经典气血阴阳虚证模型小鼠在“肾藏象”层面的证候物质基础研究

目的研究气血阴阳虚证模型小鼠在"肾藏象"层面的证候物质基础。方法以雄性ICR小鼠为对象,以控食法复制气虚证模型,以乙酰苯肼复制血虚证模型,以甲状腺素复制阴虚证模型,以氢化可的松复制阳虚证模型。动态观察小鼠体质量变化,检测各脏器变化;取肾脏、肾上腺和骨髓组织抽提RNA,以实时荧光定量PCR技术检测相关基因表达;以ELISA方法检测血清皮质酮含量。结果 (1)与正常对照组比较,控食组小鼠体质量下降最显著(P0.01),乙酰苯肼和氢化可的松组小鼠体质量也显著下降(P0.05);控食组和氢化可的松组小鼠脾脏与胸腺明显萎缩(P0.01),乙酰苯肼组小鼠脾脏显著肿大、而胸腺严重萎缩(P0.01)。(2)与正常对照组比较,控食组和乙酰苯肼组血清皮质酮水平显著升高(P0.05),而氢化可的松组显著下降(P0.001)。(3)控食组小鼠肾上腺合成皮质激素的重要酶Star、Cyp21a1、Cyp11b1表达显著升高(P0.05);肾脏Epo表达显著升高(P0.05),Csf2显著下降(P0.05);骨髓Tpo、IL-4表达显著上调(P0.05)。(4)乙酰苯肼组小鼠肾上腺Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1表达显著升高(P0.05);肾脏Epo、Csf2、Csf3表达显著升高(P0.05);骨髓Csf3、IL-4、IL-5、IL-6表达显著升高,而IL-1b和IL-7显著下降(P0.05)。(5)甲状腺素组小鼠肾上腺Cyp11b1表达显著升高(P0.05);肾脏Epo表达显著升高,Csf2显著下降(P0.05);骨髓Csf3、IL-2和IL-5表达显著下降(P0.05)。(6)氢化可的松组小鼠Star、Cyp21a1、Cyp11b1、Cyp11b2表达显著下降(P0.05),肾脏Epo表达显著升高,而Csf1和Csf2显著下降(P0.05),骨髓Csf3、IL-1b、IL-5和IL-7表达显著下降,IL-4却显著升高(P0.05)。结论通过控制摄食量,给予乙酰苯肼、甲状腺素及氢化可的松,可以复制出相关的中医虚证模型,且在肾上腺、肾脏及骨髓等"肾藏象"层面存在相应的物质功能变化。     

当归补血汤多糖对环磷酰胺和乙酰苯肼联用致小鼠血虚模型的影响

目的 :观察当归补血汤多糖对血虚小鼠血液系统的影响。方法 :用环磷酰胺和乙酰苯肼联用所致的血虚小鼠为实验对象。结果 :当归补血汤多糖能显著升高血虚小鼠的RBC、WBC、Hb水平。结论 :当归补血汤多糖具有补血作用 ,是当归补血汤的有效活性部位。     

四物汤对乙酰苯肼致溶血性贫血模型大鼠的治疗作用

目的：考察四物汤对溶血性贫血模型大鼠的治疗作用。方法：用乙酰苯肼诱导动物模型,四物汤治疗后观察一般表现,检测肝脏、脾脏重量和外周血红白细胞计数、血红蛋白含量、网织红细胞计数。结果：模型大鼠表现萎靡,肝脾肿大,红细胞数、血红蛋白量明显减少,白细胞、网织红细胞数上升;四物汤治疗后大鼠一般表现好转,肝脾缩小,外周血象明显好转。结论：四物汤可以明显改善溶血性贫血模型大鼠外周血象,促进骨髓造血。     

6种胃溃疡小鼠模型的证候特征及比较

目的研究胃溃疡不同模型小鼠证候的发生和演变,以及疾病与证候的关系。方法在文献报道的基础上,采用水浸拘束法、乙酸法、磷酸组胺法、消炎痛法、利血平法、乙醇法等6种不同方法建立小鼠胃溃疡疾病模型,并设置正常、禁食、假手术等对照组,运用业已建立的小鼠标准化、计量化的四诊检测和辨证方法,对以上各模型进行了客观、动态、量化的检测和证候评价。结果6种造模方法均能不同程度地造成胃黏膜损伤。其中,水浸拘束模型气血阴阳损伤程度轻,恢复快;乙酸法模型出现气损、阳竭,以及精血虚少的证候;磷酸组胺小鼠仅在早期有胃热证的倾向;消炎痛模型出现短暂气虚、阳虚证候,但精血损伤证候持续较长;利血平模型出现典型的胃寒证、阳虚证(主要是心阳虚、脾阳虚)和阴虚,是一个严重的气血阴阳虚证复合模型;乙醇法造模后即出现典型的胃热证,恢复期甚至出现气盛表现。结论不同造模方法的胃溃疡模型小鼠存在各自的证候特点,符合"有是病便有是证"的中医理论;同时其证候是可以通过四诊客观化方法检测到,并可以用于治则治法制定的参考,以及作为疗效评价指标。     

麋鹿角对环磷酰胺并乙酰苯肼诱导血虚模型的作用

目的:研究麋鹿角的补血作用。方法 :采用环磷酰胺并乙酰苯肼化学损伤血虚模型,以麋鹿角粉、麋鹿角水提取物以及水提药渣灌胃给药,检测小鼠体质量变化、外周血常规、骨髓细胞周期以及脾脏病理变化。结果:麋鹿角粉(1、2、4g/kg)和麋鹿角水提药渣(1、2g/kg)均对降低的模型小鼠外周血白细胞数有明显升高作用;麋鹿角粉(2、4g/kg)、水提取物以及水提药渣均能改善造模引起的小鼠体重下降,并能促进模型小鼠骨髓细胞由G0/G1期向S期转化,促进骨髓细胞DNA的合成,促进造血祖细胞的增殖;麋鹿角水提取物(1、2、4g/kg)具有改善模型小鼠脾脏病变的作用。结论 :麋鹿角对化学损伤性血虚模型小鼠有一定的保护作用。本研究可为麋鹿角药用资源的合理利用及其产业化提供科学依据。     

四物汤对环磷酰胺和乙酰苯肼致血虚证模型小鼠骨髓细胞凋亡的影响

目的:探讨四物汤对环磷酰胺和乙酰苯肼致血虚证模型小鼠骨髓细胞凋亡的影响及机制。方法:实验动物随机分为正常对照组、模型对照组、四物汤组和阳性药对照组。除正常对照组外,其余三组小鼠分别于给药后第2天、第5天皮下注射乙酰苯肼每日20 mg/kg、40 mg/kg,从第5天起,每日腹腔注射环磷酰胺40 mg/kg,连续4 d,制备血虚证小鼠模型。利用血细胞计数仪、流式细胞术和蛋白免疫印迹技术分别检测各组小鼠外周血象、骨髓细胞凋亡率及骨髓细胞Bcl-2蛋白表达。结果:与模型对照组相比,四物汤组血红细胞数升高非常显著(P0.01),白细胞数和血红蛋白含量均无显著变化(P 0.05);四物汤组小鼠骨髓细胞凋亡率下降非常显著(P0.01),Bcl-2蛋白表达量显著增加(P0.05)。结论:四物汤能够促进小鼠骨髓细胞中Bcl-2蛋白的表达,抑制骨髓细胞凋亡,提高外周血象,此可能是其发挥补血作用的机制之一。     

四物汤对γ射线照射致血虚证小鼠造血细胞作用的研究

探讨四物汤预防和治疗血虚证的作用机理。用⁶⁰Coγ射线全身照射小鼠造成血虚证模型;荧光标记并用流式细胞仪测定CD34⁺细胞在骨髓有核细胞中的比例;细胞固定后PI染色测定细胞周期;Annexin V-FITC试剂盒和DNA凝胶电泳检测骨髓细胞的凋亡。结果:四物汤对小鼠骨髓造血干祖细胞、外周血细胞的恢复有明显促进作用;有保护骨髓和促进骨髓细胞由G₁期进入S期的效应;四物汤可减轻射线引起的细胞凋亡;促进骨髓造血干祖细胞的增殖,抑制骨髓造血干祖细胞的凋亡是四物汤预防和治疗血虚证的机制之一     

雷公藤多甙致雌性小鼠生殖功能低下模型证候初探

临床报道及药理研究表明,雷公藤能造成育龄期女性生殖功能低下,我们拟用其这一特性建立一新的生殖功能低下动物模型。通过前期药物量效关系研究,我们已初步探索出了雷公藤多甙有效的造模用药剂量及造模时间。本文用临床已知的中药、西药对该模型进行治疗,以探讨该模型的可治疗性,并初探雷公藤多甙致雌性小鼠生殖功能低下模型的证候特点。     

兔动脉粥样硬化模型的证候归属研究

目的观察兔动脉粥样硬化模型的证候学表现,探讨其中医证候学归属规律。方法 24只雄性日本大耳白家兔随机分为空白组(8只)和实验组(16只),空白组给予普通饲料,实验组在高脂饮食的基础上加以免疫损伤和经股动脉球囊损伤术,共饲养10周。用血管形态学观察以及血脂检测评价模型,并定期观察家兔的耳、舌、眼睛以及整体状态等证候学变化及生化指标。结果实验组家兔早期活动量逐渐减少,气候变化时出现鼻腔分泌物增多、呼吸有喘鸣、耳廓红热等感冒症状,中期家兔眼睛周围可见脂肪斑或者形成脂肪带,耳廓冰凉,精神萎靡呆钝,血脂明显高于空白组,至第10周左右,实验组家兔舌质暗红或有瘀斑,耳廓青紫冰凉,耳缘采血困难,取材时可见血管内有栓子形成。与空白组比较,实验组氧化低密度脂蛋白和丙二醛明显增高,超氧化物歧化酶活性降低。结论兔动脉粥样硬化模型证候学是变化的,其初期表现为气虚、中期为气虚痰凝、后期为气虚血瘀之证,其规律与临床动脉粥样硬化的发病相似。     

晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的证候研究

目前对晚期NSCLC,多主张采用综合治疗的方法,包括放疗、化疗、生物免疫治疗、中医药治疗等,中医药治疗是我国治疗肺癌的特色疗法,中医药疗法的优势体现在改善患者的临床症状、提高患者的生存质量。目前有关晚期NSCLC的中医证型研究方面的报道不少,本研究采用回顾性病例研究,分析晚期NSCLC中医证型与细胞免疫功能、肿瘤血清标志物之间的关系,为今后临床治疗晚期NSCLC提供参考。1病例来源本组病例资料来源于2001年1月-2002年12月期间在广东省中医院肿瘤内科住院治疗并经过细胞或病理确诊为ⅢB,Ⅳ期NSCLC(参考《中国常见恶性肿瘤诊…     

气虚血瘀证动物模型的研究进展

中医证候模型研究起步较晚,发展迅猛,近年来随着中医病证方药的研究不断加深,为了中医现代化的发展,要求中医证候模型研究更加具体和深入。气虚血瘀证作为一种临床上常见证型,在心脑血管疾病、消化系统疾病、慢性肾病、癌症等疾病中多有出现。随着我国人口老龄化程度的不断加重,因老年人多气虚,多血瘀的体质特点,气虚血瘀证的研究已成为中医学界的热点问题。综合近年来气虚血瘀证动物模型造模方法,将其造模思路概括为病理造模、病因造模、病证结合造模三方面。通过观察实验动物出现符合中医理论的宏观表征、肢体行为学表现,以及血液流变学等指标,评价造模方法,为气虚血瘀证造模方法提供思路与借鉴,针对气虚血瘀证类模型的研究应遵循因-脉-证-治的思路,即病因-外在表征-病理机制-辨证论治,将中医证候模型研究同现代科学结合,令造模方法规范化发展,构建相对完善的气虚血瘀动物模型造模方法,为今后探究气虚血瘀证的发病机制及新的治疗思路提供模型支持。     

慢性疲劳综合征中医证候主成分的相关分析

目的研究慢性疲劳综合征(CFS)气虚证和血虚证的主成分与传统中医辨证的相关性。方法收集25例CFS气虚证和23例CFS血虚证患者,提取主成分,与传统中医辨证相结合,进行相关分析。结果CFS气虚证主成分1与CFS气虚证辨证显著正相关。CFS血虚证主成分1、2与CFS血虚证辨证显著正相关。结论CFS气虚证和血虚证的主成分与传统中医辨证结果基本吻合,将两者相结合的研究方法能够提高辨证的客观性和准确性,并有可能简化中医辨证诊断程序。     

“补血四方”治疗血虚证概述

四物汤、当归补血汤、归脾汤、八珍汤俱为补血类方剂,均具有补血作用。随着现代医学的不断发展,诊疗手段的不断进步,目前临床上迫切需要应用中医方剂治疗有明显诊断学指标变化的血液疾病。中医临床上常应用上述"补血四方"治疗具有血虚症状的疾病,从"补血四方"的补血机制和临床研究的角度探讨其对血虚证的影响和治疗作用,认为"补血四方"的补血机制均为通过对人体精髓的补益和调节作用,从生血的源头论治血虚证,但四方适宜的中医证候不同,相应的药理作用也不一样。     

模拟中医病因所致脾气虚、脾阳虚大鼠模型的证候比较研究

目的:以多因素复合法分别建立脾气虚证、脾阳虚证大鼠模型,对两组模型大鼠进行比较研究以探讨脾气虚、脾阳虚的证候实质与差异。方法:动物随机分为正常组、脾气虚组和脾阳虚组,以相应造模方法进行模型复制,并以四君子汤和理中汤进行药物反证。结果:脾气虚和脾阳虚大鼠宏观证候计分高于正常组(P0.01),且以脾阳虚组为著(P0.01);两组血清GAS均低于正常组(P0.01);脾气虚组的血浆MTL低于正常组(P0.01),而脾阳虚组高于正常组(P0.01);经健脾中药干预后,各项脾虚症状和体征逐渐缓解或消失;血清GAS、血浆MTL紊乱回复。结论:多因素复合法复制的脾气虚、脾阳虚证大鼠模型符合证候的生物学特征,稳定性良好,且经得起药物反证;脾气虚、脾阳虚大鼠的脾虚宏观证候呈递进关系;血浆MTL在脾气虚和脾阳虚中变化趋势不一致,可作为鉴别两证的微观指标。     

建立心肌梗死心气虚血瘀证和心阳虚血瘀证病证动物模型的研究

目的　探求中西医结合病证大鼠模型的构建和评价方法。方法　 结扎大鼠心脏前降支动脉致心肌梗死（心力衰竭）模型,于术后9～12周应用一氧化氮合酶抑制剂致血压升高、心衰加重,观察造模大鼠12周,采集四诊信息、结合中医八纲辨证,运用中西医结合学会虚证和血瘀证的诊断标准进行脏腑气血虚实辨证。结果　造模后大鼠心电图ST段升高,异常Q波数量、脏体比值、左室腔面积和心肌胶原面积均明显多于假手术组（P＜0.01),表现为血瘀证;且模型大鼠心率显著高于假手术组（P＜0.01）,力竭游泳时间、心功能显著低于假手术组（P＜0.01）,表现出心气虚证候;后期(12周）大鼠血压升高、心功能恶化,致心气虚证候加重,体温低、尿量增加进一步改变。结论 中西医临床和基础研究中规范的、成熟的、统一的标准和方法引入中医动物模型研究,可以成为中医病证动物模型建立和评价的基本思路。     

慢性心衰气虚血瘀证大鼠模型的研究初探

目的该研究旨在探索慢性心衰气虚血瘀证大鼠模型。方法选择Wistar雄性大鼠100只,开胸行左冠脉主干结扎术后缝合。将造模成功大鼠20只设为模型组,第2周开始减食喂养,每天让大鼠游泳1次;正常组为10只大鼠。4周后观察一般状态,测左室心功能和肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血栓素B2(TXB2)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)及心脏结构的变化。结果动物一般状况观察:模型组倦怠,黄白色口唇,舌质黯、瘀斑,呼吸、心率加快。心功能和血液指标测定:模型组与正常组比较,P<0.01。心肌组织形态学观察:模型组心肌细胞核固缩,异染色质呈块团状,可见核仁,肌原纤维排列紊乱、断裂及缺失,各带难以分辨,肿胀,空泡化,闰盘间隙增宽,紧密连接及桥粘连接消失。结论慢性心衰气虚血瘀证模型大鼠符合中医气虚血瘀证。     

四物汤对环磷酰胺所致血虚证小鼠造血细胞作用的研究

探讨四物汤治疗环磷酰胺所致小鼠血虚证的作用机理。腹腔注射环磷酰胺制成小鼠血虚证模型;测定小鼠外周血象;骨髓细胞集落形成;CD34^ 细胞在骨髓有核细胞中的比例;小鼠胸腺指数。结果表明四物汤具有明显促进骨髓造血和增强免疫的作用,并可升高血虚证小鼠的外周血象。四物汤增强免疫、促进造血可能是四物汤治疗小鼠血虚证的机理之一。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气虚血瘀痰阻证评价

目的评价慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型的中医证候特征。方法采用气道内灌注内毒素加香烟烟熏的复合方法建立大鼠COPD模型,并对该模型从宏观状态、病理形态结构和肺功能等方面进行观测,评价该模型的中医证候特点。结果模型组大鼠皮毛失去光泽、黄涩,爪甲紫黯,精神萎靡,汗多,活动减少,少反抗,少厮咬,呼吸深大,活动加剧,体重较健康对照组减轻,气道分泌物增多;肺组织体积增大、出现瘀血,小气道壁、平滑肌、胶原较正常对照组增厚,差异有统计学意义（P〈0．05）,与正常组比较,肺呼气总阻力（Re）、最大通气量（MVV）、第0．3秒用力呼气容积与用力呼气容积的百分比（FEV0.3／FVC）、用力呼气流速（FEF25-75）均降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。给予益气活血化痰法中药复方干预后,COPD模型大鼠上述体现气虚血瘀证的表象轻,小气道气道壁、胶原厚度均较模型组薄,肺功能Re、FEV0.3、FEV0.3／FVC、MVV、FEF25-75优于模型组,差异有统计学意义。结论气道内灌注内毒素加香烟烟熏的复合方法建立的COPD大鼠模型符合人类COPD的病理及肺功能改变特点,同时也体现了气虚血瘀痰阻证证候学特征。     

肺气虚证和肺阴虚证蛋白芯片研究

目的:探讨蛋白质芯片技术对肺气虚证和肺阴虚证的研究意义以及两证的血清IL-1β、IL-8、TNF-α表达水平。方法:将肺气虚证和肺阴虚证患者的血清通过Array-ELISA蛋白芯片平台检测。结果:COPD肺气虚组、COPD肺阴虚组、支气管哮喘肺气虚组、支气管哮喘肺阴虚组的血清IL-1β、IL-8、TNF-α水平明显高于健康组水平,差异有统计学意义(P0.01);COPD肺气虚组与COPD肺阴虚组、支气管哮喘肺气虚组与支气管哮喘肺阴虚组比较,COPD肺阴虚组和支气管哮喘肺阴虚组的血清IL-1β、IL-8、TNF-α水平相对较高,差异有统计学意义(P0.05);COPD肺气虚组与支气管哮喘肺气虚组、COPD肺阴虚组与支气管哮喘肺阴虚组比较,血清IL-1β、IL-8、TNF-α水平差异无统计学意义(P0.05)。COPD肺气虚组、COPD肺阴虚组、支气管哮喘肺气虚组、支气管哮喘肺阴虚组点的灰度值(发光信号值)明显比健康组点的灰度值高;COPD肺阴虚组和支气管哮喘肺阴虚组点的灰度值比COPD肺气虚组和支气管哮喘肺气虚组的高;COPD肺气虚组点的灰度值与支气管哮喘肺气虚组的、COPD肺阴虚组点的灰度值与支气管哮喘肺阴虚组的相近。结论:蛋白质芯片技术用于肺气虚证和肺阴虚证是可行的;肺气虚和肺阴虚证是一种慢性以肺部为主的全身炎症综合症,且肺阴虚较肺气虚有加重趋势。     

氢化可的松诱导的肾阳虚大鼠尿液代谢组学研究

目的:运用代谢组学方法研究氢化可的松诱导的肾阳虚大鼠尿液代谢表型的经时轨迹变化,鉴定与肾阳虚相关的代谢标志物来探讨肾阳虚相关代谢途径.方法:利用核磁共振氢谱(1H-NMR)技术建立大鼠尿液的代谢指纹谱,应用主成分分析和正交偏最小二乘判别分析研究肾阳虚大鼠尿液代谢表型的经时轨迹变化,应用正交偏最小二乘判别分析研究对照组和模型组之间的代谢物谱差异,并通过变量重要性投影(VIP)在尿液中选取生物标志物.结果:氢化可的松诱导的肾阳虚大鼠尿液代谢表型呈现明显的轨迹变化,在尿液中鉴定了与肾阳虚相关的13种生物标志物.肾阳虚大鼠机体能量代谢紊乱、肠道菌群受到扰动、甲基转移反应被抑制、氨转运功能受阻,同时,伴随一定程度的肾损伤.结论:该研究为探讨肾阳虚证的发生、发展及其病理机制、诊断的客观化和补肾阳中药的药效评价提供了一种新方法.