益气护卫汤对哮喘小鼠气道炎症及细胞因子水平影响的研究

益气护卫汤是洪广祥教授根据哮喘发病特点所创制,用于防治哮喘的有效方剂[1].通过观察益气护卫汤对哮喘模型小鼠肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞及白介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)水平的影响,探讨其防治哮喘的作用机理.     

益气护卫汤对哮喘小鼠Th1/Th2型细胞因子水平的影响

益气护卫汤是著名中医内科专家洪广祥教授根据哮喘的发病特点创制的用于哮喘防治的有效方剂[1] ,以往的实验研究表明益气护卫汤可以降低哮喘豚鼠的气道高反应性(ＡＨＲ) ,显著延长豚鼠卵蛋白雾化引喘潜伏期[2 ] ;降低豚鼠血浆可溶性细胞间粘附分子 1(ｓＩＣＡＭ 1)水平[3 ] ;调节Ｔ淋巴细胞亚群比例平衡 ,并能有效抑制Ｔ细胞活化[4] 。本研究通过观察益气护卫汤对哮喘小鼠肺泡灌洗液 (ＢＡＬＦ)中白介素 4 (ＩＬ 4 )、γ 干扰素 (ＩＦＮ γ)水平的变化 ,探讨其对Ｔｈ1/Ｔｈ2细胞亚群反应的影响及防治哮喘的作用机理。1　材料1.1　药物及试…     

益气温阳护卫汤对哮喘大鼠IFN-γ_mRNA表达的影响

目的:探讨益气温阳护卫汤对哮喘大鼠IFN-γ_mRNA的影响。方法:40只清洁级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、益气温阳护卫组、地塞米松组,每组10只。采用SYBR Green Realtime PCR测定各组外周血单个核细胞(PBMC)中IFN-γ_mRNA的表达变化。结果:哮喘模型组PBMC中IFN-γ_mRNA表达显著低于正常对照组(P<0.01),益气温阳护卫组、地塞米松组PBMC中IFN-γ_mRNA的表达显著高于哮喘模型组(P<0.01),且与正常对照组PBMC中IFN-γ_mRNA的表达相当。结论:益气温阳护卫汤可以上调IFN-γ_mRNA的表达,益气温阳护卫汤防治哮喘的作用途径可能是通过该机制实现。     

益气温阳护卫汤防治支气管哮喘立法组方思路

益气温阳护卫汤是全国著名中医洪广祥教授有效运用于支气管哮喘防治的经验方。本文就该方的立法组方思路及其用于防治哮喘的理论依据进行初步探讨。1益气温阳护卫汤的立法依据     

益气涤痰化瘀方对哮喘小鼠气道炎症及Th1/Th2平衡的影响

目的:探讨益气涤痰化瘀方对哮喘小鼠气道炎症及Th1/Th2平衡的调节作用。方法:将SPF级BALB/c雌性小鼠50只随机分为正常对照组、哮喘模型组,益气涤痰化瘀方低、中、高剂量组。采用卵清白蛋白(OVA)腹腔注射及雾化激发法构建哮喘模型,益气涤痰化瘀方干预治疗。观察各组小鼠行为学改变;制作肺组织病理切片行镜下观察;收集肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞总数及分类计数;取小鼠血清以ELI SA法检测I FN-γ、I L-4的变化。结果:1)与哮喘模型组比较,药物干预组哮喘症状有所减轻,肺组织炎性细胞浸润减轻;2)益气涤痰化瘀方中剂量组小鼠BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞(NEU)、淋巴细胞(LYM)分类计数较哮喘模型组减少(P0.05);3)与哮喘模型组比较,益气涤痰化瘀方高、中剂量组小鼠血清I FN-γ浓度升高(P0.05),I L-4浓度降低(P0.05)。结论:益气涤痰化瘀方可对免疫细胞Th2优势所致的免疫失衡状态进行调节,恢复Th1/Th2平衡;益气涤痰化瘀方可能通过调节机体平衡而减轻哮喘急性气道炎性病变,从而起到防治哮喘的作用。     

益气固本胶囊调控肾阳虚哮喘小鼠血清IL-4/INF-γ的实验研究

目的通过观察益气固本胶囊对肾阳虚哮喘小鼠血清IL-4、INF-γ的调节作用,探讨其临床意义。方法将小鼠制备肾阳虚哮喘模型,期间分别给予益气固本胶囊低、中、高剂量和金匮肾气丸进行干预,测定小鼠血清中IL-4、INF-γ含量,比较各组间的差异性。结果与肾阳虚哮喘组比较,益气固本胶囊各剂量组及金匮肾气丸组小鼠血清IL-4含量降低,血清INF-γ含量升高。结论益气固本胶囊能有效降低肾阳虚哮喘小鼠血清的IL-4、升高血清的INF-γ,起到调节免疫平衡的作用。     

加味玉屏风散对哮喘大鼠血清总IgE IL-4和IFN-γ含量的影响

目的:探讨白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)及IgE在哮喘发病过程中的作用及中药加味玉屏风散对其含量的影响.方法:采用卵蛋白致敏大鼠哮喘模型,观察正常组、哮喘组和中药治疗组大鼠血清中总IgE、白细胞介素-4和γ-干扰素的含量变化.结果:哮喘大鼠血清总IgE水平、IL-4含量明显增加(P＜0.01),血清中IFN-γ含量明显降低(P＜0.01),而补脾益气方药(加味玉屏风散)可显著降低哮喘大鼠IgE水平及IL-4含量(P＜0.01),提高IFN-γ的含量(P＜0.01).结论:中药加味玉屏风散可能通过调节血清中白细胞介素-4和γ-干扰素的含量,降低血清IgE水平改善气道的炎症状况.     

痰湿型哮喘患者炎症因子IL-4、 IL-5、IFN-γ表达特点及临床意义

目的探讨痰湿型哮喘患者炎症因子白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、干扰素-γ(IFN-γ)表达水平及临床意义。方法选取2017年5月—2019年5月新疆医科大学第一附属医院诊治的痰湿型哮喘患者40例作为痰湿型哮喘组、非痰湿型哮喘患者37例作为非痰湿哮喘组,另选取同期体检健康者38例作为正常组。通过酶联免疫吸附试验检测3组受试者血清IL-4、 IL-5、IFN-γ水平,并比较哮喘不同病情分级患者血清IL-4、IL-5、IFN-γ水平的差异。结果痰湿型哮喘组和非痰湿型哮喘组血清IL-4、IL-5水平均明显高于正常组(P均0.05),IFN-γ水平均明显低于正常组(P均0.05);痰湿型哮喘组血清IL-4、IFN-γ水平均明显低于非痰湿型哮喘组(P均0.05),IL-5水平明显高于非痰湿型哮喘组(P0.05)。痰湿型、非痰湿型哮喘不同分级患者血清IL-4、IL-5、IFN-γ水平比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论哮喘患者痰湿体质与炎症因子IL-4、IL-5、IFN-γ水平关系密切,加强炎症状态监测及干预,对临床防治痰湿型哮喘具有重要意义。     

补肾益气、化痰通络膏联合舒利迭治疗支气管哮喘的效果及对INF-γ、IL-4的影响

目的观察补肾益气、化痰通络膏联合舒利迭治疗支气管哮喘的效果及对(INF)-γ、白细胞介素(IL)-4的影响。方法于立冬前后15 d,将70例符合入组标准的支气管哮喘患者随机分为舒利迭组和联合组。舒利迭组给予舒利迭(50/250)早晚各1吸。联合组给予补肾益气、化痰通络膏早晚各10mL口服+舒利迭(50/250)早晚各1吸。2组疗程均为3个月。观察2组治疗前后哮喘证候积分及血清INF-γ、IL-4水平变化情况,统计2组临床疗效及治疗期间不良反应发生情况。结果联合组总有效率高于舒利迭组(P0.05)。治疗后联合组INF-γ水平高于舒利迭组(P0.05),IL-4水平低于舒利迭组(P0.05)。2组不良反应发生率比较差异无统计学意义。结论补肾益气、化痰通络膏联合舒利迭治疗支气管哮喘有协同作用,可有效缓解患者症状,升高INF-γ水平,降低IL-4水平,值得推广应用。     

益气温阳护卫汤对哮喘豚鼠气道反应性的影响

益气温阳护卫汤是著名中医专家洪广祥教授用于哮喘防治的有效方剂。本实验观察了该汤剂对哮喘豚鼠气道反应性作用 ,以探讨其防治哮喘的疗效机制。1　材料和方法1.1　材料1.1.1　动物　健康豚鼠 ,雄性 ,体重 40 0 ｇ左右 ,年龄为 5～7月龄 ,上海畜牧兽医学会科技咨询服务部供应。合格证号 :0 176 3。1.1.2　实验用药　 (1)实验用温阳益气护卫汤的制备 :将生黄芪、白术、防风、桂枝、白勺、生姜、大枣、炙甘草、仙茅、仙灵脾等 10味药按 2∶1.5∶1.5∶1∶1∶1∶1∶0 .5∶1∶1.5比例配伍 ,其中白术、防风、桂枝、白芍、生姜提取挥发油。然后取 …     

益气温阳护卫汤对哮喘豚鼠BALF Th1、Th2细胞因子产生及调节的影响

目的观察益气温阳护卫汤对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)Th1、Th2细胞因子产生及调节影响.方法将豚鼠随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组、玉屏风散组及益气温阳护卫汤低剂量组、中剂量组、高剂量组;于诱喘后24小时采集标本,并采用双抗体夹心ELISA法测定Th1细胞分泌的细胞因子干扰素-γ(IFN-γ);Th2细胞分泌的细胞因子白细胞介素-4,5(IL-4,IL-5);采用比色法测定各组BALF一氧化氮(NO)含量.结果益气温阳护卫汤各剂量组均能提高IFN-γ水平,降低IL-4,IL-5水平.中、高剂量组与地塞米松组IL-4水平无明显差异(P＞0.05);高剂量组IL-5水平虽低于地塞米松组,但无明显差异(P＞0.05),与其他各组均有差异(P＜0.05).高剂量组IFN-γ浓度与其他各组比较有显著性差异(P＜0.05),中、低剂量组、玉屏风散组与地塞米松组比较无显著性差异(P＞0.05),但这四组均高于哮喘组(P＜0.05).BALF NO水平,以高剂量组最低,但与中剂量组及地塞米松组比较无显著性差异(P＞0.05),三者与其他组比较有显著性差异(P＜0.05).结论益气温阳护卫汤可以促进Th1细胞分泌IFN-γ,抑制Th2细胞分泌IL-4,IL-5;调节Th1、 Th2细胞因子产生的可能有效途径之一,是通过降低NO水平实现.     

温阳益气护卫汤预防哮喘发作的临床研究

支气管哮喘属中医"哮证"范畴,是由嗜酸性粒细胞、肥大细胞和T淋巴细胞等多种炎性细胞参与的气道慢性炎症.其主要特征是气道高反应性,气道炎症是导致气道高反应的主要因素.嗜酸性粒细胞(EOS)浸润是哮喘的特征之一.嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)是EOS激活后释放对呼吸道上皮具有直接损伤作用的毒性蛋白,是造成气道炎症(AAI),导致气道高反应(AHR),诱发和加重哮喘的重要物质.ECP水平的变化能直接反映哮喘气道炎症的情况.为了预防哮喘发作,洪广祥教授创制了温阳益气护卫法,笔者对29例患者在服用温阳益气护卫汤前及1个疗程后的证候表现、气道反应性、诱导痰中EOS计数、ECP的含量以及疗程结束后1月内哮喘有关症状与上年同期比较等作了较为深入的研究.观察报告如下.     

小青龙汤对哮喘大鼠Th1/Th2型细胞因子水平的影响

研究复制卵蛋白大鼠哮喘模型 ,通过观察白介素 4 (IL - 4 )、γ -干扰素 (IFN -γ)及白介素 4 /γ -干扰素的比值 (IL - 4 /γ -干扰素 )的变化 ,探讨小青龙汤对哮喘大鼠Th1/Th2细胞亚群反应的影响及防治哮喘的作用机理。结果 :与正常组比较 ,哮喘模型组血浆IL - 4水平、IL - 4 /IFN -γ比例显著升高 (P <0 0 1) ;与哮喘模型组比较 ,小青龙汤组和地塞米松组均能显著降低IL - 4水平和IL - 4 /IFN -γ比例 (P <0 0 1) ,IFN -γ水平无显著性差异 (P >0 0 5 )。提示 :小青龙汤具有抑制Th2细胞亚群优势反应和调节免疫平衡的作用 ,从而减轻气道炎症 ,降低气道高反应性 ,减轻哮喘的症状或减缓哮喘的发作     

小青龙汤对哮喘大鼠Thl／Th2型细胞因子水平的影响

研究复制卵蛋白大鼠哮喘模型 ,通过观察白介素 4 (IL - 4 )、γ -干扰素 (IFN -γ)及白介素 4 /γ -干扰素的比值 (IL - 4 /γ -干扰素 )的变化 ,探讨小青龙汤对哮喘大鼠Th1/Th2细胞亚群反应的影响及防治哮喘的作用机理。结果 :与正常组比较 ,哮喘模型组血浆IL - 4水平、IL - 4 /IFN -γ比例显著升高 (P <0 0 1) ;与哮喘模型组比较 ,小青龙汤组和地塞米松组均能显著降低IL - 4水平和IL - 4 /IFN -γ比例 (P <0 0 1) ,IFN -γ水平无显著性差异 (P >0 0 5 )。提示 :小青龙汤具有抑制Th2细胞亚群优势反应和调节免疫平衡的作用 ,从而减轻气道炎症 ,降低气道高反应性 ,减轻哮喘的症状或减缓哮喘的发作     

益气温阳护卫法对哮喘大鼠GATA3_mRNA表达的影响

目的:探讨益气温阳护卫法对哮喘大鼠Th细胞异常分化相关分子基因表达影响。方法:50只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、益气温阳护卫组、地塞米松组和卡介菌多糖核酸组,每组10只。采用TaqMan Realtime PCR测定各组外周血单个核细胞(PBMC)中GATA3_mRNA的表达变化。结果:哮喘模型组PBMC中GATA3_mRNA表达显著高于正常对照组(P<0.01),益气温阳护卫组、地塞米松组和卡介菌多糖核酸组PBMC中GATA3_mRNA的表达显著低于哮喘模型组(P<0.01),且与正常对照组PBMC中GATA3_mRNA的表达相当。结论:益气温阳护卫法调节Th1/Th2细胞亚群趋于平衡可能是通过抑制哮喘大鼠GATA3_mRNA的表达实现,从而达到防治哮喘的作用。     

补脾益气方对哮喘模型大鼠气道炎症反应及气道嗜酸性粒细胞浸润的影响

目的:探讨补脾益气方对支气管哮喘大鼠气道炎症及嗜酸性粒细胞浸润的影响。方法:将48只健康雄性SD大鼠随机分为4组,每组12只。其中,空白对照组以生理盐水激发作为对照,哮喘模型组、地塞米松组与补脾方药组以鸡卵白蛋白激发建立哮喘模型。地塞米松组注射地塞米松,补脾方药组以补脾益气方药灌胃,末次给药后24 h检测大鼠的各项指标。结果:与空白对照组比较,哮喘模型组、地塞米松组、补脾方药组中肺泡灌洗液的细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)、淋巴细胞(L)、中性粒细胞(N)的比例明显升高;血清中干扰素-γ(IFN-γ)与白介素-12(IL-12)浓度明显下降,白介素-4(IL-4)、白介素-5(IL-5)的浓度明显上升,IFN-γ/IL-4比值出现明显下降;血清中的Eotaxin因子浓度和肺叶中Eotaxin-2蛋白的表达明显升高;哮喘模型组巨噬细胞(M)的比例明显下降,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。与哮喘模型组比较,地塞米松组和补脾方药组中肺泡灌洗液的细胞总数、EOS、L、N的比例显著下降,M的比例明显升高;血清中的IFN-γ、IL-12显著升高,IL-4、IL-5显著下降,IFN-γ/IL-4比值升高;血清中Eotaxin因子浓度和肺叶中Eotaxin-2蛋白的表达明显下降,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。与地塞米松组比较,补脾方药组的IL-12与IL-5变化更甚,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:补脾益气方药可从多靶点促进Th1因子,抑制Th2因子与嗜酸性粒细胞趋化因子,以重塑Th1/Th2的动态平衡,降低炎性细胞数量,阻止嗜酸性粒细胞向炎症部位浸润,从而改善气道炎症反应,促进病情好转,是今后哮喘治疗的主要方向。     

益气温阳护卫法对哮喘大鼠IL-4/STAT6信号通路的影响

目的:探讨益气温阳护卫法对哮喘大鼠白细胞介素4/信号传导子及转录激活子6(IL-4/STAT6)信号通路的调节作用.方法:50只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、益气温阳护卫组、地塞米松组和卡介菌多糖核酸组,每组10只.采用TaqMan Real time PcR测定哮喘大鼠Th细胞IL-4和STAT6的mRNA表达变化.结果:哮喘模型组IL-4和STAT6的mRNA表达显著高于正常对照组(P＜0.01),益气温阳护卫组、地塞米松组和卡介菌多糖核酸组PBMC中IL-4和STAT6的mRNA表达显著低于哮喘模型组(P＜0.01),且与正常对照组IL-4和STAT6的mRNA表达相当.结论:益气温阳护卫法能够抑制哮喘大鼠IL-4/STAT6信号通路基因的表达,该作用可能是调节Th1/Th2细胞亚群趋于平衡的重要机制.     

益气温阳护卫法对哮喘患者T 淋巴细胞免疫功能干预作用初探

通过益气温阳护卫法对哮喘患者T淋巴细胞免疫功能干预作用进行初探，认为气阳虚弱是哮喘发作内因，T淋巴细胞亚群功能与中医卫气功能相关，益气温阳护卫汤是防治哮喘的有效方剂。     

哮喘模型大鼠肺组织中IL-4、IFN-γ的变化及防哮方的干预作用

目的观察哮喘模型大鼠肺组织白细胞介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)的变化及防哮方的干预作用,探讨其防治哮喘的作用机理。方法将48只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组,模型组,中药低、中、高剂量组及地塞米松组各8只。用卵蛋白(OVA)致敏激发建立慢性哮喘大鼠模型。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞计数分类;逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织中IL-4、IFN-γm RNA相对表达量。结果 1)与正常组比,模型组白细胞(WBC)总数及嗜酸粒细胞(EOS)百分率显著升高(P0.05);与模型组比,中药低、中、高剂量组及地塞米松组WBC总数及EOS百分率明显降低(P0.05);中药高剂量组与地塞米松组比,变化不明显(P0.05)。2)与正常组比,模型组IL-4水平升高,IFN-γ水平降低(均P0.05);与模型组比,中药低、中、高剂量组及地塞米松组,IL-4水平均降低,IFN-γ水平均升高(均P0.05);中药高剂量组与地塞米松组比,IL-4水平较高(P0.05),IFN-γ水平变化不明显(P0.05)。结论防哮方可改善哮喘大鼠气道炎症,其作用机理可能与下调IL-4水平、上调IFN-γ水平、调节Th1/Th2免疫平衡有关。     

益气涤痰化瘀方对哮喘小鼠气道炎症及Th17/Treg平衡调节作用的研究

目的:研究益气涤痰化瘀方对哮喘小鼠气道炎症及Th17/Treg平衡的影响,初步揭示该方防治哮喘的作用机制。方法:SPF级BALB/c雌性小鼠50只随机分成正常对照组、哮喘模型组,益气涤痰化瘀方低、中、高剂量组。卵清蛋白(OVA)腹腔注射及雾化激发法,复制哮喘模型,益气涤痰化瘀方干预治疗。观察各组小鼠行为学改变;制作肺组织病理切片进镜下观察;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞总数及分类计数;取小鼠血清ELISA法检测IL-17的变化。结果:(1)与哮喘模型组比较,药物干预组哮喘症状有所减轻,肺组织炎性细胞浸润减轻。(2)益气涤痰化瘀方中剂量组小鼠BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞(NEU)、淋巴细胞(LYM)分类计数较哮喘模型组都有减少(P0.05)。(3)益气涤痰化瘀方各剂量组与哮喘模型组比较,小鼠血清IL-17浓度显著降低(P0.01)。结论:益气涤痰化瘀方治疗哮喘的作用机理之一是通过抑制哮喘小鼠IL-17的表达,减轻气道炎症反应,干预哮喘发作。