒的组分,与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05).脱毒前后的OMP各组分对小鼠的主动保护作用未见明显变化(P>0.05).实验结果表明,戊二醛能有效地降低OMP_1～OMP_4的毒性,但脱毒后的OMP_1～OMP_4仍具备较强的免疫原性和保护力.因此,OMP及其组分经戊二醛处理后,有希望成为百日咳杆茵的无细胞疫苗.     

股神经与闭孔神经肌支的定位观察

目的：为大腿部创伤修复及肌瓣移植提供形态学依据。方法：采用解剖剥离测量方法，对３６具（共７２侧）成人下肢标本的股神经和闭孔神经进行自身比例定位研究。结果：①股神经和闭孔神经发出的各肌支主要以１支型出现率最多；②股神经和闭孔神经发出的各肌支主要集中于大腿的１段和２段；③股神经和闭孔神经发出的各肌支进入各肌的区位，均有倾向于以神经干为轴心近距离分布的规律。结论：确定了股神经和闭孔神经肌支的危险区段和危     

妊娠中晚期心血管血流参数变化

采用心血管血流参数无损伤检测仪（ＴＰ－ＣＢＳ），对本院３００例妊娠中晚期孕妇检测收缩压、舒张压、脉压差、平均动脉压、心率、心搏输出量、心输出量、心搏指数、心脏指数、外周阻力、血管顺应性、脉搏波形系数、血液粘性等进行监测，发现妊娠期母体心血管系统发生一系列适应性的生理变化；随着孕龄的增加、舒张压、平均动脉压、心输出量、心率、血管顺应性均明显增加，但外周阻力明显降低。这一变化过程与胎盘循环的建立，母体血容量增加，心脏负荷加重等有着密切的关系。     

霍乱肠毒素的纯化与鉴定

本法纯化的肠毒素有下列特点:1.纯化毒素与粗制毒素对抗血清呈现单一线条,并与标准抗血清完全融合。2.经免疫电泳、等电点聚焦电泳等方法测定其结果与美国制备肠毒素一致。3.本法所纯化的毒素与自然类毒素未分开,其家兔兰斑试验为IBD/0.002μg,回收率达35%,且杀弧菌抑制试验为阴性。     

新生儿及其生母血清、头发中的锌、铜含量

本文报导42例足月新生儿及其生母血清、头发中的锌、铜含量。新生儿血清锌81.66μg/dl、铜40.45μg/dl，铜/锌比值为0.49。母亲血清锌43.78μg/dl，非常显著地低于新生儿组；而血清铜268.48μg/dl，铜/锌比值8.71，非常显著地高于新生儿组。新生儿发锌234.27μg/g，非常显著地高于母亲组（171.06μg/g）。新生儿与母亲的血清铜、铜/锌比值、头发铜、铜/锌比值呈显著正相关。新生儿血清铜与发铜呈显著正相关。提示用头发锌、铜含量来判断机体的锌、铜营养状况是可取的。