胸苷酸合成酶基因多态性与5-氟尿嘧啶治疗消化道肿瘤的研究进展

5-氟尿嘧啶（5-fluoropyrimidines,5-FU）是最常用的消化道恶性肿瘤化疗药物之一,胸苷酸合成酶（thymidylate synthase,TS）是其作用机制中最重要的靶酶。目前研究认为佟基因存在三种多态性：5’-UTR的一个可变串联重复序列多态性,3R等位基因第二次重复序列第12个核苷酸等处还存在一个G〉C的单核苷酸多态性（SNP）,3’-UTR的1494bp处存在6bp核苷酸片段的缺失或插入多态性。TS基因多态性可以通过影响TS蛋白的表达水平,影响5-FU的化疗敏感性。     

胸苷酸合成酶基因多态性与消化道肿瘤个体化治疗

消化道肿瘤的发生率在我国位居第一,而多数患者确诊时即为中晚期,已失去手术的机会,故化疗已成为此类患者的主要治疗手段。虽然以氟尿嘧啶（5-Fu）为基础的联合化疗可以延长胃癌、结直肠癌等晚期消化道肿瘤的生存期,但是接受此类方案中至少50％患者对化疗无效,而且同一化疗方案对不同患者的疗效可从完全缓解到无效,产生差别的主要原因在于个体间对化疗药物敏感性不同所致,近年来的各项研究逐渐表明,TS基因的多态性与患者对化疗药物的敏感性密切相关。     

胸苷酸合成酶基因多态性与氟尿嘧啶治疗晚期胃癌疗效相关性的研究

目的：研究胸营酸合成酶（TS）基因的5’-UTR28bp核苷酸片段重复多态和3’-UTR1494修饰处存在的6bp核苷酸片段缺失或插入多态与应用以氟尿嘧啶（5-FU）为主的联合化疗方案治疗胃癌疗效的相关性。方法：收集经病理学确诊的晚期胃癌74例,所有患者使用以5-Fu为主的化疗方案治疗,化疗前抽静脉血,提取白细胞DNA用PCR—DHPLC技术检测TS5’-UTR1R28bp及3’-UTR6bp基因型：结果：（1）74例胃癌患者的TS5’-UTR28bp31t／3R、2R／2R＋21t／3R基因型分别为21．6％（16／74）和78．4％（58／74）,而相应的化疗客观有效率分别为6．3％（1／16）和36．2％（21／58）,3R／3R组的化疗疗效比2R／2R＋2R／31／绀低（X^2=4．05,P〈0．05）;（2）74例胃癌患者的TS3’-UTR＋／＋6bp、＋／-6bp、-／-6bp基因型分别为5．4％（4／74）、52．7％（39／74）和41．9％（31／74）,相应各组的化疗有效率分别为0（0／4）、25．6％（10／39）和41．9％（13／31）,不同基因型与化疗疗效之间无相天性（P=0．076）。结论：TS5’-UTR28bp多态性与5-FU疗效之间存在相关性,其检测有助于指导晚期胃癌选择5-FU化疗,而TS3’-UTR多态性与5-FU疗效之间没有显示相关性,     

胸苷酸合成酶基因多态性与ALL儿童HD-MTX毒副作用的相关性

  目的  研究胸苷酸合成酶(TS)基因(TYMS)多态性与大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)治疗儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)时毒副作用的相关性。  方法  75例ALL中有52例接受了HD-MTX治疗, 对患儿用药后的一般反应、皮肤黏膜损害、骨髓抑制等临床表现和血尿常规、肝肾功能、心肌酶、心电图等进行统计分析, 并采用DNA直接测序技术检测ALL儿童TYMS多态性(rs699517、rs2790和rs11280056), 分析MTX毒副作用与其关系。  结果  TYMS rs2790与ALL儿童性别相关, 与AA基因型相比, 携带等位基因G者男孩数约是女孩的3倍(OR=3.05, 95%CI=1.14~8.19, P=0.024)。rs2790基因型与HD-MTX引起的中性粒细胞减少发生也相关, GG基因型使中性粒细胞减少的发生危险降低(OR=0.07, 95%CI=0.01~0.64, P=0.026)。rs699517和rs11280056与ALL儿童发病年龄、性别以及HD-MTX毒副作用均无相关性(P > 0.05)。  结论  TYMS rs2790可能与HD-MTX毒副作用具有相关性, 对ALL男性儿童影响较大。      

含培美曲塞方案治疗非小细胞肺癌疗效与胸苷酸合成酶基因多态性的相关性研究

目的 探讨含培美曲塞方案治疗晚期非鳞型非小细胞肺癌（NSCLC）的疗效及其与胸苷酸合成酶基因（TYMS）多态性的关系。方法67例晚期非鳞型NSCLC患者接受培美曲塞单药或联合铂类治疗,具体用药为：培美曲塞500mg／m2静滴,第1天;顺铂75mg／m2或卡铂AUC=5静滴,第1天,21天为1周期。取患者外周静脉血白细胞提取DNA,采用PCR及PCR RFLP法检测TYMS基因5’-非翻译区（UTR）重复序列多态性和3’-UTR缺失／插入多态性,并分析其与疗效的关系。结果 67例患者均可评价疗效,有效率为28.4％,疾病控制率为76.1％;中位无进展生存期为3.5个月。TYMS基因5’-UTR重复序列多态性基因型和3’-UTR缺失／插入多态性基因型与含培美曲塞方案治疗的有效率和疾病控制率均无关。结论 TYMS基因5’-UTR串联重复序列多态性与3’-UTR缺失／插入序列多态性基因型与含培美曲塞方案治疗晚期非鳞型NSCLC的疗效无关, TYMS基因多态性能否预测含培美曲塞方案的疗效尚需进一步研究证实。     

胸苷酸合成酶基因3’-UTR多态性与晚期胃癌化疗敏感性关系的研究

目的：研究胸苷酸合成酶（TS）基因3’-UTR多态性与胃癌对5-Fu化疗敏感性的关系。方法：收集经病理学确诊的晚期胃癌106例，所有病例化疗前抽静脉血，提取白细胞DNA，用PCR-RFLP技术检测TS3’-UTR基因型。所有患者均经5-FU为基础的化疗方案治疗。以WHO实体瘤疗效评定标准和毒性评定标准评价疗效和毒性。结果：（1）106例胃癌患者中TS＋6／＋6bp、＋6／-6bp、-6／-6bp基因型频度分别为7．6％、44．3％和48．1％，化疗的总有效率为35．9％。（2）TS＋6／＋6bp、＋6／-6bp、-6／-6bp基因型组化疗的有效率分别为0％（0／8）、40．4％（19／47）和37．3％（19／51）。TS-6／-6bp基因型组和＋6／-6bp组化疗的有效率均显著高于＋6／＋6bp组（Fisher双侧精确检验，P值分别为0．0452和0．0404）。TS-6／-6bp基因型组Ⅱ度以上毒副反应的发生率高于＋6bp／＋6bp基因型组，但其差异无统计学意义。结论：TS基因3’-UTR多态性与晚期胃癌对5-FU为基础的化疗敏感性相关，TS基因型检测有助于指导晚期胃癌的化疗。     

胃癌组织中胸苷酸合成酶、胸苷磷酸化酶mRNA表达及其临床意义

背景与目的:化学治疗在胃癌治疗中扮演了重要的作用。通过肿瘤组织中某些基因表达的水平来选择化疗药物已成为今后化疗的方向。胸苷酸合成酶(TS)、胸苷磷酸化酶(TP)是氟尿嘧啶(5-FU)体内的关键代谢酶,其表达水平影响恶性肿瘤患者接受5-FU化疗后的预后。本研究探讨胃癌组织中TS、TP mRNA表达水平与预后的关系。方法:采用实时定量RT-PCR技术检测51例胃腺癌组织TS、TP mRNA表达水平。结果:胃癌组织TS、TP mRNA表达水平的中位数分别为0.94和21.20,TS高表达组和低表达组之间无瘤生存期和总生存期差异有显著性(P<0.05),TP高表达组和低表达组之间总生存期差异有显著性(P<0.05),但无瘤生存期之间差异无显著性(P>0.05)。TS、TP mRNA表达与年龄、性别、淋巴结转移、组织学分级及临床分期均无相关性(P>0.05)。结论:检测TS、TP mRNA表达水平对接受5-FU为基础治疗方案的胃癌患者的预后有很好的预测价值。     

胸苷酸合成酶基因多态性及其蛋白表达与食管鳞状细胞癌淋巴结转移的关系

背景与目的:胸苷酸合成酶(thymidylatesynthase,TS)是DNA合成的关键酶。TS基因5′非编码区(untranslatedregion,UTR)串联重复序列和G/C单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)可能导致酶表达或活性的改变,从而改变个体对肿瘤的易感性及预后。本实验的目的是探讨TS5′-UTR多态性与食管鳞状细胞癌(esophagealsquamouscellcarcinoma,ESCC)淋巴结转移的关系,并探讨此多态性对TS蛋白表达的影响。方法:从232例ESCC患者和348例健康对照的外周血中提取白细胞DNA,分别用PCR和PCR-RFLP方法检测TS5′UTR28bp串联重复序列和G/CSNP的基因型。51例患者的术后切除组织采用免疫组织化学染色的方法(S-P法)检测肿瘤组织中的TS蛋白的表达情况。结果:5′UTR的3G/3G,3G/3C,3C/3C,2R/3G,2R/3C,2R/2R和其它基因型频率在健康对照组分别为17.5%,17.3%,29.3%,12.9%,17.8%,3.7%,1.5%和在病例组中分别为16.0%,16.0%,29.3%,13.8%,17.6%,4.3%,3.0%;3G,3C,2R和其它等位基因型频率在健康对照组中分别为32.8%,47.0%,19.5%,0.7%和在病例组中分别为31.2%,46.8%,20.5%,1.5%。与3G/3G基因型相比,2R/3G基因型显著增加淋巴结转移的危险性(年龄和性别校正OR=11.53,95%CI=2.67～49.74)。TS表达水平与患者的性别、年龄、淋巴结转移和临床病理分期无关,而与TS5'UTR基因型密切相关(P<0.05)。结论:TS5′UTR重复序列及SNP多态性与ESCC淋巴结转移有关,而TS蛋白表达水平与淋巴结转移无关。     

食管癌与胸苷酸合成酶多态性的关联研究

目的探讨胸苷酸合成酶（TS）5’非编码区（UTR）串联重复序列和3’UTR6bp缺失或插入多态性对食管鳞状细胞癌（ESCC）的发生及淋巴结转移的作用。方法从232例ESCC患者和348例健康对照者的外周血中提取白细胞DNA,分别用PCR-片段长度和PCR—RFLP方法检测TS 5’UTR和3’UTR基因型。结果TS5’UTR、3’UTR的基因型和等位基因型分布在ESCC患者与健康对照者中,差异无统计学意义,它们不单独作用于ESCC的发生和发展。但这两种多态性联合分析显示,同时携带3R／3R及6bp＋／6bp＋基因型的个体,其患ESCC的危险性显著低于携带其他基因型组合的个体（校正OR=0．32,95％CI=0．08～0．92）。5’UTR 2R／3R基因型显著增加ESCC淋巴结转移的危险性（校正OR=3．68,95％CI=1．54—8．93）。结论TS5’UTR重复序列多态性和3’UTR缺失多态性联合分析可作为预测ESCC易感性的标志,而5’UTR 2R／3R可作为预测ESCC淋巴结转移的候选分子指标。     

胸苷酸合成酶预测胃癌化疗敏感性的研究

目的 探讨胃癌组织中TS的表达及其对胃癌DDP+5-Fu化疗敏感性的预测价值.方法 60例胃癌均接受2个周期DDP+5-Fu化疗.化疗方案:DDP 15～20 ms/(m2·d),静脉滴注,d1～5;5-Fu 375～500 mg/(m2·d),静脉滴注8h,d1～5.间隔4周后,进行第2个周期化疗.采用免疫组织化学S-P法检测胃癌组织中TS的表达.结果 60例胃癌中TS高表达者29例,化疗有效率34.5%(10/29),TS低表达者的化疗有效率为64.5%(20/31),两者比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论 胃癌组织中TS表达水平对胃癌DDP+5-Fu化疗的敏感性具有一定预测价值.     

胸苷酸合成酶基因3′-UTR多态性与晚期胃癌化疗敏感性关系的研究

目的:研究胸苷酸合成酶(TS)基因3′-UTR多态性与胃癌对5-FU化疗敏感性的关系.方法:收集经病理学确诊的晚期胃癌106例,所有病例化疗前抽静脉血,提取白细胞DNA,用PCR-RFLP技术检测TS3′-UTR基因型.所有患者均经5-FU为基础的化疗方案治疗.以WHO实体瘤疗效评定标准和毒性评定标准评价疗效和毒性.结果:(1)106例胃癌患者中TS+6/+6bp、+6/-6bp、-6/-6bp基因型频度分别为7.6%、44.3%和48.1%,化疗的总有效率为35.9%.(2)TS+6/+6bp、+6/-6bp、-6/-6bp基因型组化疗的有效率分别为0%(0/8)、40.4%(19/47)和37.3%(19/51).TS-6/-6bp基因型组和+6/-6bp组化疗的有效率均显著高于+6/+6bp组(Fisher双侧精确检验,P值分别为0.0452和0.0404).TS-6/-6bp基因型组Ⅱ度以上毒副反应的发生率高于+6bp/+6bp基因型组,但其差异无统计学意义.结论:TS基因3′-UTR多态性与晚期胃癌对5-FU为基础的化疗敏感性相关.TS基因型检测有助于指导晚期胃癌的化疗.     

胸苷酸合成酶基因多态对接受氟尿嘧啶辅助化疗胃癌患者预后的影响

目的：研究胸苷酸合成酶（thymidylate synthase，TS）基因增强子区（enhancer region，ER）串联重复序列多态和3’端非翻译区（untranslated region，UTR）6bp缺失或插入多态（de16／ins6）对接受以氟尿嘧啶（fluorouracil，FU）为基础的辅助化疗胃癌患者预后的影响。方法：116例经确诊的胃癌患者，采用以FU为基础的方案进行辅助化疗。应用PCR技术检测TS基因多态。结果：在116例胃癌患者中，TSER2R／2R、2R／3R和3R／3R基因型频率分别为7．8％（9／116）、31．9％（37／116）和60．3％（70／116）；TSins6／ins6、ins6／de16和de16／de16基因型频率分别为9．5％（11／116）、41．4％（48／116）和49．1％（57／116）。携带ins6／ins6基因型患者的总生存期显著短于携带de16／de16（P=0．017）或ins6／de16基因型患者的生存期（P=0．022），不同TSER基因型胃癌患者的中位无复发生存期差异无统计学意义（P〉0．05）。COX多因素分析结果显示，ins6／ins6基因型患者的死亡风险增加。结论：TS 3’－UTR ins6／de16基因多态性是接受以FU为基础的辅助化疗胃癌患者的独立预后因素。     

TS及其基因多态性与肿瘤的关系

引言肿瘤具有高度异质性和个体性,肿瘤病变的分子特征决定了肿瘤的恶性特征。基因组学和蛋白质组学作为肿瘤诊疗新平台,是通过对基因多态性及其表达,对肿瘤分子分型而达到个体化诊疗目的。这与我国古代医学提出的同病异治、辨证论治观点基本一致。胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)是DNA生物合成反应中的关键酶,其编码基因成为许多化学药物治疗肿瘤的靶基因。通过TS及其基因多态性检测来实现对肿瘤预防、个体化诊疗、预后判断具有重要指导意义。     

胸苷酸合成酶在膀胱癌组织中的表达及意义

目的探讨膀胱癌（BC）中胸苷酸合成酶（TS）的表达对膀胱癌患者预后的影响。方法采用免疫组化S-P法检测50例膀胱癌石蜡标本中的TS蛋白表达情况。结果TS蛋白在膀胱癌与正常膀胱黏膜中的表达有显著性差异（P＜0．01），与肿瘤低分化、临床病理分期晚期、淋巴结转移密切相关（P＜0．05）。结论TS在膀胱癌中的表达增强可能是膀胱癌患者一个重要的预后指标。     

TS基因多态性与食管癌

人类胸苷酸合成酶（thymidylate synthase,TS）是DNA合成的关键酶,它在DNA合成与修复过程中发挥重要作用。TS基因的多态性可能影响Ts蛋白的表达,从而影响酶的活性及功能,导致个体对癌症易感性的差异,甚至影响癌症患者对化疗的疗效及总体预后。食管癌是我国最常见的六大恶性肿瘤之一,它的确切发病原因目前尚不清楚。近年来,     

胸苷酸合成酶、胸苷酸磷酸化酶的表达与培美曲塞时辰化疗的疗效分析

目的构建肺腺癌A549细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,研究按昼夜不同时辰给予培美曲塞是否能提高疗效和降低不良反应,分析胸苷酸合成酶（TS）mRNA和胸苷酸磷酸化酶（TP）mRNA表达高低与培美曲塞疗效以及不良反应的关系。方法 常规方法体外培养肺腺癌A549细胞。待肿瘤体积生长至0.5~1.5 cm³,随机将荷瘤鼠分为四组,每组5只,其中三组严格按照每昼夜24 h的三个时间点给药即:早晨7点（光照后0 h）、中午15点（光照后8 h）、晚间23点（光照后16 h）进行腹腔给药,第四组为对照组,腹腔给予同体积的0.9%氯化钠溶液。培美曲塞按照150 mg/kg应用,每天一次,连续4天。以后每周测量瘤体积,裸鼠体重,观察裸鼠的行为状态、精神以及食欲变化。实验结束时称量剥离的裸瘤重量。应用实时荧光定量PCR（Real-Time PCR）检测肿瘤组织中TS mRNA和TPmRNA的表达水平。结果7 h给药组裸鼠体重增长较快（P=0.041）,化疗不良反应较小,瘤体积生长最慢（P=0.032）,抑瘤率最大（P=0.000）。7 h给药组的肿瘤组织中TS mRNA相对表达量最低,TP mRNA的相对表达量对高,差异有统计学意义（P<0.01）。结论培美曲塞对肺腺癌裸鼠移植瘤有明显的抑制作用,疗效及不良反应与时辰给药有关,7 h给药组疗效最佳,化疗不良反应最小;TS和TP可以作为培美曲塞的疗效预测因子,为培美曲塞的个体化临床用药提供参考。     

亚甲基四氢叶酸还原酶和胸苷酸合成酶基因多态预测氟尿嘧啶为基础化疗方案治疗晚期胃癌疗效关系的研究

目的观察亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）（C677T、A1298C）和胸苷酸合成酶（TS3’-UTR）多态与5-FU为基础化疗方案及晚期胃癌敏感性的关系。方法选取173例晚期胃癌患者,所有病例均接受5-FU为基础化疗方案（FOLFOX,FP和DCF方案）化疗。在化疗前获取外周血白细胞DNA。采用PCR—RELP检测基因型。在2个基因中共检测了9种遗传多态。173例中检测了MTHFR（C677T、A1298C）和TS（3＇-TUR）多态。结果所有患者化疗总有效率为35．8％。DCF方案的有效率显著高于FP和FOLFOX方案（55．8％ vs 27．1％,31．1％;P=0．006）。MTHFRC677TT／T基因型患者的有效率显著高于C／C和C／T基因型（73．3％vs28．0％;P=0．000）。在MTHFRA1298C中,A／A基因型患者的有效率显著高于C／C和A／C基因型（41．8％vs21．6％,P=0．011）。在TS 3＇-UTR中,-6／-6bp和-6/＋6bp基因型患者的有效率显著高于＋6／＋6bp基因型（40．3％vs17．6％,P=0．014）。FOLFOX和FP方案中,MTHFR C677T T／T基因型患者的有效率均显著高于C／C和C／T基因型（P=0．008;P=0．000）,但在DCF方案中没有发现差异。在MTHFRC／T和C／C基因型中,DCF方案的有效率显著高于FP和FOLFOX方案（P=0．000）。MTHFR C677T T／T基因型患者的Ⅲ～Ⅳ度呕吐（66．7％）和口腔炎（30．0％）发生率显著高于C／C和C／T基因型（41．3％,9．8％;P=0．011,0．003）。MTHFRA1298CA／A基因型患者的Ⅲ～Ⅳ°度口腔炎（17．2％）和腹泻（13．9％）发生率同样显著高于A／C和C／C基因（3．9％,2．0％;P=0．025,0．026）。TS 3^＋-UTR的不同多态之间没有发现毒性差异。结论检测外周血白细胞DNA中的MTHFR和TS基因多态能预测以5-FU为基础化疗方案治疗晚期胃癌的有效性和化疗相关的毒性反应。     

胸苷酸合成酶在膀胱癌组织中的表达及意义

目的探讨膀胱癌(BC)中胸苷酸合成酶(TS)的表达对膀胱癌患者预后的影响。方法采用免疫组化S_P法检测50例膀胱癌石蜡标本中的TS蛋白表达情况。结果TS蛋白在膀胱癌与正常膀胱黏膜中的表达有显著性差异(P<0.01),与肿瘤低分化、临床病理分期晚期、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论TS在膀胱癌中的表达增强可能是膀胱癌患者一个重要的预后指标。     

胸苷酸合成酶基因多态性及烟酒茶嗜好与贲门癌易感性的关系

目的 :研究胸苷酸合成酶TS3′ UTR多态性及其和烟酒茶嗜好相互作用与贲门癌易感性的关系。方法 :在上消化道癌高发区淮安市进行了一个病例对照研究 (贲门癌 89例 ,人群对照 2 2 3例 ) ,调查研究对象的生活习惯 ,采用PCR RFLP技术检测研究对象的TS 3′ UTR基因型。结果 :贲门癌组TS 6/ 6bp、 6/-6bp和 -6/-6bp基因型频率分别为7 9%、43 8%和 48 3 % ,与对照组( 8 1%、5 4 3 %和 3 7 7% )相比差异无统计学意义。与携带TS 6bp等位基因且不吸烟、每周饮酒 <2次和饮茶者相比 ,在吸烟、每周饮酒≥ 2次和不饮茶者中 ,携带TS -6/-6bp基因型者发生贲门癌的危险性显著上升 ,调整后的OR分别为 3 99( 95 %CI:1 5 1～ 10 5 0 )、3 2 2 ( 95 %CI :1 2 1～8 5 5 )和 6 14 ( 95 %CI:2 3 9～ 15 77)。结论 :TS 3′ UTR基因多态性影响吸烟、饮酒和饮茶与贲门癌之间的关系