大鼠压疮局部不同温度治疗对PI3K/Akt/GSK3β 信号通路的影响

目的 探讨不同局部温度对大鼠压疮PI3K/Akt/GSK3β 通路的影响，为压疮的临床治疗提供基础实验依据。方法 用缺血再灌注（IRI）法复制大鼠压疮模型。将40 例无特定病原体级（SPF）健康成年雄性SD 大鼠随机分为4 组：假手术组（Sham 组）、常温IRI 组（NTI）、低温IRI 组（LTI）和高温IRI 组（HTI）。HE 染色观察骨骼肌病理变化；Western blot 检测Akt、GSK3β 的磷酸化情况；免疫荧光观察p-Akt、p-GSK3β 的表达情况。TUNEL 检测大鼠压疮组织细胞凋亡情况。结果 与常温IRI 组比较，高温IRI 组的骨骼肌细胞病理损伤加重，凋亡细胞增加，Western blot 和免疫荧光结果显示Akt 和GSK3β 的磷酸化水平均降低（P <0.05）；而低温IRI 组骨骼肌细胞病理损伤减轻，Western blot 和免疫荧光结果显示Akt 和GSK3β 的磷酸化水平均上升（P <0.05）。结论 局部高温能抑制Akt 和GSK3β 的磷酸化水平而加重大鼠压疮损伤，局部低温能提高Akt 和GSK3β 的磷酸化水平减轻大鼠压疮损伤。     

七氟烷后处理对氧自由基介导减轻兔脊髓缺血再灌注损伤的作用

目的 观察七氟烷后处理足否可以减轻兔脊髓缺血再灌注损伤以及氧自由基在其中的作用.方法 (1)雄性新西兰大白兔48只,随机分为6组(n=8):假手术组,仅行单纯手术操作但不阻闭腹主动脉;对照组,行单纯缺血再灌注,即阻闭腹主动脉20 min后进行再灌注;纯氧后处理组,在再灌注前5 min给予100%O2,持续13 min.七氟烷后处理组(Sevo0.5组/Sevo1.0组/Sevo1.5组),分别冉灌注前5 min给予0.5、1.0及1.5 MAC(肺泡气最低有效浓度)七氟烷处理,持续10 min,然后100%O2洗脱3 min.(2)雄性新西兰大白兔36只,随机分为4组(n=9).纯氧组及七氟烷组,分别接受纯氧和1.0MAC七氟烷后处理并于后处理前1h静脉注射生理盐水5 ml/kg,DMTU+七氟烷及DMTU+纯氧组,分别接受纯氧和1.OMAC七氟烷后处理并于后处理前1 h静脉注射10%二甲基硫脲(DMTU)5 ml/kg.再灌注48 h对所有动物的后肢运动功能进行评分并取脊髓行HE染色对行脊髓前角正常神经元计数.结果 (1)再灌注48 h,七氟烷后处理组后肢运动功能评分和脊髓前角正常神经元计数均显著高于对照组(P＜0.05),脊髓前角正常神经元计数Sevo1.0组明显多于Sevo0.5组和Sevo1.5组(P＜0.05).(2)再灌注48 h,七氟烷组、DMTU+七氟烷及DMTU+纯氧组的后肢运动功能评分和脊髓前角正常神经元计数均明显高于纯氧组(P＜0.05);脊髓前角正常神经元计数七氟烷组明显高于DMTU+七氟烷及DMTU+纯氧组(P＜0.05).结论 七氟烷后处理通过氧自由基介导减轻兔脊髓缺血再灌注损伤.     

不同浓度七氟烷后处理对大鼠肾脏缺血/再灌注损伤的影响

目的 探讨不同浓度七氟烷后处理对大鼠肾脏缺血/再灌注损伤的影响,评价七氟烷后处理对大鼠肾脏缺血/再灌注损伤后肾内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的影响.方法 SD雄性大鼠60只,随机分为5组(每组12例):假手术组、缺血/再灌注组[建立肾脏缺血/再灌注(I/R)模型]、不同浓度七氟烷后处理组[(1.2%七氟烷为S1.2组,1.8%七氟烷为S1.8组和2.2%七氟烷为S2.2组):先建立I/R模型,在缺血后再灌注的同时用不同浓度的七氟烷处理2 h.测定再灌注24 h时血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)浓度;大体标本观察再灌注肾横切面坏死情况;光镜下观察肾皮质肾小管坏死百分率].为探讨七氟烷后处理作用机制,采用免疫组化法测假手术组,缺血/再灌注组,S1.8组肾组织eNOS、iNOS的表达.结果 再灌注24 h时,与假手术组相比,其余4组血清Cr、BUN、肾小管坏死率明显升高(P<0.05);与缺血/再灌注组相比,S1.2组、S1.8组、S2.2组血清Cr、BUN、肾小管坏死率明显下降(P<0.05);S1.2组、S1.8组、S2.2组之间上述各指标差异无统计学意义(P>0.05).与假手术组相比,缺血/再灌注组肾eNOS、iNOS的表达明显增强(P<0.05);与缺血/再灌注组相比,S1.8>组肾eNOS、iNOS的表达明显下降(P<0.05).结论 七氟烷后处理可以减轻大鼠肾缺血/再灌注损伤;七氟烷3种不同浓度(1.2%,1.8%,2.2%)后处理对减轻大鼠缺血/再灌注损伤无明显差别;七氟烷后处理可抑制肾eNOS、iNOS的表达.     

缺血后处理对肝缺血再灌注损伤后磷脂酰肌醇-3激酶和细胞外信号调节激酶的影响和意义

摘要：目的观察缺血后处理对肝缺血再灌注后磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）和细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）表达的影响,探讨
肝缺血后处理的作用机制。方法采用大鼠70%肝缺血再灌注损伤模型,进行3次循环的再灌注1 min-阻断1 min的缺血后处
理,观察假手术（S）组、LY294002+假手术（LY+S）组、PD98059+假手术（PD+S）组、缺血再灌注（IR）组、缺血后处理（IPO）组、
LY294002+缺血后处理（LY+IPO）组和PD98059+IPO（PD+IPO）组的肝功能、细胞凋亡、Akt和ERK1/2磷酸化程度的变化。结
果缺血后处理能明显减轻缺血再灌注造成的肝功能损害,增加Akt和ERK1/2的磷酸化程度,应用LY294002或PD98059后都
可以取消IPO的作用。结论缺血后处理可能通过激活PI3K和ERK1/2减轻肝缺血再灌注损伤。
     

L-瓜氨酸预处理对大鼠缺血／再灌注损伤肾的功能及蛋白表达影响

目的研究L-瓜氨酸对大鼠缺血／再灌注（ischemia—reperfusion,I／R）损伤肾组织的保护作用机制。方法18只雄性SD大鼠分为假手术组（Sham组）、模型组（I／R组）和L-瓜氨酸组（L—Cit组）,每组6只。采用夹闭双肾动脉45min后再灌注制备肾L／R损伤模型。L—Cit组于造模前连续7天灌胃给予L-瓜氨酸600mg／kg。于再灌注3h活体摘取双肾,并行腹主动脉穿刺抽血2ml。检测各组大鼠血清肌酐、尿素氮,Western blot检测肾组织ERK1／2、p38MAPK和Akt的磷酸化表达。结果与Sham组相比,I／R组大鼠血清肌酐、尿素氮水平升高,肾组织ERK1／2和Akt的磷酸化表达明显降低,p38MAPK的磷酸化表达明显增高;L—Cit组与I／R组相比,ERK1／2和Akt的磷酸化表达明显增高,而p38MAPK的磷酸化表达明显降低,血清尿素氮、肌酐水平明显降低。结论L-瓜氨酸可能通过激活ERK1／2和Akt信号通路、抑制p38MAPK信号来保护大鼠肾缺血／再灌注损伤。     

七氟烷后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤PI3K/Akt通道的影响

目的探讨七氟烷后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤PI3K/Akt通道的影响。方法 SD雄性大鼠40只随机分为5组（n=8）：假手术对照组（C组）、缺血再灌注损伤组（IR组）、2.5%七氟烷后处理组（S组）、2.5%七氟烷＋磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B抑制剂LY294002组（S＋LY组）和溶剂对照组（DMSO组）。采用双侧颈总动脉阻断联合低血压法制备脑缺血再灌注模型。于再灌注结束后处死大鼠取海马,光镜下观察海马病理学变化,采用免疫组化法检测Caspase-3及p-Akt的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果与C组相比,其余4组AI、Caspase-3及p-Akt表达均增加（P〈0.05）。与IR组相比,S组AI及Caspase-3表达显著降低（P〈0.05）,p-Akt表达明显增加（P〈0.05）,S＋LY组及DMSO组各指标表达无明显差异（P〉0.05）。结论七氟烷后处理可能通过激活PI3K/Akt通道,抑制Caspase-3表达,减少大鼠脑缺血再灌注损伤时神经元细胞凋亡,发挥脑保护作用。     

缺血预处理及后处理对家兔肾脏缺血-再灌注损伤的保护机制研究

目的探讨缺血预处理及缺血后处理对家兔肾脏缺血-再灌注损伤的保护作用。方法首先建立家兔肾脏缺血-再灌注模型。40只雄性家兔随机分为4组（n=10）：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺血预处理组（IPC组）及缺血后处理组（IPO组）。再灌注60min后分别检测血清中丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性,光镜下观察肾组织病理学改变。结果与Sham组比较,I/R组、IPC组和IPO组血清SOD活性降低,MDA含量升高,病理损伤明显;与I/R组相比,IPC组和IPO组血清SOD活性升高,MDA含量降低,病理损伤减轻。结论缺血预处理及后处理能够减轻家兔肾脏缺血-再灌注损伤,其机制与增强机体的抗氧化损伤能力有关。     

七氟烷预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤时 细胞凋亡以及能量代谢的影响

目的探讨七氟烷预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤时细胞凋亡以及能量代谢的影响。方法选取36只SD雄性鼠随机分为假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）和七氟烷预处理组（Sevo组）,每组各12只。I/R组制备脑缺血再灌注模型;Sevo组先连续4 d给予1.2%七氟烷60 min行预处理,24 h后制备局灶性脑缺血再灌注模型;S组仅接受手术、术中不插线栓。各组大鼠在再灌注24 h后进行神经功能缺损评估,采用TTC染色方法染色法测定脑梗死范围,TUNEL法检测凋亡脑细胞并计算凋亡指数,超微量ATP酶测试盒检测Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性,Westernblot法检测Caspase-3及Bcl-2的蛋白表达水平。结果 Sevo组神经功能缺损评分,脑缺血损伤面积明显小于I/R组（P <0.01）,TUNEL阳性细胞明显少于对照组（P <0.05）。Sevo组脑组织中Na+-K+-ATPase、Ca2+更多     

GSK3β抑制在异氟醚后处理减轻SH-SY5Y细胞缺血再灌注损伤中的作用

摘 要: 【目的】 研究糖原合成酶激酶3β(GSK3β)抑制在异氟醚后处理减轻SH-SY5Y细胞缺血再灌注损伤的神经保护中所起的作用?【方法】 将SH-SY5Y细胞进行分成3组(n = 24):Control组?OGD组及OGD + Isoflurane组?Control组细胞常规培养;OGD组进行1 h氧糖剥夺(OGD)及20 h模拟再灌注;OGD + Isoflurane组进行1 h的OGD及20 h模拟再灌注,OGD开始时立即暴露于2%异氟醚1 h?检测各组模拟再灌注1 h后LDH释放水平及总GSK3β和磷酸化GSK3β表达水平?将高选择性的GSK3β抑制剂chir 98014 或chir 99021分别加入OGD组或OGD + Isoflurane组,检测各组模拟再灌注1 h后LDH释放水平?【结果】 OGD组LDH释放水平增高,与Control组相比差异有统计学意义(P 0.05),p-GSK3β表达增加,差异有统计学意义(P 0.05)?【结论】 异氟醚后处理对SH-SY5Y细胞缺血再灌注损伤具有神经保护效应?异氟醚后处理保护效应部分通过抑制GSK3β发挥作用?     

促红细胞生成素衍生肽通过PI3K/Akt信号转导通路对小鼠肾缺血再灌注损伤保护作用

目的：探究促红细胞生成素衍生肽对小鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及对PI3K/Akt信号转导通路的影响。方法：将小鼠分为假手术组、模型组和研究组,复制肾缺血再灌注损伤动物模型,在手术前6 h模型组腹腔注射促红细胞生成素衍生肽,假手术组和模型组腹腔注射生理盐水。使用苦味酸速率法检测各组小鼠血清中血肌酐（serum creatinine,Scr）,使用酶学速率法检测各组小鼠血清中尿氮素（blood urea nitrogen,BUN）水平;病理切片检查肾脏病理变化;原位末端标记法分析肾脏细胞凋亡;Western blot检测肾脏蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）、磷酸化蛋白激酶B（phosphorylated protein kinase B,p-Akt）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cysteine aspartate protease,Caspase-3）蛋白表达水平。结果：模型组小鼠血清中的Scr和BUN水平明显高于假手术组,研究组小鼠血清中的Scr和BUN水平明显低于模型组（P<0.05）;研究组肾脏的病理损伤程度明显弱于模型组,仅有少部分肾小管上皮细胞出现肿胀,少见肾小管上皮细胞坏死脱落,肾小管管腔正常,模型组小鼠的肾脏病理损伤评分明显大于假手术组,研究组小鼠的肾脏病理损伤评分明显小于模型组（P<0.05）;模型组小鼠的肾小管上皮细胞凋亡评分明显大于假手术组,研究组小鼠的肾小管上皮细胞凋亡评分明显小于模型组（P<0.05）;模型组小鼠肾脏中Caspase-3蛋白表达水平明显高于假手术组,Akt和p-Akt蛋白表达水平明显低于假手术组（P<0.05）;研究组小鼠肾脏中的Caspase-3蛋白表达水平明显低于假手术组,Akt和p-Akt蛋白表达水平明显高于假手术组（P<0.05）。结论：促红细胞生成素衍生肽对肾缺血再灌注有明显改善作用,该作用可能是通过调控PI3K/Akt信号转导通路调控机体凋亡蛋白的表达来实现的。