日常食品及食物中毒样本中金黄色葡萄球菌肠毒素的分型检测分析

目的通过对北京市海淀区日常食品及食物中毒样本检出的金黄色葡萄球菌进行肠毒素分型检测,比较两种分离菌株的肠毒素分布差异。方法实验所用的金黄色葡萄球菌为2007-2012年海淀区日常食品和食物中毒样本中分离检出的菌株,依据GB 4789.10-2010采用ELISA方法测定金黄色葡萄球菌肠毒素(SEA-SEE)。结果 127株金黄色葡萄球菌中有108株肠毒素阳性,产肠毒素阳性率为85.0%。日常食品检出金黄色葡萄球菌93株,76株菌产肠毒素,产肠毒素阳性率为81.7%;食物中毒样本检出金黄色葡萄球菌34株,32株菌产肠毒素,产肠毒素阳性率为94.1%。产1种肠毒素和同时产3种肠毒素的菌株分别是47、37株,在产毒株中分别占43.5%和34.3%。食物中毒分离株产SEA和SED的比例(65.6%、65.6%)大于日常食品分离株(32.9%、30.3%).共有98株菌产SEE,在产毒株中占90.7%,肠毒素类型分布由高到低依次为E、A、D、C、B。结论食源性金黄色葡萄球菌产毒素能力较强,金黄色葡萄球菌食物中毒分离株和日常食品分离株在肠毒素分布上有差异。     

82株不同来源金黄色葡萄球菌肠毒素的分型检测分析

目的通过对金华市区日常食品标本、医院病人标本中分离出的金黄色葡萄球菌进行肠毒素分型检测,比较不同来源分离菌株的肠毒素分布差异。方法实验所用的金黄色葡萄球菌为2012年-2013年金华市区日常食品、医院病人标本中分离的菌株。依据GB 4789-2010采用ELISA方法测定金黄色葡萄球菌肠毒素(SEA-SEE)。结果 82株金黄色葡萄球菌中检出62株肠毒素阳性,产肠毒素阳性率为75.6%(62/82),产1种肠毒素和同时产2种及以上肠毒素的菌株分别为24株和30株。日常食品中检出金黄色葡萄球菌40株,29株产肠毒素,阳性率为72.5%;医院病人标本中分离出42株金黄色葡萄球菌,33株产肠毒素,阳性率为78.6%。结论金黄色葡萄球菌产肠毒素能力较强,医院病人分离株和日常食品分离株在肠毒素分布上差异无统计学意义。     

72株不同来源金黄色葡萄球菌肠毒素的分布及耐药性分析

目的通过对瑞安市日常食品、公共场所、食物中毒样本中分离出的金黄色葡萄球菌进行肠毒素分型和耐药性检测,比较不同来源分离菌株的肠毒素分布和耐药性差异。方法采用ELISA方法测定金黄色葡萄球菌肠毒素(SEA-SEE),用K-B法测定分离菌株对抗菌药物的耐药性。结果 72株金黄色葡萄球菌的肠毒素检出41株,阳性率为56.94%。其中30株产2种及2种以上肠毒素。食物中毒样本、公共场所、日常食品分离株的肠毒素阳性率依次为94.44%、53.33%、33.33%。不同来源样本分离株产肠毒素阳性率差异有统计学意义(χ~2=15.94,P0.05)。72株金黄色葡萄球菌除对左氧氟沙星、万古霉素不耐药外,对其他8种抗菌药物均存在不同程度耐药。结论金黄色葡萄球菌对多数抗菌药物存在不同程度的耐药,临床治疗应建立在体外药敏试验基础上,有针对性地选择抗菌药物。     

食品中金黄色葡萄球菌污染状况及其肠毒素基因分析

目的了解南平市食品中金黄色葡萄球菌污染状况及该菌携带肠毒素的基因分型,为食源性疾病的防控提供依据。方法共采集8大类食物样品共454份,依据GB 4789.10-2010对样品进行金黄色葡萄球菌培养、分离和鉴定,用Real-time PCR法检测菌株携带肠毒素SEA-SEE情况。结果454份样品中检出金黄色葡萄球菌38株(8.4%),其中肉与肉制品和速冻米面制品的检出率13.3%,其次是餐饮食品(9.3%)、自制饮料和食用冰(8.8%)、冷冻饮品(3.3%),婴幼儿食品、乳及乳制品和膨化食品均未检出。38株金黄色葡萄球菌中,产肠毒素阳性8株(21.1%),主要携带SEA、SEB和SED。结论南平市部分食品受一定程度金黄色葡萄球菌的污染,肉与肉制品和速冻米面制品的污染情况较严重,控制生肉制品类的污染,特别应防止其交叉污染,可有效控制该菌引起食物中毒的发生,但更应重视的直接入口食品的污染。     

金黄色葡萄球食品分离株肠毒素基因型分析

目的:检测金黄色葡萄球菌食品分离株肠毒素基因的阳性率和型别,比较生牛奶分离株和其它食品分离株肠毒素基因阳性率和分布状况。方法:采集生牛奶和其它食品标本,用国标方法分离鉴定金黄色葡萄球菌,VITEK32生化验证。应用PCR检测肠毒素,比较生牛奶分离株和其它食品分离株肠毒素基因阳性率,分析不同型别肠毒素基因分布特征。结果:金黄色葡萄球菌食品分离株肠毒素基因阳性率为67.5%,生牛奶分离株和其它食物分离株肠毒素基因阳性率没有显著差异,生牛奶分离株的新型肠毒素基因(SEG-SE J)阳性率显著高于其它食品分离株的。结论:金黄色葡萄球菌食品分离株肠毒素基因阳性率较高,生牛奶分离株肠毒素基因型与其它食品分离株肠毒素基因型的分布不同。     

金黄色葡萄球菌食品和病人分离株肠毒素基因和耐药性比较

目的：对金黄色葡萄球菌食品（不含生牛奶）分离株和病人分离株的肠毒素基因进行分型和耐药性检测,比较两种分离菌株的肠毒素基因分布和耐药性差异。方法：用国标方法分离鉴定金黄色葡萄球菌,VITEK32生化验证,PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素基因（肠毒素SEA-SEJ基因）,VITEK32测定分离菌株抗生素的耐药性。结果：从病人分离的80株金黄色葡萄球菌检测到9种基因。肠毒素基因携带率为85.0%,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占76.3%,含传统肠毒素基因（SEA-SEE）的菌株占43.8%,有新发现肠毒素基因（SEG-SEJ）的菌株占71.3%。从食品中分离的51株金黄色葡萄球菌检测到7种肠毒素基因。肠毒素基因携带率为68.7%,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占21.6%。有SEA基因的占27.5%,含其它传统的毒素基因类型（SEB-SEE）基因的菌株占23.5%,携带新发现的毒素基因SEG、SEH、SEI的菌株只占9.8%。金黄色葡萄球菌病人分离株与食品分离株的耐药谱和耐药率有较大差异。结论：金黄色葡萄球菌食品分离株和病人分离株的肠毒素基因分布不同,其耐药性有明显区别。     

1起金黄色葡萄球菌引起食物中毒的实验室检测

目的查明食物中毒原因,检出病原菌。方法引用中华人民共和国国家标准——食品微生物学检验及中华人民共和国卫生行业标准——食物中毒诊断标准及技术处理原则,进行病原菌分离、鉴定及判断。另用荧光定量PCR检测sea,seb,sec,sed,see 5种常见金黄色葡萄球菌肠毒素基因,进行分子分型。结果 75样品中分离出10株金黄色葡萄球菌,其中有3株来自食品样本,2株来自饮用水,工用具1株,病人4株。10株阳性株中,有8株荧光定量PCR检测sea肠毒素基因阳性。结论本起食物中毒是由水质污染的金黄色葡萄球菌肠毒素（sea基因）引起。     

89株不同来源金黄色葡萄球菌耐药及肠毒素基因分析

目的分析宁波市不同来源(食品、食物中毒、环境物表)金黄色葡萄球菌对常用抗生素的耐药性及肠毒素基因携带情况,为临床合理用药提供依据,预防和控制由该菌引起的相关疾病。方法采用Kirby-Bauer纸片扩散法检测金黄色葡萄球菌对17种临床常用抗生素的敏感性。采用mini-VIDAS检测肠毒素,同时用常规PCR方法扩增分析不同来源金黄色葡萄球菌携带sea、seb、sec、sed、see 5种肠毒素基因情况。结果 89株金黄色葡萄球菌菌株有26株检出肠毒素基因,检出率为29.2%,而来源于食物中毒、食品、环境物表菌株肠毒素基因检出率分别为100.0%、22.9%、10.3%。食物中毒菌株肠毒素基因主要为seb。药敏检测结果显示对青霉素(83.1%)和红霉素(33.7%)耐药性较高,菌株存在多重耐药性。结论食源性金黄色葡萄球菌产毒素能力较强,宁波地区食物中毒菌株肠毒素基因主要为seb。金黄色葡萄球菌对多种药物耐药,提示安全用药的重要性。     

一起食物中毒事件金黄色葡萄球菌肠毒素及肠毒素基因检测与分析

目的了解分离自食物中毒事件的金黄色葡萄球菌肠毒素的型别,并对肠毒素基因携带情况及菌株分子分型进行分析。方法对分离自某起食物中毒的12株金色葡萄球菌分离株进行生化鉴定,采用微孔板酶联免疫法(ELISA)、酶联荧光免疫法(ELFA)、聚合酶链反应(PCR)进行肠毒素型别和肠毒素基因检测,并应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)法对菌株进行分子分型,应用Bio Numerics软件对不同来源的菌株进行比对,分析菌株之间的相关性。结果 12株来源于患者和食物样本的菌株经ELFA、ELISA法检测,结果均为阳性,其中1株来源于某患者呕吐物样本的菌株为肠毒素B型,其余11株来源于该患者的肛拭样本和其他样本的菌株均为肠毒素A型。肠毒素基因检测结果显示,除1株未能检出肠毒素基因外,1株检出肠毒素基因seb,10株检出肠毒素基因sea,其中8株同时检出肠毒素基因see。PFGE分型结果显示,11株菌为1型,1株菌为2型。结论金黄色葡萄球菌肠毒素检测对明确引起食物中毒的原因十分重要,PFGE分型技术有助于食物中毒的溯源研究。     

一起由金黄色葡萄球菌肠毒素引起超市食物中毒的病原学分析

目的 了解一起疑似金黄色葡萄球菌肠毒素引起食物中毒事件的病原学及溯源分析。 方法 对采集的样本进行分离培养鉴定,所得金黄色葡萄球菌进行肠毒素胶体金法快速初判定, PCR法检测肠毒素基因,酶联免疫法检测葡萄球菌肠毒素,同时进行耐药监测,并对不同来源分离株进行脉冲场凝胶电泳(pulse field gel electrophoresis,PFGE)分子分型,分析菌株之间的相关性。 结果 对患者、食品及相关加工工具,从业人员共检出13株金黄色葡萄球菌;13株分离株肠毒素基因为sea+see;肠毒素为SEA+SEE混合型;PCR法和酶联免疫法结果一致,PFGE对不同来源分离株同源性准确锁定,显示13株分离株分子分型同源性为100%;药敏结果显示,13株菌均对青霉素和四环素耐药。 结论 本起食物中毒由产肠毒素SEA+SEE混合型的金黄色葡萄球菌污染食物所致,PCR法与酶联免疫法同时检测葡萄球菌肠毒素,对食物中毒病因准确定位,PFGE分子分型对不同来源菌株溯源分析起到关键作用。相关部门应加大监管力度,加强从业人员健康教育。     

市售生鲜肉食品中金黄色葡萄球菌基因分型与毒素基因检测

【目的】了解市售生鲜肉中金黄色葡萄球菌的污染、群体遗传多样性和毒素基因携带规律,为金黄色葡萄球菌的污染防控提供依据。【方法】按照GB4789.10—2016对金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,采用多位点序列分型方法(MLST)进行分子分型,利用PCR方法检测11种毒素基因的携带情况。【结果】148份样品中有56份检出金黄色葡萄球菌,污染率为30.1%,分离到56株菌。56株菌可分成11种序列型(STs),其中ST7(28.6%)是主要流行的序列型,其他优势序列型分别为ST188(23.2%),ST1(8.93%)和ST88(8.93%)。6种毒素基因在27株菌(48.2%)中检出阳性结果,其中杀白细胞素基因pvl(26.8%)检出率最高,其次为肠毒素基因sec(12.5%),seh(10.7%),sea(7.1%)和sed(5.4%)。【结论】金黄色葡萄球菌在市售生鲜肉中具有较高的污染率,丰富的遗传多样性表明菌株污染来源广泛,与食物中毒和临床感染相关的毒素基因具有较高的分布比例,应加强对生鲜食品中金黄色葡萄球菌的监控。     

广州市食源性金黄色葡萄球菌肠毒素及耐药分析

目的 了解广州地区食品和食物中毒样品中金黄色葡萄球菌产肠毒素和耐药性情况。 方法 按食品安全国家标准和相关文献对2010-2016年广州市疾病预防控制中心微生物实验室从食品和食物中毒样品中分离并保存的118株金黄色葡萄球菌进行了肠毒素和药敏试验。 结果 118株金黄色葡萄球菌有70株产肠毒素,产毒率为59.32%,快餐类食品和食物中毒样品的产毒率偏高。以荧光PCR方法对70株肠毒素阳性的菌株进行肠毒素A-E分型,其中SEA检出率为29.20%、SEB 17.70%、SEC 11.50%、SED 15.93%、SEE 25.67%;携带两种或以上毒力基因的产毒菌株占41.42%。在受检的菌株中,有104株菌不同程度的对一种或多种的抗生素有抗性,占88.14%;青霉素G耐药率高达71.19%;检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)5株,占4.24%,mecA耐药基因检测阳性。 结论 广州市食源性金黄色葡萄球菌中产肠毒素菌株较多,且存在耐药株,甚至MRSA,应加强对广州市食品安全风险的监管。     

环介导等温扩增PCR技术检测金黄色葡萄球菌毒素基因的研究

目的:了解杭州市萧山区不同来源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)分离株主要肠毒素SEA、SEB、SEC、SED基因携带情况。方法:应用环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法对34株分别从医院(物体表面)消毒监测样品、食品监测样本及食物中毒现症病人粪便和呕吐物中分离到的SA菌株进行肠毒素SEA、SEB、SEC、SED基因检测。结果:34株SA菌株中,肠毒素基因检出率为58.82%,其中SEA、SED检出率较高,分别为26.47%和32.35%。不同来源SA分离株肠毒素基因检出率有所不同,20株来自医院消毒监测样品SA中检出肠毒素基因12株,检出率为60.00%;9株来自食品监测样本SA中检出肠毒素基因3株,检出率为33.33%;5株来自食物中毒SA中检出肠毒素基因5株,检出率为100%。结论:34株实验分离株SA中肠毒素基因检出率较高,且可同时分泌两种毒素(10/34)。试验表明,LAMP技术应用于检测SA分离株中肠毒素基因简单、快速、易行,极适合在基层实验室应用。     

食品中金黄色葡萄球菌检出率及肠毒素与耐药性分析

目的研究温州市龙湾区6类食品中金黄色葡萄球菌污染状况及产肠毒素特性与耐药性,为防止金黄色葡萄球菌引起的食物中毒及为临床用药提供依据。方法按照《食品微生物学检验》(GB 4789.1—2010)对样品进行金黄色葡萄球菌检测,分离出的菌株用PCR法分析肠毒素基因(SEA~SEE),同时用VITEK2 Compact进行药敏试验。结果在540份食品样品中分离出金黄色葡萄球菌31株,检出率为5.74%,其中肉与肉制品和餐饮食品中检出率较高,分别为11.25%和6.88%。对31株金黄色葡萄球菌进行肠毒素PCR基因检测,检出12株产肠毒素菌株,占38.71%;10株携带SEA,其中2株同时携带SEC,2株携带SEB。31株金黄色葡萄球菌对氨苄西林、青霉素、红霉素和头孢西丁的耐药率为90.32%、87.10%、48.39%和48.39%,并表现出多种耐药谱。结论食品中存在金黄色葡萄球菌污染,尤其在肉与肉制品和餐饮食品中较严重;检出产肠毒素金黄色葡萄球菌的比例较高,应引起足够重视;食品中金黄色葡萄球菌对多种药物耐药,临床治疗应选择敏感药物。     

金黄色葡萄球菌食品分离株肠毒素基因及耐药性研究

目的了解2015年2月-2017年9月上海市金黄色葡萄球菌食品分离株肠毒素基因分布规律及耐药情况。方法采用酶联免疫法(ELISA)检测金黄色葡萄球菌的5种毒力基因sea~see,同时用CLSI推荐的微量肉汤稀释法进行药敏试验,定量测定最低抑菌浓度(MIC)。结果 106株金黄色葡萄球菌食品分离株中有68株检出肠毒素基因,肠毒素基因携带率为64.2%,同时携带2种毒素基因的菌株占7.4%(5/68)。微量肉汤稀释法检出91株金黄色葡萄球菌耐药株,76.9%(70/91)为2重以上的多重耐药菌,呈现21种耐药表型谱,耐药性最强的菌株对6种抗生素产生耐药性。结论上海地区金黄色葡萄球菌食品分离株产肠毒素能力较强且多重耐药性严重,应加强食源性金黄色葡萄球菌的监测,为临床合理使用抗生素和开展食品安全风险评估提供科学依据。     

食物中毒样本及日常食品中金黄色葡萄球菌肠毒素的分型检测研究

目的:研究食物样本采集到的金黄色葡萄球菌肠毒素产毒性和分型差异。方法:搜集本市2019年1月至12月日常食物样本和食物中毒样本分离所得的164株金黄色葡萄球菌,以酶联免疫吸附法进行肠毒素检测分型,分析不同食物样本肠毒素检测阳性率和分型差异。结果:164株金黄色葡萄球菌肠毒素总阳性率为83.54%,日常食物阳性率为81.25%,食物中毒阳性率为91.67%;分型检测肠毒素A、D、E三型占比较高,分别为40.14%、38.69%、89.05%,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:食物中的金黄色葡萄球菌具有极高的毒素生产率,且不同食物的肠毒素类型有分布差异,肠毒素阳性菌株以A、D、E型占比较高。     

一起金黄色葡萄球菌食物中毒检测与分析

目的查明食物中毒致病菌,分析菌株间的亲缘关系与毒力,为食物中毒诊断提供依据。方法致病菌分离采用国家标准和文献方法;金黄色葡萄球菌鉴定采用仪器法;同源性分析采用脉冲肠凝胶电泳法;肠毒素检测采用PCR法;药敏试验采用VITEK 2 Compact法。结果从22份标本中检出12株金黄色葡萄球菌,阳性检出率为54.55%;检出SEa、SEb、SEd、SEe传统肠毒素基因4种和SEh、SEj新型肠毒素基因2种;食品株与患者株金黄色葡萄球菌的脉冲肠凝胶电泳带型一致,具有高度同源性;菌株对大多数常用抗生素敏感。结论本起食物中毒由金黄色葡萄球菌及其肠毒素污染鸡肉卷所致;菌株携带多种肠毒素基因,致病性较强;鸡肉卷与患者检出的金黄色葡萄球菌脉冲肠凝胶电泳显示其来源为同一克隆群,从分子生物学上证明了食物中毒病原菌的相关性。     

食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因分布、耐药性及分型研究

目的 对2017—2021年上海市松江区不同食品来源的金黄色葡萄球菌进行肠毒素基因检测、药敏试验和脉冲场凝胶电泳分子分型，以了解金黄色葡萄球菌病原特征。方法 利用PCR方法检测金黄色葡萄球菌肠毒素基因，微量肉汤稀释法进行药物敏感试验，脉冲场凝胶电泳进行基因分型。结果 108株食源性金黄色葡萄球菌中有39株检出肠毒素基因，检出率为36.1%,其中sea(28.02%,11/39)、seb(41.0%,16/39)、sec(33.3%,13/39)、sed(12.8%,5/39);药敏试验结果显示氨苄西林(83.3%)、青霉素(80.6%)和红霉素(42.6%)耐药率最高；最低为万古霉素(100.0%)、达托霉素(98.1%)和庆大霉素(94.4%),且有15株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，20株表现出多重耐药，其中1株最高耐受6类抗生素。脉冲场凝胶电泳分子分型结果显示108株金黄色葡萄球菌中有11株不能分型，其他97株共分为19簇，包括77种型别，呈现多样性。结论 2017—2021年上海市松江区食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因携带率较高、多重耐药性情况需引起重视，并加强食品中金黄色葡萄球菌的...     

金黄色葡萄球菌食物中毒的多重PCR快速检测及产肠毒素耐药分析

目的对一起疑似金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒事件进行实验室检测和鉴定。方法采集7份环境涂抹物,4份食品和1份病例样本,提取样品总DNA进行14种食源性致病菌的多重PCR检测,对样品进行葡萄球菌肠毒素的ELISA检测。同时按照《食品安全国家标准食品卫生微生物学检验》进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定,分离得到菌株进行耐药分析和肠毒素基因分型(SEA-SEE)。结果多重PCR和ELISA检测台面涂抹物和病例样本中金黄色葡萄球菌和肠毒素均为阳性。分离出3株和10株金黄色葡萄球菌,分别携带肠毒素基因sea和seb。其中台面涂抹物和病例样本都有携带sea毒素基因的分离株,携带同种肠毒素基因的菌株耐药结果一致,所有分离株对氨苄西林和青霉素耐药。结论该起食物中毒由金黄色葡萄球菌肠毒素引起,并存在耐药现象,相关部门应加强对小型饭馆的卫生监督管理。     

从人和食品分离出产肠毒素A和B的金黄色葡萄球菌

葡萄球菌食物中毒是由于进食了该菌预先在食物中形成的肠毒素所致。到目前为止,已被鉴定出的肠毒素有A、B、C、D、E和F六种,其中A和B为最常见。虽然产肠毒素的凝固酶阴性菌株曾有报告,但大多数产肠毒素的葡萄球菌均为凝固酶阳性。本文乃从健康带菌者鼻拭子、医院病人病灶和与爆发食物中毒无关的食品所检出的凝固酶阳性菌株中,调查产肠毒素A和B的菌株的分布状况。将从人分离的66株和111份食品分离的36株金黄色葡萄球菌,用Caserio和Valcamonica设计的技术进行产毒培养。结果表明,在来自人的66株金黄色葡萄球菌中,产肠毒素的有54株(82%),其中2