HPLC-MS/MS法测定比格犬血浆中PA-824的浓度及其药动学研究

摘 要 目的：建立高效液相色谱 质谱连用（HPLC MS/MS）测定比格犬血浆中PA 824的浓度,以及进行PA 824在比格犬体内的药动学研究。方法: 以卡马西平为内标,生物样品预处理采用乙酸乙酯萃取。色谱柱为Eclipse Plus C18柱（100 mm×2.1 mm,3.5 μm）,流动相为甲醇 水（90∶10）,流速为0.6 ml·min^-1,柱温为30℃,进样量为5 μl,样品分析时间为5 min;电喷雾电离源（ESI）,正离子多反应监测扫描分析,PA 824离子对为m/z360.1→m/z 175.0（碰撞能量：35,解簇电压：65）,卡马西平离子对为m/z 237.2→m/z 194.0（碰撞能量：28,解簇电压：83）。比格犬口服给药之后,在不同的时间点取血测定血浆中PA 824的含量,然后再用DAS 2.0软件进行药代动力学参数的计算。结果: 比格犬口服给药之后,PA 824在50～10 000 ng·mL^-1 （r=0.999 1）范围内呈线性关系,回收率为97.7%～105.1%,日内、日间精密度RSD均<5.0%。PA 824 3个不同给药量（100,200,500 mg）的AUC0 t分别为（5 735.18±1 918.76）,（11 548.47±1 838.04）,（21 987.88±4 587.58）ng·min·ml^-1,t^1/2分别为（14.17±5.97）,（11.11±4.39）,（13.13±5.46）h,Cmax分别为（626.66±188.48）,（2 399.13±516.51）,（4 861.33±2 253.61）ng·ml^-1。结论:该方法简单、准确、快速、重复性好,适用于比格犬血浆PA 824的药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中帕罗西汀及其药动学

帕罗西汀（Paroxetine）属强力、高度选择性的5-羟色胺（5-HT）再摄取抑制剂。其抗抑郁作用和治疗强迫性神经症、惊恐障碍及社交焦虑症的疗效被认为与其所具有的特异性抵制脑神经的5-HT再摄取有关。     

人血浆中氟康唑的LC-MS/MS法测定及药动学

建立了LC-MS/MS法测定人血浆中的氟康唑(1).采用C18色谱柱,以甲磺酸酚妥拉明(2)为内标,2 mmol/L乙酸铵溶液(含0.05%甲酸)-甲醇(40:60)为流动相,电喷雾离子化源,选择性正离子多反应监测,检测离子分别为m/z 307.2→238.2(1)和m/z 282.2→212.2(2).1在0.03～10 μg/ml浓度范围内线性关系良好,方法回收率大于94%,提取回收率大于90%,日内和日间RSD均小于5.4%.20名男性健康志愿者单剂量口服1片150 mg,主要药动学参数为Cmax(3.26±0.54)μg/ml,tmax(1.42±0.65)h,t1/2(29.75±4.89)h,AUC0→120 h(131.4±23.4) μg·ml-1·h和AUC0→∞(140.5±26.3) μg·ml-1·h.     

LC-MS/MS法测定可待因在Beagle犬血浆中的质量浓度

目的建立Beagle犬血浆中可待因质量浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法。方法色谱柱为Agela·C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水-甲酸(体积比为15∶85∶0.5),血浆样品经甲醇沉淀蛋白处理,以多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描方式检测,测定Beagle犬经口给予洛芬待因缓释片后血浆中可待因的质量浓度。结果血浆中可待因质量浓度在0.2²0μg·L-1内线性关系良好,日内和日间精密度RSD≤11.5%,平均提取回收率为104.1%20μg·L-1内线性关系良好,日内和日间精密度RSD≤11.5%,平均提取回收率为104.1%¹09.2%,基质效应为119.2%109.2%,基质效应为119.2%¹28.3%。可待因在Beagle犬血浆中主要药动学参数t1/2为(2.9±0.5)h,ρmax为(8.7±3.4)μg·L-1,AUC0-∞为(28.5±7.3)μg·h·L-1。结论该方法适用于可待因在Beagle犬体内药动学的研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中的金刚烷胺浓度及其药动学

目的建立HPLC-MS/MS分析方法测定人血浆中的金刚烷胺浓度,并用于研究健康受试者口服氨酚咖黄烷胺片后金刚烷胺的药动学。方法血浆经乙醚-二氯甲烷(4∶1,V/V)提取,采用C18柱为分析柱,甲醇-10 mmol.L-1醋酸铵溶液-冰醋酸(60∶40∶0.08,V/V/V)为流动相,流速1.0 mL.min-1,柱后分流,0.2 mL.min-1进入质谱,柱温35℃。质谱检测方式:多反应离子监测,选择监测的离子为m/z152→m/z135(金刚烷胺)和m/z275→m/z230(内标物,氯苯那敏)。结果金刚烷胺的线性范围为1~200μg.L-1(r=0.9999),血浆中金刚烷胺的最低定量限达1μg.L-1(RS,N>10),回收率>80%。结论本法简便、准确、灵敏度高,适用于金刚烷胺的药动学研究。     

芬太尼口颊片在比格犬体内的药动学研究

目的:建立比格犬体内枸橼酸芬太尼血药浓度的测定方法,并进行芬太尼口颊片的药动学研究。方法:取6只比格犬给予芬太尼口颊片1片(675μg/片,含服),分别于给药后2、5、10、15、30、45、60、90、120、240、360、480、720 min取静脉血1 mL,经甲醇沉淀后,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法[色谱条件:色谱柱为Agilent C_18,流动相为甲醇-0.02%甲酸水溶液(95:5,v/v),流速为0.5 mL/min,进样量为5μL,柱温为30℃;质谱条件:采用电喷雾电离源,正离子多反应监测,检测离子为枸橼酸芬太尼质荷比(m/z)337.1→1 88.0、卡马西平(内标)m/z 237.1→194.1],测定枸橼酸芬太尼的血药浓度,并采用DAS 2.0软件计算药动学参数。结果:枸橼酸芬太尼检测质量浓度的线性范围为1.0～325.0 ng/mL(r=0.998),精密度试验的日内RSD<5%(n=6),日间RSD<6%(n=3);平均回收率为(94.65±6.32)%～(99.21±3.24)%(n=6);基质效应的RSD<15%(n=6),稳定性试验的RE在±6.2%内(n=3)。芬太尼口颊片在比格犬体内的药动学参数tmax为(32.5±6.1)min,t_(1/2)为(211.8±47.4)min,c_(max)为(40.3±1.9)ng/mL,CLz/F为(0.006±0.001)L/(min·kg),AUC_(0-720)min为(7 564.0±1 576.7)ng·min/mL(n=6)。结论:本方法简便、可行、准确。芬太尼口颊片在比格犬体内具有良好的速释、缓释双相释药特性。     

LC-MS/MS法测定坦索罗辛在比格犬血浆中的浓度及其缓释制剂的药动学研究

目的:建立坦索罗辛血药浓度LC-MS/MS测定方法,并研究坦索罗辛缓释制剂在比格犬体内的药代动力学。方法:6只比格犬空腹单次口服给予含有0.4 mg的盐酸坦索罗辛缓释胶囊,给药前(0 h)、给药后不同时间点各采血0.3 mL,分离血浆后,加入内标愈创木酚甘油醚,经乙酸乙酯萃取,以甲醇:水:甲酸(80∶20∶0.2,V/V/V)为流动相,在反相C18色谱柱进行分离。采用电喷雾离子源(ESI源)的正离子方式检测,扫描方式为选择反应监测(SRM),用于定量分析的离子反应为m/z409.0→m/z228.0(坦索罗辛)和m/z199.0→m/z125.0(内标,愈创木酚甘油醚)。结果:坦索罗辛在线性范围内0.05～10.0 ng/mL线性良好,定量下限为0.05 ng/mL,批内、批间精密度(RSD)均小于13.4%。盐酸坦索罗辛缓释制剂0.4 mg口服给药后AUC0-24 h为(7.82±1.92)ng.h.mL-1、AUC0-∞为(8.04±2.02)ng.h.mL-1t、1/2为(2.96±2.13)h。结论:LC-MS/MS法灵敏度高、分析快速,适用于比格犬血浆中坦索罗辛的药动学研究,坦索罗辛缓释胶囊口服给药后半衰期短,消除快。     

LC-MS/MS法测定人血浆盐酸依伐布雷定浓度及药动学研究

目的:建立LC-MS/MS法测定人血浆中盐酸依伐布雷定浓度,并用于药动学研究.方法:血浆经乙醚萃取处理,盐酸多奈哌齐为内标,采用氰基柱,以甲醇:0.3%甲酸水溶液(40:60)为流动相,流速0.3 ml·min-1,以ESI源正离子,多反应检测方式监测,选择离子反应为m/z469.0→177.0(盐酸依伐布雷定),m/z380.5→243.3 (内标).结果:盐酸依伐布雷定在0.05～100 ng·ml-1浓度范围内线性关系良好,低、中、高三种浓度平均提取回收率分别为70.87%、76.88%、78.31%,日内、日间相对标准差均小于15%.结论:该法可以用于盐酸依伐布雷定的药动学研究.     

LC-MS/MS法测定人血浆中三氟柳浓度及药动学

目的:建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定三氟柳血药浓度的方法,并用于研究三氟柳胶囊在健康人体内的药动学特征。研究口服三氟柳胶囊低、中、高3个剂量给药后,三氟柳在健康人体内的药动学特征。方法:将36例健康受试者平行随机分为低、中、高3组,分别低剂量组单次口服三氟柳胶囊300 mg(1粒);中剂量组单次口服600 mg(2粒),高剂量组单次口服900 mg(3粒)。给药后用LC-MS/MS测定人体的三氟柳血药浓度,并评价三氟柳在人体的药动学特征。结果:特异性结果显示,内源性物质不干扰样本的测定,定量下限、精密度、回收率、基质效应及稳定性均符合生物样本分析要求。口服给药三氟柳胶囊后,低、中、高剂量组的主要的药动学参数测定结果如下:tmax分别为0.55,0.61,0.67 h;Cmax分别为3.31,10.85,13.22μg·m L-1;AUC0-10分别为3.92,13.18,19.51 mg·h·L-1。结论:本研究建立的LC-MS/MS方法测定准确、专属性强、灵敏度高,适用于三氟柳胶囊药动学的研究。     

人全血中阿莫地喹的LC-MS/MS法测定及其药动学

建立了液相色谱-串联质谱法测定健康志愿者全血中的阿莫地喹(1),并考察其在健康志愿者体内的药动学。以羟化氯喹为内标,使用Agilent Zorbax SB C18柱,乙腈∶20 mmol/L乙酸铵溶液(23∶77)为流动相;采用大气压力化学电离源(APCI),多反应监测(MRM)模式,正离子检测,监测离子对为m/z 356.3→m/z 283.2(1)和m/z 336.0→m/z247.1(内标)。1在0.5~100 ng/ml浓度范围内线性关系良好,日内和日间RSD均小于10.0%,提取回收率大于70.4%。18名男性健康志愿者口服青蒿琥酯1盐酸盐片,主要药动学参数为cmax(25.9±4.7)ng/ml,tmax(1.1±0.3)h,t1/2(13.9±3.9)h,AUC0→t(294.5±42.8)ng·h·ml-1,AUC0→∞(310.3±45.0)ng·h·ml-1。     

LC-MS／MS法测定右溴苯那敏的血药浓度及其药动学特征评价

目的建立液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定人血浆中右溴苯那敏的浓度,并评价右溴苯那敏在健康受试者体内的药动学特征。方法血浆经参有氯苯那敏为内标的甲醇沉淀后在Inertsil ODS-3柱（150mm×2．1mm,5μm）上分离,流动相采用含10mmol·L^-1甲酸铵的甲醇／sic／甲酸（60：40：0．1,V／V／V）溶液。串联质谱sciex API 3000采用正电喷雾离子源和多反应监测的扫描模式。结果右溴苯那敏在0．1—40μg·L^-1内线性良好,定量下限为0．1μg·L^-1。方法的准确度为87％～113％,批内、批间的RSD均〈15％。右溴苯那敏的主要药动学参数ρmax、tmax、t1/2、AUC0→t。和AUC0→∞在单剂量给药后分别为：（3．58±1．14）μg·L^-1、（9．42±2．94）h、（18．46±9．48）h、（108．4±53．97）μg·L^-1和（126．3±73．91）μg·L^-1;在多剂量给药后分别为：（14．59±6．75）μg·L^-1,（6．35±2．09）h、（21．40±7．74）h、（487．9±316．2）μg·L^-1和（578．0±437．3）μg·L^-1。稳态时的药动学参数AUC^88、ρmax、tmax和DF分别为：（153．0±74．47）μg·L^-1、（12．07±5．84）μg·L^-1、（12．75±6．21）μg·L^-1和（21．2±7．7）％。结论本方法专属性强,精确,灵敏度高,操作简单,快速。结果表明单剂量和多剂量给药后ρmax、tmax和AUC^88之间的差异有统计学意义,右溴苯那敏在体内有蓄积。     

液相色谱-串联质谱法测定犬血浆中布地奈德

建立液相色谱-串联质谱法测定犬血浆中布地奈德。血浆样品碱化后，经乙酸乙酯液-液萃取，以乙腈-5 mmol·L^-1醋酸铵(60∶40，v/v)为流动相，Capcell Pak C₁₈ MG柱分离；采用电喷雾电离源，以多反应监测(MRM)方式进行负离子检测，用于定量分析的离子反应分别为m/z 489→m/z 357(布地奈德)和m/z 493→m/z 413(内标，曲安奈德)。测定血浆中布地奈德方法的线性范围为25.0～2 000 pg·mL^-1，定量下限为25.0 pg·mL^-1，日内、日间精密度(RSD)均小于15%，准确度(RE)在-8.1%～-1.7%。应用本法研究6只比格犬单次和多次给予布地奈德缓释胶囊9 mg后的药代动力学结果显示：单次给药后T_max为(3.5±3.3) h，C_max为(786±498) pg·mL^-1；多次给药后C_max为(2 142±1 515) pg·mL^-1。该法选择性强、灵敏度高、操作简便，适用于布地奈德缓释制剂的药代动力学研究。     

LC/MS法测定犬血浆中的水飞蓟宾浓度

目的建立犬血浆中水飞蓟宾浓度的LC-MS测定方法。方法取犬血浆400μl,加200μl磷酸氢二钠(0.1mol.L-1)和50μl内标萘酚(10mg·mL-1),3ml乙醚萃取后取上清液挥干,100μl甲醇复溶,离心并取10μl进行LC-MS测定。色谱条件:色谱柱为ODS-C18柱(2.1mm×150mm,5μm,Phenomenex,USA),流动相为甲醇:2%乙酸水=55∶45,流速为0.2ml.min-1;质谱条件:电喷雾离子化(ESI)方式,以选择性负离子方式检测,水飞蓟宾和内标萘酚的选择检测离子质荷比分别为m/z481.00([M-H]-)和m/z142.92([M-H]-)。结果水飞蓟宾的线性范围为25～8000μg.L-1,定量下限(LOQ)为25μg.L-1。准确度、精密度及回收率均符合有关要求。结论本方法专属性强,检测限低,灵敏度高,线性关系良好,方法简便快捷、经济,适用于水飞蓟宾药代及毒代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中右旋酮洛芬的浓度

目的:建立LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中右旋酮洛芬的浓度。方法:血浆样品采用乙腈沉淀法处理,取上清液进样。以乙腈(每500 mL中加入甲酸10μL)-水(80∶20,v/v)为流动相;用Zorbax Eclipse SB-C18柱(5μm,150 mm×4.6 mm)色谱柱分离;以布洛芬为内标。流速0.5 mL·min-1;进样量25μL;柱温为室温。质谱检测采用ESI正离子模式,扫描方式为多反应监测,扫描离子对m/z右旋酮洛芬253.0/209.0,布洛芬204.8/160.8。结果:右旋酮洛芬的线性范围为1.0～1000 ng·mL-1,线性关系良好(r=0.9979),最低定量下限为1.0 ng·mL-1,绝对回收率在100.0%～104.3%之间,变异系数均小于6%。结论:该方法预处理快速简单,灵敏度高,所建立的LC-MS/MS法准确、可靠,可用于犬血浆中右旋酮洛芬的浓度测定及药代动力学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中forsklin的浓度及其药代动力学（英文）

目的建立了测定大鼠血浆中forsklin的液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）。方法血浆样品经叔丁基甲醚萃取后,以水（0.1%甲酸）-乙腈为流动相梯度洗脱,BetaBasic-C18柱分离。通过电喷雾离子化四极杆串联质谱,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 411→375.3（forsklin）和285→193（地西泮）。结果在本实验条件下,forsklin血浆浓度测定方法的线性范围为0.5~1000 ng/ml,定量下限为0.5 ng/ml。日内、日间精密度（相对标准差RSD）均小于14.4%;准确度（相对误差RE）在-3.5%和3.8%之间。方法的专属性,绝对回收率,稳定性和基质效应均符合要求。结论该法快速、灵敏、准确,可用于forsklin的药代动力学研究。     

用LC-MS/MS法测定大鼠血浆中大蒜皂苷PIEB的浓度及其体内药动学研究

目的 采用高效液相色谱-质谱（LC-MS/MS）法测定大鼠血浆中大蒜皂苷提取物中大蒜皂苷Proto-iso-eruboside-B（PIEB）的浓度,并研究其药动学特点。方法 采用Athena C₁₈-WP色谱柱（50 mm×2.1 mm,3 μm）,流动相为乙腈-水（含0.05%甲酸）体系,梯度洗脱,流速0.3 ml/min。大鼠分别给予低、中、高剂量大蒜皂苷总提取物灌胃及静脉注射单一剂量大蒜皂苷总提取物,给药后在不同的时间点眼眶取血,采用LC-MS/MS法测定血药浓度;采用InnaPhase Kinetica2000^TM软件计算相关药动学参数。结果 大蒜皂苷提取物中的PIEB成分在10~2 430 ng/ml范围内具有良好的线性关系（r=0.999 1）;方法学考察均符合要求;大鼠静脉给药大蒜皂苷总提取物（50 mg/kg）后,PIEB即刻在体内达到最大血药浓度,其t_1/2为322 min左右,平均驻留时间（MRT）为270 min;口服灌胃低、中、高浓度大蒜皂苷总提取物后,PIEB的AUC、c_max等随给药剂量的增加而增大,大蒜皂苷提取物中的PIEB成分在大鼠体内的药动学过程符合线性药动学特征。结论 本方法操作简便、结果准确、重复性好,适用于测定大鼠血浆中大蒜皂苷PIEB的浓度。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中伪麻黄碱及其药动学研究

目的建立人血浆中伪麻黄碱含量的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）测定法,并对其进行人体药动学研究。方法血样用甲醇沉淀、离心后进行质谱分析,色谱柱：Agilent ZORBAX SB C18（100 mm×3.5 mm,3.0μm）;流动相：甲醇-水（含10 mmol.L-1乙酸铵,0.05%甲酸）=28∶72（v/v）;质谱条件：气动辅助电喷雾离子化（ESI）,正离子检测,选择性多反应检测（SRM）：伪麻黄碱,166.1〉148.1;内标：帕罗西汀,330.1〉192.1。测定20名健康受试者口服受试制剂（单剂量、多剂量）后血浆中伪麻黄碱浓度。结果线性范围1-600μg.L-1,最低定量限（LLOQ）为1.0μg.L-1,绝对回收率为85.8%-87.6%。单剂量口服伪麻黄碱（120、240 mg）后药动学参数：t1/2为（6.8±0.9）、（6.6±1.3）h,tmax为（6.1±1.6）、（7.4±3.8）h,Cmax为（210.44±41.59）、（465.26±87.65）μg.L-1,V为（398.12±91.05）、（353.52±102.34）L,CL为（42.57±9.02）、（39.69±8.87）L.h-1,AUC0-48为（3 256.12±711.26）、（6 954.52±1 955.27）μg.h.L-1,MRT0-48为（11.71±0.89）、（11.87±1.26）h;伪麻黄碱多剂量（120 mg,bid）药动学参数：Cmax为（398.08±102.56）μg.L^-1,V为（309.66±82.37）L,CL为（37.51±7.23）L.h^-1,AUC0-48为（5 463.24±2 256.39）μg.h.L^-1,Cav为（282.11±92.19）μg.L-1,DF为（0.61±0.15）,AUCss为（3 372.85±1 328.78）μg.h.L^-1。结论本方法结果准确、灵敏,伪麻黄碱主要药动学参数与国内外文献报道基本一致。     

LC-MS/MS法测定比格犬血浆中匹莫范色林浓度及药代动力学研究

目的建立一种高效、灵敏的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定匹莫范色林在比格犬血浆中的浓度并应用于药代动力学研究。方法血浆样品用甲基叔丁基醚(MTBE)液液萃取预处理,使用Agilent Eclipse XDB-C 18(4.6 mm×150 mm,3.5μm)色谱柱进行分离,流动相为乙腈(含0.1%甲酸)-水(含5%乙腈,0.1%甲酸)梯度洗脱,流速为1.2 mL·min-1,分流比为1∶1,质谱检测用电喷雾离子(ESI)源,正离子模式下采用多反应监测(MRM)模式,分析时间为4.5 min。使用WinNonlin 6.1软件的NCA模块计算药动学参数。结果匹莫范色林在0.05~20 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好,定量下限为0.05 ng·mL-1,批内和批间精密度良好CV均小于7.1%(LLOQ均小于18.4%),准确度RE均在-6.6%~12.7%之内(LLOQ均在3.8%~19.9%)。结论本方法高效、灵敏、准确,成功用于比格犬血浆中匹莫范色林浓度的测定及其药代动力学研究。     

用LC—MS／MS法测定人血浆中的氢氯噻嗪及其药动学研究

目的:建立人血浆中氢氯噻嗪浓度测定的 LC-MS/MS 法,进行人体药动学研究。方法:测定20名健康受试者口服受试制剂(单剂量、多剂量)后血浆中氢氯噻嗪浓度。结果:单剂量口服氢氯噻嗪(12.5,25 mg)后药动学参数:T_(1/2β)为(13.57±2.39)、(10.93±1.71)h;T_(max)为(1.85±0.53)、(2.20±0.59)h;C_(max)为(74.14±15.04)、(125.57±23.47)μg·L~(-1);AUC_(0-48)为(470.0±90.7)、(794.7±182.6)μg·h·L~(-1);氢氯噻嗪多剂量(12.5 mg,qd)药动学参数:T_(max)~(ss)为(1.83±0.25)h,C_(max)~(ss)为(80.2l±17.98)μg·L~(-1),C_(min)~(ss)为(3.72±1.79)μg·L~(-1),C_(av)为(19.37±3.20)μg·L~(-1),AUC_(0-48)~(ss)为(464.90±76.89)μg·h·L~(-1)。结论:本方法灵敏度高,结果准确,氢氯噻嗪在大部分人体内的过程符合二室开放模型,其主要药动学参数与国内外文献相近。