糖尿病对雄性大鼠阴茎海绵体窦压的影响

目的 探讨糖尿病对雄性大鼠阴茎海绵体窦压(ICP)的影响.方法 用BL-410电生理仪检测正常对照(NDM,n=10)组、糖尿病(DM,n=10)组和链脲佐菌素(STZ,n=10)组大鼠阴茎海绵体窦压(ICP),并镜检阴茎组织形态学改变.结果 基础ICP值在NDM组为(8.46±2.25)cmH2O,DM组(4.57±0.89)cmH2O,STZ组(8.75±1.90)cmH2O,其中DM组与NDM/STZ组间差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.01);电刺激诱导ICP值NDM组为(49.30±3.67)cmH2O,DM组为10.46±1.55 cmH2O,STZ组为(47.72±4.42)cmH2O,其中DM组与NDM/STZ组间具有显著性差异(P<0.01,P<0.01).基础ICP值和电刺激诱导ICP值在STZ组与NDM组间均无显著性差异(P>0.05).HE染色结果显示,DM组较NDM/STZ组平滑肌细胞数量减少,纤维增多,学管壁增厚.结论 糖尿病可严重影响大鼠的大鼠阴茎海绵体窦压,其机制可能与阴茎组织结构的病理学改变有关.     

GDNF基因修饰的雪旺细胞对大鼠坐骨神经缺损的修复作用

目的应用携带胶质细胞源性神经营养因子基因的逆转录病毒载体质粒(pLXSN-GDNF)对体外培养的雪旺细胞进行基因修饰,并结合细胞外基质凝胶及生物可降解聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)管构建神经移植复合体,用于大鼠坐骨神经缺损的修复,同时对其促轴突再生及神经元保护作用予以检测评价.方法 40只成年Wistar大鼠随机分为4组:A组(n=10) 细胞外基质凝胶-PLGA管桥接组;B组(n=10)雪旺细胞-细胞外基质凝胶-PLGA管桥接组;C组(n=10) GDNF基因修饰的雪旺细胞-细胞外基质凝胶-PLGA管桥接组;D组(n=10)自体神经桥接组.损伤各组12周时应用神经电生理及甲苯胺蓝染色和透射电镜观测神经再生情况,辣根过氧化物酶神经逆行示踪技术用于脊髓前角运动神经元再生评价.结果 12周时再生神经运动传导速度检测、甲苯胺蓝染色轴突形态计量学分析、透射电镜超微结构观察以及脊髓前角运动神经元再生评价结果提示:C组优于A、B组,而与D组相比无明显差异.结论雪旺细胞的转基因处理可能弥补单纯细胞移植神经营养因子含量的不足,而可能达到与自体神经移植相似的效果.     

电生理检测在勃起功能障碍鉴别诊断中的价值

目的:探讨电生理检测在勃起功能障碍鉴别诊断中的价值.方法:对30 例神经性勃起功能障碍(ED)(神经组)和心理性ED(心因组)患者进行球海绵体肌反射(BCR),坐骨海绵体肌反射(ICR),阴茎背神经体感诱发电位(SSEP)的潜伏期、波幅的检测,并与正常对照组(对照组)进行比较.结果:三组BCR,ICR,SSEP潜伏期比较差异存在显著性(P＜0.05),神经组较心因组、对照组BCR、ICR潜伏期明显延长(P＜0.05).结论:BCR,ICR,SSEP对鉴别神经性ED具有一定的诊断价值.     

Urodynamic examination in the patients with benign prostatic hyperplasia combined with cerebral infarction

目的 了解良性前列腺增生伴脑梗死患者的排尿情况,指导临床治疗.方法 对90例良性前列腺增生伴脑梗死患者行尿流动力学检查,记录最大尿流率(Qmax)、残余尿量(PVR)、初尿意膀胱容量(FBS)、最大测压膀胱容量(MCBC)、最大逼尿肌压(MDP)、膀胱顺应性(BC).将患者资料按脑梗死病程(病程＜1月为急性期、1月≤病程≤1年为恢复期组、病程＞1年为后遗症期组)分为急性期组、恢复期组、后遗症期组共3组.对检查结果进行多因素分析.结果 Qmax(ml/s)表现为急性期(7.11±1.76)小于恢复期(10.77±1.24)和后遗症期(10.33±1.61)(P＜0.01);PVR(ml)表现为急性期(361.33±43.10)大于后遗症期(129.62±30.82)和恢复期(83.31±14.95)(P＜0.01);FBS(ml)表现为急性期(347.33±69.95)大于恢复期(132.27±13.16)和后遗症期(211.25±26.81)(P＜0.01);MCBC(ml)表现为急性期(696.00±42.39)大于后遗症期(537.92±62.74)和恢复期(233.38±38.30)(P＜0.01);MDP(cmH2O)表现为急性期(16.11±4.11)小于恢复期(55.18±14.40)及后遗症期(50.85±15.27)(P＜0.01);BC(ml/cmH2O)表现为恢复期(11.85±1.21)小于急性期(52.22±2.64)及后遗症期(39.75±1.14)(P＜0.01).结论 脑梗死急性期对膀胱尿道功能影响最大,引起逼尿肌收缩无力;恢复期对膀胱尿道功能亦有较大影响,引起逼尿肌反射亢进,呈不稳定膀胱;后遗症期对膀胱尿道功能影响较小.     

阴道哑铃联合生物反馈电刺激对术后患者盆底功能时影响

目的 观察阴道哑铃联合生物反馈电刺激对术后患者盆底功能恢复的影响.方法 选取行子宫全切术的患者80例,将患者随机均分为对照组与观察组(n=40).对照组给予生物反馈电刺激治疗,观察组给予阴道哑铃训练联合生物反馈电刺激治疗,观察治疗前与治疗后3个月时盆底肌肉肌力情况、盆底肌力静息压、盆底收缩压变化.结果 对照组治疗前和治疗后分别有32.50％、65.00％的患者为≥3级肌力,观察组治疗前和治疗后分别有37.50％、85.00％的患者为≥3级肌力,2组盆底肌肉治疗后≥3级肌力所占比例均较治疗前显著增高(P＜0.01),观察组治疗后≥3级肌力所占比例显著高于对照组(P＜0.05);对照组治疗前盆底肌肉静息压、盆底收缩压分别为(33.21±6.44)cmH2O、(33.00±9.45)cmH2O,治疗后分别为(38.45±9.40)cmH2O、(44.35±10.11)cmH2O,观察组治疗前分别为(34.17±6.32)cmH2O、(33.31±9.56) cmH2O,治疗后分别为(44.50±10.11)cmH2O、(54.76±11.45)cmH2O,2组盆底肌肉静息压、盆底收缩压治疗后均较治疗前显著升高(P＜0.01),治疗后肌力升高观察组较对照组更为显著(P＜0.01).结论 阴道哑铃训练联合生物反馈电刺激可明显促进子宫全切术后患者盆底功能恢复.     

神经源性膀胱M2受体mRNA的变化

目的 研究犬脊髓损伤后致神经源性膀胱逼尿肌中毒蕈碱样胆碱受体亚型(M2)受体的变化,探讨M2受体在犬神经源性膀胱逼尿肌的意义. 方法 建立动物模型,设骶上型、骶下型神经源性膀胱组和对照组,RT-PCR法半定量检测膀胱体部逼尿肌M2受体mRNA. 结果 骶上型组膀胱容量(281.0±26.2)mL,逼尿肌压力(58.5±5.7)cmH2O,膀胱顺应性(4.8±1.1)mL/cmH2O;骶下型组容量(513.2±44.4)mL,逼尿肌压力(40.3±4.1)cmH2O,顺应性(12.2±2.1)mL/cmH2O,2组比较有统计学意义(P＜0.05).对照组逼尿肌压力(43.0±3.9)与骶下组比较无统计学意义.对照组膀胱逼尿肌有M2受体mRNA表达,骶上型组和骶下型组M2受体mRNA较对照组增加(P＜0.05),骶上型组明显高于骶下型组(P＜0.05). 结论 脊髓损伤后神经源性膀胱逼尿肌M2受体增多,骶上型M2受体增多更明显,M2受体可能直接参与骶上型神经源性膀胱逼尿肌无抑制性收缩.     

神经干细胞移植对脑挫伤大鼠神经功能恢复神经元存活和轴突再生的影响

目的 观察神经干细胞(NSCs)移植对脑挫伤大鼠神经功能恢复影响,并探讨其机制.方法 24只SD大鼠以投币法分为3组:假手术组、手术组和NSCs移植组.采用自由落体致大鼠皮质运动区脑损伤模型,将培养纯化并鉴定的NSCs于术后当天移植入损伤位点周围;术后0d、3d、7d、14d行神经功能缺失(NSS)评分,观察动物运动和平衡功能缺损与恢复情况;14d时取脑组织用免疫荧光技术检测hochest标记的移植NSCs在体内存活、迁移;用神经元核蛋白(NeuN)、生长相关蛋白(GAP-43)抗体检测并计数宿主神经元存活和局部轴突再生.结果 与假手术组比较,脑外伤组大鼠脑挫伤后即出现不同程度抽搐,瘫痪,平衡功能缺失.神经功能缺损评分较假手术组明显升高,并随时间推移有所降低.而NSC移植组的NSS评分至第7天后与单纯手术组比较有明显减少[(4.38±0.74)分,(5.50±1.07)分,P＜0.01].Ho-chest标记的移植NSCs能在宿主脑组织存活,并向四周迁移.免疫组化染色显示宿主NeuN阳性神经元[(51.46±3.303)个,(42.83±5.401)个,P＜0.01]和GAP-43阳性纤维数量[(13.3±1.7)个,(8.7±1.1)个,P＜0.01]在NSC移植组明显增多.结论 NSCs移植能在挫伤脑组织存活、迁移,并促进宿主神经元存活、局部轴突再生和改善脑挫伤大鼠神经功能.     

建立神经性勃起功能障碍大鼠模型的实验研究

目的 明确大鼠海绵体神经(CN)的解剖并且建立海绵体神经损伤性勃起功能障碍(ED)的大鼠模型.方法 在连续变焦解剖显微镜下了解CN的解剖结构并通过电刺激实验证实,然后将30只雄性SD大鼠分为假手术组、双侧海绵体神经夹伤组(双夹组)、双侧海绵体神经切断组(双切组).术后2周电刺激CN并测量阴茎海绵体内压与平均颈动脉压比值(ICP/MAP)并对阴茎海绵体组织行Masson染色,观察平滑肌纤维与胶原纤维的分布,证实造模是否成功.结果 大鼠CN位于背侧前列腺叶的后外侧,盆神经节的下方.术后2周电刺激CN,双夹组与双切组均丧失勃起功能,ICP/MAP变化无统计学差异,对照组大鼠勃起功能正常,ICP/MAP变化具有统计学差异(P<0.05),Masson染色显示双夹组与双切组平滑肌纤维减少,胶原纤维增多,与假手术组相比有统计学差异(P<0.05).结论 大鼠海绵体神经分布与人体有高度相似性,是ED研究的理想动物,海绵体神经损伤后电刺激CN并测定ICP/MAP是建立神经性ED的可靠方法.     

心房颤动犬心房肌细胞骨架重构及贝那普利的干预作用

目的 观察快速心房起搏心房颤动(房颤)犬心房肌细胞骨架重构及贝那普利的干预作用.方法 采用慢件快速左心房起搏建立房颤犬模型,分为假手术组(6只)、房颤组(7只)、干预组(6只).房颤组应用固定频率型起搏器,600次/min起搏6周;干预组于起搏前1周开始每日服贝那普利(1 mg/kg).实验结束时取材,HE染色测定心房肌细胞直径;Masson染色进行心房肌纤维化定量分析;免疫组织化学法检测结蛋白心脏原位蛋白分布及表达;RT-PCR方法测定心房肌组织β-微管蛋白、结蛋白mRNA表达水平.结果 假手术组、房颤组、干预组左心房肌细胞直径分别为(19.6 ±2.9)μm、(27.9 ±3.8)μm、(25.1 ±3.4)μm,右心房分别为(18.7 ±2.6)μm、(26.8 ±3.2)μm、(25.2 ±3.5)μm,房颤组、干预组左、右心房肌细胞直径均明显长于假手术组(均P＜0.01);左心房胶原容积分数(CVF)分别为(9.2±0.9)%、(16.9 ±1.1)%、(11.3 ±0.8)%,右心房CVF分别为(9.3±0.8)%、(15.7 ±2.3)%、(10.9 ±0.8)%,房颤组左、右心房CVF均高于假手术组(均P＜0.01),干预组均明显低于房颤组(均P＜O.01).免疫组化示房颤组结蛋自在细胞质内表达增多,而闰盘处表达不明显,房颤组左、右心房肌结蛋白吸光度值均高于假手术组(均P＜0.01),干预组均明显低于房颤组(均P＜0.01).房颤组左、右心房肌结蛋白、微管蛋白mRNA表达均高于假手术组(均P＜0.01);干预组房颤组(均P＜0.01).结论 快速心房起搏房颤犬心房肌细胞骨架发生重构且贝那普利对其有干预作用.     

增龄对Wistar大鼠非脂肪组织脂肪异位沉积的影响

目的 观察增龄对Wistar大鼠非脂肪组织脂肪异位沉积的影响.方法 将Wistar大鼠30只分为青年组(4月龄组15只)和老年组(24月龄组15只),给予正常饮食饲养60d后观察体重及腹腔内脂肪重量变化,检测血生化指标,行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验测定INS敏感性.结果 老年组大鼠体重(730.9±9.57)g明显高于青年组大鼠(495.6±7.53)g(P＜0.01),肝脏、肾周和附睾脂肪重量较青年组明显增加(P＜0.01),TG、TC、FFA明显高于青年组大鼠(P＜0.05),INS(2.37±0.06)ng/ml明显高于青年组INS(0.59±0.32)ng/ml(P＜0.01);而两组血糖无明显变化.高胰岛素-正葡萄糖钳夹结果显示青年组大鼠葡萄糖输注速率为(26.07±2.80)mg/(kg·min),老年组为(10.79±0.7 1)mg/(kg·min)(P＜0.05).HOMA-IR在青年组和老年组分别为(3.07±0.75)和(13.15±1.56)(P＜0.05).油红O染色结果显示老年组大鼠肝脏、肌肉脂滴较青年组比较明显增多,两组胰腺镜下均未见脂滴.老年组肝脏脂肪染色灰度值(116.60±4.56),青年组为(175.48±3.02)(P＜0.05).老年组大鼠肌肉染色灰度值(121.70±4.60),青年组为(150.65±3.60)(P＜0.05).结论 老龄大鼠肝脏、肌肉脂肪沉积增加,存在一定的胰岛素抵抗.     

妊娠肝内胆汁淤积症患者胎盘组织HLA-G蛋白表达 及其对外周血Th1/Th2细胞因子的影响

目的：探讨人类白细胞抗原G（HLA-G）和Th1/Th2细胞因子在妊娠肝内胆汁淤积症（ICP）中的表达变化及其与ICP发病的相关性。方法：选取2007年12月至2008年3月在中南大学湘雅二医院确诊为ICP,行剖宫产终止妊娠的初产妇26例为ICP组,同期在该院行剖宫产的正常初产妇22例作为对照（NP）组。用免疫组织化学法检测孕妇胎盘组织HLA-G蛋白的表达,同时用酶联免疫吸附法（ELISA）检测孕妇外周血中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-4（IL-4）水平,并测定血清中总胆汁酸（TBA）水平。结果：ICP组孕妇外周血中TBA浓度为（27.05±6.08） μmol/L,明显高于NP组（4.35±2.68） μmol/L（P＜0.01）;ICP组胎盘组织绒毛外滋养层细胞（EVT）中HLA-G蛋白的表达程度（弱阳性61.54％,阳性30.77％,强阳性7.7％）,明显低于NP组（弱阳性13.64％,阳性18.19％,强阳性68.19％）（P＜0.01）;ICP组胎盘组织HLA-G蛋白表达的平均光密度（MOD）值52.91±7.19,明显低于NP组69.26±7.72（P＜0.01）;ICP组中TNF-α水平（101.31±19.30） pg/mL,明显高于NP组（54.51±23.72） pg/mL（P＜0.01）;ICP组IL-4水平（22.16±6.55） pg/mL,明显低于NP组（31.69±8.25） pg/mL（P＜0.01）;ICP组TNF-α/ IL-4为（4.52±1.91）明显高于NP组（1.72±0.61）（P＜0.01）;ICP组中HLA-G表达的 MOD值与TNF-α呈负相关（r=-0.98,P＜0.01）,与IL-4及TNF-α/ IL-4无明显相关性（P＞0.05）;ICP组中TBA与TNF-α呈正相关（r=0.99,P＜0.01）,与HLA-G 表达的MOD值呈负相关（r=-1.00,P＜0.01）,与IL-4及TNF-α/ IL-4无明显相关性（P＞0.05）。结论：ICP患者外周血存在Th1/Th2细胞因子失衡,向Th1偏移的现象;其胎盘组织中HLA-G的表达下降,外周血中Th1型细胞因子增多,可能是ICP肝脏损害的原因之一。     

肺牵张指数指导急性呼吸窘迫综合征最佳呼气末正压的选择

目的 研究以不同的肺牵张指数指导急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者呼气末正压(PEEP)的选择.方法 14例ARDS患者实施肺复张后容量控制通气,用回归法求得方程P=a×timeb+c,b为肺牵张指数.调整PEEP使b<1(0.61(1.11时PEEP分别为(8.3±1.5)cm H2O、(15.0±1.9)cm H2O和(18.4±1.9)cm H2O,差异有统计学意义(P<0.001).b=1和b>1时的PaP2/FiO2明显高于复张前.与b=1时相比,b>1时的肺静态顺应性显著降低(P<0.05).h=1和b>1的复张容积较b<1增大.结论 充分复张后b=1时患者氧合、顺应性、肺复张容积明显改善,可指导ARDS患者最佳PEEP的选择.     

转化生长因子、碱性成纤维细胞生长因子与大鼠膀胱出口梗阻后逼尿肌收缩功能障碍的关系

目的 探讨转化生长因子β1(TGFβ1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与大鼠膀胱出口梗阻(BOO)后逼尿肌收缩功能障碍的关系.方法 建立Wistar大鼠BOO模型(BOO 2周组11只;BOO 6周组10只),假手术组(8只)作为对照,测定离体逼尿肌肌条M受体激动剂刺激下收缩力,RT-PCR方法测定逼尿肌中TGFB1 mRNA、bFGF mRNA的表达,ELISA测定尿液中TGFβ1、bFGF 的水平.结果 在1×10-4、1×10-3 mmo/L氯化氨基甲酰胆碱(Carbachol)浓度下BOO 2周组的最大逼尿肌收缩力[(0.96±0.11)、(1.98±0.21)g]大于对照组[(0.85±0.18)、(1.82 ±0.19)g,均P＜0.05];大鼠在1×10-5、1×10-4、1×10-3和1 × 10-2 mmol/L Carbachol浓度下BOO 6周组的最大逼尿肌收缩力[(0.19 ±0.02)、(0.65 ±0.06)、(1.12 ±0.08)和(1.40 ±0.19)g]均小于BOO 2周组[(0.24±0.03)、(0.96 ±0.11)、(1.98 ±0.21)和(2.16 ±0.21)g,均P＜0.05]和对照组[(0.23 ±0.04)、(0.85 ±0.18)、(1.82 ±0.19)和(2.12 ±0.26)g,均P＜0.05].TGFβ1 mRNA在对照组、BOO 2周组、BOO 6周组逼尿肌的表达分别为0.32 ±0.01、0.34 ±0.10和0.72 ±0.21,后两组之间差异有统计学意义(P＜0.01);bFGF mRNA表达分别为0.10±0.05、0.21±0.07和0.38 ± 0.13,组间两两比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).离体逼尿肌收缩力与其TGFβ1 mRNA、bFGF mRNA表达水平呈负相关(均P＜0.05).BOO 6周组尿中TGFβ1表达[(606±216)μg/mol肌酐]明显高于BOO 2周组[(131 ±49)μg/mol肌酐]和对照组[(107 ±22)μg/mol肌酐,均P＜0.05].结论 逼尿肌bFGF mRNA表达随BOO进展持续升高,TGFβ1 mRNA在失代偿阶段表达才明显升高;尿液TGFβ1在大鼠BOO 6周时呈强表达,有可能成为预测BOO后逼尿肌收缩功能的指标.     

载脂蛋白E拟肽COG1410对蛛网膜下腔出血后自噬和凋亡的影响

目的 研究新一代载脂蛋白(apolipoprotein E,apoE)拟肽COG1410的应用对蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后早期脑损伤(early brain injury,EBI)期间大脑自噬及凋亡的影响.方法 选用颈内动脉穿刺法建立小鼠SAH模型,首先观察EBI期间伤侧大脑半球自噬、凋亡及相关信号蛋白的表达变化,然后针对自噬水平最活跃的时间点进行COG1410给药,采取Garcia评分评价SAH及给药后小鼠的神经功能变化,利用Western blot测定自噬、凋亡及相关信号分子蛋白的表达量,并使用免疫荧光染色观察皮层神经元的凋亡变化情况.结果 ①在SAH后EBI期间,与Sham组相比,伤侧大脑半球的自噬水平在SAH后6h开始增加(P＜0.05),并在24 h达到高峰(P＜0.01),随后逐渐下降,信号分子p-GSK-3β水平也有类似的变化趋势;给予小鼠COG1410后,SAH后24 h的大脑自噬活动被进一步增强(P＜0.05).②在SAH后的EBI期间,伤侧大脑半球整体凋亡水平变化并不完全和自噬及p-GSK-3β水平变化同步,其在EBI后期仍保持相对高值,但有减弱的趋势;给予COG1410后,伤侧大脑半球和皮层神经元凋亡水平均被下调(P＜0.05).③与Sham组(16.50±1.05)比较,SAH组的Garcia评分(11.17±1.83)明显降低(P＜0.01),COG1410的干预能显著改善SAH组的Garcia评分(15.17 ±0.75)(P ＜0.01),但COG1410的干预对SAH分级影响并不大.结论 COG1410的应用可能通过磷酸化GSK-3β增强SAH后EBI期间大脑的自噬活动,减弱神经元的凋亡活动,并改善模型小鼠的神经功能.     

齐拉西酮对脂多糖损伤海马神经干细胞的保护作用

目的 探讨齐拉西酮对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）损伤后海马神经干细胞（neural stem cells,NSCs）活性的作用及其凋亡的影响.方法 建立体外大鼠海马NSCs的LPS损伤细胞模型,分为对照组（sham组）、LPS组、LPS＋齐拉西酮组（包括1μmol/L、5μmol/L、10 μmol/L和20 μmol/L等4个不同剂量组）,药物作用48 h或72 h后,采用WST-1试剂检测细胞活性,乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）试剂盒检测乳酸脱氢酶释放情况,并采用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 （1）细胞活力：作用48 h后,与对照组（吸光度值0.380±0.029）相比,LPS组（吸光度值0.265±0.047）细胞活力显著下降（P＜0.01）,而LPS＋齐拉西酮5μmol/L组（吸光度值0.316±0.008）组与LPS＋齐拉西酮10 μmol/L组（吸光度值0.321±0.006）则显著提升其活力（与LPS相比较,均P＜0.05）.作用72 h后的细胞活力结果与48 h相似,LPS组细胞活力显著低于对照组（P＜0.01）,而LPS＋齐拉西酮5μmol/L组与LPS＋齐拉西酮10μmol/L组则缓解了LPS对其活力的抑制.（2）LDH检测结果显示,作用48 h或72 h后,LPS组LDH的释放水平显著高于sham组（均P＜0.01）,而LPS＋齐拉西酮5μmol/L组与LPS＋齐拉西酮10 μmol/L组的LDH释放水平均显著低于LPS组（均P＜0.01）.（3）流式细胞术检测凋亡的结果显示,作用48 h后,与对照组[（9.15±1.54）％]相比,LPS组[（22.67±2.15）％]凋亡百分率显著上升（P＜0.01）,而LPS＋齐拉西酮5μmol/L组[（18.45±3.84）％]组与LPS＋齐拉西酮10 μmol/L组[（17.87±2.29）％]则显著抑制其凋亡（与LPS相比较,均P＜0.05）.作用72 h后,LPS组的凋亡百分率[（15.70±2.97）％]仍然显著高于对照组[（8.45±1.04）％],而LPS＋齐拉西酮10 μmol/L组[（10.52±1.42）％]则显著低于LPS组（P＜0.05）.结论 适当浓度的齐拉西酮能抑制LPS导致的海马NSCs损伤,这一作用可能是其发挥神经保护效应的细胞学基础之一.     

脑深部电刺激双侧伏核对吗啡成瘾大鼠复吸行为的影响

目的 研究脑深部电刺激双侧伏核核心部对吗啡成瘾大鼠复吸行为的影响.方法 手术前筛选大鼠,筛选后大鼠随机分为空白组、空白电刺激组、吗啡组、吗啡假手术组、吗啡电刺激组.电极植入7d后采用隔日递增原则皮下注射吗啡(5mg/kg起始,每次递增5mg/kg,至20mg/kg稳定)建立大鼠吗啡成瘾模型.通过改进后的DBS电路进行电刺激,刺激参数为130Hz、150A、60s、1 h/d、14d.干预前后变化由条件位置偏爱实验检测.复吸行为采用小剂量吗啡(3 mg/kg)诱导,24h后再次检测CPP.数据统计采用two-way ANOVA,组间比较用Bonferroni方法.结果 ①完成CPP训练后,吗啡组、吗啡假手术组、吗啡电刺激组三个组的CPP评分为(155.87±20.45)s、(107.33 ± 18.10)s、(135.45±22.09)s,与前两组均有明显差异[与空白组(-70.34±15.40)s比较t值和P值分别为:t=9.45,P＜0.01;t=6.94,P＜0.01;t=8.04,P＜0.01].②7天DBS后,吗啡电刺激组大鼠CPP评分与吗啡组(t=4.21,P＜0.01)、吗啡假手术组(t=1.10,P＜0.05)差异明显.14d DBS后差异更加明显(t=5.15,P＜0.01;t=3.92,P＜0.01).③给予小剂量吗啡诱导复吸后,吗啡电刺激组CPP评分小于吗啡组(t=4.04,P＜0.01)和吗啡假手术组(t=4.13,P＜0.01)组,且与空白组(-53.50 ± 11.10)s(t=2.60,P＞0.05)差异无显著性,但与空白电刺激组(t=3.70,P＜0.01)仍差异有显著性.结论 DBS双侧伏核核心部不仅可以干预吗啡成瘾大鼠的CPP行为,而且能抑制小剂量吗啡诱导的复吸行为.

Abstract：

Objective To investigate the influence on the behavior of withdrawal and relapse after deep brain stimulation of bilateral nucleus accumbens in morphine-dependent rats. Methods The rats with a strong unconditioned preference were discarded in preconditioning test, the selected rats were distributed into five groups randomly. After operation,morphine hydrochloride was injected subcutaneously into SD rats for 12 days (once every day,initial 5 mg/kg,increasing by 5 mg/kg per time,stable in 20 mg/kg ). A modified electrical circuit was used to procedure the DBS,the parameter was 130 Hz,150 A,60 s,l h/d,14 d. CPP test was used to exam the effect of DBS. A minor morphine dose (3 mg/kg) was injected to induce the behavior of relapse, and CPP was tested again after 24 h. Two-way ANOVA was performed on the data with Bonferroni posttest. Result ①After CPP training,CPP score of group morphine, morphine + sham and morphine + DBS was ( 155. 87 ± 20. 45 ) s, (107.33 ± 18.10)s,(135.45 ±22.09)s,and had significant difference with group of control( ( -70.34 ± 15.40) s)(t = 9.45,P＜0.01; t = 6.94,P＜0.01;t = 8.04,P＜0.01).②After 7 days' DBS,the CPP score in group of morphine + DBS reduced significantly compared to group of morphine( t = 4.21, P＜0.01) and morphine + sham( t=1.10, P＜0.05).0n the 14th day,there was more pronounced reduction ( t = 5. 15, P＜0.01; t = 3.92, P＜ 0.01). ③ 24 hours after the minor morphine dose was injected,the CPP score in morphine + DBS didn't increase significantly, and had significant difference with group of morphine ( t = 4.04, P＜0.01) and morphine + sham ( t= 4. 13, P＜0.01). Conclusion DBS bilateral nucleus accumbens in morphine-dependent rats can interfere the behavior of morphine-induced CPP and relapse.     

PC12细胞应激损伤中能量限制的效应及SIRT3的表达

目的 研究H2O2诱导的PC12细胞氧化应激损伤中,能量限制(CR)及SIRT3参与的调控效应.方法 实验分4组:H2O2组,H2O2+CR组,CR组和正常对照组;MTT法检测不同浓度H2O2作用下CR对细胞生存率的影响;TUNEL染色法检测过氧化氢作用后CR对细胞的凋亡的影响;免疫荧光检测PC12细胞中SIRT3的表达定位;RT-PCR及Western印迹检测SIRT3、Caspase-3的表达变化.结果 60μmol/L H2O2作用6 h后,H2O2组细胞生存率(74.01±2.21)%可维持在70%以上,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);120μmol/L H2O2作用下,H2O2组的细胞活力显著下降(38.22±3.34)%,后续研究选取60μmol/L H2O2浓度作为应激源;60μmol/L H2O2作用6 h后H2O2组细胞生存率(74.01±2.21)%与CR+H2O2组(97.26±1.92)%间比较差异有统计学意义(P＜0.05).TUNEL凋亡检测H2O2+CR组凋亡率较H2O2组显著降低.免疫荧光双染色证实PC12细胞中SIRT3为一种线粒体蛋白.Western印迹显示与正常对照组(5256±144)比较,CR组中SIRT3表达升高(6857±157),差异有统计学意义(P＜0.05)、H2O2组中表达降低(3786±160),差异有统计学意义(P＜0.05).与H2O2组(3786±160)比较,CR+H2O2组中SIRT3表达上升(5056±121),差异有统计学意义(P＜0.05).与正常对照组比较(5342±420),H2O2组中Caspase-3表达升高(8499±426),差异有统计学意义(P＜0.001).CR+H2O2组(5750±438)中Caspase-3表达较H2O2组表达下降(8499±426),差异有统计学意义(P＜0.001).RT-PCR显示与正常对照组(6204±134)比较,CR组(7214±148)中SIRT3表达升高,差异有统计学意义(P＜0.05)、H2O2组中表达降低(4807±143),差异有统计学意义(P＜0.05).与H2O2组(4807±143)比较,CR+H2O2组中SIRT3表达上升(6195±166),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PC12细胞中,CR具有抗氧化应激损伤及凋亡的效应;CR可上调PC12细胞中SIRT3的表达,在H2O2诱导的PC12应激损伤中CR-SIRT3的调控具有保护效应,SIRT3是否具有延缓神经元衰老作用值得进一步研究.

Abstract：

Objective To study the regulation effects of CR (caloric restriction) and SIRT3 in the H2O2-induced oxidative stress injury of PC12 cell. Methods The cells were divided into four groups:H2O2, H2O2+CR, CR and control (high glucose). For control and H2O2 group, cells were cultured in DMEM containing 0.45% glucose; for group in CR condition, cells were treated with the medium containing 0.1% glucose. For groups with H2O2, the H2O2 was diluted in EMEM medium to obtain the final concentration containing 60 μmol/L. Viability of PC12 cells were measured by MTT assay. The medium was refreshed with different concentration of H2O2 (from 10 to 120 μmol/L). The absorbance of the samples was measured at 492 nm using a microtiter plate reader. We detected TUNEL-positive cells using the In Situ Cell Apoptosis Detection kit pretreated with CR and H2O2. Immunofluorescence double staining detected the expression and localization of SIRT3. RT-PCR and Western-blot mehtods detected the expression of SIRT3,Caspase-3. Results After pretreating with 60 μmol/L H2O2 for 6 h, the viability of PC12 cells in H2O2 group (74.01±2.21)% retained above 70%, and have statistical significance contrasted with control group (P＜0.05); After pretreating with 120μmol/L H2O2, the viability of PC12 cells declined significantly (38.22±3.34)%. So 60μmol/L H2O2 is our experiment concentration . The viability of H2O2 group (74.01±2.21)% was much lower than CR + H2O2 group (97.26±1.92)% (P＜0.05). After pretreating with H2O2, TUNEL staining showed the apoptosis cells of CR+H2O2 group decreased significantly contrasted with H2O2 group. The immunofluorescence double staining results showed that SIRT3was a mitochondria protein. Western-blot showed the expression of SIRT3 in CR group (6857±157) (P＜0.05) increased and decreased in H2O2 group (3786±160) (P＜0.05) contrasted with control group (5256±143). The expression of SIRT3 in CR + H2O2 group(5056±121)(P＜0.05)increased contrasted with H2O2 group(3786±160). We also detected that Caspase-3 in H2O2 group(8499±426)(P＜0.001 )was much higher than control group than (5342±420), but in the CR + H2O2 group (5750±438 ) theexpression of Caspase-3 was much lower than H2O2 group(8499±426) (P＜0.001). RT-PCR also showed that the expression of SIRT3 in CR group (7214±148) increased and decreased in H2O2 group (4807±143 ) (P＜0.05) contrasted with control group (6204 ± 134 ). The expression of SIRT3 in CR + H2O2 group (6195 ± 166) increased contrasted with H2O2 group (4807 ± 143 ) ( P＜0.05). Conclusion CR causes anti-oxidative injury and has apoptotic effects in PC12 cell. It up-regulates the expression of SIRT3 and the effects of CR-SIRT3 can prevent PC12 cell from H2O2-induced apoptosis. And SIRT3 may be a novel molecule of regulating target in the delay of neuronal senescence.     

富血小板血浆对创伤性颅脑损伤大鼠神经功能的保护作用

目的：探讨富血小板血浆（PRP）对创伤性颅脑损伤（TBI）大鼠神经功能的保护作用,阐明其作用机制。方法：60只SD大鼠随机分为假手术组（仅开放骨窗）、TBI模型组（TBI组）和TBI模型并PRP处理组（PRP组）,每组20只。PRP组大鼠于术后当天、第2和6天血管内注射PRP,TBI组和假手术组大鼠注射生理盐水。3组大鼠分别于术后第1、3和7天时行改良大鼠神经功能缺损（mNSS）评分;每组各取10只大鼠处死并取脑,制作切片行组织学观察,剩余大鼠行Morris水迷宫实验。结果：与假手术组比较,TBI组和PRP组大鼠mNSS评分明显升高（P<0.05）;与TBI组比较,PRP组大鼠mNSS评分明显降低（P<0.05）;与TBI组比较,PRP组大鼠脑组织损伤体积明显减小（P<0.05）;Nissl染色,PRP组大鼠脑损伤区细胞排列相对整齐,新生毛细血管多于TBI组;免疫组织化学染色,与假手术组比较,TBI组大鼠脑损伤区域有较多胶质纤维酸性蛋白阳性（GFAP⁺）细胞,但神经元核抗原阳性（neuN⁺）细胞少于PRP组（P<0.05）。Morris水迷宫实验,PRP组大鼠在各象限逃避潜伏期均低于TBI组（P<0.05）,穿越平台次数及第三象限游泳时间高于TBI组（P<0.05）。结论：PRP对TBI大鼠可发挥神经保护作用。     

淫羊藿黄酮对阿尔茨海默病小鼠模型学习记忆能力的影响

目的 观察淫羊藿黄酮对β-淀粉样肽(Aβ)拟阿尔茨海默病(AD)模型小鼠学习记忆能力的影响.方法 将ICR小鼠随机分为正常组、假手术组、模型组,淫羊藿黄酮小剂量(0.03 g/kg)、中剂量(0.1 g/kg)、大剂量(0.3 g/kg)组.灌胃给药14d后,行右侧脑室注射Aβ1-40造模,继续给药7 d,进行Morris水迷宫、避暗实验和自主活动实验,观察小鼠学习记忆能力.结果 Aβ1-40侧脑室注射模型小鼠出现学习记忆障碍.淫羊藿黄酮中、大剂量组在Moms水迷宫实验中逃避潜伏期[(40.12±4.15)s.(34.99±5.49)s]和游泳距离[(648.36±88.42)cm,(781.57±104.41)cm]明显缩短.与模型组逃避潜伏期(65.45±5.15)s,游泳距离(1142.66±96.80)em比较,差异具有显著性(P<0.01),在避暗实验中可延长模型小鼠的潜伏期[(255.40±11.00)s,(257.46±19.50)s]并降低其错误次数[(0.80±0.14)次,(0.77±0.17)次],与模型组潜伏期[(196.27±25.47)s],错误次数[(1.47±0.31)次]比较,差异有显著性(P<0.05).在自主活动实验中,各组之间差异无显著性(P>0.05).结论 淫羊藿黄酮能明显提高Aβ脑室注射致AD小鼠模型的学习记忆能力.