兔脑缺血模型的建立

为了研究脑缺血损伤后的生化改变及其临床意义，采用线结扎兔颈动脉法建立兔脑缺血模型，Ａ组（ｎ＝５）结扎双侧颈动脉；Ｂ组（ｎ＝５）结扎单侧颈动脉，３０ｍｉｎ时松开结扎线使颈动脉再灌流；Ｃ组（ｎ＝５）为假结扎组。结果：３组动物中，Ａ组兔全部死亡，Ｂ组和Ｃ组兔全部成活；后２组相比，Ｂ组兔脑脊液分泌量减少，麻醉苏醒延迟，术后２４ｈ时有神经缺失体征。提示：结扎兔单侧颈动脉可制成不完全脑缺血模型     

兔脑缺血模型的建立

为了研究脑缺血损伤后的生化改变及其临床意义，采用线结扎兔动脉法建立兔脑缺血模型，Ａ组结扎双侧颈动脉；Ｂ组结扎单侧颈动脉，３０ｍｉｎ时松开结扎线使颈动脉再灌流；Ｃ组为假结扎组，结果；３组动物中，Ａ组兔全部死亡，Ｂ组和Ｃ组兔全部成活；后２组相比，Ｂ组兔脑脊液分泌量减少，麻醉苏醒延迟，术后２４ｈ时有神经缺失体征。     

高血胆固醇兔下肢缺血动物模型的建立及形成机制探讨

目的探讨建立高血胆固醇兔下肢缺血模型的方法及其形成机制,观察缺血肢体血运重建情况。方法将34只日本大耳兔随机分成对照组11只,喂以普通饲料;实验组23只,喂以高胆固醇饲料并静脉注射牛血清蛋白;6周后结扎离断股动脉,建立下肢缺血模型,观察血脂水平、颈总动脉斑块形成情况和测定股动脉内膜／中膜厚度比值（I／M）;10周后血管造影观察血管形成情况。结果6周后实验组兔均出现高胆固醇血症,其中12只见颈总动脉粥样硬化斑块（动脉粥样硬化组）,9只未见粥样硬化斑块（高血胆固醇组）,TC、TG、LDL—C、I／M均明显高于对照组（均P〈0.05）;动脉粥样硬化组TC、TG、LDL—C、I／M亦明显高于高血胆固醇组（均P〈O．05）。血管造影示实验组兔新生血管明显少于对照组,镜下可见动脉内皮细胞损害、平滑肌细胞增生。结论高胆固醇饲料喂养结合免疫反应损伤法可成功建立高血胆固醇兔下肢缺血模型,该方法简便易行、可靠,可引起内皮结构和功能损害、内膜增厚,其病理改变与人类动脉粥样硬化的病理过程相似,这为内皮祖细胞移植治疗老年下肢缺血提供了可靠的实验依据。     

下肢缺血动物模型研究进展

下肢缺血动物模型是了解临床肢体缺血疾病病理生理发生、发展过程以及探索其治疗手段的重要措施,而建立和选取适当的动物模型是研究下肢缺血性疾病的基础。近年来,随着各种新技术的出现,下肢缺血动物模型制作体系也进一步得到了完善。本文将对各种缺血模型及其特点进行总结,便于后续研究根据不同实验要求来选择适当的动物模型提供一定依据。     

兔肺气肿模型的建立

目的：应用木瓜蛋白酶雾化吸入和静脉注射法来复制兔肺气肿模型。方法：兔耳缘静脉注入8％木瓜蛋白酶和让兔雾化吸入5％木瓜蛋白酶液制作模型。观测其动脉血气及肺功能并对肺组织进行病理学观察。结果：与正常组相比模型组兔动脉血pH值、PaO2浓度降低，PaCO2浓度升高；潮气量下降，呼吸总阻力、中心阻力、总气道阻力升高；病理组织切片光镜下见肺泡壁变薄、断裂，肺泡腔扩张、融合，典型肺气肿表现。结论：木瓜蛋白酶雾化吸入和静脉注射能成功复制出兔肺气肿模型。     

大鼠下肢缺血性梗死模型的制备

目的以不同方法制备大鼠下肢缺血性梗死模型,比较不同制备方法间的优劣,建立有效的下肢缺血性梗死模型。方法 32只Wistar大鼠随机分为对照组、直接结扎组、股浅动脉结扎组和股动脉结扎组4组,每组8只。对照组切开皮肤,不做结扎,作为创伤对照模型。直接结扎组用手术线直接结扎后肢。股浅动脉结扎组和股动脉结扎组分别分离股浅动脉、股动脉,并用手术线结扎血管。观察下肢皮肤和肌肉变化,术后1周处死大鼠取下肢肌肉组织进行HE染色。结果与对照组和股浅动脉结扎组相比,直接结扎法与股动脉结扎法均可使大鼠后肢出现明显的缺血坏死,但直接结扎法造成损伤面积过大并有严重的炎症反应,股动脉结扎法可造成下肢明显缺血坏死且炎症反应轻微。结论股动脉结扎法是制备大鼠下肢缺血性梗死模型的有效方法。     

三种制作Balb/c小鼠下肢缺血模型方法的比较

目的采用高位结扎并离断一段股动脉、单纯性高位结扎和单纯性低位结扎股动脉三种术式,制作Balb/c小鼠下肢缺血模
型。通过比较3种术式的优缺点,为制作用于再生医学研究的缺血模型提供理论依据。方法选8周龄的雄性Balb/c小鼠30只,
随机分成3组,分别按3种方法制作缺血模型。术后连续观察5 d。第2天行激光多普勒检测。结果激光多普勒显示3种模型
中手术侧的下肢血流阻滞。高位结扎并离断股动脉组中小鼠整个肢体坏疽并脱落;单纯性高位结扎组小鼠中出现小腿及脚爪
坏疽;单纯性低位结扎小鼠脚掌干燥并有脱皮现象,个别脚爪坏死,组织学见大片肌组织坏死及再生俢复反应。结论单纯性低
位结扎股动脉是制作Balb/c小鼠下肢缺血模型比较好的方法。
     

骨髓干细胞移植治疗糖尿病兔下肢缺血效果观察

目的:对比骨髓干细胞移植、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员及局部骨髓干细胞移植联合G-CSF动员3种方法对糖尿病兔缺血组织血管新生的作用.方法:40只健康新西兰兔,用四氧嘧啶(ALX)诱导成为糖尿病兔后,均结扎右后肢股动脉,建立糖尿病下肢缺血动物模型,然后随机分为4组,每组10只.其中1组不进行治疗作对照(A组),余3组分别用G-CSF动员(B组)、局部骨髓干细胞移植(C组)及G-CSF动员联合局部骨髓干细胞移植(D组)进行治疗.28 d后均以右侧股内侧正中部位为中心等距离取局部肌肉组织,免疫组织化学染色检测肌组织微血管密度及血管内皮生长因子(VEGF)表达水平.结果:上述A、B、C、D 4组缺血组织微血管密度(1)分别为(22.0±6.0)、(35.8 4±7.5)、(38.1±7.2)和(48.7±9.1)个/高倍视野,VEGF蛋白表达水平(2)分别为(8.87 4-1.51)%、(11.83 4-1.65)%、(12.32±1.34)%和(17.13±2.73)%,局部干细胞移植(1)和G-CSF动员(2)对微血管密度和VEGF的表达有影响(F1分别为50.599、35.930,F2分别为39.846,25.435,P均<0.001,但F1x2分别为2.256,0.437,P>0.05).结论:G-CSF动员和局部骨髓干细胞移植均可用于治疗糖尿病下肢缺血性疾病.     

兔腮腺涎瘘模型的建立

目的：建立兔腮腺涎瘘的模型。方法：选取10只新西兰白兔，随机确定在每只兔的一侧颊部皮肤作角形切口，解剖面神经分支并锐性剥离腮腺组织，腮腺残端不结扎，再严密缝合切口。在兔的另一侧颊部皮肤作同样的角形切口，翻开组织瓣后再复位缝合作对照。术后7天内连续观察局部肿胀和创口渗出情况，并于术后6天测定穿刺液中唾液淀粉酶含量。结果：实验侧腮腺区术后1-5天出现渐进性肿胀，伤口有清亮液体渗出。术后7天，在腮腺肿胀区切开皮肤后，有大量清亮的液体流出；继续观察7天，创口不愈，并不断有清亮的液体流出；肿胀区穿刺液中唾液淀粉酶含量均高于10000U／L。对照侧腮腺区术后1天出现轻度肿胀，创口无渗出，并随着时间的推移，腮腺区肿胀逐渐消失。肉眼观察和唾液淀粉酶检测证实，10只新西兰兔实验侧的腮腺涎瘘模型均取得成功。结论：通过解剖兔面神经、锐性剥离腮腺组织而造成涎瘘，方法简便，重复性好，是腮腺涎瘘的理想动物模型。     

家兔心肌缺血再灌注损伤模型的制备与评定

目的 改进心肌缺血再灌注模型的制备方法,确定判断模型成功的综合指标,为研究心肌缺血再灌注提供更为准确的模型.方法 制备家兔心肌缺血再灌注模型,钝性开胸,结扎冠状动脉,45 min后剪断手术线,实现再通,在此期间观测并记录心电图改变,3 h后颈总动脉穿刺取血,分离血清测CK、CK-MB,摘取心脏做常规病理切片.结果 结扎...     

下肢缺血的腔内治疗现状

髂动脉狭窄闭塞的腔内治疗应用最多,成功率最高,技术最普及。经皮腔内血管成形术(PTA)和支架在股腘动脉狭窄闭塞治疗方面的应用还处于开发阶段。尽管股浅动脉腔内治疗的中远期通畅率低于手术转流,但其具有微创性和可重复的优势。腘动脉狭窄的治疗应采取谨慎态度。对小腿动脉狭窄闭塞的中远期疗效还缺少多中心前瞻性研究结果,但因其可解决部分患者糖尿病足长期不愈的痛苦,故有一定的临床应用价值。     

Reliability of pressure cuff induced transient limb ischemia in conscious rabbits

Background The protective effects of transient limb ischemia （TLI） induced by several cycles of intermittent pressure cuff inflation and deflation for a period have been widely investigated,however the reliability of this protocol has not been clearly verified.Our study aimed to investigate the reliability of pressure cuff induced TLI in conscious rabbits.Methods Eight New Zealand rabbits were subjected to TLI without anesthesia.TLI consisted of 3 cycles of ischemia and reperfusion induced by inflating the cuff placed on the left lower limb to 200 mmHg for 5 minutes followed by deflating the cuff for 5 minutes.Skin color,pulse oxygen saturation （SpO2）,pulse rate （PR）,plethysmogram waveform （Pleth）,and ultrasound detection of the blood flow in the extremity distal to the ischemic segment were observed to confirm ischemia and reperfusion during TLI.The frequency of severe limb movement during TLI was also recorded to assess the amenability of this protocol in conscious rabbits.Results The skin color of the extremity distal to the ischemic segment changed from bright red to dark purple after inflating the cuff to 200 mmHg,and returned to normal after cuff deflation.Pleth,PR and SpO2 disappeared during ischemia and restored during reperfusion in the monitor.Blood flow of the left posterior tibial artery was completely blocked by a pressure of 200 mmHg during ischemia,and recovered immediately after cuff deflation.The frequency of severe limb movement in supine position was higher than that in prone position （P〈0.05）,but there was no severe limb movement that could result in disturbance to ischemia when the rabbits were placed in prone position.Conclusion Pressure cuff inflating to 200 mmHg for 5 minutes and deflating for 5 minutes is a reliable regimen to induce TLI in conscious rabbits.     

改良下半身停循环联合选择性脑灌注兔模型的建立

目的探讨建立心脏停跳的改良下半身停循环联合选择性脑灌注兔模型的可行性。方法随机选取26只新西兰兔,平均体重3.0 kg,15~20周龄。13只用于建立模型,另13只作为供血兔。经右锁骨下动脉和右心房插管建立体外循环(CPB),左锁骨下动脉置管于主动脉根部,在CPB降温至28℃时灌注St.Thomas液。降至肛温20℃时停循环,行选择性脑灌注60 min。围CPB期于4个时点采集血流动力学指标和检测动脉血气,记录数值。结果 1只动物死于主动脉破裂,其余12只均顺利完成实验。血流动力学和血气指标总体符合CPB的病理生理过程。结论该改良下半身停循环联合选择性脑灌注兔模型安全、稳定,可用于心、脑等器官保护机制的研究。     

兔慢性高眼压模型的建立

目的:建立一种持续时间较久的慢性高眼压动物模型.方法:新西兰白兔10只左眼为对照眼,右眼为模型眼.模型眼前房注入3g/L复方卡波姆溶液制作成慢性高眼压模型,对照眼只作前房穿刺.每日测量眼压;在高眼压模型前和高眼压持续1,2及4wk共4个时间点,检测ERG的b波、Ops波的振幅;高眼压持续4wk后检测视网膜节细胞(retinalganglioncells,RGCs)数目的变化.结果:①模型眼的眼压(4.47±1.41)kPa,明显高于对照眼(2.08±0.25)kPa(t=4.798,P=0.001).②高眼压持续1,2及4wk后,对照眼b波的振幅为(211.49±57.22,207.86±51.89,201.77±56.47)μV,Ops波的振幅为(77.45±24.08,73.61±8.87,79.66±21.94)μV;模型眼b波的振幅为(149.08±20.55,121.12±27.99,81.82±77.66)μV,Ops波的振幅为(50.09±9.77,39.99±8.98,33.12±7.67)μV;二者间b波、Ops波的振幅有非常显著性差异(P值均为0.000),模型眼b波和Ops波的振幅在高眼压前和高眼压持续1,2及4wk时有非常显著性差异(P值均为0.000),并且随高眼压持续时间的延长有进行性降低的趋势(P值分别为0.001,0.000).③慢性高眼压持续4wk后检测RGCs数目对照眼为(302.30±23.99)/10mm和模型眼为(89.20±10.86)/10mm,有非常显著性差异(t=23.685,P=0.000).结论:从眼压、视网膜功能和形态来衡量,兔眼前房注射3g/L复方卡波姆溶液是一种理想的慢性高眼压模型.     

兔耳增生性瘢痕模型的建立

目的建立一种稳定、易复制、又能反映增生性瘢痕变化规律的动物模型.方法通过损伤日本大耳白兔耳内侧皮肤,与损伤后7天去痂;建立起增生性瘢痕的动物模型;进行9个月的大体形态和组织病理观察.结果兔耳损伤创面在经过早期的炎症反应和肉芽组织增生后,逐渐上皮化;在术后30天时,形成了色红质硬,突出皮面的瘢痕;并在术后6个月内持续增生,9个月时仍维持其硬度厚度和颜色.90天的瘢痕组织学显示:组织水肿,淋巴细胞浸润,微血管增生,成纤维细胞大量增生,排列紊乱;胶原纤维增生,排列紊乱,局部有涡状及结状排列;网状纤维增多;弹力纤维缺失.术后6个月和9个月时,胶原束渐粗大,成纤维细胞数减少,炎症反应消失.结论采用本实验的模型复制方法,可以得到稳定,复制成功率高且能基本反应增生性瘢痕增生期律的动物模型.     

远端动脉旁路术治疗重症下肢缺血

[目的]探讨远端动脉旁路术在治疗重症下肢缺血中的作用。[方法]回顾性分析了2003年1月～2007年3月应用远端动脉旁路术治疗的36例重症下肢缺血病人。[结果]36例中33例（91．7％）术后患肢静息痛消失,皮肤温度、颜色明显改善,踝肱指数均值由术前0．12±0．15升为术后0．87±0．21,两者之间差异有统计学意义（P〈0．001）。术后随访31例,随访时间1～3年（平均2年）,术后1、2、3年移植血管的一期累计通畅率分别为85％、72％、70％,二期累计通畅率分别为87％、73％、72％。[结论]远端动脉旁路术是治疗重症下肢缺血,挽救患者肢体的有效方法之一。     

肢体缺血动物模型研究进展

肢体缺血动物模型是进行缺血损伤机制、血管新生等研究的基础,成功制作一种效果确切、重复性强的肢体缺血模型是保证实验研究能够顺利进行的关键。本文对近年来暂时和永久缺血两大类肢体缺血动物模型的适用情况、制作方法及评价指标作一简要综述,以期对今后缺血动物模型的相关实验研究提供一定的线索。