人外周血DNA提取方法比较

分子生物学技术已经广泛应用于生物学、基础医学、临床医学和预防医学等多个学科领域,人外周血DNA的提取是分子生物学的一项基础研究技术,从全血中提取高浓度、高纯度和高质量的DNA在实验研究中尤为重要[1～3].张宁等[4]提出的酚抽提法、甲酰胺裂解法以及异丙醇沉淀法是提取DNA最为经典的实验方法,但其操作繁琐,耗时较长,且所用试剂具有一定的毒性.目前,很多学者针对不同实验样品的传统DNA提取方法都提出了改良方法[5-7],应用试剂盒提取人外周血DNA被广泛应用于现在的实验研究,本文针对试剂盒提取人外周血DNA方法的操作过程以及其注意事项等展开讨论,以期为其他研究者提供参考.     

贵州黔西荔波少数民族全血DNA提取方法的探讨

目的 研究贵州黔西荔波少数民族全血提取样品DNA的价值。方法 采用低渗溶血酚氯仿提取法和PCR扩增检测提取DNA的质量。结果 两地区八少数民族2307份均获得基因组DNA。结论 血细胞在-85℃存放3～6个月，用经典的酚氯仿提取法均能获得较高质量的DNA样品。     

川芎DNA提取方法的研究

目的 以伞形科蒿本属植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.叶为材料,研究川芎DNA的提取方法 .方法 分别采取CTAB法、高盐低pH法、木本植物DNA提取法、改良高盐低pH法提取基因组DNA,并对4种方法进行了改进.通过0.9%琼脂糖凝胶电泳和RAPD两种方法检测所提取的DNA样品.结果 比较DNA产量、质量等,确定了木本植物DNA提取法最佳.结论 木本植物DNA提取法为最佳方法.     

三种全血基因组DNA提取方法的比较

目的比较高盐法、改良高盐法和超声波处理法三种方法对全血基因组DNA的提取效果。方法取200ul肝素抗凝血，分别采用上述三种方法提取基因组DNA，用紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测其纯度和含量。结果三种方法提取的基因组DNA含量分别为：高盐法38ug／ml全血；改良高盐法76．5ug／ml全血；超声波处理法20ug/ml全血；三种方法提取的基因组DNA纯度用A260／A280表示分别为：高盐法1．62；改良高盐法1．46；超声波处理法4．10。结论三种全血基因DNA提取方法操作简便、安全、快速，以改良高盐法提取效率最高。     

芋螺基因组DNA提取方法的优化

热带药用海洋生物芋螺产生的芋螺毒素(Conotoxin),已成为神经科学研究的有力工具药和新药开发的新来源。近来出现了从芋螺基因组DNA中克隆新型芋螺毒素基因的新方法．因而快速获得芋螺基因组DNA是分离多样性毒素基因、建立基因库及药用芋螺基因资源开发的前提。本研究采用不同的DNA提取方法．从6种芋螺的不同组织和器官中分离总DNA，经综合比较，建立了简便快速的提取芋螺总DNA的改良苯酚-SDS优化方法。     

冰冻血样的DNA提取方法比较

目的探索冰冻血样的最佳提取方法,保证DNA检测分析的质量。方法采用离心柱法和磁珠法进行DNA提取,分析所得DNA的浓度和纯度。结果两种DNA提取方法提取DNA纯度均符合实验要求(1.6~1.9),两种方法无统计学差异;磁珠法提取冻存血样所得DNA浓度高于离心柱法,有统计学意义。结论对于冰冻血液的DNA提取,磁珠法优于离心柱法。     

“一步法”提取DNA方法的改进

文献报道的组织提取DNA的方法,大多操作步骤复杂,花费时间长。我们介绍一种“一步法”提取DNA,可明显提高从石蜡切片中提取DNA量,且不需要额外试剂或特殊仪器,花费时间短。1材料和方法1.1组织标本58份病理档案石蜡包埋组织块,在室温中保存直至被选用。1.2主要试剂、仪器DNA提取液“一步法”:变性缓冲液终浓度:1×PCR缓冲液,0.45%NP40,0.45%Tween20,100μg/ml PK。酚-氯仿提取法:10%SDS,10mg/ml PK,饱和酚,氯仿,醋酸钠等。Tag DNA聚合酶为上海生物工程技术有限公司产品,三磷酸去氧核糖核苷(dNTP)为北京TaQGENE公司产品,DNA…     

不同种类中药材的DNA提取方法

目的　根据不同种类中药材来选择DNA提取方法。方法　根据作者对各种药材鉴定的实践经验,结合国内外有关代表性的论文,进行归纳和整理。结果　分析了不同DNA提取方法适用范围和局限性。结论　根据药材种类、贮存时间,选取合适的提取方法和适当的样品量。     

一种快速经济的外周血DNA提取方法

目的：将传统酚/氯仿提取DNA方法改进,建立一种快速、经济的从全血中提取高质量基因组DNA的方法。方法：用双蒸水破红细胞,KI30秒内充分裂解白细胞、细胞核,然后通过高浓度NaCL沉淀蛋白,酚-氯仿-异戊醇混合液同时萃取。结果：提取的基因组DNA吸光度值A260/280为（1.84±0.03）,产量为（27.2±2.6）μg/ml全血。提取基因组DNA凝胶电泳条带完整,PCR扩增目的条带完整。结论：本方法是一种快速、经济的外周血DNA提取方法,适合大规模人群基因组学研究。     

植物类药材基因组DNA提取与纯化的方法学研究

本文探讨了菊科9种植物和地胆草的4种对口商品药材基因组DNA提取与纯化的原理、方法，通过对3种常用植物基因组DNA提取方法（CsC1梯度超速离心法、CTAB／CsC1梯度超速离心法和DTAB微量提取法）的条件摸索，在DNA产率、纯度以及提取纯化过程中影响PCR扩增因子方面进行比较，认为CTAB微量提取法是植物类药材基因组DNA一种比较省时、有效、经济的提取方法。     

微波法快速提取丝状真菌基因组DNA

丝状真菌基因组DNA的提取是一个费时、费力,并且费用较高的工作,效率较低。本文报道一种以微波热振破壁处理真菌菌丝,快速、简便和高效提取真菌基因组DNA的方法。以提取的DNA为模板可以扩增出18S rRNA基因。     

DNA提取方法进展

DNA的提取是分子生物学研究的基础技术，提取的DNA的纯度及结构完整性是进行基因工程各项研究所必需的条件。近年来一些新的或改进的DNA提取纯化方法不断出现，本文对从陆生动物、植物、微生物以及海洋生物提取DNA的方法进行综述。     

3种方法从血清标本中提取HBV DNA的比较

目的:比较3种从血清标本中提取HBVDNA方法的效果,选出一种快速、简单、高效提取血清中HBVDNA的方法。方法:收集40例经荧光PCR定量检测HBVDNA含量全部大于1.0×104copies·ml-1的血清标本,用3种方法提取标本中的HBVDNA,然后进行荧光定量PCR检测,对检测结果进行统计学分析。结果:用裂解液煮沸法提取的HBVDNA模板含量最高,与另外2种方法之间的差异有显性(P<0.05)。结论:裂解液煮沸法是一种快速、简单、高效的提取血清中HBVDNA的方法。     

快速曲霉菌基因组DNA的提取方法

随着骨髓移植、器官移植的广泛应用,侵袭性曲霉感染逐渐增多。研究曲霉致病的分子机制以及进行临床快速基因诊断已成为研究的热点。而这些工作的前提就是获得足量、高质、稳定的供分析用的DNA分子。我们经过反复摸索、比较找出一个较为简便、经济、可靠的方法,报告如下。     

两种提取冻存全血基因组DNA方法的比较

目的比较两种不同方法提取冻存全血中基因组DNA的效果和特点。方法分别用改良碘化钾法和Promega全血基因组提取试剂盒提取全血基因组DNA,通过紫外分光光度仪、凝胶电泳、PCR进行检测。结果改良碘化钾法和试剂盒法提取的基因组DNA浓度分别为(330.9±0.94)ng/μL和(490.3±3.16)ng/μL;纯度为(1.87±0.03)和(1.85±0.06)。试剂盒法提取的基因组DNA含量稍高于改良碘化钾法,质量和纯度无显著差异。结论试剂盒法更简便、快速、无毒地进行提取DNA,但价格较贵;改良碘化钾法价格低廉,适合大量临床血液标本的提取,能够满足分子生物学实验的需要。     

贝母属药用贝母总DNA提取方法的比较研究

目的 比较筛选最适于贝母属药用贝母的总DNA提取方法。方法 利用试剂盒法、改良的CTAB法、改良的SDS法提取贝母属药用贝母的总DNA;通过核酸蛋白检测仪及琼脂糖凝胶电泳方法检测其浓度和纯度;进行ISSR-PCR扩增检测所得总DNA质量。结果 3种方法均可提取出产量较高的基因组DNA,但试剂盒法相较提取的总DNA纯度最高,质量最好,并且均能扩增出丰富清晰的条带,稳定性高,操作简单耗时短。改良的CTAB法、SDS法提取的总DNA纯度、质量均次于试剂盒法,操作复杂耗时长,不适用于下游的分子生物学实验。结论 试剂盒法为贝母属药用贝母总DNA提取的最佳方法,其所得样品适用于PCR及其他分子生物学研究。     

用于PCR实验的毕赤酵母基因组DNA制备方法的比较

目的：比较4种用于PCR实验的毕赤酵母基因组DNA的制备方法，以寻求一种稳定、简便的DNA模板制备方法，用于毕赤酵母重组子的分析。方法：分别用玻璃珠法、煮沸法、煮—冻—煮法以及直接法制备毕赤酵母基因组DNA模板，在相同条件下进行PCR扩增并比较其差异。结果：煮—冻—煮法与玻璃珠法制备的模板进行PCR均可取得理想的实验结果。以煮沸法制备模板作PCR时结果受所用模板浓度的影内很大，稳定性较差。直接法(即直接用未经处理的菌体作模板)的PCR结果随机性较大，实验结果最不理想。结论：煮—冻—煮法所需时间少、费用低、操作简便而且结果稳定，是采用毕赤酵母表达系统进行PCR鉴定时制备模板DNA的首选方法。     

结直肠癌患者粪便细菌DNA提取方法的比较研究

摘要：目的比较结直肠癌患者粪便细菌DNA提取方法的优缺点及获得DNA的质与量,有利于结直肠癌患者肠道相关分子微生态的研究。方法采用传统法,化学裂解法和TIANamp bacteria DNA Kit试剂盒法,提取粪便中细菌DNA,比较其作为模板,用于细菌16SrRNA基因PCR扩增后凝胶电泳的优缺点及用核酸蛋白检测仪Biophotmeter测定提取DNA的质与量。结果传统法提取DNA的量及纯度均较低（22．37±2．45,3．24±0．22）,化学裂解法和试剂盒方法提取的量及纯度均较高,（分别为33．87±2．06,2．18±0．44;38．60±9．00,1．70±0．09）;传统法与化学裂解法、试剂盒法相比差异有统计学意义（P〈0．05）,化学裂解法与试剂盒法相比差异无统计学意义（P〉0．05）,但以试剂盒法为佳。结论3种方法各具优缺点,不同的DNA提取方法会影响结直肠癌患者肠道相关分子微生态的研究结果。与传统法和化学裂解法比较,试剂盒提取法的效率更高,能够检测到更多种类的细菌,更合适肠道相关分子微生态的研究。