醒脑静对老年急性脑出血患者Th9细胞及IL-9水平的影响

目的 探讨醒脑静对老年急性脑出血(ICH)患者外周血中辅助性T细胞-9(Th9)及血清中白细胞介素-9(IL-9)水平的影响.方法 纳入202例该院门诊及住院的老年ICH患者,随机分为两组,其中常规治疗组100例予常规治疗,醒脑静组102例予醒脑静加常规治疗,另取100例性别及年龄匹配的健康检验者作为对照.使用流式细胞术检测外周血Th9比例,使用免疫酶联吸附(ELISA)法检测血清IL-9水平；采用美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)、蒙特利尔认知评估量表(Moca)、日常生活能力评定量表(ADL)对疗效进行评定.结果 治疗前:ICH患者外周血中Th9比例及IL-9水平均显著高于对照组(均P＜0.05)；治疗后:醒脑静组外周血Th9比例及IL-9水平下降较常规治疗组明显[Th9:(0.42±0.13)％ vs(0.54 ±0.12)％；IL-9:(0.51±0.09) pg/ml vs (0.64±0.12) pg/ml,P＜0.05]；醒脑静组对神经功能缺损的改善程度较常规治疗组更明显(P＜0.05).结论 Th9可能参与了ICH发生、发展,醒脑静可能通过减轻细胞因子介导的炎性反应对脑组织具有保护作用,从而改善ICH患者的预后.     

类风湿关节炎CD4+T细胞白细胞介素-9白细胞介素-17干扰素-γ的表达及意义

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血CD4+T细胞胞内白细胞介素(IL)-9、IL-17、干扰素-y的表达及意义.方法 取RA患者活动期25例、稳定期25例和健康人20名外周血单个核细胞(PBMC),免疫磁珠阴选获得CD4+T细胞,通过流式细胞术(FCM)检测CD4+T细胞内IL-9、IL-17、干扰素-γ水平;应用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-9、IL-17、孤核受体(RORγt)、干扰素-γ mRNA水平.采用方差分析法进行组间比较,采用Pearson相关分析法进行相关性分析.结果 免疫磁珠阴选CD4+T细胞纯度达90％以上.RA患者病情活动组IL-9、IL-17、干扰素-γ的水平显著高于病情稳定组,分别为(1.62±0.23)％与(1.15±0.24)％(P＜0.01)、(1.47±0.20)％与(1.04±0.26)％(P＜0.01)、(8.1±0.6)％与(6.9±1.0)％(P＜0.01);RA组显著高于健康对照组(P＜0.01);RA病情活动组IL-9、IL-17、RORγt、干扰素-γmRNA水平高于病情稳定组,分别为(3.0±0.6)与(1.8±0.4)(P＜0.01)、(4.2±0.9)与(2.3±0.7)(P＜0.01)、(4.1±0.7)与(2.9±0.3)(P＜0.01)、(4.0±0.8)与(2.3±0.6)(P＜0.01),RA组IL-17、RORγt、干扰素-γ mRNA表达又显著高于健康对照组(P＜0.01);RA患者胞内IL-9水平与胞内IL-17(r=0.632,P=0.001)、干扰素-γ(r=0.515,P=0.008)、DAS28 (r=-0.519,P=-0.009)、外周血ESR水平(r=-0.857,P=0.038)呈正相关,而与C反应蛋白水平(r=0.38,P=0.61)无明显相关性.结论 RA患者体内IL-9、IL-17和干扰素-γ表达增高,可能参与RA炎症.     

滤泡辅助性T细胞及白细胞介素-21CXCL13在类风湿关节炎中的作用

目的 通过检测类风湿关节炎(RA)患者外周血滤泡辅助性T细胞(Tfh)和细胞因子白细胞介素(IL)-21,CXCL13的表达并与健康者比较,探讨其与RA临床表现的相关性及其可能的免疫学发病机制.方法 流式细胞仪检测患者和健康对照外周血中Tfh细胞的变化;酶联免疫吸附试验( ELISA)法检测RA患者及健康对照者血浆中IL-21、CXCL13等细胞因子的水平.采用t检验、单因素方差分析和SNK-q检验、z2检验、Spearman秩和相关分析以及多元线性回归分析.结果 RA患者外周血中Tfh比例显著高于对照组(3.0±1.2与1.1±0.4,P＜0.01);同时RA患者轻、中、重度活动组外周血Tfh的比例依次增多(1.8+0.7,2.5±0.6与4.0+1.2),3组之间比较差异均有统计学意义(P均＜0.01),且均较对照组升高(P＜0.01);Tfh细胞数与RA患者DAS28、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、关节压痛数、骨质破坏、RF及抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体滴度呈正相关;严重骨质破坏组Tfh表达率明显高于轻度或无骨质破坏组(2.7+1.1与3.4±1.3);未治疗组相比非正规治疗组、正规治疗组的Tfh表达率逐渐降低(P均＜0.01);正规治疗组的Tfh表达率低于非正规治疗组(P＜0.05).重、中、轻度活动组及健康对照者组的IL-21、CXCL13水平依次降低(P均＜0.05).结论 RA患者外周血Tfh比例及IL-21、CXCL13水平显著升高,且与疾病活动、骨侵蚀等有明显相关,抗风湿药物治疗可以降低Tfh,提示Tfh细胞可能在RA发病中起着重要作用.     

调节性T细胞和辅助性T细胞17的平衡变化在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用

目的 研究调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)的平衡变化在慢性HBV感染中的作用.方法 应用ELISA法和流式细胞术分别对34例慢性乙型肝炎(CHB)患者、20例HBV相关慢加急性肝功能衰竭(ACHBLF)患者和20例健康对照者外周血中Treg和Th17分化相关细胞因子及外周血Th17和Treg细胞水平进行检测.计数资料应用Fisher's确切概率法,计量资料应用单因素方差分析和Tukey's多重比较检验.结果 ACHBLF组Th17分化相关因子IL-1β为(3.97±2.85) pg/mL,IL-6为(12.75±8.87)pg/mL,IL-21为(360.0±335.7)pg/mL,比健康对照组的IL-1β[(1.87±0.94)pg/mL,q=4.559,P＜0.01)、IL-6[(5.28±o.72)pg/mL,q=7.309,P＜0.01)和IL-21[(46.68±20.17) pg/mL,q=6.946,P＜0.01)均明显上调.ACHBLF组外周血Th17细胞比例明显高于健康对照组(q=3.972,P＜0.05).与健康对照组和ACHBLF组相比,CHB组Treg细胞分化相关因子TGF-β明显升高(q=4.536、5.323,均P＜0.01),外周血Treg比例也明显升高.ACHBLF组Th17细胞效应因子IL-17A水平最高,ACHBLF患者外周血Th17细胞比例与血清TBil水平呈正相关(γ=0.74,P＜0.01).结论 慢性HBV感染中,宿主免疫存在Th17和Treg失衡,ACHBLF组以Th17细胞活动为主,CHB组以Treg细胞活动为主.     

肿瘤坏死因子-α拮抗剂对类风湿关节炎和强直性脊柱炎患者血清白细胞介素-17和外周血 Th17细胞比例的影响

目的初步探讨外周血 Th17细胞亚群的比例以及 IL-17的表达水平在 RA 和 AS 患者接受 TNF-α拮抗剂治疗前后的改变及其意义。方法选择 RA 患者27例和 AS 患者22例,2种疾病中各有14例患者接受 TNF-α拮抗剂治疗40周。对照组24名来源于健康献血者。采用流式细胞术检测外周血 CD4+T 细胞中 Th17细胞亚群的比例,ELISA 检测外周血 IL-17表达水平。符合正态分布数据采用2个独立样本 t 检验,不符合正态分布则采用 Wilcoxon 秩和检验,患者治疗前后的比较采用配对 t 检验。结果治疗前,RA 和 AS 患者外周血 CD4+ T 细胞中 Th17细胞亚群的比例显著高于健康对照组[RA 1.03%（0.66%,1.78%）与健康对照0.50%（0.43%,0.67%）,Z=-3.236,P<0.01;AS（1.16±0.09）%与健康对照（0.59±0.06）%,t=5.226,P<0.01]。同样,IL-17的表达水平在2组疾病中也显著升高[RA（32.3±2.5） pg/ml,健康对照（14.3±2.5） pg/ml,t=5.070,P<0.01;AS 28.98（23.84,36.14） pg/ml,健康对照11.84（5.33,22.12） pg/ml,Z=-4.103,P<0.01]。 TNF-α拮抗剂治疗后,2组疾病 CD4+T 细胞中 Th17细胞亚群比例无明显变化[RA 驻（0.1045±0.2126）%;AS 驻（0.0025±0.1838）%],但 IL-17表达水平则明显下降[RA 驻（-13.5±5.0） pg/ml;AS 驻（-16.0±1.9） pg/ml]。结论 Th17细胞及其分泌的细胞因子 IL-17在 RA 和 AS 的发病机制中起重要作用,TNF-α拮抗剂对 AS 和 RA 患者 Th17细胞亚群炎症细胞因子的分泌功能有明显的抑制作用,但40周的治疗仍不能降低 Th17细胞比例,这可能是 TNF-α拮抗剂短期治疗后疾病复发的原因之一。     

类风湿关节炎患者外周血高迁移率族蛋白1RORγt和白细胞介素-17表达水平的检测及临床意义

目的 检测类风湿关节炎(RA)患者外周血高迁移率族蛋白1(HMGB1)及Th17细胞特异性转录因子、相关细胞因子的表达水平,同时分析其与C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)和类风湿因子(RF)的关系,初步探讨RA患者HMGB1的表达水平及其与Th17的关系.方法 收集80例RA患者外周血标本,其中静止期32例、活动期48例,健康志愿者50名.采用实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)中HMGB1、RORγt和白细胞介素(IL)-17的mRNA水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆HMGB1、IL-17、IL-23的蛋白浓度,采用单因素方差分析和Spearman相关分析进行统计学处理.结果 RA患者PBMC中HMGB1、RORyt和IL-17 mRNA的表达水平均高于健康对照组(P<0.05).且活动期[HMGB1(0.424±0.262)pg/ml,RORγt(0.34±0.25)pg/ml,IL-17(1.42±0.38)pg/ml]明显高于静止期(P<0.01).o血浆HMGB1、IL-23和IL-17蛋白水平也显示类似的结果,RA组明显高于健康对照组(P<0.05),且与CRP、ESR、RF呈正相关(P<0.05).结论 检测RA患者外周血HMGB1和Th17细胞特异性转录因子及相关细胞因子水平,有助于探讨HMGB1和IL-17在RA发病过程中的病理生理作用,也为寻找RA的治疗靶点提供了新的思路.     

类风湿关节炎患者血清中期因子和白细胞介素-17的表达

目的 探讨中期因子和白细胞介素(IL)-17在类风湿关节炎(RA)患者血清中的表达及其临床意义。方法 应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验( ELISA)法检测79例RA、37例骨关节炎及70名健康体检者血清中中期因子、IL-17,同时应用ELISA法检测血清抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体,免疫散射比浊法检测C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF),间接免疫荧光法检测抗角蛋白抗体(AKA),分析中期因子与IL-17、抗CCP抗体、CRP、RF、红细胞沉降率(ESR)、AKA及RA疾病活动度评分(DAS)之间的相关性。多组间比较采用Kruskal-WallisH检验,2组间比较采用Mann-Whitney U检验,相关分析采用非参数Spearman相关分析。结果 RA组血清中期因子水平(327±167) pg/ml显著高于骨关节炎组(209±130)pg/ml和健康对照组(225±109) pg/ml,差异有统计学意义（H=22.01,P＜0.01）,骨关节炎和健康对照组比较差异无统计学意义(D0.05)。RA组IL-17水平(44±15) pg/ml也显著高于骨关节炎组(26±8) pg/ml和健康对照组( 27±8) pg/ml,差异有统计学意义(H=66.89,P＜0.01),骨关节炎组和健康对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。血清中期因子水平与IL-17、CRP呈正相关（r=0.398,P＜0.01;r=0.285,P＜0.01）,与DAS、RF、ESR、AKA、抗CCP等无相关性。结论 中期因子和IL-17可能在RA疾病的发生、发展中发挥了一定的作用,通过复杂的细胞因子网络相互协同,促进了RA的发生发展。     

病毒性心肌炎患者外周血miR-31与Th22细胞水平的相关性分析北大核心CSCD

目的检测病毒性心肌炎(VMC)患者外周血中微小RNA-31(miR-31)、辅助型T 22(Th22)细胞及其白介素-22(IL-22)的变化,探讨miR-31与Th22细胞水平的相关性。方法从2020年1月到2021年6月期间本院收治的VMC患者中选取125例作为VMC组,根据心功能指标(LVEF)划分为轻度组(52例)、中度组(52例)和重度组(21例),对照组为125名健康志愿者;收集外周血样本5 ml并分离单个核细胞,实时荧光定量(qRT-PCR)技术检测外周血中miR-31的表达水平,流式细胞仪检测Th22细胞水平,酶联免疫吸附实验检测IL-22表达水平,分析比较对照组与VMC组及不同病情组之间miR-31、Th22细胞及IL-22的表达水平的差异;分析VMC组外周血miR-31表达水平分别与Th22细胞水平、IL-22水平之间,及Th22细胞水平与IL-22水平之间的相关性。结果与对照组[(1.00±0.00)、(0.78±0.22)%、(21.69±3.50)pg/mL]相比,VMC组外周血中miR-31表达水平(1.45±0.32)、Th22细胞水平[(2.02±0.55)%]及IL-22[(33.34±7.44)pg/mL]水平升高(P<0.05);不同病情组VMC患者间外周血miR-31[(1.35±0.27)、(1.47±0.32)、(1.63±0.36)]、Th22细胞[(1.80±0.42)%、(2.02±0.51)%、(2.55±0.57)%]及IL-22的表达水平[(30.95±6.98)pg/mL、(33.96±7.00)pg/mL、(37.75±7.61)pg/mL]比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),且重度组>中度组>轻度组;VMC组外周血miR-31、Th22细胞水平与IL-22表达水平均呈显著正相关(r=0.599,P<0.05;r=0.635,P<0.05);VMC组外周血miR-31表达水平与Th22细胞水平呈显著正相关(r=0.613,P<0.05)。结论VMC患者外周血的miR-31、Th22细胞及IL-22表达水平均显著升高,miR-31可能通过影响Th22介导的免疫调控在VMC的发生发展中起关键作用。     

老年类风湿关节炎患者血清CXCL-9及CXCL-10表达及临床意义

目的探讨血清CXC趋化因子配体(CXCL)-9及CXCL-10在老年类风湿关节炎(RA)患者中的表达及其临床意义。方法选取海南省人民医院收治108例老年RA患者,按照DAS28评分分为低活动组(n=41)和高活动组(n=67),Sharp评分分为非骨侵蚀组(n=48)和骨侵蚀组(n=60)。采用酶联免疫吸附试验检测各组血清CXCL-9、CXCL-10、类风湿因子(RF)及抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体水平。应用受试者工作特征(ROC)曲线分析CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗体诊断RA的价值。结果 RA组血清CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗体水平均明显高于对照组(P0.01)。高活动组血清CXCL-9[198.75±56.48)pg/ml vs(124.50±31.83)pg/ml]、CXCL-10[54.63±13.85)pg/ml vs(27.46±7.41)pg/ml]、RF[(15.36±4.68)IU/ml vs(10.40±2.26)IU/ml]及抗CCP抗体[(96.35±18.24)RU/ml vs(83.72±11.60)RU/ml]水平均明显高于低活动组(P0.01)。骨侵蚀组血清CXCL-9[(206.52±60.37)pg/ml vs(118.28±27.63)pg/ml]、CXCL-10[(60.74±16.13)pg/ml vs(21.60±6.24)pg/ml]、RF[(17.24±5.27)vs (8.52±1.93)IU/ml]及抗CCP抗体[(98.73±19.62)RU/ml vs(81.40±10.85)RU/ml]水平均明显高于非骨侵蚀组(P0.01)。ROC曲线分析显示,血清CXCL-9、CXCL-10、RF及抗CCP抗体诊断RA的临界值分别为104.36 pg/ml、25.40 pg/ml、9.53 IU/ml、54.80 RU/ml,四项联合诊断RA的曲线下面积(AUC)(0.920,95%CI:0.862～0.975)最大,其敏感度和特异度为93.0%和86.4%。相关分析显示,RA患者血清CXCL-9、CXCL-10与RF、抗CCP抗体及DAS28评分均呈正相关(P0.01)。结论血清CXCL-9及CXCL-10高表达与老年人RA活动度和骨侵蚀程度相关,与RF及抗CCP抗体四项联合检测有助于提高老年RA诊断的价值。     

Th17细胞和调节性T细胞在系统性红斑狼疮患者中的研究

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血Th17细胞、调节性T细胞及联系两者的细胞因子白细胞介素(IL)-6的变化及其与病情活动的相关性,探讨Th17细胞、调节性T细胞在SLE发病机制中的作用.方法 收集103例SLE患者及28名健康者,SLE活动性的判断采用SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分方法,其中非活动组(SLEDAI≤9分)患者37例,活动组(SLEDAI＞9分)患者66例.用四色分选流式细胞仪检测外周血Th17细胞、调节性T细胞百分数,用流式细胞仪微球捕获芯片技术(CBA)检测血清IL-6浓度,并分析其与病情活动的相关性.统计学处理采用t检验、秩和检验和Spearman相关分析.结果 ①SLE患者组Th17细胞[(1.2±1.1)%]、IL-6[(35±92)pg/ml]显著高于健康对照组[(0.6±0.4)%、(6±3)pg/ml],而调节性T细胞[(1.6±1.2)%]显著低于健康对照组[(2.6±1.8)%].②SLE活动组Th17细胞[(1.6±1.7)%]显著高于SLE非活动组[(1.0±0.7)%]与健康对照组(P均＜0.05),SLE活动组调节性T细胞[(1.5±1.3)%]显著低于SLE非活动组[(2.1±2.0)%]与健康对照组(P均＜0.05),SLE活动组Th17/调节性T细胞(0.68±0.34)显著高于SLE非活动组(0.24±0.20)与健康对照组(0.13±0.09,P均＜0.05),SLE活动组IL-6[(41±22) pg/ml]显著高于SLE非活动组[(32±28) pg/ml]与健康对照组(P均＜0.05);SLE非活动组与健康对照组之间Th17细胞、调节性T细胞、Th17/调节性T细胞、IL-6差异均无统计学意义(P＞0.05).③Th17细胞百分数与SLEDAI呈正相关,调节性T细胞百分数与SLEDAI呈负相关,Th17/调节性T细胞与SLEDAI呈正相关,IL-6浓度与SLEDAI评分之间呈正相关,Th17细胞与调节性T细胞呈负相关.结论 SLE患者外周血Th17细胞、调节性T细胞及IL-6浓度较健康对照组显著增高,并与疾病活动性密切相关,说明Th17细胞、调节性T细胞可能在SLE的发生、发展中起重要作用.

Abstract：

Objective To study the changes of Th17 cell, regulatory T cell (Treg) and interleukin (IL)-6 in the peripheral blood of patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and their relationship with disease activity. Methods Percentage of Th17 and Treg in the peripheral blood of 103 patients with SLE and 28 healthy volunteers were detected by flow cytometry. The concentration of IL-6 in SLE patients and healthy volunteers was detected by cytometric bead array (CBA). The disease activity of SLE was measured by SLEDAI. SLE patients were divided into two groups: stable SLE (SLEDAI≤ 9, n=37) and active SLE (SLEDAI＞9, n= 66). The change of Th17, Treg, IL -6 and their relationship with disease activity were analyzed. Nonparamentric tests, t -test and spearman correlation were used for statistical analysis. Results The percentage of Th17 cells and the concentration of IL-6 in the peripheral blood in patients with SLE was higher than that in normal controls [respectively for (1.2±1.1)%, (35±92) pg/ml and (0.6±0.4)%, (6±3) pg/ml, P＜0.05]. However, the percentage of Treg in patients with SLE was lower than that in normal controls [respectively for (1.6±1.2)%,(2.6±1.8)%, P＜0.05]. The percentage of Th17, Th17/Treg IL-6 level in active SLE patients was higher than those in inactive SLE and those in normal controls (P＜0.05). However, the percentage of Treg in active SLE was lower than that in stable SLE patients and that in normal controls (P＜ 0.05). The percentage of Th17, Th17/Treg and concentration of IL-6 was positively correlated to disease activity(P＜0.05). But the percentage of Treg had negative correlation with the percentage of Th17 and disease activity (P＜0.05). Conclusion Th17, Treg and serum IL-6 in SLE patients are abnormal and they maybe contribute to the pathogenesis of SLE.     

Unexpected Ca2+-binding properties of synaptotagmin 9

Synaptotagmin 1 (Syt 1) functions as an essential Ca2+ sensor for the fast but not slow component of Ca2+-triggered exocytosis. One hypothesis to account for this selective function, based on the close homology of Syt 1 with synaptotagmin 9 (Syt 9), is that these Syts are redundant for the slow but not the fast component of release. We now show, however, that Syt 9 has unique properties that set it apart from Syt 1. Different from Syt 1, endogenous Syt 9 does not associate Ca2+ dependently or independently with soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptors (SNARE) protein complexes, and the Syt 9 C2B domain does not form Ca2+/phospholipid complexes, whereas such complexes are essential for Syt 1 function. Nevertheless, the C2A domain of Syt 9 functions as a Ca2+-binding module, suggesting that Syts 1 and 9 are Ca2+ sensors with similar Ca2+-binding sequences but distinct properties that indicate nonoverlapping functions.     

Gastric Diffuse Large B-Cell Lymphoma: A Single-Center 9-Year Experience

Gastric diffuse large B cell lymphoma (DLBCL) represents the majority of all gastric lymphomas. We report a series of gastric DLBCL diagnosed and treated in a single center, between 2010 and 2018 (included). We retrospectively analyzed the population demographic features, treatment outcomes and survival. One-hundred-and-one patients were studied, 50.5% males and median age of 64 years [23–94]. Lugano staging was I in 16.8%, II1 in 20.8%, II2 in 10.9%, IIE in 13.9% and IV in 34.7% of cases. Twenty percent had Helicobacter pylori infection. R-CHOP-like therapy was used as first line in 96.9% of the patients. A complete response was achieved in 80% after first line therapy. At 3-years of follow-up (FU), 54% were in complete remission. The mean FU time was 73.6 months. Median overall survival and median progression free survival were not reached. We identified seven factors with negative impact in survival: age above 65 years-old (p < 0.01), ECOG 2–3 (p < 0.01), B symptoms (p = 0.001), bulky disease (p = 0.003), IPI 3–4 (p = 0.001), more than 3 treatment lines (p < 0.01), absence of response to first line treatment (p < 0.01). This study demonstrates that gastric DLBCL is a potentially curable disease with R-CHOP-like therapy, entailing long term survival and comparing well with other published series.