两亲性嵌段共聚物普朗尼克的细胞毒性及细胞摄取

目的：考察不同型号、混合普朗尼克对MCF-7及耐药MCF-7的细胞毒性和细胞摄取,筛选出可供后续胶束研究的混合普朗尼克最优配比。方法：选取Pluronic F68、F127、P85、P105、P123,按HLB值分为2组,以一定比例交叉混合,采用CCK-8法和高效液相色谱法,测定普朗尼克、混合普朗尼克对MCF-7及耐药MCF-7的细胞毒性和细胞摄取量。结果：试验结果表明,F68、F127对细胞的毒性较小,而P85、P105、P123对细胞的毒性相对较大;当2种普朗尼克配比使用的质量浓度小于100 μg·mL^-1时,MCF-7及耐药MCF-7 2种细胞的存活率均大于70%。随着混合普朗尼克的浓度增加,细胞毒性均逐渐增强;F68与P85配比使用时,细胞毒性最大,且配比浓度为1：4时的细胞毒性大于1：2。Pluronic P85、P105、P123均可促进肿瘤细胞的药物摄取,Pluronic F68、F127基本不促进药物的摄取。F127-P123较其他混合普朗尼克表现出更强的摄取能力。结论：随着HLB值的降低及浓度的增大,普朗尼克对MCF-7及耐药MCF-7细胞的毒性增加。混合普朗尼克可以促进肿瘤细胞对于化疗药物的摄取。     

地塞米松预处理人乳腺癌MCF-7细胞对多西他赛抗肿瘤活性的影响

目的 探讨地塞米松预处理人乳腺癌MCF-7细胞后,对化疗药物多西他赛(艾素)抗肿瘤活性的影响.方法 以不同浓度(1×10-8～1×10-6 mol·L-1)的地塞米松预先作用于人乳腺癌MCF-7细胞后,再以艾素(5×10-6 mol·L-1)处理,在以上药物作用的相应时间段,通过流式细胞仪技术测定细胞凋亡,采用细胞计数观察细胞生长密度、形态.结果 地塞米松对MCF-7细胞增殖有抑制作用(P＜0.01),艾素能够明显抑制MCF-7细胞增殖,促进其凋亡(P＜0.01),地塞米松预处理后艾素干预MCF-7细胞的增殖抑制作用较单用艾素减弱(P＜0.01),且随地塞米松浓度的增加,其对化疗药艾素的凋亡抑制作用的影响增强.结论 地塞米松预处理对艾素诱导的人乳腺癌MCF-7细胞的凋亡具有明显的阻抑作用,抑制了多西他赛的抗肿瘤活性.     

多西他赛他莫昔芬复方脂质体逆转乳腺癌细胞耐药性的研究

目的 在体外考察多西他赛(Docetaxel, DTX)他莫昔芬(Tamoxifen, TMX)复方脂质体对乳腺癌细胞耐药性的逆转作用。方法 在体外,利用乳腺肿瘤细胞MCF-7和耐药乳腺肿瘤细胞MCF-7/ADR,通过MTU实验和中效原理评价多西他赛和他莫昔芬不同浓度时的协同作用。通过薄膜分散法制备具有协同作用的多西他赛他莫昔芬复方脂质体。在体外通过MTT实验考察复方脂质体细胞毒性和逆转肿瘤耐药作用。结果 在MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞,TMX-DUX混合物(M∶M=7∶1)的中效原理联合指数值都小于1,具有协同作用。对MCF-7细胞,游离药物DTX在浓度0.001 nM到50 nM有细胞毒性,游离TMX没有细胞毒性,DTX-TMX复方脂质体具有细胞毒性。对耐药MCF-7/ADR细胞,游离药物DTX在浓度0.001 nM到50 nM没有细胞毒性,游离TMX没有细胞毒性,DTX-TMX复方脂质体具有细胞毒性,并且细胞毒性强度大于对MCF-7细胞。结论 DTX-TMX复方脂质体能够逆转肿瘤耐药性。     

多西他赛联合化疗治疗晚期乳腺癌

目的观察多西他赛联合化疗对晚期乳腺癌的疗效和不良反应。方法对23例晚期乳腺癌采用多西他赛联合化疗。结果23例患者中完全缓解(CR)2例,部分缓解(PR)9例,总有效率47.8%。主要不良反应为骨髓抑制、胃肠道反应等。结论多西他赛联合化疗对晚期乳腺癌有较好疗效,不良反应可以耐受。     

多西他赛联合化疗治疗晚期乳腺癌

目的：观察多西他赛联合化疗对晚期乳腺癌的疗效和不良反应。方法：对23例晚期乳腺癌采用多西他赛联合化疗。结果：23例患者中完全缓解（CR）2例，部分缓解（PR）9例，总有效率：47．8％。主要不良反应为骨髓抑制、胃肠道反应等。结论：多西他赛联合化疗对晚期乳腺癌有较好疗效，不良反应可以耐受。     

多西他赛治疗晚期乳腺癌的临床研究

目的:探讨多西他赛治疗晚期乳腺癌的临床疗效。方法:选取2017年5月～2019年11月在某院接受治疗的晚期乳腺癌患者112例,分为研究组和对照组各56例,对照组采取常规治疗模式,研究组在此基础上结合多西他赛进行治疗,观察比较两组患者疗效和不良反应发生率。结果:治疗后,研究组有效率为92.6%,显著高于对照组有效率79.6%(P0.05);治疗后,研究组不良反应发生率明显低于对照组(P0.05)。结论:对晚期乳腺癌患者应用多西他赛进行治疗,可显著提高患者的身心健康,减轻社会及其个人的直接和间接经济负担,提高患者的成本效益比,可进一步在临床治疗上进行推广。     

多西他赛与下肢水肿相关

1名61岁男性胃癌晚期患者，术后化疗给予多西他赛40mg／m^2静脉滴注，亚叶酸钙120mg／m^2静脉滴注，氟尿嘧啶800mg／m^2 24h中心静脉持续滴注，配合羟基喜树碱15mg腹灌和热疗2个周期。用药结束后第5天患者出现双下肢进行性可凹性水肿。给予甲泼尼龙、呋塞米治疗4d后，水肿消退。     

多西他赛联合卡培他滨治疗蒽环类耐药乳腺癌的临床观察

目的 探讨多西他赛联合卡培他滨治疗蒽环类耐药乳腺癌的有效性和安全性.方法 回顾性分析2005年至2010年我院收治的蒽环类耐药乳腺癌48例,其中28例行多西他赛单药化疗(多西他赛35 mg/m2,d1、8,静脉点滴,用药前一天开始服用地塞米松8 mg/次,2次/d,连续服用3 d),20例行多西他赛联合卡培他滨化疗(多西他赛35 mg/m2,d1、8,静脉点滴,用药前一天开始服用地塞米松8 mg/次,2次/d,连续服用3 d;卡培他滨联合组1250 mg/m2,2次/d口服,d1～14,21 d为一周期),所有患者均至少完成2周期化疗.结果 联合组及单药组的有效率分别为60%及39.3%(P=0.157),没有统计学意义;中位疾病进展时间分别为6.5个月及5.5个月(P=0.042),有统计学差异;毒副反应均为可耐受,在消化道反应及骨髓抑制方面两组发生率无统计学差异.结论 多西他赛联合卡培他滨是蒽环类耐药转移性乳腺癌有效、安全的化疗方案.     

多西他赛治疗晚期浸润性转移乳腺癌的临床研究

目的探讨多西他赛治疗晚期浸润性转移乳腺癌的抗癌机制与特性。方法用多西他赛联合环磷酰胺和氟尿嘧啶化疗方案(治疗组)治疗浸润转移乳腺癌25例,并与25例同期同型晚期浸润性转移乳腺癌用多柔比星联合环磷酰胺和氟尿嘧啶化疗方案(对照组)比较。结果治疗组治疗前平均瘤体和平均血管密度分别为(855±347)mm3和(23.63±3.68)条,治疗后为(315±86)mm3和(9.98±2.83)条,较治疗前下降(P<0.01);对照组治疗前平均瘤体和平均血管密度分别为(848±332)mm3和(22.76±4.67)条,治疗后为(512±113)mm3和(13.47±3.39)条,较治疗前下降(P<0.01);治疗组治疗前其平均瘤体和平均血管密度与对照组比较差别无显著性意义(P>0.05),治疗后其平均瘤体和平均血管密度均较对照组低(P<0.01);治疗组副作用和不良反应率与对照组比较差别无显著性意义(P>0.05)。结论多西他赛通过抑制癌细胞内的有丝分裂,抑制微血管的过度增长而达到抗癌作用,用多西他赛联合化疗方案治疗晚期浸润性转移乳腺癌,可有效缩小肿瘤的瘤体,抑制瘤体内的微血管的过度生长,控制肿瘤的再度转移,从而达到有效控制癌症进一步恶化的作用,其抗癌效果较多柔比星联合化疗方案好。     

多西他赛联合替吉奥治疗蒽环类耐药晚期乳腺癌

目的：观察多西他赛联合替吉奥治疗蒽环类耐药晚期乳腺癌的疗效及不良反应.方法：多西他赛75 mg·m-2,第1天;替吉奥40 mg·m-2餐后口服,bid,连用14 d,21 d为1周期,每结束2周期评价疗效及不良反应.结果：40例蒽环类耐药晚期乳腺癌患者总有效率57.5%,肿瘤控制率80%,中位生存期420 d,中位疾病进展时间221 d,1年生存率67.5%.主要不良反应为骨髓抑制,其次为手足综合征、恶心、呕吐、腹泻、纳差等不良反应,经对症处理均可耐受,无治疗相关死亡患者.结论：多西他赛联合替吉奥治疗蒽环类耐药乳腺癌的疗效好,不良反应可耐受,值得临床推广使用.     

多西他赛普朗尼克P123胶束的制备

摘 要 目的： 优化以普朗尼克P123为载体材料的多西他赛胶束处方工艺。方法: 采用薄膜水化法制备多西他赛普朗尼克P123胶束。采用星点设计 效应面法优化胶束处方工艺,以包封率作为评价指标,考察投药量、有机溶剂体积、水化体积、水化温度。采用透射电镜观察胶束形态,并测定胶束的粒径和Zeta电位,以透析法进行胶束体外释放特性考察。结果: 以多元线性回归和二次、三次多项式拟合指标与因素之间的数学关系,结果表明三次多项式拟合度较好,制备出的胶束形态圆整,平均粒径和Zeta电位分别为108.3 nm和 3.99 mV,多分散指数为0.265,平均包封率和载药率分别为（97.91%±0.28％）和（3.72%±0.12％）,多西他赛胶束120 h的累积释放率达95.03%,具有一定的缓释能力。结论:采用薄膜水化法制备的多西他赛胶束工艺简单可行,具有较高的包封率,在体外具有较好的缓释效果。     

替诺福韦阳离子脂质体的制备及其对人体肝细胞SMMC-7721摄取和细胞毒性研究

目的:研究替诺福韦阳离子脂质体的制备及其促进肝实质细胞摄取的情况和细胞毒性作用。方法:采用叔丁醇冻干法制备替诺福韦阳离子脂质体,测定其包封率及理化性质;以SMMC-7721细胞为模型,研究脂质体对肝实质细胞摄取替诺福韦的促进作用,MTT法检测不同条件下载药脂质体对细胞的毒性情况。结果:制备的脂质体包封率为(88.3±1.6)%,粒径为(278.4±67.6)nm,Zeta电势为(31±5)mV;经半乳糖基及PEG修饰的脂质体较游离药物进入肝实质细胞的浓度明显升高,且时间延长;当替诺福韦脂质体、脂质浓度分别为7.5、30μg·mL-1时,细胞存活率在80%以上,毒性较小。结论:所制备的阳离子脂质体具有显著增加细胞摄取替诺福韦和保护替诺福韦的作用,有望成为抗病毒药物如替诺福韦等的高效传递系统。     

精氨酸水溶液复溶的多西他赛聚合物胶束的体外药效学及体内分布

目的：考察精氨酸复溶的多西他赛胶束的体外药效及体内分布情况。方法：用CCK-8法考察多西他赛胶束和多西他赛注射液对肿瘤细胞的增殖抑制作用。以荧光染料DIR标记多西他赛聚合物胶束,通过活体成像系统比较精氨酸水溶液复溶组,生理盐水复溶组和多西他赛注射液组的荧光分布。结果：多西他赛胶束组IC₅₀值明显比多西他赛注射液组高。精氨酸复溶的多西他赛胶束组肿瘤部位荧光强度比生理盐水复溶组和多西他赛注射液组都强。结论：精氨酸复溶的多西他赛胶束肿瘤靶向性更强且在肿瘤部位的停留时间更长,但其体外抗肿瘤活性有待提高。     

固相萃取-HPLC法测定MCF-7细胞内、外液中多西他赛的含量

目的:建立测定人乳腺癌细胞MCF-7内、外液中多西他赛(DOC)含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。分别制备细胞内液和细胞外液样品,经三氯乙酸除蛋白,固相萃取柱提取,色谱柱为Symmetry-C18,柱温为30℃,流动相为醋酸盐缓冲液(pH5.0)-乙腈=50∶50,检测波长为230nm。结果:DOC在细胞内、外液中检测浓度线性范围均为0.05～5.50μg·mL-1(r=0.9993、r=0.9990),平均提取回收率(n=5)均大于94%,日内、日间RSD(n=5)均小于5%,最低检测限分别为0.05、0.03μg·mL-1;细胞内液中DOC含量远高于细胞外液。结论:本方法简便、灵敏、干扰小,可用于MCF-7细胞内、外液中DOC含量的测定。     

多西紫杉醇联合斑蝥酸钠对人肺腺癌细胞增殖的抑制作用

目的:探讨多西紫杉醇联合斑蝥酸钠对人肺腺癌A549细胞的抑制作用。方法:采用MTT法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果:斑蝥酸钠和多西紫杉醇均能显著抑制人肺腺癌A549细胞的增殖诱导细胞凋亡(P<0.05),联合使用抑制率及凋亡率均显著高于单药组(P<0.05)。结论:多西紫杉醇和斑蝥酸钠均可明显抑制人肺腺A549细胞,联合使用抑制作用增强。     

紫杉醇Pluronic P105聚合物胶束的制备、表征与逆转肿瘤多药耐药性的体外研究

药物递送系统是克服肿瘤多药耐药性(MDR)的一种新策略。本文以聚合物胶束系统和难溶性药物紫杉醇(PTX)为研究对象，旨在制备一种新型的PTX给药系统，既能增溶难溶性药物，又具有克服肿瘤MDR的能力。以Pluronic P105为载体，采用固体分散-水化法制备PTX聚合物胶束，并以星点设计-效应面优化法进行处方优化。对其粒径、体外释放等性质进行表征后，以人耐药卵巢癌细胞SKOV-3/PTX为细胞模型，体外评价PTX聚合物胶束的细胞摄取及其逆转肿瘤细胞耐药性的作用。结果显示，聚合物胶束制剂的载药量约为1.1%、药物浓度约为700 μg·mL^-1、平均粒径约为24 nm。胶束制剂与普通制剂(Taxol)在6 h内的累积释放分别为45.4%和95.2%，前者具有较强的缓释作用；胶束制剂与Taxol对SKOV-3/PTX的IC₅₀值分别为1.14和5.11 μg·mL^-1，二者的耐药逆转指数(RRI)分别为9.65和2.15。胶束制剂可促进耐药细胞对P-糖蛋白(P-gp)底物(PTX或Rhodamine-123)的摄取。结果表明，Pluronic P105可有效增溶难溶性药物PTX，并形成具有较强缓释作用的纳米级聚合物胶束制剂，该制剂可显著提高PTX对人卵巢癌耐药细胞的细胞毒性，能逆转其耐药性。     

Influence of Surface Chemistry on Cytotoxicity and Cellular Uptake of Nanocapsules in Breast Cancer and Phagocytic Cells

The present work tests the hypothesis that stabilizers have a critical role on nanocarrier stealthiness and anticancer drug efficacy. Two different types of docetaxel (Doc)-loaded nanocapsules (NCs) stabilized with polysorbate 80 (NC_T80) and polyvinyl alcohol (NC_PVA) were synthesized using the emulsion solvent diffusion method. These NCs were characterized for particle mean diameter (PMD), drug content, morphology, surface composition, and degree of crystallinity. Furthermore, the cytotoxicity and cellular uptake of the NCs were investigated in MDA-MB 231 cells, THP-1 monocytes, and THP-1-derived macrophages. The optimized spherical NC_T80 had 123.02 ± 14.6 nm, 0.27 ± 0.1, and 101 ± 37.0% for PMD, polydispersity index, and drug encapsulation efficiency, respectively. Doc release kinetics from NC_T80 and NC_PVA mostly provided better fit to zero-order and Higuchi models, respectively. Powder X-ray diffraction (PXRD) and X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) results revealed the presence of amorphous stabilizers on the surface of the NCs. At high drug concentration, the cytotoxicity of NC_T80 was substantially improved (1.3–1.6-fold) compared with that of NC_PVA in MDA-MB 231 cells. The uptake of both NCs was inhibited by latrunculin A and dynasore, indicating an actin- and dynamin-dependent endocytosis in MDA-MB 231 cells. This occurred via a multifaceted mechanism involving clathrin, caveolin, cytoskeleton, and macropinocytosis. Interestingly, the uptake of NC_PVA was 2.7-fold greater than that of NC_T80 and occurred through phagocytosis in monocytes and macrophages. This study demonstrates the potential impact of the surface chemistry on the cytotoxicity and phagocytic clearance of nanocarriers for a subsequent improvement of the efficacy of Doc intended for breast cancer chemotherapy.

Electronic supplementary material

The online version of this article (doi:10.1208/s12248-014-9572-0) contains supplementary material, which is available to authorized users.KEY WORDS: cancer chemotherapy, cytotoxicity, nanocapsules, phagocytosis, surface chemistry     

Fundamental Relationships Between the Composition of Pluronic Block Copolymers and Their Hypersensitization Effect in MDR Cancer Cells

Purpose. Previous studies have demonstrated that Pluronic block copolymers hypersensitize multiple drug resistant (MDR) cancer cells, drastically increasing the cytotoxic effects of anthracyclines and other anticancer cytotoxics in these cells. This work evaluates the dose dependent effects of these polymers on (i) doxorubicin (Dox) cytotoxicity and (ii) cellular accumulation of P-glycoprotein probe, rhodamine 123 (R123) in MDR cancer cells. Methods. Dox cytotoxicity and R123 accumulation studies are performed on monolayers of drug-sensitive (KB, MCF-7, Aux-Bl) and MDR (KBv, MCF-7/ADR, CH^rC5) cells. Results. Both tests reveal strong effects of Pluronic copolymers observed at concentrations below the critical micelle concentration (CMC) and suggest that these effects are due to the copolymer single chains ('unimers'). Using block copolymers with various lengths of hydrophobic propylene oxide (PO) and hydrophilic ethylene oxide (EO) segments these studies suggest that the potency of Pluronic unimers in MDR cells increases with elevation of the hydrophobicity of their molecule. Optimization of Pluronic composition in R123 accumulation and Dox cytotoxicity studies reveals that Pluronic copolymers with intermediate lengths of PO chains and relatively short EO segments have the highest net efficacy in MDR cells. Conclusions. The relationship between the structure of Pluronic block copolymers and their biological response modifying effects in MDR cells is useful for determining formulations with maximal efficacy with respect to MDR tumors.