人肝癌细胞株HepG2和BEL-7402对放射敏感性的体外实验研究

目的　采用体外实验方法探讨人肝癌细胞株HepG 2和BEL -740 2对放射的敏感性。方法　对人肝癌细胞株HepG2和BEL -740 2进行体外培养 ,应用集落形成法和MTT法测定 6MVX线不同剂量照射后细胞的存活率 ,计算 2株细胞放射敏感性参数 (D0 )。结果　HepG 2的D0 值为 1.5 ,SF2 为 (0 .45± 0 .0 5 ) ;BEL -740 2的D0 值为 1.6,SF2 为 (0 .63± 0 .0 5 )。MTT法与集落形成法相关性较好 (γ =0 .946,P <0 .0 5 )。结论　HepG2具有较高的放射敏感性 ,BEL -740 2的放射敏感性较低 ;MTT法可替代集落形成法作细胞放射敏感性的快速测定。     

纳米二氧化钛对人肝癌Bel-7402细胞周期的影响

 近年来 ,纳米生物材料在医学上的研究和应用开始崭露头脚 ,有学者认为某些无机纳米粒子在一定的粒径范围内可以抑制癌细胞的生长、增殖[1- 4] ,我们应用FCM分析纳米TiO2 对人肝癌细胞系Bel 74 0 2细胞周期的影响 ,以便深入地探讨其抗癌作用机理。     

氯化钴诱导缺氧对脑胶质瘤T98G细胞株放射敏感性的影响

摘 要：［目的］观察氯化钴诱导的缺氧对脑胶质瘤细胞周期的改变及放射敏感性的影响。［方法］ 用氯化钴诱导胶质瘤T98G细胞缺氧,细胞克隆形成实验观察细胞放射敏感性。流式细胞仪检测细胞周期的变化。［结果］ T98G细胞在缺氧状态下放射敏感性较常氧下明显降低,差异有统计学意义。氯化钴诱导细胞缺氧后,与常氧状态相比,S期细胞比例由4.7%提高至24.0%,G1期细胞比例由90.4%降至66.7%。［结论］ 氯化钴诱导的缺氧能改变胶质瘤T98G细胞株的细胞周期,降低细胞的放射敏感性。     

端粒酶反义核酸对BEL-7402肝癌细胞生长和活性的影响

目的 研究人类端粒酶RNA（hTR)基因的反义寡核苷酸（AS－ODN）对BEL－7402肝癌细胞生长和活性的影响。方法 将AS－ODN作用于BEL－7402细胞，观察细胞生长状况，PCR－ELISA法检测端粒酶活性，流式细胞仪和细胞DNA电泳观察细胞的凋亡情况。结果 AS－ODN能抑制BEL－7402细胞的生长，降低其端粒酶活性并诱导细胞凋亡。结论 针对hTR的AS－ODN对治疗肝癌有潜在意义。     

宫颈癌细胞周期阻滞和凋亡与放射敏感性的关系

宫颈癌是我国女性最常见的恶性肿瘤之一。放射治疗是治疗宫颈癌的主要方法 ,但疗效仍不满意。如果在放射治疗前即可预测肿瘤的放射敏感性 ,制定个体化的治疗方案 ,则可能提高疗效。笔者搜集了 45例宫颈癌病例 ,对其癌组织标本细胞周期及凋亡在放射治疗过程中的变化与放射敏感性的关系进行了研究 ,现报道如下。一、材料和方法1.临床资料 :1999年 12月至 2 0 0 1年 5月在本院就诊、未经治疗的宫颈鳞癌患者 45例 ,诊断均经病理学检查证实。中位年龄 48岁 (2 9～ 80岁 )。国际妇产科协会 (ＦＩＧＯ)临床分期ＩＩＢ期 4例 (8.89% ) ,ⅢＢ期 41例 …     

STAT3抑制剂S3I-201对人肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的 研究STAT3小分子抑制剂S3I-201对人肝癌细胞系BEL-7402增殖、凋亡与细胞周期的影响和初步的作用机制。方法 分别采用细胞活性检测试剂盒cell couting kit-8(CCK-8)和EdU细胞增殖法检测S3I-201对人肝癌细胞BEL-7402细胞增殖的影响,应用流式细胞术分析S3I-201对BEL-7402的细胞凋亡和周期的影响,通过Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果 CCK-8及EdU结果显示,S3I-201能抑制BEL-7402细胞的生长和增殖(P<0.05),使BEL-7402细胞阻滞于S期,具有诱导细胞凋亡的作用,上调Bax的表达,下调Bcl-2的表达(P<0.05)。结论 STAT3小分子抑制剂S3I-201通过促进BEL-7402凋亡、上调促凋亡蛋白Bax、下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,并将BEL-7402阻滞于S期而发挥抗肿瘤效应。     

5-FU持续和间歇处理对 Bel-7402 肝癌细胞株的抑制作用

目的：评价体外5－FU持续和间歇处理对Bel-7402肝癌细胞株的生长抑制作用。方法：体外培养Bel-7402肝癌细胞株，用一系列不同浓度的5－FU对Bel-7402肝癌细胞株分别进行每天24小时持续处理及2小时间歇处理，4天后进行MTT试验，检测肿瘤细胞的生长抑制率，对两组的IC50进行比较。结果：5－F处理浓度依次10．0μg/L、25．0μg/L、50．0μg/L、75．0μg/L、100μg/L、250．0μg/L、500μg/L、750．0μg/L、1000．0μg/L、2500．0μg/L、5000．0μg/L、7500．0μg/L、10000．0μg/L、20000．0μg/L持续处理组的肿瘤细胞抑制率依次分别为1．34％、2．01％、7．21％、10．37％、18．64％、29．96％、35．06％、43．35％、50．66％、87．63％、93．63％、94．46％、99．27％、99．35％，IC50是991．7μg/L。5－FU处理浓度依次120．0μg/L、300．0μg/L、600．0μg/L、900．0μg/L、1200．0μg/L、3000．0μg/L、6000．0μg/L、9000．0μg/L、12000．0μg/L、18000．0μg/L、60000．0μg/L、90000．0μg/L、120000．0μg/L、240000．0μg/L2小时间歇处理组的肿瘤细胞抑制率依次分别为1．32％、1．78％、2．01％、2．89％、3．57％、5．94％、8．30％、10．36％、15．25％、17．27％、25．95％、32．63％、43．66％、67．81％、IC50为146600μg/L，为持续处理组的147．8倍。结论：低浓度的5－FU持续处理较高浓度的5－FU间歇处理对Bel-7402肝癌细胞有更强的抑制作用。     

CoCl2诱导缺氧对Eca109细胞细胞周期及放射敏感性的影响

Objective:To investigate the change of the cell cycle,apoptosis and radiosensitivity effect by CoCl2 induced hypoxia in esophageal cancer line Eca109 cells in vitro.Methods:The hypoxia culture model induced by 150 microM CoCl2 was established.The cell cycle and apoptosis were measured with flow cytometry (FCM).The radiosensitivity was analysized with clonogenic assay after irradiation alone or combined with hypoxia in Eca109 cells in vitro.Results:Eca109 cells were treated with 150 microM CoCl2 for 24 h,cell cycle arrest in G0/G1 phase increase and decreasing arrest in S phase with longer of hypoxiac time (0-24 h),the other rate of cell cycle and apoptosis did not change obviously.The G2/M phase block was arrested obviously in radiation alone comparing with the hypoxia plus irradiated group,apoptosis did not occur in Eca109 cell line following irradiation.The DO value and cell surviving fraction of Eca109 cell was 2.48 Gy,2.44 Gy and 97.33%,96.33% in hypoxia and control group,respectively;the Dq value of Eca109 cell was 2.89 Gy,0.52 Gy,the cell surviving fraction after radiation with 4 Gy was 48.3%,21.7% in hypoxia and control group,respectively.The hypoxia decreased the radiosensitivity in esophageal cancer Eca109 cells with clonogenic assay.Conclusion:Hypoxia induced by CoCl2 influences radiosensitivity of Eca109 cell through regulating cellular proliferation rates.     

X线照射对不同放射敏感性鼻咽癌细胞中ATM mRNA表达的影响

[目的]研究X线照射对鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2中ATM mRNA表达水平的影响。[方法]采用逆转录酶聚合酶链式反应（RT-PCR）技术．以β-actin为内参照,测定10GyX线照射前后CNE1、CNE2中ATM mRNA表达水平的变化：[结果]在X线照射前,CNE1中ATM mRNA基础水平与CNE2相似：存X线照射后,CNE1中ATM mRNA水平在照射4h后明显升高。12h后恢复：CNE2中ATM mRNA水平在照射后12h内无显著变化．[结论]在具有不同放射敏感性的鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2中．ATM mRNA表达的基础水平相似,在经X射线处理后,CNE1和CNE2中ATM mRNA水平变化规律不同。这种ATM mRNA表达差异可能是导致两者放射敏感性不同的原因之一．     

COX-2表达对脑胶质瘤的放射敏感性和细胞周期的影响

背景与目的COX-2在胶质瘤的发生发展过程中发挥重要作用,近年来发现COX-2抑制剂对一些胶质瘤细胞有增强放射敏感性的作用.本研究的目的在于观察人恶性脑胶质瘤细胞的COX-2蛋白表达和COX-1/COX-2双重抑制剂对乙酰氨基酚(acetaminophen,ACE)对细胞COX-2 mRNA表达、克隆形成率和细胞周期的影响,并探讨ACE提高胶质瘤细胞放射敏感性的机制.方法选用人恶性脑胶质瘤细胞株SHG-44作为研究对象.免疫细胞化学和RT-PCR检测细胞COX-2表达,成克隆分析法测定对乙酰氨基酚对细胞的放射增敏作用,流式细胞仪检测细胞周期分布.结果免疫细胞化学染色SHG-44细胞的胞膜和胞质均有COX-2蛋白表达.RT-PCR检测对乙酰氨基酚作用后细胞中COX-2mRNA表达降低.对乙酰氨基酚联合放疗作用于SHG-44细胞与单纯照射组相比,显示了放射增敏作用,增敏比为1.23(D0值水平)或1.43(Dq值水平).细胞周期检测发现,不同时间各组细胞都出现了不同的周期分布,照射后12 h单纯照射组和放射加药组G2/M期细胞明显多于对照组,24 h后单纯照射组迅速下降到与对照组相等的水平,而放射加药组仍维持较高比例(P＜0.01),同时对放射抗拒的S期细胞比例最低.结论人恶性脑胶质瘤细胞株SHG-44的胞膜和胞质均有COX-2蛋白表达,对乙酰氨基酚能增加该细胞株的放射敏感性,其机制可能与抑制COX-2表达、改变细胞周期分布有关.     

表没食子儿茶素没食子酸酯对两株不同肝癌耐药细胞株基因表达谱的影响

背景与目的:绿茶中的儿茶索单体表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)在体内外能逆转肝癌细胞多药耐药性.鉴于多药耐药机制的复杂性,本研究拟采用高通量基因芯片技术进一步探讨EGCG逆转人肝癌细胞BEL7404/ADM、BEL7402/5-FU多药耐药的可能机制.方法:MTT法检测药物敏感性.基因芯片技术分析EGCG作用于两株不同肝癌耐药细胞的基因表达谱差异.RT-PCR和Western blot法分别检测相同处理条件下两株肝癌耐药细胞的基因MDR1、LRP和Cyclin G1蛋白表达变化以验证基因芯片技术结果.结果:EGCG对BEL7404/ADM、BELT402/5-FU细胞的IC10分别为24.76 mg/L、20.60 mg/L.20 mg/L EGCG联合0.05 mg/L ADM、100 μmol/L 5-FU对BEL7404/ADM、BEL7402/5-FU的逆转倍数分别为9.66、2.36倍.EGCG作用BEL7404/ADM双荧光通路显著差异基因210个,上调表达38个,下调表达172个.与耐药机制相关的可能基因有ABCB10(MDR/TAP)、TOP2A、TOP2B、CCNG1上调,ABCB1、MVP、ARHD、HDAC5、GSS、GSTPI、HSPA1B、HSPB7、CDKN1A、RAB11B、RAB9P40下调.作用BEL7402/5-FU双荧光通路显著差异基因179个,上调表达31个,下调表达148个.与耐药机制相关的可能基因有ABCG(BCRP)、CCNG2、GADD34、RB1、RBBP4上调,DTYMK、GPX1、USP5、BAX、BAK1、HSPA1L下调等.相同处理条件下两组肝癌耐药细胞的MDR1、LRP基因表达均减少,Cyclin G1蛋白表达均增加.结论:EGCG对肝癌多药耐药细胞BEL7404/ADM、BEL7402/5-FU具逆转作用,但作用于不同肝癌多药耐药细胞的基因表达谱变化不完全相同.     

阿霉素热化疗对肝癌细胞及其耐药株凋亡的影响与机制

目的探讨阿霉素(ADM)加热化疗对人肝癌细胞BEL7402(以下简称BEL7402细胞)及其耐药株BEL7402/ADM细胞(以下简称BEL7402/ADM细胞)的凋亡诱导作用。方法以体外培养的人肝癌细胞BEL7402和BEL7402/ADM细胞为研究对象,采用水浴加温法,观察单纯热疗、单纯ADM化疗与热化疗对细胞凋亡的影响。用AnnexinV-FITC和PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡;采用流式细胞技术检测加热对BEL7402细胞和BEL7402/ADM细胞胞内ADM浓度和细胞膜上P糖蛋白(P-gp),多药耐药性相关蛋白(MRP)的影响。结果热化疗组细胞凋亡率(%)显著高于单纯热疗、单纯ADM化疗组的同种细胞[BEL7402细胞:(79.21±0.54)vs(16.67±1.03),(48.91±0.05),P均<0.05;BEL7402/ADM细胞:(75.42±0.16)vs(14.79±0.61),(23.78±0.04),P均<0.05]。热化疗组细胞内ADM浓度显著高于单纯化疗组的同种细胞(P<0.05)。热化疗组和单纯热疗组细胞膜上P-gp、MRP的表达率显著低于单纯化疗组的同种细胞(P<0.05)。结论加热可能通过抑制细胞膜上P-gp、MRP的表达,从而提高BEL7402细胞及BEL7402/ADM细胞对ADM诱导凋亡作用的敏感性。     

miR-122对肝癌细胞HepG2放疗敏感性影响及其机制研究

目的 miR-122是一种肝脏特异性miRNA,miR-122过表达可以降低肝脏肿瘤细胞的相关特性,并增强化疗药物的敏感性,但是在放疗方面研究较少.本研究探讨miR-122对肝癌细胞放疗敏感性的影响及其可能的机制.方法 通过转染miR-122类似物构建HepG2-miR-122 mimic细胞,利用Q-PCR检测miR-122的表达,通过成克隆分析观察miR-122对肝癌细胞放疗敏感性的影响,ELISA方法检测X射线照射后不同时间点细胞内乏氧因子HIF1-α及ROS的表达;蛋白质印迹法检测X射线照射后48 h各细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Bim的表达变化.结果 Q-PCR检测显示,HepG2-miR-122mimic细胞中miR-122的表达较HepG2细胞增加了约8.2倍.成克隆分析显示,HepG2细胞转染miR-122mimic后放疗敏感性增高,与HepG2组相比,准域剂量Dq的放疗增敏比(SER)为1.52.ELISA分析显示,HepG2细胞在0 h HIF-1α表达量为5.20 ng/mL.X射线照射后HepG2细胞中HIF-1α升高,至48 h升至最高,为6.69 ng/mL.而HepG2-miR-122 mimic细胞在0h的表达量为4.7 ng/mL,X射线照射后HIF-1α的含量进一步下降,至48 h下降至3.41 ng/mL.48 h时miR-122 mimic转染情况对HIF-1α的表达差异有统计学意义,F=70.819,P＜0.001;X射线暴露对HIF-1α的表达差异有统计学意义,F=132.436,P＜0.001;miR-122 mimic的转染情况及X射线暴露之间存在交互作用,F=4.290,P=0.039.ROS含量在X射线照射后表现为轻度升高,在0 h HepG2组和HepG2-miR-122 mimic组ROS表达量分别为116.21和121 IU/mL,X射线照射后ROS进一步升高,至48 h升至最高,分别为130和192 IU/mL.48 h时miR-122 mimic转染情况对ROS的表达差异有统计学意义,F=98.189,P＜0.001;X射线暴露对ROS的表达差异有统计学意义,F=145.373,P＜0.001;miR-122 mimic的转染情况及X射线暴露之间存在交互作用,F=6.548,P=0.012.蛋白质印迹法检测结果显示,HepG2-miR-122 mimic细胞中BCL-2的表达量为HepG2的56.32％,X射线照射后48 h HepG2细胞中BCL-2的表达量降至原来的55.01％,而HepG2-miR-122 mimic细胞则降至23％.HepG2-miR-122 mimic细胞中Bax和Bim的表达量分别为HepG2细胞的170.21％和140.35％,X射线照射后,HepG2细胞中Bax和Bim的表达量分别升至HepG2的220.12％和178.34％,而HepG2-miR-122 mimic细胞中,Bax和Bim的表达量则分别升至HepG2细胞的240％和260％.miR-122 mimic转染情况对BCL-2、Bax和Bim的表达差异均有统计学意义,均P＜0.01.X射线暴露对BCL-2、Bax及Bim的表达差异均有统计学意义,均P＜0.01.miR-122mimic转染情况及X射线暴露对Bcl-2、Bim及Bax的表达均不存在交互作用.结论 miR-122可以上调肝癌细胞HepG2的放射敏感性,其机制可能与调节HIF-1α和ROS及凋亡相关蛋白有关.     

NS-398对胰腺癌细胞株PC-3放射增敏作用及其机制的研究

目的:应用选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398作用于胰腺癌细胞株PC-3,观察其放射增敏作用,并对其可能机制进行初步探讨。方法:体外培养胰腺癌细胞株PC-3;以流式细胞术(FCM)单抗标记技术检测PC-3细胞的COX-2表达水平;以MTT实验检测细胞增殖抑制情况及NS-398对细胞放射敏感性的影响;以FCM分析细胞周期变化以RT-PCR及FCM分析凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达变化。结果:FCM显示PC-3细胞存在COX-2的异常高表达;MTT实验显示,与单纯照射组比较,联合NS-398照射组的细胞生存率显著降低〔(78.45±3.46)%vs(57.42±2.58)%,χ2=5.52,P=0.016〕;FCM显示,NS-398联合放射组S期细胞比值显著下降(χ2=4.91,P=0.029),而G2～M期细胞比值显著增加(χ2=3.92,P=0.041),NS-398和放射线可协同作用,使PC-3细胞的周期再分布显著变化;RT-PCR及FCM显示,NS-398可致细胞内Bcl-2/Bax比值下降。结论:选择性COX-2抑制剂NS-398可增强胰腺癌细胞PC-3的放射敏感性,其机制可能与改变细...     

改善肿瘤细胞乏氧状态对非小细胞肺癌放疗效果的影响

 目的 为了观察改善肿瘤细胞的乏氧状态对非小细胞肺癌（NSCLC）放疗效果的影响。方法 随机选择Ⅱ~Ⅳ期的NSCLC患者42例，资料完整者38例，在放射治疗前30 min内，采用舒氧康静脉内给氧的方法，提高血液中的氧分压，改善肿瘤细胞的乏氧状态；给氧前、后分别作血气分析，然后及时给予放射治疗，每次2 Gy，每日1次，每周5 d，总剂量60 ~ 70 Gy，随机选取同期的常规普放NSCLC患者37例作对照，按WHO疗效评价标准评价疗效，并作统计学处理。结果 试验组内给氧前后的动脉氧分压（PO2）分别为（85.6±7.5）mmHg，（103±9.7）mmHg；内给氧前后的血氧饱和度（SaO2）分别为（89.5±6.1）%和（94.4±5.2）%；放疗有效率为63.16 %（24／38）。对照组的有效率为43.24 %（16／37），试验组的疗效优于对照组（0.05＜P＜0.1），而两组之间毒副反应的发生率差异无统计学意义（P）。结论 放疗前静脉内给氧可改善肿瘤细胞的乏氧状态，提高放射治疗效果。     

金喜素诱导人肝癌HCC7721细胞凋亡及细胞周期阻滞的研究

目的 :研究金喜素诱导人肝癌HCC772 1细胞的凋亡作用。方法 :采用MTT法测定金喜素对人肝癌HCC772 1细胞的杀伤作用 ;通过电镜观察细胞形态变化 ;琼脂糖凝胶电泳检测断裂DNA ;流式细胞仪分析DNA含量及细胞周期。结果 :经0 3 μmol/L金喜素处理 6、12、2 4及 3 6h ,HCC772 1细胞的存活率与对照组相比 ,逐渐降至 ( 83± 16) %、( 69± 10 ) %、( 5 2±13 ) %和 ( 3 0± 11) % ,低于对照组 ,P <0 0 5 ;靶细胞出现细胞固缩、染色质凝聚和边集 ;产生梯状DNA并检测到亚二倍体峰(凋亡峰 ) ;同时 ,G0 /G1期细胞增多 ,S期细胞减少。结论 :金喜素可抑制人肝癌HCC772 1细胞增殖 ,使细胞阻滞在G0 /G1期 ,进一步诱导细胞凋亡。     

上调miRNA-145表达对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响

目的探讨上调miRNA-145表达对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响。方法收集人正常肺上皮细胞株BEAS-2B和非小细胞肺癌细胞株A549,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两种细胞中miRNA-145的相对表达量。以Lipofectamine^TM 2000转染试剂将miRNA-145模拟物和阴性对照质粒转染至A549细胞中,分别作为miRNA-145组和NC组,以只加入转染试剂的A549细胞作为对照组,RT-PCR检测各组细胞中miRNA-145的相对表达量。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞术(FCM)检测上调miRNA-145表达对细胞增殖和凋亡的影响。给予不同放射剂量X线照射后采用克隆形成实验检测细胞的放射敏感性。结果A549细胞中miRNA-145的相对表达量明显低于正常肺上皮BEAS-2B细胞(P<0.01);转染后,miRNA-145组细胞中miRNA-145的相对表达量高于对照组(P<0.05);转染后,NC组与对照组细胞中miRNA-145的相对表达量比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);miRNA-145组细胞转染24、48、72 h的光密度(OD)值均低于对照组(P<0.05);转染48 h后,miRNA-145组细胞的凋亡率高于对照组(P<0.05);2、4、6、8 Gy剂量的X线照射后miRNA-145组细胞的存活分数(SF)均低于对照组,放射增敏比(SER)为1.491。结论与正常肺上皮BEAS-2B细胞比较,A549细胞中miRNA-145的相对表达量较低,上调其表达能够抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡,增强放射敏感性。     

洛铂对人胃癌细胞株BGC823放射敏感性的影响

目的 观察洛铂（LBP）对人胃癌细胞株BGC823放射敏感性及凋亡相关蛋白表达的影响。方法 采用四甲基偶氮唑盐MTT法获得LBP处理24h后对BGC823细胞的半数抑制浓度（IC50）,并以20％的IC50剂量为增敏浓度;克隆集落形成实验检测单纯照射组与LBP（增敏浓度）+照射组在0、2、4、6、8Gy X线照射后的细胞存活率,并根据单击多靶模型绘制出的细胞存活曲线分析LBP增敏比;Western blotting和流式细胞术分别检测空白对照组、单纯照射组和LBP（增敏浓度）+照射组24h后的凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3）的表达水平和细胞周期及凋亡率。结果 LBP对BGC823细胞的IC50为16.08μg／ml,增敏浓度为3.20μg／ml;随照射剂量增大,单纯照射组与LBP+照射组的细胞存活率均逐渐下降,从4Gy起,LBP+照射组的细胞存活率低于单纯照射组（P＜0.05）,LBP增敏比为113;LBP+照射组的G2／M期细胞比例、凋亡率及Bax和Cleaved caspase-3水平均高于其他两组,S期细胞比例、Bcl-2水平均低于其他两组（P＜0.05）。结论 LBP对胃癌细胞株BGC823具有放射增敏作用,同时可诱导细胞凋亡及G2／M期阻滞。     

mTOR信号通路与非小细胞肺癌放疗敏感性的关系

目的:研究mTOR信号通路与非小细胞肺癌放疗敏感性的关系。方法:采用不同剂量的雷帕霉素抑制非小细胞肺癌细胞系A549中的mTOR信号通路;Western blot检测雷帕霉素作用后下游信号分子的表达;将A549细胞分为空白对照组及雷帕霉素作用的实验组,将对照组和实验组经不同剂量射线作用;用MTT实验（噻唑蓝）及克隆形成能力检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果:雷帕霉素药物作用抑制了mTOR信号通路及下游分子的表达,经不同剂量射线照射后细胞的增殖能力和克隆形成能力显著低于对照组,凋亡显著高于对照组。结论:抑制mTOR信号通路可以增加非小细胞肺癌对放疗的敏感性。     

Raf激酶抑制蛋白对HepG2肝癌细胞生物学特性影响的研究

目的：Raf激酶抑制蛋白（RKIP）是磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族的重要成员,近来的一些研究表明RKIP基因的蛋白产物在人类肝癌组织中表达显著下调。本研究旨在探讨RKIP基因对于肝癌细胞增殖状态,细胞周期,凋亡状态等生物学特性及浸润转移能力等恶性表型的影响,以初步阐明其功能意义。方法：将RKIP基因插入载体pcDNA3.1构建PC-RKIP真核表达载体。脂质体转染肝癌细胞系HepG2建立稳定转染细胞系（Hep-RKIP）,而后使用生长曲线法、平板克隆形成实验法、流式细胞仪,细胞迁徙实验法等方法分析稳定表达株相关生物学特性变化。同时设立空载体转染组和空白细胞组为对照。结果：与转染pcDNA3.1空载体及空白HepG2肝癌细胞相比,转染PC-RKIP载体的稳定表达细胞株生长有显著减慢,后两组之间亦无显著差异,平板克隆形成实验结果显示PC-RKIP转染组平均克隆形成率显著低于其它两组（P〈0.05）,细胞周期检测显示PC-RKIP转染组处于G0/G1期的细胞比例显著高于未处理的HepG2细胞和转染pcDNA3.1空载体的HepG2细胞（P〈0.05）,而处于G2-M期的细胞比例显著均低于其它两组（P〈0.05）,其它各期细胞比例均无显著差异。流式细胞仪法检测细胞凋亡结果显示PC-RKIP转染组调亡比例为6.4%左右,显著高于对照组（P〈0.05）。细胞迁徙实验结果提示PC-RKIP转染组穿膜率与其它两组相比显著降低（P〈0.05）。结论：RKIP基因可能具有抑制细胞生长增殖及分裂作用,同时可影响细胞周期及细胞凋亡,对肝癌细胞侵袭转移能力可能有一定抑制作用,对抑制细胞恶性表型有一定意义。