糖尿病大鼠骨折愈合过程中 VEGF、BMP-2及BMP-7的动态观察

目的：动态观察糖尿病模型大鼠骨折愈合过程中的血管内皮细胞生长因子（ VEGF）、骨形态发生蛋白-2（BMP-2）、骨形态发生蛋白-7（BMP-7）的变化趋势,探索影响糖尿病骨折愈合的机制。方法选取Wester 雄性大鼠70只,采用随机数字表法分为糖尿病组[（腹腔注射链脲佐菌素（ STZ）造模]和对照组,每组35只。采用线锯锯断2组大鼠的左侧胫骨,采用外固定复位处理,观察2组大鼠术后第1、3、5、7周的血清及骨痂中VEGF、BMP-2、BMP-7的表达变化。结果糖尿病组大鼠术后第1周、术后第3周的VEGF、BMP-2、BMP-7的表达水平均显著低于对照组（ P＜0构．05）,术后第5、第7周2组大鼠骨痂组织中的VEGF、BMP-2、BMP-7的表达水平差异无统计学意义（ P ＞0．05）。糖尿病组与对照组大鼠的血清中VEGF、BMP-2、BMP-7在术后第1～7周差异无统计学意义（ P ＞0．05）,糖尿病大鼠术后第1、第3周BMP-7的表达水平显著低于对照组大鼠,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。结论糖尿病大鼠血清、骨痂组织中BMP-7、BMP-2及VEGF表达减少可能是其延迟愈合的一个重要原因。     

BMP-2 TGF-β1和VEGF在骨性关节炎滑膜组织中的表达

目的 探讨骨形成蛋白-2（BMP-2）、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）和血管内皮生长因子（VEGF）在人膝关节骨性关节炎（OA）各期滑膜组织中的表达及作用。方法 收集2012~2014年内蒙古自治区人民医院骨关节科原发性膝关节OA患者滑膜组织标本,男性35例,女性45例,作为试验组,根据Kellgren-Lawrence（K-L）分级标准将试验组分为OA1组（10例,K-LⅠ级）、OA2组（16例,K-LⅡ级）、OA3组（28例,K-LⅢ级）、OA4组（26例,K-LⅣ级）。另选取4例正常膝关节滑膜作为对照组。采用免疫组织化学法观察BMP-2、TGF-β₁和VEGF在各组滑膜中的表达情况。结果 与对照组各细胞因子的表达（BMP-2：0.087±0.015,TGF-β₁：0.103±0.018,VEGF：0.095±0.017）比较,试验组4组滑膜中BMP-2、TGF-β₁和VEGF表达率（OA1组,BMP-2：0.112±0.022,TGF-β₁：0.173±0.019,VEGF：0.135±0.008;OA2组,BMP-2：0.214±0.012,TGF-β₁：0.288±0.03,VEGF：0.271±0.021;OA3组,BMP-2：0.298±0.030,TGF-β₁：0.416±0.032,VEGF：0.368±0.025;OA4组,BMP-2：0.330±0.024,TGF-β₁：0.471±0.020,VEGF：0.300±0.033）增高（P<0.05）。OA1、OA2、OA3、OA4各组滑膜中BMP-2、TGF-β₁和VEGF表达水平依次递增,且差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 滑膜中高表达的BMP-2、TGF-β₁和VEGF可能是OA的病理进程中的重要因素之一。     

肺癌组织中VEGF、EGFR表达与ADC直方图相关参数的关系

目的 探讨肺癌表观弥散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)直方图相关参数与肺癌组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)表...     

载骨碎补总黄酮磷酸钙骨水泥对骨缺损模型大鼠诱导膜中成骨细胞分化的影响及其机制研究

目的:探究载骨碎补总黄酮磷酸钙骨水泥对骨缺损模型大鼠诱导膜成骨分化的作用及其机制。方法:分别以磷酸钙骨水泥(CPC)、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)骨水泥为载体,以强骨胶囊内容物(有效成分为骨碎补总黄酮)制备载药CPC和载药PMMA骨水泥。选取64只雄性SD大鼠,随机分为载药CPC组、载药PMMA骨水泥组、未载药CPC组、未载药PMMA骨水泥组,每组16只。分离大鼠股骨并行截骨,以制备骨缺损模型,然后分别植入相应骨水泥。造模4周后,各组大鼠切开并保护好诱导膜,取出骨水泥,植入自体松质骨。于造模后第4周对大鼠后肢骨进行X射线拍片;于造模后第4周和植骨后第6周时分别取大鼠骨缺损区诱导膜和新生骨,采用苏木精-伊红染色法观察诱导膜组织形态学,并测定新生骨组织的骨小梁宽度及成骨细胞数;采用免疫组化法检测诱导膜中人骨成型蛋白2(BMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达水平;采用Western blotting法检测新生骨组织中Smad1、Smad4、Smad7的蛋白表达水平。结果:与其余3组比较,载药CPC组大鼠骨缺损区的骨水泥降解更明显,且可见诱导膜组织形成,骨缺损区域更小;诱导膜中毛细血管内皮细胞丰富、排列有序;新生骨组织中骨小梁宽度及成骨细胞数均显著增加(P<0.05);诱导膜中BMP-2、VEGF的蛋白表达水平和新生骨组织中Smad1、Smad4、Smad7的蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论:载骨碎补总黄酮CPC具有促进骨缺损模型大鼠诱导膜成骨的作用。这可能是通过激活BMP-2/Smad通路,从而调节成骨细胞分化;同时通过提高VEGF表达,促进血管内皮细胞分化,加快形成毛细血管网,从而促进骨愈合。     

BMP-2与VEGF基因在同种异体骨修复骨缺损中的实验研究

目的 探讨“补肾壮骨合剂”(骨碎补、续断、自然铜、土鳖虫)在同种异体骨修复骨缺损中对骨形态形成蛋白-2(bone morphogenetic protein two,BMP-2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因的表达及影响 方法 普通家兔48只,取其中36只随机分为实验组和对照组,实验组和对照组均为18只,实验组和对照组再继续分为6组,每组各为3只;实验组和对照组均按常规1术在无菌条件把左侧桡骨中下1/3处用骨磨钻制成10mm的骨缺损模型,取另外12只备用家兔处死后取髂骨植入以上骨缺损处;实验组用“补肾壮骨合剂”复合饲料喂养,对照组用普通饲料喂养,于术后3d及1、2、4、6、8周各处死实验组和对照组普通家兔3只,取骨缺损处标本进行BMP-2和VEGF基因的实时定量聚合酶链反应(real-time PCR).结果 对BMP-2和VEGF的目的基因校正结果后,以对照组1周拷贝数为基础,其他各组与其比值:对照组和实验组在3d及1、2、4、6、8周BMP-2基因分别为0.55、1.00、2.19、3.20、2.29、1.42和1.84,8.83、3.44、2.50、6.50、6.00;VEGF基因分别为2.08、1.00、0.88、3.40、1.71、1.17和6.5、2.25、1.86、3.13、3.33、3.31,实验组与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05) 结论 补肾壮骨合剂能明显缩短骨缺损的修复时间和提高骨组织的修复质量,在对BMP-2和VEGF的释放水平和诱导成骨进程及促进骨损伤区血管化方面有显著的影响,并可以看出在骨缺损的修复过程中各个时间段二者的增长不成比例关系.     

MMP-2、MMP-9和VEGF与胃癌的研究进展

胃癌是危害人类健康的消化道恶性肿瘤之一,其病死率居所有恶性肿瘤的第二位。胃癌发生发展、浸润及转移是个复杂的过程,其中最重要的是新生血管形成和淋巴转移,与这两者相关的主要因子有:基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)。目前,MMP-2、MMP-9和VEGF已经成为研究热点,但与胃癌发生浸润和转移的具体机制尚存在争议,现就三者在胃癌中的表达及相互关系作一总结,为临床治疗胃癌提供依据。     

血清Ang-2及VEGF水平与子宫肌瘤的相关性研究

目的研究子宫肌瘤患者血清血管生成素-2（Ang-2）和血管内皮生长因子（VEGF）水平及与子宫肌瘤的相关性,以及作为子宫肌瘤临床检测指标的可行性。方法分别选取40例手术治疗的子宫肌瘤患者和同龄正常女性作为研究组和对照组。用ELISA法测定2组血清Ang-2、vEGF含量。结果研究组Ang-2和VEGF含量明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．01）。子宫肌瘤患者Ang-2和VEGF无月经周期变化（P〉0．05）,Ang-2和VEGF与子宫肌瘤数无关（P〉0．05）。结论Ang-2和VEGF与子宫肌瘤发病相关,Ang-2和VEGF可以作为子宫肌瘤临床检测指标之一。     

自体骨复合骨形态发生蛋白2和(或)血管内皮生长因子修复海水浸泡开放性骨缺损的实验研究

目的初步探讨骨形态发生蛋白2(BMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)单独及联合应用修复海水浸泡开放性骨缺损的疗效。方法将60只新西兰兔双侧桡骨中段制作1.5 cm骨缺损,海水浸泡3 h,随机分为A、B、C、D四组,每组15只兔。A组为对照组,植入自体髂骨;B、C、D三组为实验组,B组植入自体髂骨/可吸收胶原海绵(ACS)/BMP-2;C组植入自体髂骨/ACS/VEGF;D组植入自体髂骨/ACS/BMP-2/VEGF。分别于术后1、2、4、8及12周切取标本,每组每个时相点根据随机原则取6个标本,通过X线摄片、骨痂灰度值、组织形态学观察、免疫组织化学及环境扫描电镜观察各时相点骨缺损修复情况。结果①1、2周时,四组X线差异不明显,4、8、12周时B、C、D三组与A组的骨痂灰度值比较,差异有统计学意义(P<0.05);D组与B、C两组平均骨痂灰度值比较差异有统计学意义(P<0.05);B、C、两组平均骨痂灰度值比较差异无统计学意义(P>0.05)。②免疫组织化学结果表明:骨缺损修复早期BMP-2、VEGF二者相互促进,联合应用具有协同效应。结论①BMP-2、VEGF单独应用均能促进海水浸泡兔桡骨开放性骨缺损的修复。②BMP-2和VEGF联合应用能显著促进海水浸泡开放性骨缺损修复,两者联合应用具有协同效应。     

纳米羟基磷灰石／胶原蛋白复合骨结合血管内皮生长因子／骨形态发生蛋白-7修复骨缺损的实验研究

目的探讨血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）联合骨形态发生蛋白-7（bonemorphogeneticprotein7,BMP-7）复合纳米羟基磷灰石／胶原蛋白复合骨（nano—hydroxyapatite／collagen,NHAC）修复骨缺损的效果。方法将纳米羟基磷灰石粉末和胶原蛋白粉末混合制备NHAC人工骨,再将混合粉末与含VEGF、BMP-7的蒸馏水调和,制备NHAC／VEGF／BMP-7、NHAC／VEGF人工骨。建立大鼠桡骨缺损模型,按随机原则分为3组,NHAC／VEGF／BMP-7组植入NHAC／VEGF／BMP-7,NHAC／VEGF组植入NHAC／VEGF,NHAC组植入NHAC人工骨。术后2、4、8周行组织学及免疫组织化学检查,观察材料成骨及血管化情况。结果各时间点组织学评分NHAC／VEGF／BMP-7组高于其他两组,NHAc／VEGF组高于NHAC植入组。在4周内,血管计数以NHAC／VEGF／BMP-7组最多。结论血管内皮生长因子联合骨形态发生蛋白-7能更好的促进成骨,比单纯应用血管内皮生长因子能更好的修复骨缺损。     

山羊下颌骨牵张成骨过程中血管生成与新骨形成关系的实验研究

目的研究牵张成骨过程中BMP-6以及VEGF的表达分布模式以及其生物学意义。方法在建立山羊下颌骨牵张成骨动物模型的基础上,应用免疫组化法观察牵张成骨不同时期骨组织中BMP-6以及VEGF的表达以及分布情况。结果牵张结束后1周,血管内皮细胞和新生骨小梁边缘的成骨细胞VEGF表达强阳性染色。新生骨小梁表面附着的成骨细胞可见BMP-6强阳性染色。随着时间的延长,两者表达阳性率逐渐减弱。6周后,VEGF主要定位于牵张区新生组织中的血管内皮细胞,BMP-6主要局限在骨膜处,呈弱阳性表达。结论BMP-6很可能是在牵张成骨早期以旁分泌和自分泌机制诱导新骨的形成。VEGF生成早期通过加强局部血管的增生、渗入和牵张间隙的血流量,促进新骨生成。     

骨碎补治疗外伤性骨折作用机制的研究进展

外伤性骨折是临床骨科常见病和多发病,积极有效促进骨折愈合对改善患者预后具有重要临床价值。骨碎补可促进骨髓间充质干细胞分化、促进成骨细胞增殖、抑制破骨细胞活性、促进软骨细胞生长、抑制氧化应激反应、调节相关分子信号通络。探讨了骨碎补促进骨折愈合、治疗外伤性骨折的作用机制,为骨碎补临床上提供参考。     

知母盐炙前后体外降血糖作用的研究

目的利用Caco-2细胞模型比较知母盐炙前后的降血糖作用,并考察其作用机制,为盐知母炮制原理的阐明提供依据。方法建立Caco-2单层细胞模型,采用CCK-8细胞活力试剂盒检测5 000、2 500、500、250、50、25、5、2.5、0.5、0.25μg/m L生、盐知母水煎液细胞毒性,来确定药物最大毒性剂量。以蔗糖酶和麦芽糖酶底物,葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖质量浓度,计算抑制率,比较其对Caco-2单层细胞上蔗糖酶和麦芽糖酶活力的影响。葡萄糖吸收实验测定剩余葡萄糖的质量浓度,比较生、盐知母对Caco-2细胞吸收和转运葡萄糖的影响。结果当生、盐知母质量浓度≤250μg/m L时,Caco-2细胞可进行细胞实验。实验选取了50、250μg/m L两个质量浓度。生、盐知母水煎液50、250μg/m L对蔗糖酶、麦芽糖酶活性均有抑制作用,且盐知母水煎液对蔗糖酶、麦芽糖酶的抑制作用均优于生知母。生、盐知母水煎液均有降低细胞对葡萄糖吸收的趋势,且呈现剂量相关性,但效果不显著。盐知母水煎液对葡萄糖吸收的抑制作用略好于生知母(P0.05)。结论盐知母对Caco-2细胞的降糖作用优于生知母,其降糖机制可能主要体现在α-葡萄糖苷酶上,而对葡萄糖吸收作用影响较小。     

绿萼梅总黄酮对慢性温和刺激所致抑郁大鼠神经内分泌和氧化应激的影响

目的 通过观察绿萼梅总黄酮（TFAM）对慢性温和刺激抑郁大鼠神经内分泌及氧化应激的影响,探讨其可能的抗抑郁机制。方法 将SD大鼠随机分为6组：生理盐水组、模型组、阳性对照组（氟西汀,20 mg/kg）、低剂量治疗组（TD-TFAM,80 mg/kg）、中剂量治疗组（TZ-TFAM,160 mg/kg）和高剂量治疗组（TG-TFAM,240 mg/kg）;除生理盐水组外,其余各组大鼠经历28 d慢性不可预见性温和应激（CUMS）造模成功后随机分组。通过大鼠体重增量变化、糖水偏好实验、旷场实验评估TFAM的抗抑郁作用;采用酶联免疫吸附法（Elisa）测定大鼠海马和前额叶皮层去甲肾上腺素（NA）、5-羟色胺（5-HT）、促肾上腺皮质激素（ACTH）和皮质酮（CORT）含量,评估TFAM对神经递质表达量的影响;通过检测大鼠血清和纹状体中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性评估TFAM对氧化应激的影响。结果 TFAM能显著增加CUMS大鼠体重增值变量,提高糖水偏爱百分比,逆转旷场实验评分,提高大鼠海马和前额叶皮层NA、5-HT的含量,降低ACTH、CORT的含量,增强大鼠血清和纹状体中GSH-Px和SOD的活性。结论 TFAM抗抑郁作用可能与促进单胺递质分泌、调节下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴功能和清除体内自由基有关。     

生川乌配伍白蔹、白及反药组合在大鼠血中移行成分的研究

目的鉴定生川乌配伍白蔹、白及的入血成分,比较配伍前后血中移行成分的变化特征。方法大鼠ig给予生川乌配伍白蔹、白及提取物,收集血浆样品并采用UPLC-QTOF/MS法鉴定入血成分,由半定量分析比较配伍前后血中移行成分的变化。结果检测配伍组20个成分,均为来自于生川乌的原形成分,配伍组中双酯型生物碱的相对质量分数均显著降低,单酯型生物碱中苯甲酰乌头原碱的相对质量分数显著降低,醇胺型生物碱中宋果灵的相对质量分数显著降低,其他没有显著性变化。结论生川乌配伍白蔹、白及能够改变其血中移行成分的体内过程。     

天麻配方颗粒高效液相色谱指纹图谱研究

目的 研究天麻配方颗粒的高效液相色谱指纹图谱,为其质量控制提供更可靠的方法。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Megres5-C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈-0.05%磷酸溶液进行梯度洗脱,柱温为30 ℃,体积流量为0.8mL/min,检测波长为220 nm。结果 初步建立了天麻配方颗粒的高效液相色谱指纹图谱,确定了6 个特征峰。结论 高效液相色谱指纹图谱可为天麻配方颗粒的鉴别和质量控制提供参考。     

盐知母不同有效部位改善链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠糖代谢的研究

目的探究盐知母不同溶剂萃取物对2型糖尿病大鼠糖代谢的影响,旨在寻找盐知母降血糖作用的有效部位。方法 SD雄性大鼠ig脂肪乳10 g/kg,1次/d。4周后,ip链脲佐菌素35 mg/kg,建立2型糖尿病模型。造模成功的大鼠按血糖值随机分为模型组、阿卡波糖(0.2 g/kg)组以及石油醚萃取物、氯仿萃取物、醋酸乙酯萃取物、正丁醇萃取和萃余物组,连续ig给药14 d。于给药7、14 d后测定空腹血糖值(FBG),末次给药后测定口服葡萄糖耐量(OGTT),眼眶取血测定糖化血红蛋白(HbAlc)、血清胰岛素(FINS),计算胰岛敏感指数(ISI)和Homa胰岛素抵抗(HOMA-IR)指数。结果与模型组比较,盐知母氯仿萃取物能够明显降低FBG、HbA1c、FINS、HOMA-IR指数,升高ISI,改善OGTT;盐知母醋酸乙酯萃取物能够显著降低HbAlc、HOMA-IR指数,改善OGTT;盐知母正丁醇萃取物能够显著降低FINS;盐知母萃余物能够显著降低FBG、FINS、HOMA-IR指数,升高ISI。结论盐知母不同溶剂萃取物对2糖尿病大鼠糖代谢具有较好的改善作用,其中氯仿萃取物的作用最强。     

莪术药理作用的研究新进展

莪术是传统中药,广泛分布于我国各地,在民间有广泛使用,其化学成分主要为挥发油和姜黄素类、多糖类、甾醇类、酚酸类、生物碱类等,现代药理学研究表明,莪术具有抗肿瘤、抗血小板聚集、抗血栓、调血脂、抗动脉粥样硬化、抗组织纤维化、抗炎镇痛、抗菌抗病毒、降血糖、抗氧化等多种药理学作用。本文对近年来莪术药理学作用的研究新进展进行综述,以期为莪术的进一步研究开发和应用提供参考。     

苍术抗炎、抗肿瘤和免疫调节作用的研究进展

苍术为菊科植物茅苍术Atractylodes lancea或北苍术A.chinensis的干燥根茎,具有燥湿健脾、祛风散寒的功效。药理研究显示苍术及其提取物具有抗炎、抗肿瘤和免疫调节等作用。其对细胞免疫、体液免疫和非特异性免疫都有增强作用;对肺癌细胞、消化系统肿瘤细胞、白血病细胞、黑色素瘤细胞、宫颈癌细胞和肉瘤生长均有抑制作用;苍术烯内酯、苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇、苍术多糖可能是苍术的重要活性成分。     

苍术–玄参药对治疗2型糖尿病作用机制的网络药理学研究

目的采用网络药理学方法研究苍术–玄参药对治疗2型糖尿病的作用机制。方法通过检索中药系统药理数据分析平台(TCMSP),把口服利用度(OB)≥20%,类药性(DL)≥0.1作为筛选条件,获得苍术、玄参主要活性成分和相关作用靶点。通过Uni Prot数据库提取作用靶点的基因名称,并用CTD网络在线分析平台获得与2型糖尿病相关的作用靶点,构建活性成分靶点相互作用的网络图和疾病靶点相互作用网络图。利用Cytoscape 3.6.1软件中的Merge功能进行网络合并,筛选交集网络,进一步进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果筛选得到27个活性分子,18个作用于2型糖尿病的靶点,KEGG富集通路37条,关键靶点包括胰岛素(INS)、一氧化氮合酶3(NOS3)、肿瘤坏死因子(TNF)等,关键通路包括长寿调节通路、胰岛素分泌、脂肪细胞因子信号通路、缺氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路、视黄酸诱导基因蛋白I(RIG-I)样受体信号通路、晚期糖基化终末产物(AGE)及其受体(RAGE)的AGE-RAGE信号通路等。结论苍术–玄参药对中的活性成分能通过多靶点、多通路起到治疗2型糖尿病的作用,为苍术–玄参药对的进一步开发提供了科学依据。     

藏紫菀总黄酮对模拟高原缺氧小鼠抗氧化能力及细胞凋亡的影响

目的 探讨藏紫菀总黄酮对高原缺氧小鼠抗氧化能力及细胞凋亡的影响。方法 采用常压密闭实验筛选藏紫菀总黄酮最佳抗缺氧剂量;40只小鼠随机分为对照组、模型组、乙酰唑胺(200 mg/kg)组和藏紫菀总黄酮(500 mg/kg)组,模拟海拔8000 m高原环境,减压缺氧12 h,测定小鼠脑组织中的过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、还原型谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,Western blotting法检测Nrf-2、SOD、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果 常压密闭实验中,藏紫菀总黄酮500 mg/kg剂量组小鼠的存活时间最长,为最佳给药剂量;与对照组比较,缺氧后小鼠脑组织中SOD、CAT、GSH和GSH-Px活性均显著降低,Nrf-2蛋白表达显著升高,SOD蛋白表达和Bc1-2/Bax比值显著降低 (P<0.01);经藏紫菀总黄酮预处理后,小鼠脑组织中SOD、CAT、GSH和GSH-Px活性均显著升高,Nrf-2、SOD蛋白表达和Bcl-2/Bax比值显著升高(P<0.05、0.01)。结论 藏紫菀总黄酮提高高原缺氧小鼠脑组织抗氧化能力,降低细胞凋亡。