7-羟乙基白杨素对PC12细胞的抗氧化作用及机制研究

目的 研究7-羟乙基白杨素对PC12细胞的抗氧化作用,并对其保护机制进行探讨。方法 使用CCK-8试剂盒检测PC12细胞的存活率,筛选出7-羟乙基白杨素作用的最佳浓度进行实验。之后将PC12细胞随机分为4组,分别为对照组、缺氧组、白杨素组和7-羟乙基白杨素组。使用微量酶标法测定细胞培养基中LDH活性,DCFH-DA染色观察细胞内ROS含量,同时使用试剂盒对细胞内MDA、SOD和CAT水平进行测定,提取细胞总蛋白通过Western blotting检测评价Nrf2及其下游蛋白表达量。结果 缺氧后PC12细胞存活率显著下降,经7-羟乙基白杨素预处理后可获得改善;白杨素组和7-羟乙基白杨素组上清液中的LDH和细胞内ROS、MDA含量与缺氧组相比显著降低,SOD和CAT含量与缺氧组相比显著升高,同时发现7-羟乙基白杨素在各个方面的保护作用都明显强于白杨素。缺氧条件会使Nrf2、Keap1、HO-1、NQO1蛋白表达增加,7-羟乙基白杨素干预后可以进一步提高它们的蛋白表达。结论 7-羟乙基白杨素具有比白杨素更好的保护效果,它可以通过激活Nrf2/ARE通路减轻PC12细胞由于缺氧造成的损伤。     

圣草次苷激活Nrf2信号通路保护H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤作用研究

目的 建立大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤模型,考察圣草次苷改善心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法 利用无糖无血清培养基结合厌氧（94%N₂、5%CO₂、1%O₂）处理H9c2心肌细胞4h后,更换新鲜完全培养基再放入正常孵箱复氧24h,制备H/R损伤模型。在造模前12h给予圣草次苷（5、10、20μg·mL^-1）,细胞活力及乳酸脱氢酶（LDH）检测实验中选择灯盏乙素（20μg·mL^-1）作为阳性药,对照组及模型组给予等体积DMSO。MTT法测定细胞存活率;试剂盒检测细胞培养上清液中LDH水平;试剂盒检测细胞内丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力;TUNEL染色检测细胞凋亡;DCFH-DA和JC-1探针分别检测细胞内活性氧（ROS）和线粒体膜电位改变;Western blotting检测核蛋白中转录因子（NF）-E2相关因子2（Nrf2）和总蛋白中血红素氧合酶1（HO-1）、γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶（GCL）水平。结果 与对照组比较,H/R损伤诱导的模型组细胞存活率明显下降,凋亡明显增加,LDH水平明显升高,细胞内MDA水平明显升高,SOD、CAT、GSH-Px活力明显降低,ROS释放明显增多,线粒体膜电位明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.01）;与模型组比较,圣草次苷可剂量相关性地改善上述变化,其中10、20μg·mL^-1组均差异显著（P＜0.01）。Western blotting结果显示,与对照组比较,模型组细胞Nrf2核转位以及HO-1、GCL表达水平无显著变化;与模型组比较,圣草次苷10、20μg·mL^-1显著增加Nrf2核转位及HO-1、GCL表达水平（P＜0.01）。结论 圣草次苷能够保护H/R诱导的H9c2心肌细胞损伤,其可能通过激活Nrf2抗氧化信号通路,增加细胞内源性抗氧化能力,抑制氧化应激损伤,保护线粒体功能以阻止细胞凋亡的发生。     

血根碱对脂多糖致H9c2细胞氧化损伤的改善作用

目的 观察血根碱（sanguinarine,SAN）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的H9c2细胞氧化应激的影响,并对其与HO-1/NOX2途径之间的关系进行探讨。方法 不同因素干预H9c2细胞后,采用细胞活性试剂盒检测不同浓度SAN和/或LPS对H9c2细胞生存的影响;酶标仪及荧光显微镜检测SAN对LPS诱导细胞产生活性氧（reactive oxygen species,ROS）的影响; Real time RT-PCR检测SAN对LPS诱导的NOX2、P47PHOX、HO-1、SOD1、SOD2基因表达的影响; MDA检测试剂盒检测MDA的变化。结果 单用SAN对H9c2细胞活性无影响,LPS可显著降低细胞活性,而SAN与LPS共同干预则可呈浓度依赖性地提高细胞活性,降低ROS产生。LPS处理12 h上调H9c2细胞NOX2、p47phox mRNA表达、下调HO-1 mRNA表达; SAN预处理后,细胞内NOX2、p47phox mRNA下调、HO-1 mRNA上调,而SAN与锌原卟啉IX预处理则可逆转这种现象。SAN上调SOD1及SOD2 mRNA表达,降低MDA产生。结论 SAN可通过活化HO-1/NOX2途径,抑制ROS的产生,从而使H9c2细胞免受LPS介导的损伤,提高细胞活力。     

平消胶囊联合左甲状腺素钠治疗结节性甲状腺肿的临床研究

目的 对狭叶薰衣草Lavandula angustifolia中的木脂素类化合物进行研究。方法 运用RP-HPLC、TLC、硅胶、凝胶、MCI-gel树脂等方法进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果 从狭叶薰衣草中分离得到11个木脂素类化合物,分别鉴定为松脂醇（1）、丁香树脂醇（2）、fraxiresinol-4''-O-β-D-glucopyranoside（3）、syringaresinol-4''-O-β-D-glucopyranoside（4）、8-hydroxypinoresinol-4-O-β-D-glucopyranoside（5）、rel-（2α,3β）-7-O-methylcedrusin（6）、落叶松脂醇-4''-O-β-D-葡萄糖苷（7）、（2S,3R）-2,3-dihydro-2-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-3-hydroxymethyl-7-methoxybenzofuran-5-（trans） propen-1-ol-3-O-β-glucoside（8）、（7S,8R）-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol-9-β-D-glucopyranoside（9）、（7R,8R）-7,8-dihydro-9''-hydroxyl-3''-methoxyl-8-hydroxymethyl-7-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-1''-benzofuranpropanol-9''-O-β-D-glucopyranoside（10）、（E）-3-（（2S,3S）-2-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-3-hydroxymethyl-7-methoxy-2,3-dihydrobenzofuran-5-yl） allyl-2-hydroxyacetate（11）。结论 11个化合物均首次从狭叶薰衣草中分离得到。     

萝卜硫素对肾小管上皮细胞氧化应激及Nrf2/HO 1信号通路的影响

摘 要 目的：探讨萝卜硫素（SFN）对肾小管上皮细胞（HK-2）的氧化应激及核转录因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素加氧酶（HO）-1信号通路的影响。方法: 体外培养HK-2细胞,将细胞分为空白对照组、H2O2处理组、H2O2+10 μmol·K^-1 SFN组、H2O2+20 μmol·K^-1 SFN组和H2O2+40 μmol·K^-1 SFN组;测定HK-2细胞中丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、谷胱甘肽（GSH）的含量及超氧化物歧化酶（SOD）的活性;RT-PCR和Western Blot法分别检测Nrf2和HO-1 mRNA及蛋白表达水平。结果: 与空白对照组相比,H2O2处理组中MDA、NO含量明显升高,GSH水平和SOD酶活性显著降低（P<0.05）;经高、中、低3种浓度的萝卜硫素处理后MDA、NO含量显著降低,GSH水平显著升高,SOD酶活性也显著升高,Nrf2和HO 1mRNA及蛋白表达明显上调（P<0.05）。结论:萝卜硫素有抗HK 2细胞氧化应激损伤的作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。     

半枝莲黄酮类化学成分分析

目的 分析半枝莲黄酮类化学成分。方法 采用硅胶、Sephadex LH-20等多种色谱方法,依据波谱数据对其结构进行分析和鉴定。结果 半枝莲中共分离了12个化合物,分别为圣草酚、野黄芩素、三裂鼠尾草素、黄芩苷、芹菜素、汉黄芩素、4''-羟基汉黄芩素、木犀草素、4'',5-二羟基-3'',5'',6,7-四甲氧基黄酮、柚皮素、7-羟基-5,8,2''-三甲氧基黄烷酮、大波斯菊苷。结论 分离得到的化合物类型均为黄酮苷元和苷类化合物,可为半枝莲的黄酮成分分析提供一定的科学依据。     

槟榔醇提物对H9C2心肌细胞的抗缺氧保护作用

目的 研究槟榔无水醇提物对低氧H9C2心肌细胞的作用及其保护机制。方法 建立H9C2心肌细胞低氧模型,CCK-8法检测槟榔无水醇提物对H9C2细胞存活率的影响;通过检测细胞内丙二醛（MDA）含量,过氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）活力,研究槟榔无水醇提物对H9C2细胞的保护作用;RT-PCR法检测细胞内Nrf2、Caspase-3 mRNA水平的表达,从分子水平研究槟榔无水醇提物对低氧H9C2细胞的保护机制。结果 与常氧对照组相比,低氧24 h时细胞存活为28.46%（P<0.01）,细胞内MDA含量升高44.33%（P<0.05）,SOD、GSH活力分别下降16.18%、30.64%（P<0.05或P<0.01）。RT-PCR实验结果表明,Nrf2被激活,其mRNA表达上升1.74倍（P<0.05）。与低氧模型组相比,槟榔无水醇提物处理组H9C2细胞存活率明显升高（P<0.01）,且呈现剂量依赖性,槟榔无水醇提物处理组细胞内SOD、GSH活力分别增加14.90%、28.94%（P<0.05）,Nrf2基因mRNA相对表达下降66%（P<0.05）。结论 槟榔无水醇提物对低氧H9C2细胞有显著的保护作用,其保护机制可能与提高细胞内抗氧化物酶活力,减轻细胞氧化应激损伤,提高细胞耐低氧能力有关。     

基于Keap1/Nrf2/HO-1通路汉黄芩素7-O-β-D-乙基葡萄糖醛酸苷体外抗氧化应激作用研究

目的 探讨汉黄芩素 7-O-β-D-乙基葡萄糖醛酸苷（WODE）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠巨噬细胞（RAW264.7）的抗氧化应激作用及机制。方法 MTS法检测WODE（2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0、160.0 μmol·L^-1）对RAW264.7细胞活力的影响；体外培养RAW264.7细胞，WODE（10、20、40 μmol·L^-1）或地塞米松（1 μmol·L^-1，阳性药）预处理1 h，再给予LPS刺激24 h（造模过程不再加药），对照组不加 LPS 和受试物，模型组只给予 LPS 刺激；荧光探针检测胞内活性氧（ROS）水平；Griess反应测定细胞上清液中 NO 生成量；ELISA 检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）的分泌；实时荧光定量 PCR（qRT-PCR）法检测细胞内诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）、环氧化酶-2（COX-2）、白细胞介素-1β（IL-1β）、醌氧化还原酶1（NQO-1）、超氧化物歧化酶-1（SOD-1）的mRNA表达水平；Western blotting法检测细胞核因子E2相关因子2（Nrf2）和血红素加氧酶-（1 HO-1）蛋白表达水平；免疫荧光染色法检测细胞内Kelch ECH相关蛋白（1 Keap1）表达水平。结果 与对照组比较，WODE浓度小于40 μmol·L^-1时，细胞存活率没有明显变化；浓度大于80 μmol·L^-1时，细胞存活率下降，但未见统计学差异。与模型组比较，WODE 10、20、40 μmol·L^-1组 ROS水平显著降低（P＜0.01）；20、40 μmol·L^-1 组 NO 释放显著降低（P＜0.05、0.01）；40 μmol·L^-1 组 iNOS mRNA 表 达 水 平 显 著 降 低（P＜0.01）；10、20、40 μmol·L^-1 组 COX-2 和20、40 μmol·L^-1组IL-1β mRNA表达水平显著降低（P＜0.05、0.01）；10、20、40 μmol·L^-1组TNF-α和IL-6的释放受到显著抑制（P＜0.01）；10、20、40 μmol·L^-1组NQO-1 mRNA表达水平显著升高（P＜0.01），40 μmol·L^-1组SOD-1 mRNA表达水平显著升高（P＜0.01）；10、20、40 μmol·L^-1组Keap1蛋白表达水平显著降低（P＜0.01）；10、20、40 μmol·L^-1组HO-1蛋白和mRNA表达水平显著提高（P＜0.05、0.01）；20、40 μmol·L^-1 组 Nrf2 蛋白和 40 μmol·L^-1 组 Nrf2 mRNA 表达水平显著增加（P＜0.01）。结论 WODE 对 LPS 诱导的RAW264.7细胞的氧化应激具有抑制作用，其作用机制可能与调控Keap1/Nrf2/HO-1信号通路相关。     

基于Nrf2信号通路的三七总皂苷对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡的保护作用机制研究

目的探讨三七总皂苷对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及分子机制。方法利用Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤模型,MTT法检测PC12细胞活力,试剂盒测定LDH漏出量、ROS水平、MDA含量、Caspase-3活力以及抗氧化酶SOD、CAT和GHS-Px活力,TUNEL染色检测细胞凋亡,JC-1染色观察线粒体膜电位,Western blot检测相关蛋白HO-1、Lamin-B、细胞核内Nrf2及总Nrf2的蛋白表达。结果三七总皂苷能够明显抑制Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞活力下降(P<0.01)和LDH漏出(P<0.01),减少ROS和MDA的产生(P<0.01),增加SOD、CAT和GSH-Px活力(P<0.01),稳定线粒体膜电位,抑制caspase-3的活化(P<0.01)。而且,三七总皂苷还能够上调PC12细胞细胞核Nrf2、总Nrf2和细胞质中HO-1的蛋白表达。HO-1抑制剂Sn PP能够抑制三七总皂苷的神经保护作用。结论三七总皂苷可能通过上调Nrf2/HO-1信号通路,从而抑制Aβ25-35诱导PC12细胞氧化应激和凋亡。     

基于Nrf2/HO-1信号通路研究橄榄苦苷的体外抗炎作用

目的 探讨橄榄苦苷对脂多糖（LPS）诱导的小鼠腹腔巨噬细胞（RAW264.7）炎症的保护作用及机制。方法 MTT法检测橄榄苦苷（0、10、20、40 μmol/L）对RAW264.7细胞活性的影响;用橄榄苦苷（10、20、40 μmol/L）预处理细胞1 h后,LPS诱导炎症模型,Griess试剂检测细胞内Nitrite释放;Western blotting方法检测细胞iNOS、COX-2、Nrf2、Keap-1、HO-1、NQO1蛋白表达水平;流式细胞仪检测细胞内NO、ROS、Ca²⁺的水平;荧光显微镜检测线粒体膜电位（MMP）水平;ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）的释放。结果 与模型组比较,橄榄苦苷组Nitrite释放水平显著降低（P<0.05、0.01、0.001）,iNOS、COX-2蛋白的表达显著降低（P<0.001）,NO的产生显著减少（P<0.05、0.01）;TNF-α、IL-6的释放受到显著抑制（P<0.001）;Ca²⁺释放受到显著抑制（P<0.01）;ROS生成受到显著抑制（P<0.01）;JC-1单体降低,恢复聚合物状态（红色荧光变多）,MMP稳定性增强;Keap1蛋白表达显著降低, Nrf2、HO-1、NQO1蛋白的表达均显著升高（P<0.05、0.01、0.001）。结论 橄榄苦苷对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症具有抑制作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路相关。     

美洲大蠊提取物对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨美洲大蠊提取物(PAS840)对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞氧化损伤模型的保护作用及机制。方法:采用H₂O₂刺激PC12细胞建立神经细胞氧化损伤模型,实验分为正常组(Con)、模型组(Mod)、PAS840低中高剂量组(20,50,125 μg·mL^-1的PAS840培养基溶液进行处理),采用倒置显微镜观察细胞形态并采用CCK-8法检测各组细胞存活率,生化试剂盒检测各组超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的水平;DCFH-DA荧光探针检测各组活性氧簇(ROS)的水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;JC-1法染色检测各组细胞线粒体膜电位(MMP);RT-qPCR检测各组Nrf2/HO-1通路因子(Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1)、凋亡因子(Bcl-2、Bax和Caspase-3)、炎症因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)、乙酰胆碱酯酶(AchE)和过氧化氢酶(CAT) mRNA的表达水平;Western blot法检测各组Nrf2、HO-1、Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达水平。结果:PAS840可显著提高氧化损伤细胞的存活率、MMP及SOD、GSH-Px和GSH的水平,降低LDH、MDA和ROS的水平;显著降低Keap1、TNF-α、IL-1β、IL-6和AchE mRNA表达的同时,显著增加CAT和NQO1 mRNA的表达,显著降低Nrf2、Bax和Caspase-3的mRNA及其蛋白表达,显著增加HO-1和Bcl-2的mRNA及其蛋白表达。结论:PAS840可以抑制H₂O₂诱导的PC12细胞凋亡,减轻炎症,其机制可能与降低ROS、调控Nrf2/HO-1通路因子减轻细胞的氧化损伤程度有关。     

淫羊藿苷对H2O2诱导的软骨细胞氧化损伤的保护作用及其机制

目的 探究淫羊藿苷（icariin,ICA）对H₂O₂诱导的软骨细胞氧化损伤的保护作用及相关机制。方法 分离SD新生大鼠软骨细胞,随机分为对照组、H₂O₂模型组、ICA低剂量组、ICA中剂量组、ICA高剂量组;采用CCK8法检测各组细胞增殖能力的变化;采用ELISA试剂盒检测各组细胞中活性氧（reactive oxygen,ROS）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、过氧化氢酶（catalase,CAT）以及谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）的表达情况;流式细胞术检测各组细胞周期情况,并计算增殖指数（proliferation index,PI）;Hoechst染色观察各组细胞核凋亡情况;分别采用荧光定量PCR （qRT-PCR）和Western blotting检测凋亡相关因子及Nrf2/HO-1通路的表达情况。结果 与对照组相比,H₂O₂模型组细胞增殖能力降低,ROS、MDA含量升高,SOD、CAT及GSH-Px含量下降,细胞凋亡情况加重;经ICA干预后,软骨细胞的增殖能力上升,ROS、MDA含量下降,SOD、CAT及GSH-Px含量增加,并且ICA能够有效抑制软骨细胞凋亡,上调Nrf2和HO-1蛋白的表达。结论 ICA对H₂O₂诱导的软骨细胞氧化损伤具有保护作用,能够抑制软骨细胞凋亡,其机制跟Nrf2/HO-1信号通路有关。     

加兰他敏介导Nrf2/HO-1信号通路对慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞损伤的保护作用

目的 探讨加兰他敏介导核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路对慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞（RGCs）损伤的影响及其机制。方法 48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、加兰他敏组、加兰他敏+ML385组,每组12只。假手术组大鼠进行手术操作但不烙闭巩膜静脉,其余各组大鼠采用巩膜上静脉烙闭法建立慢性高眼压大鼠模型。加兰他敏组大鼠ip 4 mg/kg加兰他敏溶液;加兰他敏+ML385组大鼠ip 4 mg/kg加兰他敏溶液和30 mg/kg ML385。采用便携式动物眼压计测定眼压;苏木精–伊红（HE）染色观察视网膜组织形态及RGCs数量;TUNEL染色检测RGCs凋亡情况;试剂盒法检测视网膜组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）水平;Western blotting法检测视网膜组织中Nrf2、HO-1蛋白表达。结果 与模型组相比,加兰他敏组大鼠眼压降低,视网膜组织病理损伤得到改善,RGCs数量增多,RGCs凋亡率降低,视网膜组织中SOD、CAT活性以及Nrf2、HO-1蛋白表达水平均升高,MDA含量降低（P<0.05）...     

黄芪总皂苷对三氧化二砷诱导大鼠心肌细胞损伤的保护作用及机制研究

目的:探讨黄芪总皂苷(astragalus total saponin,ASTs)对三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)诱导大鼠心肌细胞损伤的保护作用及机制研究。方法:分离并培养Wistar乳鼠原代心肌细胞,将细胞分为空白对照组、模型组、LY294002(PI3K抑制剂)组和黄芪总皂苷低中高浓度组。采用CCK-8法检测各组心肌细胞活力;使用全自动生化分析仪检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、磷酸肌酸激酶(phosphocreatine kinase,CK)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)的含量;采用试剂盒法检测各组细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)以及过氧化氢酶(catalase,CAT)的活力;采用蛋白免疫印迹(Western Blotting)法检测心肌细胞中磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,P-AKt...     

钴原卟啉对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的研究钴原卟啉(COPP)预处理在H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用及分子机制。方法建立H9C2心肌细胞缺氧/复氧模型。在H9c2心肌细胞缺氧/复氧前用COPP预处理,并用锌原卟啉(Znpp),全反视黄酸(ATAR)分别抑制HO-1及Nrf2-ARE。检测细胞上清液中LDH、CK的水平变化;用RT-PCR法分析HO-1mRNA表达水平;Westernblot分析HO-1、Nrf2的蛋白表达水平。结果与缺氧/复氧组比,COPP预处理组中LDH和CK水平均明显降低,而HO-1mRNA水平,蛋白水平及细胞核的Nrf2蛋白水平均明显增加;Znpp的加入阻断了COPP预处理对心肌细胞的保护作用;ATAR的加入抑制了Nrf2在细胞核的聚集,进而抑制了COPP对HO-1的诱导。结论COPP预处理诱导H9c2心肌细胞HO-1过表达,具有抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用;其机制与Nrf2-ARE信号通路相关。     

Nrf2 mediates the protective effect of edaravone after chlorpyrifos‐induced nervous system toxicity

We aim to confirm the impairment of chlorpyrifos (CPF) in PC12 cells, evaluate the protective effect of edaravone on CPF‐induced injury, and try to unravel its underlying mechanism perspective from Nrf2 signaling pathway. Viability of PC12 cells treated with CPF and edaravone (Ed) were evaluated by MTT assay. Cell apoptosis was observed by the Hoechst 33342 stain. The level of reactive oxygen species (ROS), the content of malondialdehyde (MDA), and the activity of superoxide dismutase (SOD) were detected to evaluate the oxidative stress injury. The expression of Nrf2 was detected by Western blot; profoundly, RNA interference was conducted to construct Nrf2 gene knockdown PC12 cells and to uncover its underlying mechanism. MTT results showed CPF injured PC12 cells in a concentration‐dependent manner. Increased ROS and MDA content, decreased total SOD activity, or even apoptosis were occurred in PC12 cells when treated with CPF. Interestingly, CPF‐induced cell injury was conspicuously reversed after Ed administration. Nrf2 signaling pathway was activated after Ed treatment and the neuroprotective effect of Ed was not significant in cells after Nrf2 gene knockdown. In conclusion, Ed exerts neuroprotective effect on CPF‐induced oxidative stress injury and its mechanism was correlated with the Nrf2 signaling pathway.     

白果内酯在PC12细胞中对NO诱导的细胞毒性的保护作用(英文)

目的:研究白果内酯在PC12细胞中对NO诱导的细胞毒性的保护作用。方法:以MTT法及LDH法检测细胞存活率;同时检测细胞的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及脂质过氧化水平。结果:NO供体SIN-1(50-300μmol·L~(-1))可导致PC12细胞死亡,可使PC12细胞脂质过氧化水平升高。白果内酯预孵育可减少NO诱导的细胞死亡;可抑制脂质过氧化水平升高。白果内酯预孵育本身可使SOD及CAT酶活性升高。结论:白果内酯对NO诱导的细胞毒性作用具保护作用,该保护作用可能与白果内酯升高细胞内SOD和CAT的活性有关。     

丹皮酚对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用(英文)

目的探讨丹皮酚对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法建立H2O2致PC12细胞损伤模型,采用MTT法测定细胞存活率,流式细胞术测定细胞凋亡率及细胞内活性氧含量,化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量及细胞内丙二醛(MDA)含量。结果PC12细胞经H2O2100μmol.L-1处理10 h可致细胞存活率下降,并能诱导细胞凋亡,LDH释放量及细胞内活性氧和MDA含量明显增加;丹皮酚(12,25和50μmol.L-1)预处理1 h可提高细胞存活率,减少细胞凋亡、LDH释放量及细胞内活性氧和MDA含量。结论丹皮酚对H2O2诱导的PC12细胞凋亡具有抑制作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。