Caspase家族与神经细胞凋亡的研究进展

Caspase家族是研究细胞凋亡的热点话题,而缺血性脑血管病是人类三大主要的死亡原因之一,其发病机制较复杂,随着细胞分子生物技术的发展,使缺血性脑血管病发病机制的研究进入了分子水平。神经细胞凋亡在缺血性脑血管病的发生、发展过程中的起着重要的作用。半胱氨酸天冬氨酸酶(Caspase)是一种促使细胞凋亡的蛋白酶,在细胞凋亡机制网络中处于核心地位。本文将综述Caspase家族与神经细胞凋亡的关系,以阐明其在缺血脑损伤中的作用。     

普鲁卡因拮抗氰化物中毒机理初探

普鲁卡因具有一定拮抗氰化物中毒的作用。本文通过测定小鼠神经细胞内钙离子浓度，外周血中高铁血红蛋白浓芳以及不同时间血中氰化钾浓度水平，研究其作用机理。结果发现：普鲁卡因拮抗氰化物中毒的机理与拮抗氰化物中毒所造成的神经细胞内钙离子浓度升高有关，从而可防止因钙内环境紊乱所带来的细胞损伤。     

氨培养胎鼠神经细胞钙离子浓度变化与凋亡的相关性

目的 观察体外培养神经细胞在氨作用下钙离子浓度变化与凋亡的关系,探讨氨毒性机制.方法 体外培养胎鼠神经细胞7d,实验分组为对照组、低氨组和高氨组;分别作用24 h后,用流式细胞仪测定神经细胞凋亡比率,用Fluo-3/AM荧光探针测定细胞内钙离子浓度.结果 对照组神经细胞有少量凋亡,细胞内钙离子浓度正常,随着NH4CL浓度的提高,细胞内钙离子浓度明显升高,神经细胞凋亡增加.低氨组和对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）,高氨组和低氨组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 氨诱导神经细胞凋亡与细胞内钙离子浓度相关.     

尼莫地平对脑挫裂伤后神经细胞内游离钙浓度的影响

目的〓〖HTK〗研究尼莫地平对脑挫裂伤后神经细胞胞浆内游离钙离子浓度变化的影响。〖HTW〗方法〓〖HTK〗将Wistar大鼠随机分为对照组、创伤组、治疗组；创伤组按照Feeney自由落体脑损伤模型方式制作大鼠左顶叶脑挫裂伤模型，治疗组在外伤后开始静脉滴注尼莫地平。分别对脑挫裂伤后0.5、1、3、6、12、24、48h各时相点细胞内游离钙离子浓度和细胞凋亡率进行检测。对不同时相的创伤组、治疗组和对照组进行比较分析。〖HTW〗结果〓〖HTK〗脑挫裂伤后大脑皮层神经细胞内游离钙离子浓度迅速升高，0.5h时为正常值的4倍，24h时达到高峰，48h时降低明显，但仍然维持在比较高的水平。应用尼莫地平治疗后，钙离子浓度显著降低，6h时降至接近正常水平。脑挫裂伤后神经细胞凋亡率和胞内游离钙离子浓度存在相关性。〖HTW〗结论〓〖HTK〗脑挫裂伤后神经细胞胞浆内钙离子浓度升高，导致钙超载并引起细胞凋亡。早期应用尼莫地平能抑制钙超载，抑制细胞凋亡，对神经细胞具有极强的保护作用。     

血栓通对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡影响的研究

目的 研究血栓通在脑缺血再灌注过程中对神经细胞的作用机理,特别是血栓通与细胞凋亡的关系。方法 利用末端标记法,测定血栓通干预后脑缺血鼠脑组织中神经细胞的凋亡情况。结果 血栓通能明显降低神经细胞凋亡百分率,降低凋亡神经细胞积分光密度,减轻病理损害。结论 血栓通可显著抑制缺血再灌注诱导的脑神经细胞凋亡,起到一定程度的神经保护作用。     

小檗碱对人鼻咽癌CNE-2细胞内钙含量的影响

研究表明，小檗碱对鼻咽癌细胞有明显的抑制作用。细胞内线粒体参与了肿瘤细胞增殖、凋亡的过程，线粒体的功能与线粒体膜的通透性即跨膜电位差密切相关。有实验证实，细胞内大量钙离子储存于线粒体内，钙离子在诱导细胞凋亡中起重大作用。本研究小檗碱作用于体外培养的人鼻咽癌CNE-2细胞，观察CNE-2细胞内钙离子浓度水平变化，探讨小檗碱对鼻咽癌CNE-2瘤株抑制的分子机理。     

白藜芦醇通过Ca2+/Caspase-3途径减轻内质网应激诱导的神经细胞凋亡

目的：研究白藜芦醇对内质网应激诱导神经细胞凋亡的影响及机制。方法：采用内质网应激诱导剂毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)处理PC12细胞,构建内质网应激模型。免疫印迹法检测GRP78蛋白表达,激光共聚焦和Fluo-3/AM检测胞浆钙离子浓度,比色法测定Caspase-3活性,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果：白藜芦醇减轻内质网应激诱导剂TG引起的GRP78高表达,阻止内质网应激诱导的钙超载。白藜芦醇和钙离子螯合剂BAPTA均抑制内质网应激诱导的Caspase-3活化和神经细胞凋亡。结论：白藜芦醇可能通过Ca²⁺/Caspase-3途径抑制内质网应激诱导的神经细胞凋亡。     

三磷酸胞二钠对大鼠局灶性脑缺血再灌注后Fas蛋白表达的影响

近几年来，大量的研究表明脑缺血再灌注后海马区出现神经细胞凋亡．其发生的机制尚不十分清楚。细胞凋亡的发生是一个主动的细胞死亡过程，是由基因调控的。凋亡相关的基因通常分为二大类，即抗凋亡基因和促凋亡基因。Fas为目前发现的最重要的促凋亡基因之一。我们就大鼠脑缺血再灌注后海马区Fas蛋白的表达规律进行研究。同时，给予三磷酸胞二钠(维力安)进行治疗，探讨维力安的脑保护作用。     

热休克应答对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响

目的:研究热休克应答对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响,探索热休克蛋白70治疗缺血性再灌注损伤的应用前景。方法:将46只成年Wistar大鼠随机分为假手术组、对照组与试验组。除假手术组大鼠外,其余大鼠均制作全脑缺血再灌注动物模型,对照组不进行热休克应答干预,试验组在全脑缺血再灌注后进行热休克干预,即静脉注射热休克蛋白70,分别于不同时间段(6小时、12小时)检测各组大鼠脑神经细胞凋亡数目,对比分析各组大鼠神经细胞凋亡情况的差异,验证热休克蛋白70对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的保护作用。结果:与对照组比较,试验组大鼠脑神经细胞凋亡数目减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:热休克应答对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡有保护性作用,热休克蛋白70对缺血性脑血管病再灌注损伤有一定的治疗前景。     

脑缺血性疾病的临床研究进展（五）

神经细胞内的Ca^2+与神经递质的释放和中枢神经系统基本电活动和脑的高级功能密切相关，对神经细胞生长、演变和再生过程具有调节作用。但细胞内钙超载是细胞损伤级联反应的重要环节，是细胞死亡的主要原因（坏死与凋亡），细胞外钙离子主要通过电压门控性钙通道，受体门控性钙通首和机械激活性（又称牵张活化性）钙通道进入细胞内。钙通道的开启和关闭构成通道的门控过程，此过程具有激活态、失活态和静息态三种状态。静息状态时通道大多关闭，此时膜外Ca^2+几乎不能通过。     

脑缺血再灌注损伤神经细胞凋亡的形态学特征

①目的 观察局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的形态学特征。②方法 应用苏木精-伊红染色、甲基绿-派诺宁染色和透射电镜技术观察凋亡神经细胞的形态结构特征。③结果 苏木精-伊红染色：缺血半影区神经细胞数量减少，细胞核染色质凝聚，未见到典型的凋亡细胞。甲基绿-派诺宁染色：缺血半影区细胞数量减少，结构完整，可见到少数胞浆呈紫红色且胞核呈绿色的凋亡细胞。透射电镜：在缺血半影区，神经细胞细胞核固缩、染色质凝聚，胞膜完整、胞质减少，线粒体和内质网结构清晰，可见到不典型的凋亡小体。缺血中心区细胞核染色质溶解、核膜破坏，细胞浆线粒体和内质网等细胞器溶解，细胞轮廓不清。④结论 脑缺血再灌注缺血中心区神经细胞主要表现为坏死特征，缺血半影区主要表现为凋亡特征。     

百草枯暴露致帕金森病神经细胞程序性死亡机制研究进展

神经细胞尤其是多巴胺能神经元的程序性死亡是帕金森病(PD)的主要病理改变,涉及细胞凋亡、自噬样细胞死亡、细胞坏死等多种类型。百草枯能选择性地破坏黑质纹状体系统,诱发神经细胞的程序性死亡,导致PD。百草枯致PD的机制包括细胞凋亡和神经元自噬的过度激活以及星形胶质细胞的自噬障碍,可导致病理性蛋白聚集和清除障碍以及细胞坏死死亡通路的异常。百草枯暴露导致PD神经细胞程序性死亡的机制复杂,目前具体机制尚不清楚。     

银杏内酯B对谷氨酸诱导视网膜神经细胞凋亡的影响

【目的】探讨银杏内酯B拮抗谷氨酸诱导的体外培养新生大鼠视网膜神经细胞凋亡作用及其可能的机制。【方法】MTT法检测不同浓度谷氨酸对原代培养sD大鼠视网膜神经细胞的兴奋性毒性作用。细胞分为正常组、谷氨酸组和不同浓度（10、50、100μmol／L）银杏内酯B治疗组（n=6）。MTT法检测不同浓度的银杏内酯B对谷氨酸诱导凋亡的视网膜神经细胞存活率的影响。流式细胞仪结合AnnexinV／PI检测细胞凋亡率，JC-1染色检测线粒体膜电位。【结果】100μmol／L谷氨酸作用下，视网膜神经细胞的吸光度值降低至0．50&#177;0．07，凋亡率为52．4％，JC-1的红／绿比值为1．77。10～100μmol／L银杏内酯B作用下神经细胞的吸光度值分别为0．52&#177;0．09、0．64&#177;0．15和0．74&#177;0．11，细胞的凋亡率分别下降至36．7％，12．4％和2．1％，JC-1的红／绿比值则分别上升为1．898、2．089、2．276（P〈0．05）。【结论】银杏内酯B可以拮抗谷氨酸诱导的视网膜神经细胞凋亡。其作用机制可能与提高线粒体膜机能有关。     

THH碱不通过钙离子信号通道诱导Jurkat淋巴瘤细胞株凋亡

目的 探讨昆明山海棠碱在凋亡中对细胞内游离钙离子浓度的影响。方法 THH碱诱导Jurkat细胞后，采用Indo-1 AM及PI进行细胞染色、流式细胞术等手段在单细胞水平上检测细胞内钙离子浓度的变化。结果 THH碱诱导后细胞内钙离子浓度未见明显变化。结论 THH碱不通过钙离子信号通道诱导Jurkat细胞凋亡。     

缺血性脑血管病急性期氧化应激反应的机制研究

缺血性脑血管病的发病率逐年升高,其机制涉及众多。其中氧化应激损伤在脑缺血后神经细胞损伤中起了关键作用。氧化应激导致活性氧产生,直接损伤神经细胞,引发凋亡,激活一系列的损伤级联反应,涉及线粒体、Bcl家族、caspase以及钙蛋白酶等,并激活小神经胶质细胞的吞噬作用。对以上各种途径的深入研究,将为有效地防治缺血性脑血管病提供帮助。     

谷氨酸介导的大脑皮层神经细胞凋亡

目的 观察相对低浓度谷氨酸（Glutamate,Glu)对培养皮层神经细胞的兴奋毒性作用。方法 以30μmol／L处理培养第7天神经细胞30min，应用吖啶橙色荧光显微镜观察及流式细胞仪定量分析法，分别观察Glu作用后细胞凋亡形态特征及不同时间点（6h,12h,18h,24h)凋亡细胞所占比例。结果 Glu作用后6h即有凋亡细胞的出现，12h后渐增多，以18h达到高峰，为12％。结论 相对低浓度Glu可诱导大脑皮层神经细胞凋亡。     

缺血/缺氧性神经细胞凋亡与中药黄精药理作用研究进展

缺血／缺氧性脑损伤常见于脑中风、癫痫、老年性痴呆等脑疾病，其病理损害主要是缺血／缺氧所引发的损伤，即急性期导致神经元坏死及慢性期导致神经元凋亡。缺血性脑损伤时神经细胞凋亡和坏死并存，共同参与梗塞区的形成；凋亡主要位于半暗区，坏死发生于缺血中心区。抑制半暗区向缺血中心区的发展是缺血性脑血管病治疗的关键．即抑制神经细胞凋亡的发生有利于缺血性脑血管疾病的治疗。     

慢性压迫性脊髓损伤神经细胞凋亡的实验研究(摘要)

细胞凋亡是一种广泛存在于生理及病理情况下的细胞主动死亡方式,与细胞有丝分裂相辅相成,调节机体内细胞生长与消亡的平衡,具有重要的动力学意义。大量研究表明在中枢神经系统缺血和创伤的继发病理过程中有大量神经细胞凋亡,神经细胞凋亡可能是迟发性神经细胞死亡的主...     

Nrf2在脑外伤后细胞钙离子稳态及凋亡中的作用

目的 Nrf2在脑外伤后脑保护可能具有重要的作用,其作用机制尚不明确;文中研究Nrf2在脑外伤后继发性脑损伤中对神经细胞钙离子稳态及凋亡的影响并探讨其可能的作用机制. 方法 用自由落体致伤的方法 制作小鼠脑外伤模型,分为Nrf2( -/ - )外伤组、Nrf2( +/ + )外伤组、Nrf2( -/ - )对照组、Nrf2( +/ + )对照组;分别检测实验性外伤24 h后神经细胞内游离钙离子浓度和神经细胞凋亡指数. 结果 外伤组脑组织神经细胞内游离钙离子浓度、神经细胞凋亡指数显著高于对照组(P＜0.01);与Nrf2( +/ + )外伤组相比,Nrf2( -/ - )外伤组改变更显著(P＜0.05);对照组之间无明显差异(P＞0.05). 结论 Nrf2通路是脑外伤后保持神经细胞钙离子稳态和减轻神经细胞凋亡的保护性通路.     

大鼠脑创伤后Fas mRNA表达与细胞凋亡关系及GM-1的脑保护作用

目的 通过观察大鼠脑创伤后海马区Fas mRNA的表达及细胞凋亡的情况，进一步探讨脑创伤后细胞凋亡的机制和GM-1的脑保护作用。方法 建立Marmarou颅脑创伤模型，同时给予GM-1治疗，采用TUNEL和原位杂交方法观察细胞凋亡及Fas mRNA在脑创伤后的变化规律。结果 脑创伤后海马区神经细胞过度地表达Fas mRNA，并且该区出现明显的神经细胞凋亡，GM-1能够使Fas mRNA的表达高峰及神经细胞凋亡高峰下调。结论 Fas的过度表达可能是脑创伤后神经细胞凋亡的重要原因。GM-1可能通过抑制Fas的表达，减少神经细胞凋亡发挥脑保护作用。