邻苯二甲酸二丁酯对原代培养海马神经元的毒性及机制

目的 本研究探讨邻苯二甲酸二丁酯（DBP）暴露对原代培养海马神经元的神经毒性及可能机制。方法 海马神经元原代培养4 d后将海马神经元暴露在含有终浓度为0.0（对照）、1 g/LDBP的培养基中，选取染毒24、48、96 h 3个时相点，免疫荧光及透射电子显微镜下观察DBP染毒后海马神经元轴突及超微结构的形态变化；膜片钳测定海马神经元的动作电位；cck-8检测DBP染毒后海马神经元活性。Western blot测定脑源性神经营养因子（BDNF）、神经肽Y（NPY）、雌激素受体β（ERβ）核酸及蛋白的表达情况。高效液相色谱串联质谱检测神经递质GABA的释放。结果 DBP染毒96 h后神经元网络稀疏、轴突长度变短（P<0.01），电镜下细胞核呈圆形，染色质聚集，细胞质空泡化；膜片钳测定发现DBP染毒96 h后细胞出现去极化漂移、放电频率增加（P<0.01）；cck-8检测发现DBP染毒24、48、96 h的细胞活性均低于同时间点正常对照组（P<0.01）。DBP染毒48、96 h的ERβ、BDNF、NPY蛋白表达显著低于对照组（P<0.05）。DBP染毒96 h后神经递质GABA的释放显著低于对照组（P<0.05）。结论 DBP染毒后可导致海马神经细胞形态受损，并导致功能改变，这可能与神经递质GABA参与的ERβ-BDNF-NPY信号通道受阻相关。     

母源毒死蜱暴露对子代小鼠海马 COX2、 CREB 和 BDNF mRNA 及蛋白表达的影响

目的： 研究母源毒死蜱（chlorpyrifos，CPF）暴露对子代小鼠环氧化酶 -2（cyclooxygenase-2，CO 腺苷效应元件结合蛋白（cyclic adenosine monophosphate response element-binding protein，CREB）和脑源性神经营 养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）mRNA 及蛋白表达的影响。 将母鼠随机分成对照组（control）、 方法： 溶剂组（cpf ）和给药组，给药组根据给药剂量不同又分为三个亚组，即 cpf 0.3 组、cpf 0.6 组和 cpf 1.2 组。母鼠染毒交配 产仔后，应用高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）方法检测母代和子代小鼠血浆中 CPF 浓度，荧光定量 PCR 方法和 Western blot 方法检测子代小鼠海马 COX2、CREB 和 BDNF mRNA 及蛋白的表达量。 结果： 与对照组和溶剂组相比，母鼠进行 CPF 染毒后，母代和子代小鼠血浆中均能检测到 CPF，并且给药组间存在 剂量关系（P<0.01）；子代小鼠海马 COX2 mRNA 与蛋白的表达量升高，CREB 与 BDNF mRNA 及蛋白的表达量降 低（P<0.01， P<0.05） 。 CPF可由母代小鼠进入子代体内，通过影响COX2-CREB-BDNF通路产生神经毒性作用。     

孕晚期七氟烷暴露对子代大鼠脑组织单胺类

目的 探讨孕晚期七氟烷暴露对子代大鼠脑组织单胺类神经递质含量的影响.方法 18只SD孕大鼠,随机分为3组,对照组、低浓度暴露组和高浓度暴露组,每组6只.孕14 d行麻醉干预,低浓度和高浓度暴露组孕鼠于麻醉箱内分别吸入混有2.5％和4.5％七氟烷的空气2h,对照组吸入空气2h.测定5周龄子鼠体重、脑重,计算脑脏器系数;水迷宫测试5周龄子鼠学习记忆能力;高效液相色谱-荧光检测法测定5周龄子鼠大脑皮质和海马去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、多巴胺(dopamine,DA)和五羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)含量.结果 高浓度暴露组子鼠脑脏器系数(1.51±0.08)显著低于对照组(1.63 ±0.12),P＜0.05;定向航行实验训练第1天,各组子鼠游泳速度无明显差异(P＞0.05);从训练第2天起,随暴露浓度增加,子鼠逃避潜伏期逐渐延长(P＜0.05);空间探索实验中,子鼠在目标象限停留时间随暴露浓度增加逐渐缩短(P＜0.05);子鼠大脑皮层NE和5-HT含量随染毒剂量增加逐渐下降(P＜0.05);高浓度暴露组子鼠大脑皮层DA含量也显著低于对照组和低浓度暴露组(P＜0.05);子鼠海马NE和DA含量随染毒剂量增加逐渐下降(P＜0.05);高浓度暴露组子鼠海马5-HT含量也显著低于对照组(P＜0.05).结论 孕晚期七氟烷暴露可导致子代生后成年早期学习记忆能力下降;对脑形态和不同脑区单胺类神经递质含量的影响可能参与其导致的神经发育毒性过程.     

孕期及哺乳期苯并[a]芘暴露与子代胰腺受损及mtDNA拷贝数的关系

目的 了解孕期苯并[a]芘(BaP)暴露对母鼠及子代血糖的影响,并围绕线粒体损伤探讨其作用机制。方法 将24只Wistar孕鼠,随机分为对照组, BaP低、中、高剂量组,每组 6 只。对母鼠采用灌胃方式连续染毒6周,剂量从低到高依次为 2、200、800μg/kg。母鼠在孕第1天、第10天,哺乳期第10天、第21天禁食12h,子鼠哺乳结束时禁食12h,采用尾尖断尾采血法测母鼠及子鼠空腹血糖。实验第 6 周(哺乳期结束),腹腔麻醉后摘取各组母鼠及子鼠的胰腺、肝脏组织称重。采用大鼠胰岛素(INS) 酶联免疫吸附测定试剂盒检测母鼠及子鼠血清胰岛素水平。母鼠及子鼠胰腺组织苏木精-伊红(HE)染色,镜下拍片观察胰腺组织形态学变化。提取胰腺组织DNA,利用绝对实时荧光定量 PCR法检测mtDNA拷贝数。结果 BaP染毒组母鼠胰腺脏器系数均高于对照组,其中低剂量组母鼠胰腺脏器系数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量组子鼠胰腺脏器系数均高于中、低剂量组及对照组(P<0.05)。中、高剂量组母鼠哺乳期第10、21天空腹血糖值显著高于孕第1天空腹血糖值(P<0.05)。子鼠空腹胰岛素水平中、高剂量组分别与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。随着BaP染毒剂量的增加,子鼠胰岛边界模糊,胰岛内β细胞排列稀疏,细胞明显减少,可见凋亡细胞,部分胰岛细胞内脂质沉积。子鼠对照组平均mtDNA拷贝数是高剂量组的5.96倍。结论 孕期、哺乳期BaP暴露可造成子代大鼠糖代谢指标及胰腺组织病理改变。随着染毒剂量的增加子鼠胰腺组织线粒体DNA拷贝数降低。     

GPR30激动剂对Aβ1-42所致认知功能障碍的 治疗作用及其机制研究

目的 探讨G蛋白耦联受体30（G protein coupled receptor 30,GPR30）激动剂对β淀粉样蛋白（amyloid β-protein,Aβ）1-42所致小鼠认知功能障碍的治疗作用。方法 将72只ICR小鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组、G1低剂量组、G1中剂量组和G1高剂量组。采用双侧海马脑立体定位注射Aβ1-42建立阿尔茨海默病认知功能障碍模型,48h后给予GPR30激动剂G1（1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg）。进行Morris水迷宫实验、避暗实验和新物体识别实验测试小鼠的认知能力,采用蛋白质印迹法检测小鼠海马组织中Bcl-2、Bax、caspase-3、脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）、cAMP效应元件结合蛋白（cAMP response element binding protein,CREB）、p-CREB的表达水平。结果 Morris水迷宫实验中,G1高剂量组小鼠的目标象限停留时间百分比和穿越平台次数显著高于模型组（P<0.05）;避暗实验中,G1中、高剂量组小鼠的错误次数均显著少于模型组（P<0.05）,避暗潜伏期均显著长于模型组（P<0.05）;新物体识别实验中,G1中、高剂量组小鼠的识别指数均显著高于模型组（P<0.05）。G1高剂量组小鼠海马组织中的p-CREB/CREB、mBDNF/proBDNF、Bcl-2/Bax的比例显著高于模型组（P<0.05）,活化的caspase-3/pro-caspase-3的比例显著低于模型组（P<0.05）。结论 GPR30激动剂可通过激活CREB/BDNF通路对Aβ1-42诱导的小鼠认知障碍和神经元凋亡产生保护作用。     

辛基酚对雌性大鼠生殖能力的影响

目的:研究环境雌激素辛基酚(octylphenol,OP)对雌性大鼠生殖能力的影响。方法:将50只初成年雌性大鼠随机分为5组,其中设阴性对照和己烯雌酚(30μg/kg)阳性对照各1组。隔日染毒60d后与未染毒的雄性成年大鼠交配,研究OP对母鼠的受孕、分娩及子代发育的影响。结果:随着染毒剂量的升高,每窝平均产仔量下降。低剂量组子鼠平均出生体重与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),中、高剂量组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05和P<0.01)。断乳后,各剂量组母鼠的体重和卵巢、子宫、肝脏、肾脏、脑体系数差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在本实验剂量下,随着母鼠交配前OP接触剂量的升高,子鼠的出生体重有降低的趋势。     

柴桂温胆定志汤对抑郁模型大鼠海马BDNF和TrκB的影响

目的观察柴桂温胆定志汤对抑郁模型大鼠海马脑源性神经营养因子（BDNF）和特异性受体酪氨酸激酶B（TrκB）的影响。方法将42只SD大鼠随机分为6组,采用长期轻度不可预见性应激加孤养复制大鼠抑郁症模型,运用免疫组织化学法测定大鼠海马BDNF及其TrκB的表达。结果模型组大鼠海马BDNF和TrκB的表达明显低于空白对照组（P〈0.01）;氟西汀组、柴桂温胆定志汤高剂量组大鼠海马BDNF和TrκB的表达皆明显高于模型组（P〈0.01）;柴桂温胆定志汤中剂量组大鼠海马BDNF和TrκB的表达高于模型组（P〈0.05）。结论柴桂温胆定志汤能提高抑郁模型大鼠海马BDNF及其受体TrκB的表达,从而保护海马神经元,可能是其抗抑郁的药理机制之一。     

DeBDE对学习记忆能力及BDNF基因表达的影响

目的研究十溴联苯醚（decabromod iphenylether,DeBDE）暴露对雄性大鼠学习记忆能力及海马组织中BDNF基因表达的影响。方法雄性SD初断乳大鼠经口灌胃给予不同剂量100,300,500 mg/（kg.d）的DeBDE染毒,对照组给予溶剂玉米油。60 d后用Morris水迷宫测试其学习记忆能力,并用定量PCR检测其大脑海马组织中脑源性神经生长因子的表达。结果高、中剂量组大鼠空间学习、记忆能力较对照组明显降低,差异有统计学意义;低剂量组大鼠学习记忆能力与对照组比较,差异无统计学意义;高、中、低剂量组大鼠海马组织中BDNF基因的表达都显著降低,且随染毒剂量增加表达有逐渐下降的趋势。结论 DeBDE可以损害大鼠的学习记忆能力,可能和降低海马BDNF的表达有关。     

孕期壬基酚暴露对大鼠子代生长发育和神经行为的影响

目的：探究孕期壬基酚（NP）暴露对大鼠子代生长发育和神经行为的影响。方法：采用NP对妊娠SD大鼠进行全孕期染毒，设置阴性对照组（玉米油）、NP低剂量组（50 mg/kg）、NP中剂量组（100 mg/kg）、NP高剂量组（200 mg/kg）和阳性对照组（己烯雌酚，Des,30μg/kg）。观察子鼠生长发育情况。用旷场实验检测子鼠自主活动与焦虑行为，强迫游泳实验检测子鼠抑郁情况，Morris水迷宫实验检测子鼠学习记忆能力。结果：与阴性对照组相比，NP中剂量组和阳性对照组子鼠出生后第0天（PND0）体重降低，NP高剂量组和阳性对照组子鼠出生后第23天（PND 23）体重和甲状腺重量降低，NP中剂量组肝脏系数降低，NP中、高剂量组和阳性对照组睾丸重量降低（均P<0.05）。旷场实验中，与阴性对照组相比，NP中、高剂量组和阳性对照组总移动距离显著减小，NP高剂量组、阳性对照组中央区停留时间显著缩短，NP低剂量组、阳性对照组中央区距离占比显著降低，NP中、高剂量组和阳性对照组总移动格数减少（P<0.05）。抑郁样行为检测结果显示，与阴性对照组相比，NP低剂量组在第4天逃避潜伏期显著...     

乳腺癌根治术后采血模式与采血异常现象之间的相关性分析

目的探讨丙戊酸钠对精神分裂大鼠环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）/脑源性神经营养因子（BDNF）/酪氨酸激酶受体B（TrkB）通路及神经元损伤的影响。方法将50只雄性Wistar大鼠按随机数表法分为对照组、模型组、丙戊酸钠低剂量组、丙戊酸钠高剂量组和氯氮平组,每组10只。模型组、丙戊酸钠低剂量组、丙戊酸钠高剂量组和氯氮平组腹腔注射地卓西平（MK-801）制备精神分裂症模型。造模结束后24 h,丙戊酸钠低剂量组和丙戊酸钠高剂量组同时分别灌胃150 mg/kg和300 mg/kg的丙戊酸钠;氯氮平组灌胃20 mg/kg的氯氮平;对照组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续给予14 d。采用Morris水迷宫实验检测大鼠的学习和记忆能力,观察大鼠海马组织病理学情况,检测海马组织细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法检测海马组织中CREB、磷酸化-CREB（p-CREB）、BDNF、TrkB和磷酸化-TrkB（p-TrkB）蛋白表达水平。结果对照组大鼠海马组织细胞多且排列紧密,层次清晰;模型组和丙戊酸钠低剂量组大鼠海马组织排列紊乱,细胞明显肿胀、细胞核固缩、核碎裂;丙戊酸钠高剂量组和氯氮平组大鼠海马组织趋于正常,但见少量核固缩和核碎裂的细胞。与对照组比较,其余各组大鼠目标象限游泳时间、穿越平台次数、海马组织中CREB、p-CREB、BDNF、TrkB和p-TrkB蛋白表达水平降低,海马组织细胞凋亡率增加（P<0.05）;与模型组相比,各丙戊酸钠剂量组和氯氮平组大鼠目标象限游泳时间、穿越平台次数、海马组织中CREB、p-CREB、BDNF、TrkB和p-TrkB蛋白表达水平增加,海马组织细胞凋亡率降低（P<0.05）;且丙戊酸钠高剂量组大鼠目标象限游泳时间、穿越平台次数、海马组织中CREB、p-CREB、BDNF、TrkB和p-TrkB蛋白表达水平高于丙戊酸钠低剂量组,海马组织细胞凋亡率低于丙戊酸钠低剂量组（P<0.05）;但作用没有氯氮平组显著（P<0.05）。结论丙戊酸钠可以缓解精神分裂症大鼠神经元损伤,抑制海马细胞凋亡,其作用机制可能与CREB/BDNF/TrkB通路激活有关。