右归饮含药血清对成骨细胞硬骨素表达调控的影响

目的探讨右归饮含药血清对硬骨素（SO）在体外成骨细胞分化过程中表达调控的影响。方法将煎制的右归饮液,对成年sD大鼠进行灌胃,获得右归饮含药血清。体外培养新生sD大鼠颅骨成骨细胞,取第3代细胞分实验组、对照组,分别用右归饮含药血清及0．9％NaCl溶液体外诱导培养,分别在7、14、21天进行形态学观察、ALP活性检测,SO的RT—PCR检测。结果经右归饮含药血清体外诱导培养,成骨细胞中ALP及矿化染色随培养时问延长,均有不同程度加深;实验组中SO表达量随培养时间延长呈增长趋势,同对照组相比,在诱导21天时表达显著升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论右归饮能调控SO基因在成骨细胞分化过程的表达,提示SO可能参与成骨细胞的分化,影响骨重建过程。     

右归饮含药血清对人骨髓基质干细胞诱导为成骨细胞的影响

目的：观察右归饮对体外人骨髓分化成骨细胞的影响。方法：将右归饮含药血清加入人骨髓基质干细胞诱导分化成骨细胞的培养体系,采用细胞形态学观察、MTT法及细胞内ALP含量检测反映其促进成骨的功能。结果：形态学观察及椰法表明,右归饮对成骨细胞的增殖起促进作用,钙结节染色及细胞内ALP含量测定表明右归饮对成骨细胞的活性有促进作用（P〈0．05）。结论：右归饮对人骨髓基质干细胞诱导分化的成骨细胞的成骨起促进作用。     

右归饮的毒性研究

目的:评价右归饮口服给药的安全性,为临床安全用药提供合理的科学依据。方法:1.以右归饮最大药液浓度和小鼠最大灌胃体积,24 h内3次给予小鼠,检测一般体征、血常规、血生化指标以观察14 d内动物的急性毒性反应。2.大鼠灌胃给予60 g/kg右归饮,每天1次,连续90 d,停药后观察30 d,观察大鼠活动、形态、每周体重变化和死亡情况,检测其血常规、血生化和主要脏器大体形态、脏器指数、病理形态。结果:右归饮给药后小鼠在14 d的观察期内未出现死亡和异常情况;与空白组对比,右归饮组体重、卵巢、子宫、胸腺、脾、心、肾、胃、脑等主要脏器指数无显著性差异;血常规和血生化指标均无显著改变。右归饮给药后大鼠在给药期及恢复期内未见死亡;与空白组相比,右归饮组大鼠在各个时间点的外观形态均无显著差异,大鼠体重、脑、胸腺、心、肝、肾、肾上腺、子宫、卵巢、睾丸、附睾等主要脏器的外观形态和脏器系数均无显著差异。给药90 d及停药30 d后,与空白组相比,右归饮组血清中ALT、AST、ALP、ALB、TP、TG、GLU、T-CHO和CREA均无显著差异。给药90 d后,血清中UREA明显降低,CK明显增高;停药30 d后,血清中ALT、AST、ALP、TP、GLU、T-CHO、UREA和CK有显著差异,但都在正常大鼠的生理范围内,血常规各指标无明显变化,脑、胸腺、心、肝、肾、肾上腺、子宫、卵巢、睾丸、附睾等主要脏器的脏器系数及病理学检查均无显著变化。结论:右归饮24小时内3次灌胃给药共计720 g/kg,相当于人临床拟用药量(81 g/kg)的533倍,未见小鼠显著毒性反应;60 g/kg连续灌胃给药90 d,相当于人临床拟用药量(81 g/kg)的44倍,未见大鼠显著毒性反应。提示右归饮口服用药安全性较高。     

不同浓度右归饮对OC形成分化的影响

目的：探讨不同浓度右归饮对体外培养破骨细胞形成分化的影响。方法：分离培养大鼠破骨细胞,分别以地塞米松组、地塞米松组＋不同浓度右归饮的培养液培养破骨细胞,用RT—PCR测定ATPae a3基因相对表达变化,分析破骨细胞骨吸收性。结果：两组间对比,地塞米松组＋30％右归饮组TRAP染色阳性的破骨细胞数量显著减少（分别为P〈0．05,P〈0．01）,地塞米松组＋30％右归饮组的ATPase a3基因表达量与其他对照血清组相比明显减少（P〈0．01）.结论：30％右归饮合药血清抑制破骨细胞的形成和分化,抑制破骨细胞的骨吸收活性能力最强。     

左、右归饮对小鼠血浆环核苷酸的影响

分别给予左、右归饮煎液和生理盐水灌胃6天,测试小鼠血浆环核苷酸含量。结果表明左、右归饮对小鼠血浆环核苷酸的含量有不同影响,提示滋肾阴和温肾阳对机体环核苷酸系统有不同作用。     

右归饮择时使用对肾阳虚大鼠睾酮昼夜节律的影响

为探讨右归饮择时用药在肾阳虚证治疗中的意义,将SD大鼠随机分为正常、模型、右归饮酉时用药和右归饮卯时用药四个大组,其中每组再分别设 4个亚组,即 02: 00、08: 00、14: 00、20: 00组,共计 16个小组。皮下注射氢化可的松的方法制作肾阳虚模型,造模同时灌胃右归饮水煎剂,共计 14d。造模结束次日,于 02: 00、08: 00、14: 00、20: 00将相应组别动物摘眼球取血,采用放免法测定血清睾酮水平。结果显示,模型大鼠血清睾酮水平较正常降低,各时间点中尤以 14: 00和 20: 00下降为显著,与同一时间正常大鼠比较均有显著性差异 (P<0. 01),节律几乎消失,近似直线。两用药组中,酉时用药组的睾酮变化模式与正常组接近。提示右归饮治疗肾阳虚证应当提倡择时用药,酉时用药对睾酮昼夜节律维护较卯时为好。     

右归饮对老年肾虚证小鼠影响的蛋白质组学研究

目的:从蛋白质表达水平观察中药方剂右归饮对老年小鼠生理性肾虚证动物模型的影响。方法:将昆明系雄性小鼠随机分为老年肾虚证模型组、右归饮(5.6 g.kg-1,1次/d连续ig 2个月)组与青年正常对照组3组,对其肝、肾、睾丸组织蛋白质提取液及血清分别进行蛋白质双向电泳并对电泳图谱进行分析,找出右归饮调节纠正的蛋白质,进行质谱分析鉴定和Western-blot验证。结果:找到右归饮调节纠正的蛋白质点22个,质谱鉴定出17种蛋白质。结论:找到并鉴定了右归饮对老年小鼠生理性肾虚证动物模型调节纠正的17种蛋白质。     

股骨头坏死愈胶囊对酒精干预大鼠成骨细胞碱性磷酸酶表达的影响

目的：观察股骨头坏死愈胶囊对酒精干预后大鼠成骨细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)表达的影响,探讨股骨头坏死愈胶囊治疗酒精性股骨头坏死可能的机制。方法：采用酶消化法分离SD大鼠新生24 h内乳鼠股骨头中成骨细胞,原代培养,取P3代细胞消化制成单细胞悬液。设股骨头坏死愈胶囊组各剂量组、酒精组和空白对照组(培养基组)。股骨头坏死愈胶囊组设140,210,280,336,420,560,672,750,840 mg/L 9个浓度梯度。酒精组在培养基中加入浓度为0.09 mol/L的酒精。股骨头坏死愈胶囊组各剂量组在相同培养基中加入相应浓度的股骨头坏死愈胶囊溶液,同时加入浓度为0.09 mol/L酒精。同等条件下培养,于培养第7天和第14天收集上清液,收集对应的细胞提取蛋白,求单位蛋白含量下对应ALP的含量。根据变化选取关键浓度值进行ALP含量的组间比较。结果：一定浓度的股骨头坏死愈胶囊药液对体外培养的成骨细胞ALP的表达具有促进作用,当药物浓度为750 mg/L时其对应的ALP含量最高。结论：中药股骨头坏死愈胶囊可促进体外成骨细胞ALP的表达。此可能是其疗股骨...     

右归饮对肾阳虚小鼠模型的实验研究

目的：研究右归饮对小鼠肾阳虚模型的治疗作用。方法：将小鼠分为4组：正常组、模型组、治疗组高剂量组、治疗组低剂量组,除正常组外,其他组小鼠用醋酸泼尼松龙制备肾阳虚模型。正常组和模型组小鼠进行等体积的蒸馏水灌胃,而治疗组给予相应剂量的右归饮,持续2w。实验结束时,测算肾脏的脏器系数,同时测定血清中超氧化物歧化酶（SOD）、和丙二醛（MDA）含量。结果：与模型组相比,高剂量组动物脏器系数明显降低,血清中的SOD较明显升高,MDA含量显著降低。结论：右归饮对小鼠肾阳虚模型有一定的治疗作用。     

右归饮温阳作用的实验观察

分别给予氢化可的松化阳虚小鼠右归饮液和生理盐水0.5ml 灌胃10天,结果右归饮使阳虚小鼠的血浆环磷酸腺苷 cAMP 含量明显升高,P<0.05;环磷酸鸟苷 cGMP含量明显地下降,P<0.05;cAMP/cGMP 比值明显上升,P<0.01。使血浆皮质醇含量明显升高,P<0.05。并有增加氢化可的松化阳虚小鼠脾及胸腺重量的作用。     

右归饮疗效机理的初步研究

对氢化考的松化阳虚模型小鼠,右归饮可使其血浆皮质醇及cAMP含量明显增加,cGMP含量明显降低。小鼠及免疫抑制模型小鼠给予右归饮,均可使外周血淋巴细胞NANE阳性率、血清溶血素含量、胸腺指数及腹腔巨噬细胞吞噬率显著增高。右归饮的疗效可能与其调节血浆皮质醇含量及cAMP∶cGMP值,增强机体免疫功能有关。     

右归饮对体外培养破骨细胞分化与功能的影响

目的：探讨右归饮对体外培养破骨细胞的分化、凋亡及骨吸收活性的影响。方法：分离培养大鼠破骨细胞,分别以空白对照血清、地塞米松＋对照血清、地塞米松＋右归饮血清的培养液来培养破骨细胞,通过抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色对TRAP阳性多核破骨细胞计数;采用吖啶橙荧光染色法计数破骨细胞的凋亡率;用RT-PCR测定ATPase a3基因相对表达变化分析破骨细胞骨吸收活性。结果：与空白对照血清组和对照血清＋地塞米松组相比,地塞米松＋右归饮血清组TRAP染色阳性的破骨细胞数量显著减少（分别为P〈0.01,P〈0.05）,破骨细胞的凋亡率明显增加（P〈0.01）,ATPase a3基因表达明显减少（P〈0.01）。结论：右归饮可抑制破骨细胞的形成和分化及骨吸收活性,促进破骨细胞的凋亡,从而发挥其抗激素性股骨头坏死的作用。     

右归饮对肾阳虚大鼠下丘脑正中隆起室管膜细胞的影响

目的：探讨肾阳虚证的本质及补肾中药右归饮的作用机理。方法：以大剂量醋酸可的松造成大鼠肾阳虚模型,取其下丘脑进行扫描电镜观察。结果：1.肾阳虚大鼠下丘脑正中隆起室管膜细胞超微结构发生改变,细胞出现孔洞。2.右归饮能够逆转肾阳虚所致下丘脑正中隆起室管膜超微结构的改变。结论：肾阳虚大鼠下丘脑正中隆起室管膜细胞存在着超微结构的改变和损伤,右归饮对这种超微结构的改变和损伤具有逆转作用,说明肾阳虚证与下丘脑正中隆起室管膜细胞的结构和功能改变密切相关。     

右归饮对中晚期男性广西肝癌细胞端粒长度的影响

目的观察右归饮对中晚期男性广西肝癌细胞端粒长度(TRF)的影响,探讨广西肝癌的肾虚机制。方法选择经CT或MRI、AFP和肝穿病理确诊的男性中晚期广西肝癌50例,随机分为右归饮组和左归饮组各25例,分别口服右归饮、左归饮合剂50 ml,每日三次,连续10个月,比较两组治疗前后主要临床症状及肝癌细胞TRF的变化。结果右归饮组主要临床症状明显改善、肝癌细胞TRF显著缩短,与本组治疗前比较P0.01,与左归饮组治疗后比较P0.01。结论右归饮能使中晚期男性广西肝癌细胞的TRF明显缩短,肝癌细胞的端粒代谢障碍是广西肝癌肾阳虚的机制之一。     

右归饮对中晚期男性广西肝癌细胞端粒酶活性的影响

目的:观察右归饮对中晚期男性广西肝癌细胞端粒酶活性的影响,探讨广西肝癌的肾虚机制。方法:选择经CT或MRI、AFP和肝穿病理确诊的男性中晚期广西肝癌50例,随机分为右归饮组和左归饮组各25例,分别口服右归饮合剂36.67g、左归饮合剂28.33g各50ml,每日三次,连续10个月,比较两组治疗前后主要临床症状及细胞端粒酶活性的变化。结果:右归饮每日110g,服用300天,主要临床症状明显改善、肝癌细胞端粒酶活性显著下降,与本组治疗前比较P<0.01,与左归饮组治疗后比较P<0.01。结论:右归饮对中晚期男性广西肝癌细胞端粒酶活性具有抑制作用,广西肝癌肾阳虚的机制与端粒酶活性的过度表达密切相关。     

右归饮影响大鼠膝骨关节炎疼痛的实验研究

正近期临床观察中发现,右归饮对于缓解膝关节疼痛效果较好,但机制不明确。对此,笔者使用右归饮干预影响大鼠膝骨性关节炎疼痛,旨在证实右归饮能缓解膝关节炎疼痛症状,并探讨相关机制。报告如下。1材料与方法1.1实验动物:健康SPF级4周龄SD大鼠36只,体质量80±5g(实验动物由浙江中医药大学实验动物中心提供,实验动物生产许可证号:ACXK(沪)2013-0016)。实验过程中对动物的处置符合浙江中医药大学实验动物处     

补肾健骨汤对成骨细胞增殖及碱性磷酸酶、骨钙素合成的影响

目的考察补肾健骨汤体外对大鼠成骨细胞增殖及碱性磷酸酶、骨钙素合成的影响.方法采用酶消化法分离大鼠颅骨成骨细胞,取第3代为实验模型,用常规计数法每日同时间检测成骨细胞增殖情况,连续7 d,观察补肾健骨汤提取液及载药血清对成骨细胞增殖的影响;以酶免法测定培养第5天细胞内骨钙素的含量.结果补肾健骨汤提取液及载药血清对体外培养的成骨细胞增殖均有显著的促进作用,其中提取液的作用在0～100 μg/mL浓度范围内呈剂量依赖性;提取液与载药血清均提高细胞内碱性磷酸酶和骨钙素含量,与空白对照组比较均有显著差异(P＜0.05).结论补肾健骨汤体外对成骨细胞的增殖及碱性磷酸酶、骨钙素的合成具有促进作用.     

右归饮对家兔激素性股骨头坏死骨髓脂肪化的影响

为观察右归饮对激素性股骨头坏死骨髓脂肪化的影响,探讨其防治作用机理。采用醋酸氢化泼尼松臀肌注射造模,设模型组、治疗组和正常组,应用PAS-8000病理图象分析系统分别测定各组髓腔内脂肪细胞面积,并观察股骨头局部病理形态改变、计数骨陷窝空虚率。结果显示,与正常组比较,模型组髓腔内脂肪细胞面积显著增大(P<0.01),骨陷窝空虚率显著增高(P<0.01)。与模型组比较,治疗组髓腔内脂肪细胞面积明显减少(P<0.01),骨陷窝空虚率明显降低(P<0.01)。表明右归饮可抑制股骨头髓腔内骨髓脂肪化,认为这可能是右归饮通过拮抗激素诱导骨髓基质细胞成脂分化同时促进成骨修复达到防治激素性股骨头坏死作用的机理。     

右归饮新方活性部位及其配伍的筛选

目的：明确右归饮新方中的各味药材的主要活性部位及最佳配伍。方法：以大鼠成骨细胞样细胞为模型细胞,考察各味药材不同提取部位及其配伍对成骨细胞增殖及分化的影响。结果：续断、淫羊藿及蛇床子的正丁醇部位的配伍具有最为显著的成骨细胞增殖活性。结论：右归饮新方活性部位及其配伍的筛选为后续创新中药的开发奠定基础。     

右归饮合炙甘草汤对Shy-Drager综合征患者血压的影响

Shy—Drager综合征(SDS)是中年以后起病,以直立性低血压、大小便失禁、出汗、性功能障碍等自主神经损害及共济失调、肌僵直、运动减少、震颤、步行障碍等运动功能损害为主要临床表现的症候群,现就21例SDS治疗前后的有关资料,总结报道如下。1 临床资料本组21例中男12例,女9例,男女比例为1.33:1;年龄55.57±8.30岁;病程4.43±2.48年。直立性头晕(由卧、坐位至立位时出现)15例,直立性头晕伴站立不稳者3例,直立性晕厥3例,治疗前共济失调8例次,肌僵直11例次,震颤9例