广州管圆线虫Mr32000抗原的免疫诊断效果评价

目的 价广州管圆线虫Mr32000抗原(AC32)的诊断价值．方法 利用切胶纯化法从广州管圆线虫成虫抗原中获取AC32，用Western blotting和ELISA方法检测61例广州管圆线虫感染大鼠血清、5例正常鼠血清、1例广州管圆线虫病人血清、50例其他寄生虫体阳性患血清和50例献血员血清。结果AC32和成虫粗抗原包被的ELISA检测61份感染大鼠血清和1例临床诊断为广州管圆线虫病人血清均为阳性：AC32．ELISA检测的50例献血员、20例急性血吸虫病人、11例弓形虫病人和所检测的其他寄牛虫抗体阳性患血清均为阴性。结论AC32在广州管圆线虫病的血清学诊断中具有较高的敏感性和特异性。     

广州管圆线虫Mr32000抗原的免疫诊断效果评价

目的 评价广州管圆线虫Mr32000抗原(AC32)的诊断价值。方法 利用切胶纯化法从广州管圆线虫成虫抗原中获取AC32,用Westernblotting和ELISA方法检测61例广州管圆线虫感染大鼠血清、5例正常鼠血清、1例广州管圆线虫病人血清、50例其他寄生虫体阳性患者血清和50例献血员血清。结果 AC32和成虫粗抗原包被的ELISA检测61份感染大鼠血清和1例临床诊断为广州管圆线虫病人血清均为阳性;AC32-ELISA检测的50例献血员、20例急性血吸虫病人、11例弓形虫病人和所检测的其他寄生虫抗体阳性患者血清均为阴性。结论 AC32在广州管圆线虫病的血清学诊断中具有较高的敏感性和特异性。     

联合检测血清广州管圆线虫循环抗原及循环抗体的临床价值

目的:探讨血清中广州管圆线虫循环抗原(CAg)和循环抗体检测对广州管圆线虫病的诊断价值.方法:用单克隆抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫病患者血清中循环抗原,间接ELISA法检测血清中特异性循环抗体.结果:25例广州管圆线虫病人血清中循环抗原的阳性率为80%,循环抗体的阳性率为88%;56例其他寄生虫病人血清循环抗原检测均为阴性,循环抗体检测与1例旋毛虫病人血清有交叉反应;25例健康人广州管圆线虫循环抗体阳性率为16%,循环抗原检测全部为阴性.结论:联合检测血清中广州管圆线虫循环抗原和循环抗体有助于提高广州管圆线虫病的诊断率.     

快速检测抗斯氏狸殖吸虫抗体的金标免疫渗滤法的建立和应用

目的 :建立一种检测斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体的快速、敏感和特异的新方法。方法 :以斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原为上样抗原 ,胶体金标记羊抗人IgG为显色剂 ,建立检测斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体的斑点金免疫渗滤法 (DIGFA) ;并以ELISA作平行对照。结果 :DIGFA和ELISA分别检测 83例斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体 ,其阳性率分别为 95 .2 % (79/ 83)和 91 .6 % (76 / 83) ,两法差异无显著性 (P >0 .0 5 )。DIGFA分别检测正常人血清32例、华支睾吸虫病患者血清 2 3例和日本血吸虫病患者血清 36例 ,前者均为阴性 ,后两者的交叉反应率分别为 4 .3% (1 / 2 3)和 8.3% (3/ 36 ) ;DIGFA和ELISA两法的总符合率达 92 .3% (36 / 39)。结论 :DIGFA的特异性和敏感性与ELISA相近 ,但方法快速、试剂稳定 ,且不需特殊设备 ,适用于各级医疗单位和血清流行病学调查     

斑点免疫金渗滤法检测抗荚膜组织胞浆菌抗体的研究

目的 研究快速检测荚膜组织胞浆菌抗体的方法.方法 荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物(P-HTPM)为包被抗原,以葡萄球菌A蛋白(SPA)标记的免疫胶体金为检测标记物,采用斑点免疫金渗滤试验(DIGFA)检测荚膜组织胞浆菌(HC)免疫小鼠血清中抗HC抗体以及其他真菌免疫血清中抗体.结果 DIGFA检测20份HC小鼠免疫血清,结果全为阳性,与ELISA检测结果一致,敏感性为100%.检测8份正常小鼠血清出现1份假阳性,特异性为87.5%.检测其他真菌免疫血清结果为:念珠菌属和马尔尼菲青霉菌免疫血清结果全为阴性;8份皮炎芽生菌血清出现1份阳性,9份副球孢子菌血清出现2份阳性.结论 斑点免疫金渗滤法检测抗HC抗体有较高的敏感性和特异性,快速简便.经临床标本扩大验证后将对荚膜组织胞浆菌病的快速诊断有应用价值.     

单克隆抗体检测广州管圆线虫循环抗原的研究

目的制备抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原单克隆抗体,用于广州管圆线虫循环抗原（CAg）的检测。方法广州管圆线虫成虫可溶性抗原免疫BALB／c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞（SP2／0）融合,用酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫印迹试验对所获得的细胞克隆进行筛选和鉴定,双抗体（单抗3F1和4H2）夹心ELISA法检测实验感染广州管圆线虫大鼠、小鼠和广州管圆线虫病人血清中的CAg。结果获得了3株稳定分泌抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原单抗的杂交瘤细胞株,经鉴定2株为IgG1（3F1、4H2）,1株为IgM（2A2）,杂交瘤细胞培养上清效价分别为1：25600、1：25600和1：12800,诱生腹水ELISA效价分别为1：80000、1：80000和1：40000。3株单抗均识别广州管圆线虫成虫相对分子量约为15000的蛋白。实验感染广州管圆线虫大鼠、小鼠血清CAg检出率分别为84．2％（48／57）和87．2％（41／47）,广州管圆线虫病人血清CAg检出率为86,4％（19／22）,与日本血吸虫、囊虫、肺吸虫、旋毛虫病人血清无交叉反应。实验感染小鼠血清CAg第2周即呈阳性反应,第4周A。。值达到高峰。结论建立了敏感性高、特异性强的3P1、4H2双抗体夹心ELISA检测广州管圆线虫循环抗原法,可用于广州管圆线虫病的临床诊断、疗效考核和流行病学调查。     

金标免疫渗滤法（DIGFA）快速检测血吸虫循环抗原的研究

目的建立一种简便、快速的血吸虫病诊断方法。方法在已建立的检测血吸虫抗体的DIGPA基础上，以抗血吸虫重组蛋白SVLBP多抗为捕捉抗体，金标抗SEA多抗为覆盖抗体，建立快速检测病人血清中血吸虫循环抗原的双夹心DIGFA。结果用该法检测了急性血吸虫病病人血清30人份和慢性血吸虫病病人血清38人份，其阳性检出率分别为100％和52．6％；120人份流行区健康人血清全为阴性；100人份非流行区健康人群血清的阴性符合率为100％，与10例华支睾吸虫病病人血清无交叉反应；15例肺吸虫病病人血清有1例阳性，交叉反应率为6．7％；与双夹心ELISA的符合率为97.4％，经x^2检验表明两法检测效果无显著性差异。结论用DIGFA检测血吸虫循环抗原具有较高的敏感性和特异性，并且方法简便、快速、不需特殊仪器设备，有广阔的应用前景。     

实验小鼠豚鼠弓形虫抗体ELISA试剂盒的研制及应用

本文研究了快速、特异性强、敏感性好的弓形虫抗体ELISA诊断试剂盒。IHA、IFAT和ELISA平行检测3份阳性血清和30份阴性血清，符合率均为100％。IHA和ELISA检测61份小鼠和84份豚鼠血清，结果表明ELISA法敏感于IHA。用本ELISA诊断试剂共检测了319份血清，小鼠阳性率为0．67％．豚鼠为2.22％．说明弓形虫在实验小鼠、豚鼠中感染率报低。     

金标免疫渗滤法检测卫氏并殖吸虫循环抗原的研究

目的：建立一种快速，简便，检测卫氏并殖吸虫病患者血清循环抗原（CAg)的新方法。方法：对抗体夹心金标免疫渗滤法（DAS－DIGFA）以抗卫氏并殖吸虫成虫多克隆抗体为包被抗体，加待检血清后再加免疫金标的抗卫并殖吸虫成虫单克隆抗体，阳性者出现红色斑点，结果：用DAS－DIGFA检测59例卫氏并殖吸虫病患者清，其阳性率为96．6％（57／59）；检测正常人血清20例，肺结核病患者血清20例，丝虫病患者血清27例，囊虫病患者血清20例和血吸虫病者血清26例，除1例血吸虫病患者血清阳性外，余均为阴性，特异性为99．1％（112／113）。结论：DAS－DIGFA是一种快速，简便，敏感和特异的检测卫氏并殖吸虫病患者血清中循环抗原的新方法。     

检测血清弓形虫IgG抗体的滴金免疫测定法的建立及应用

目的：建立检测血清中弓形虫IgG抗体的简便、快速的滴金免疫测定法。方法：将弓形虫抗原包被于硝酸纤维素膜上,通过胶体金-SPA直接显色,阳性者在膜上出现红色斑点。结果：用该法与间接ELISA法平等对比检测经间接血凝法确定的11份阳性血清和30份阴性健康人血清,结果有良好的一致性。符合率为90.9%。结论：滴金免疫测定法检测血清中弓形虫抗体简便、快速、敏感,无需特殊仪器设备,适于基层应用。     

温州地区广州管圆线虫病的研究

目的：阐明温州地区1997年10－11月暴发流行“酸脑”的病因，并为该病的防治提供科学依据。方法：分析患发病过程及临床症状，针对性开展温州地区广州管圆线虫病流行学调查，同时用免疫学试验作临床辅助诊断。结果：温州存在广州管圆线虫的自然疫源地，主要中间宿主（福寿螺）及终末宿主的感染率分别为69．4％和19．5％，患皮内试验及间接荧光抗体试验阳性率分别为100％和90．6％，ELISA法用于检测广州管圆线虫血清具有较高的敏感性和特异性。结论：确定温州地区此次爆发流行的“酸脑”为广州管圆线虫病，温州地区为广州管圆线虫病流行区。     

广州管圆线虫感染大鼠血清IgG抗体水平动态观察

目的了解大鼠感染广州管圆线虫后血清特异性IgG抗体水平的动态变化。方法用ELISA方法对感染后不同时间采集的大鼠血清进行抗广州管圆线虫IgG抗体滴度的检测，以了解其抗体水平的动态变化。并比较了感染血清经过或不经过2-琉基乙醇处理和给大鼠灌服吡喹酮的情况下，ELISA检测值的变化。蛄果大鼠感染广州管圆线虫后，其血清特异性IgG抗体水平随时间的推移而逐渐升高。用2-ME处理后各时点采集的感染大鼠血清OD值均较不加处理者有不同程度的提高。服药结束后第3d大鼠血清IgG抗体ELISA检测值约为未服药组感染大鼠的2．2倍。结论以2-ME处理的血清及服用吡喹酮能提高阳性检出率。     

斑点金免疫渗滤试验快速检测抗甲型肝炎病毒IgM抗体

建立胶体金免疫渗滤试验用于快速检测抗甲型肝炎ＩｇＭ抗体。     

实验室条件下广州管圆线虫生活史的建立

目的 人工建立一套规范的实验室条件下的广州管圆线虫生活史过程,探索广州管圆线虫人工繁殖的技术和方法.为深入研究广州管圆线虫病,提供充足、有效的试验材料.方法 从广州管圆线虫疫区采集广州管圆线虫中间宿主褐云玛瑙螺,解剖分离三期幼虫,经口感染SD大鼠.6周后采集镜检鼠粪,贝尔曼漏斗法分离粪便内一期幼虫感染实验室养殖的二代褐云玛瑙螺白化种白玉蜗牛25只,3周后解剖螺镜检三期幼虫并计数.将阳性螺直接喂食饥饿SD大鼠10只,感染2周后检测血清,6周后镜检鼠粪,并分别于3、5、8周时解剖大鼠观察虫体.结果 感染3周后解剖白玉蜗牛镜检可见三期幼虫,大鼠感染2周后检测血清特异性抗体阳性,6周后镜检鼠粪可见一期幼虫,3周后脑部解剖可见四期幼虫,5周、8周后心肺部解剖可见成虫与虫卵.结论 利用SD大鼠与白玉蜗牛为宿主在实验室条件下成功建立广州管圆线虫生活史.     

广州管圆线虫感染大鼠血清IgM抗体水平的动态观察

目的 了解大鼠感染广州管圆线虫后血清特异性IgM抗体水平的动态变化。方法用ELISA方法对感染后不同时间采集的大鼠血清进行抗广州管圆线虫IgM抗体检测，了解其抗体水平动态变化。并比较感染血清经过或不经过兔抗大鼠IgC处理的情况下，ELISA检测值的差异。结果大鼠感染广州管圆线虫后，其血清特异性IgM抗体水平在感染后第6d已有明显上升，并在45d左右达到第1个高峰，然后下降，在第123d前后又达到一个高水平。感染大鼠血清经兔抗大鼠IgC预处理后，在27、60和90d三个时点IgM抗体检测值出现较明显的变化。结论结果显示广州管圆线虫感染后宿主体液免疫应答的特点，对免疫学检测靶标和诊断时机的选择也有一定意义。