UHPLC-MS/MS测定人血浆中的阿普斯特浓度及生物等效性研究

目的 采用超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）法,建立了快速、 简单、 灵敏的测定人血浆中阿普斯特浓度的方法并用于阿普斯特人体生物等效性试验研究。方法 采用蛋白沉淀法处理,以阿普斯特-d5作为内标,色谱柱为Phenomenex Kinetex C₁₈柱(2.1 mm×50 mm, 2.6 µm),流动相为0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈,流速0.45 mL·min-1梯度洗脱,采用电喷雾(ESI) 离子源以正离子方式进行MRM检测,用时3 min。结果 阿普斯特在 2~600 ng·mL^-1 (r²=0.997 7)范围内线性关系良好,准确度和精密度均小于15%。空腹和餐后条件下阿普斯特片受试制剂AUC_0-t、AUC_0-∞和C_max的90% CI为参比制剂相应参数的80.00 %~125.00 %范围内。结论 受试制剂与参比制剂具有生物等效性。     

UPLC-MS/MS法同时检测人血浆中美托洛尔和曲美他嗪浓度

目的:建立同时检测人血浆中美托洛尔和曲美他嗪浓度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,应用于临床美托洛尔和曲美他嗪血药浓度监测.方法:血浆采用甲醇沉淀蛋白方法处理后进样分析,以苯佐卡因为内标,色谱柱为Agilent Poroshell 120 EC-C18(100 mm×2.1 mm,2.7 μm),...     

UPLC-MS/MS法测定人血浆中丙硫氧嘧啶的含量

目的 建立UPLC-MS/MS法测定人血浆中丙硫氧嘧啶的含量,为临床治疗药物监测（TDM）和生物等效性试验（BE）提供方法学基础。方法 采用Agilent SB-C₁₈柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）,流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液（80∶20,V/V）,等度洗脱。质谱采用AJS-ESI源,多反应监测（MRM）正离子模式,检测离子对为：丙硫氧嘧啶m/z 171.1→112.1、内标（丙硫氧嘧啶-D5）m/z 176.1→117.0。结果 血浆中丙硫氧嘧啶在10~5 000 ng/ml范围内线性关系良好,r=0.999 3;批内和批间的精密度和准确度良好（RSD<10%,RE<±10%）;不同浓度的基质效应均<110%,变异系数<5%;不同浓度的平均回收率为101.60%~113.56%,符合方法学要求。结论 该方法快速简便、灵敏准确,适用于血浆中丙硫氧嘧啶的含量测定。     

UHPLC-MS/MS法同时测定人血浆中氨氯地平和缬沙坦的质量浓度

目的建立快速、灵敏的UHPLC-MS/MS法同时测定人血浆中氨氯地平和缬沙坦的质量浓度,并将此方法应用于缬沙坦氨氯地平单片复方制剂的人体药物动力学研究。方法采用氘代同位素双内标(缬沙坦-d3和氨氯地平-d4),血浆样品采用乙腈沉淀蛋白结合样品稀释的方法进行预处理,色谱柱为Waters Xbridge-C_(18)柱(50 mm×2.1 mm,2.5μm),流动相为水(含体积分数为0.1%的甲酸)-甲醇(含体积分数为0.1%的甲酸),梯度洗脱,流速为0.4 mL·min~(-1)。离子源为电喷雾电离(ESI)源,正离子化方式,扫描方式为多反应离子监测(MRM)。结果血浆中氨氯地平和缬沙坦的质量浓度分别在0.1～20.0μg·L~(-1)和2.0～5 000μg·L~(-1)内线性关系良好,提取回收率分别为89.1%～92.8%和95.5%～103.1%,方法的专属性、精密度和准确度均符合测定要求。结论该方法适用于缬沙坦氨氯地平单片复方制剂在人体内的药代动力学研究。     

UHPLC-MS/MS同时测定中药饮片中4种恩镰孢菌素

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）检测中药饮片中4种恩镰孢菌素含量的分析方法。方法 样品采用70%甲醇超声处理后,以2 mmol·L^–1醋酸铵、甲醇-乙腈为流动相,经Agilent Infinity Lab Poroshell 120 SB-C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,2.7 μm）梯度洗脱分离,在电喷雾电离（electrospray ionization,ESI）正离子模式下采用多反应监测（multiple reaction monitoring,MRM）进行测定,基质外标法定量。结果 在高、中、低3个加标水平下,4种恩镰孢菌素的平均回收率为92.15%~118.67%,各恩镰孢菌素在线性范围内线性关系良好,相关系数均≥0.999,方法检出限为0.002~0.02 μg·kg^–1,定量限为0.01~0.1 μg·kg^–1,结果显示4种恩镰孢菌素对17种样品均有不同程度的污染。结论 该方法简便、快速、准确,适用于中药饮片中4种恩镰孢菌素筛查。药饮片中恩镰孢菌素检出率较高。     

UPLC-MS/MS法同时测定三七总皂苷中5种皂苷类成分在大鼠血浆中的含量

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定大鼠口服三七总皂苷后血浆中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb 1、人参皂苷Rd的含量.方法 以柴胡皂苷A为内标,蛋白沉淀法对血浆样品进行处理.色谱柱:ACQUITY BEH C18柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),流动...     

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆和尿液中哌拉西林他唑巴坦的浓度

目的：建立同时测定人血浆和尿液中哌拉西林他唑巴坦浓度的高效液相色谱-质谱联用方法。方法：采用Waters C18柱（4.6mm×50mm,5μm）,流动相为乙腈-0.5%甲酸,兰索拉唑为内标,以多反应监测（MRM）扫描方式进行检测,监测离子质荷比哌拉西林m/z516.2→233.1,他唑巴坦m/z299.0→138.1,兰索拉唑m/z368.1→163.9。血浆样品经乙腈沉淀蛋白后取上清液进样,尿液样品稀释后经乙腈沉淀蛋白进样。结果：血浆和尿液中哌拉西林、他唑巴坦的线性范围均为0.10～100.00μg·mL-1,低、中、高3个浓度日内、日间精密度均小于10%。结论：本方法灵敏度高,重现性好,操作简便快捷,可用于生物样本中哌拉西林、他唑巴坦钠的浓度测定。     

UPLC-MS/MS法测定人血浆中双氯芬酸钠的浓度

目的建立测定人血浆中双氯芬酸钠浓度的超高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法。方法采用蛋白沉淀法处理血浆样品。色谱柱为Waters C18(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-体积分数为0.06%的甲酸溶液(体积比为40∶60),流速为0.7 m L·min-1,正离子模式多反应监测(MRM)扫描分析,离子通道分别为m/z 296.03→249.98(双氯芬酸钠),m/z 358.10→138.92(吲哚美辛,内标物)。结果血浆中双氯芬酸钠线性为10³ 000μg·L-1(r=0.998 0),定量下限为10μg·L-1,提取回收率在95.1%3 000μg·L-1(r=0.998 0),定量下限为10μg·L-1,提取回收率在95.1%¹01.3%,日内、日间精密度RSD均小于10%。结论该方法可用于双氯芬酸钠的药物动力学研究。     

HPLC-MS/MS同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因含量的方法学研究

目的建立同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因浓度的HPLC-MS/MS法。方法以茶碱为内标,血浆样品用甲醇沉淀蛋白后直接进样。用Waters symmetry C18（150 mm×4.6 mm,5μm）为分析柱,甲醇-0.2%醋酸=35∶65（v/v）为流动相,流速为0.9 mL·min^-1,采用柱后分流,0.2 mL·min^-1进入质谱,柱温35℃。选择监测的离子为m/z152.1→109.9（对乙酰氨基酚）、m/z195.3→138.1（咖啡因）和m/z181.1→123.9（茶碱）。结果血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因的线性范围分别为0.02-4.04μg·mL^-1,5.05~1 010 ng·mL^-1;日内日间精密度RSD均〈7.94%。结论本方法专属性强,灵敏度高,操作简便、快速,符合生物样品分析要求,适用于临床药动学研究。     

UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中布洛芬的浓度

目的：建立超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）法测定大鼠血浆中布洛芬的浓度。方法：色谱条件为：色谱柱Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18（2.1 mm×50 mm,5 μm）,流动相A为 0.01%甲酸-0.05%甲酸铵水溶液,流动相B为乙腈,流速0.3 mL·min-1,柱温40 ℃,进样量5 μL。质谱条件为：电喷雾负离子多反应监测模式,雾化器压力：40 psi,干燥气流速：6.0 mL·min-1,干燥气温度：150 ℃,鞘气流速：10.0 mL·min-1,鞘气温度：175 ℃,气体为高纯氮气,离子源电压为3 800 V。结果：布洛芬在20.477 1～2 047.71 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好,平均回收率为115%。结论：本法快速、简便、专属性好、灵敏度高,可以为布洛芬的质量标准研究提供理论依据。     

HPLC-MS／MS测定血浆中丁丙诺啡的浓度

目的建立人血浆中丁丙诺啡浓度的HPLC-MS/ MS 测定法。方法以曲马多为内标,将待测血浆样品经氢氧化钠碱化后,加正己烷提取,上清液经Agilent Eclipse plus C18 （4. 6 mm ×150 mm,3. 5 μm）色谱柱分离,甲醇- 水（80∶20,v∶v,含0. 005 mol/ L 甲酸铵和0.25%甲酸）为流动相,流速0. 5 mL/ min,进行洗脱,采用电喷雾电离源（ESI）,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测。用于定量分析的离子分别为m/ z 468. 3→55. 2 和m/ z 264. 2→58. 1（内标）。结果血浆中丁丙诺啡的浓度与峰面积比在50-20 000 ng/ L 的范围内线性关系良好,定量下限为50 ng/ L;提取回收率大于67%,日内日间精密度小于11%。结论该法简单、灵敏、快速,分离效果良好,可用于人体血药浓度测定和药动学研究。     

UPLC-MS/MS法检测人血浆中莫西沙星浓度

目的 建立快速检测人血浆中莫西沙星浓度的UPLC-MS/MS方法。方法 用乙腈沉淀血浆蛋白的方法处理,运用Waters XEVO TQD三重四级杆液质联用仪,色谱柱为ACQUITY UPLC? BEH C₁₈柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1,柱温40 ℃,内标为左氧氟沙星,质谱条件：电喷雾离子化源(ESI),正离子检测模式;加入200 μL冰乙腈沉淀蛋白,13 000 r·min^-1离心10 min,取200 μL上清于进样瓶内,取2 μL上样。结果 莫西沙星的保留时间为1.58 min,线性范围为0.1~10 μg·mL^-1(r=0.999 6),最低定量限为0.01 μg·mL^-1,高、中、低浓度的相对回收率为(96.66±3.8)%,(102.0±1.76)%和(107.2±7.19)%。日内、日间RSD均<10%,血浆样品体系中的其他内源性物质不干扰测定。结论 该方法准确可靠,操作简便,重复性好,适于检测人血浆中莫西沙星的血药浓度及其药动学研究。     

A Novel and Rapid Method to Determine Doxycycline in Human Plasma by Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry

A simple, rapid, specific and sensitive liquid chromatography tandem mass spectrometric method has been developed and validated for the determination of doxycycline from the human plasma. Doxycycline is extracted from human plasma by solid phase extraction. Demeclocycline was used as an internal standard. Detection was performed at transitions of 444.800→428.200 for doxycycline and 464.700→448.100 for demeclocycline using mass spectrometry. Chromatographic separation of analyte and internal standard were carried out using a reverse phase C18, column at 0.500 ml/min flow. The assay of doxycycline is linear over the range of 0.055-7.612 μg/ml, with a precision <14.83%, regression coefficient (r²)=0.9961 and the limit of quantification in plasma for doxycycline was 0.055 μg/ml. Mean extraction recovery obtained was 95.55%. Samples are stable at room temperature for 6 h, processed samples were stable at least for 30.20 h and also stable at three freeze-thaw cycles. The method has been used to perform pharmacokinetic and bioequivalence studies in human plasma.     

LC-MS/MS测定人血浆中对乙酰氨基酚及其人体药动学和生物等效性研究

目的 建立一种快速、灵敏的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）方法以测定人血浆中对乙酰氨基酚浓度,并应用于两种对乙酰氨基酚制剂的人体药代动力学和生物等效性研究。方法 以替硝唑为内标,200μL血浆样品经5倍于其体积的乙酸乙酯液液萃取,再经Waters XBridge? C18柱等度洗脱分离后导入串联质谱,以正离子多反应监测模式进行定量分析,对乙酰氨基酚和内标的选择性反应离子对分别是m/z 152→110和248→121。方法经验证后应用于19名健康受试者单剂量空腹口服两种对乙酰氨基酚制剂500mg后药代动力学和生物等效性的研究。结果 血浆中对乙酰氨基酚在0.1～8.0 μg·mL-1范围内线性良好（r2 > 0.99）,最低检测限为 0.1 μg·mL-1,提取回收率为91.0%～98.7%,日内和日间准确度分别为98.8%～111.3% （精密度：CV ? 9.03%）和94.9%～102.6% （精密度：CV ? 10.68%）。生物等效性试验中,受试制剂与参比制剂的主要药代动力学参数Cmax、AUC0-t和AUC0-∞ 几何均值比的90%置信区间分别为83.50%～105.79%,94.25%～101.54%和93.24%～101.02%,均落在生物等效可接受标准80.00%～125.00%范围内。结论 所建立测定人血浆中对乙酰氨基酚浓度的HPLC-MS/MS法具有快速灵敏、回收率高、选择性好的特点,适用于对乙酰氨基酚片人体药代动力学和生物等效性研究。受试制剂与参比制剂在人体内吸收速度和程度相似,两种制剂生物等效。     

UHPLC-MS/MS同时检测人血浆中5种麻醉药物

目的 建立UHPLC-MS/MS同时检测人血浆中瑞芬太尼、舒芬太尼、依托咪酯、右美托咪定、地佐辛5种麻醉药物的分析方法,为指导临床用药提供参考。方法 血浆样品经乙腈沉淀蛋白质后进样分析,以普鲁卡因为内标,采用Agilent Poroshell 120 EC-C₁₈（2.1 mm×150 mm,2.7 μm）色谱柱进行色谱分离;以甲醇-10 mmol·L^-1甲酸铵溶液（28：72,用甲酸调节pH至3.5）为流动相,流速0.2 mL·min^-1;采用电喷雾电离源正离子检测模式,以多反应监测方式进行分析。结果 人血浆中瑞芬太尼、舒芬太尼、依托咪酯、右美托咪定、地佐辛分别在0.25~25.32（r=0.998 7）,0.27~27.48（r=0.999 2）,1.54~154.05（r=0.999 5）,0.51~51.35（r=0.999 2）,0.56~56.19（r=0.998 8）ng·mL^-1内线性关系良好。日内和日间精密度RSD均<10.0%,提取回收率均处于92.8%~107.3%之间。该方法成功应用于30例临床患者血浆样本分析。结论 该方法操作简单快速、灵敏度高、专属性高且稳定,适用于人血浆中瑞芬太尼、舒芬太尼、依托咪酯、右美托咪定、地佐辛5种麻醉药物的分析,能够服务于临床治疗药物监测。     

超高压液相色谱-串联质谱法测定患儿血清中阿米卡星的浓度

目的：建立超高压液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）法测定儿童血清中阿米卡星药物浓度的分析方法,并将该方法应用于临床样本的检测,指导临床合理用药。方法：血清样品经甲醇蛋白沉淀,以异帕米星为内标,采用Agilent Poroshell120 HILIC-Z（2.1 mm×100 mm,2.7 μm）色谱柱分离,流动相A：100 mM醋酸铵溶液（含1%甲酸）,流动相B：乙腈（含1%甲酸）,梯度洗脱。电喷雾离子源,多反应离子监测模式,采用正离子模式进行检测,检测离子通道为m/z 586.2/163.1（阿米卡星）和m/z 570.2/411.4（内标）。结果：阿米卡星在0.625~40.000 μg/mL范围内线性关系良好（r=0.999 6）,日内和日间精密度<11.14%,准确度为91.76%~110.31%,基质效应95.02%~103.23%,提取回收率90.24%~96.29%。结论：本方法简单、快速、灵敏、准确,适用于人血清阿米卡星浓度分析测定。将该方法用于临床6例儿科患儿阿米卡星药物浓度监测,测定结果显示患儿的稳态谷浓度和峰浓度个体差异较大,提示阿米卡星在治疗过程中应进行药物浓度监测。     

UHPLC-MS/MS同时测定人血浆中辛伐他汀及其代谢产物

目的采用UHPLC-MS/MS同时测定人血浆中辛伐他汀及其代谢产物辛伐他汀酸,并研究辛伐他汀、辛伐他汀酸在人体内的药动学特征。方法血浆样品以乙醚萃取,采用UHPLC-MS/MS进行分析。色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18(100mm×2.1mm,3.5μm);乙腈-1mmol·L-1醋酸铵(甲酸调pH 4.5)为流动相梯度洗脱,流速:0.2 m L·min-1。采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测方式(MRM)进行定量分析。辛伐他汀和内标洛伐他汀在正离子模式下定量分析,离子对分别为m/z 419.4→199.3和m/z 405.3→199.3;辛伐他汀酸和内标洛伐他汀酸在负离子模式下定量分析,离子对分别为m/z435.5→115.2和m/z 421.4→101.2。结果辛伐他汀和辛伐他汀酸的线性范围均为0.2~50 ng·m L-1(r>0.99),最低定量限均为0.2 ng·m L-1,日内和日间精密度(RSD)均≤11.10%,提取回收率均≥63.71%。结论该方法专属性强、灵敏度高、重现性好,适用于辛伐他汀的药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定血清中硫酸头孢噻利浓度

目的：建立一种灵敏、可靠的检测血清中硫酸头孢噻利含量的高效液相色谱-串联质谱法。方法：血清样品经酸化甲醇蛋白沉淀后,采用ExtendC18柱（250mm×4．6mm,5μm）0．02mol·L^-1乙酸铵-甲醇（65：35）为流动相,头孢唑啉为内标,应用高效液相色谱／大气压化学电离串联质谱法在多反应监测模式（MRM）下测定,硫酸头孢噻利和内标的定量离子对分别为m/z 523→396和m／z455→323。结果：硫酸头孢噻利的回收率在94．0％-101．9％之间,硫酸头孢噻利在2．0～1000．0μg·L^-1范围内呈良好线性,日内RSD〈9．2％,日间RSD〈10．6％,定量检出限为2．0μg·L^-1。结论：本方法简便、灵敏、干扰少、特异性好,可用于硫酸头孢噻利的临床药动学研究及临床特殊人群的血药浓度测定。     

LC/MS/MS法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪的浓度

目的 建立一种快速、灵敏地测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪(1amotrigine,LTG)的LC/MS/MS方法.方法 采用高效液相色谱串联质谱电喷雾检测(LC/MS/MS)法,色谱柱为Welch Materials XB-C18柱,流动相甲醇-水(95:5,V/V,含5 mmol/L甲酸铵),流速0.3ml/min,柱温...     

LC-MS／MS法测定全血中他克莫司浓度的方法学研究

目的：建立测定人全血中他克莫司液相色谱-串联质谱联用（LC-MS／MS）方法,并与微粒子免疫分析（MEIA）方法测定的结果进行了比较。方法：运用LC-MS／MS方法,血样经乙腈沉淀蛋白,上清液氮气吹干流动相复溶进样。色谱柱：Zorbax Extend—C18柱（150mm×4．6mm,5μm）;流动相：甲醇-乙腈-20mmol·L^-1醋酸胺溶液（80：15：5）;流速：0．4ml·min^-1。采用电喷雾离子化四极杆串联质谱,多反应检测方式测定样品的浓度。检测离子对分别为m／z821．7→m／z 768．4和m／z 821．7→m／z 786．5。结果：他克莫司在0．5～128ng·ml^-1浓度范围内,峰面积与浓度线性关系良好（r=0．9991,／2=5）,最低定量限为0．5ng·ml^-1,平均回收率为99．0％,日内精密度、日间精密度的RSD分别为3．38％和4．16％。MEIA分析采用标准IMX测定方法。两种方法比较,其标准差小于3．0,表明相关性好。结论：本方法具有良好的灵敏度、准确度、精确度及专属性,可用于他克莫司血药浓度监测和人体药药动力学研究。