抑制乳腺癌增殖和转移的蛋白质类物质

日本筑波大学先端学术领域研究中心的柳泽纯教授研究小组发现了人体细胞中抑制乳腺癌增殖和转移的称作”CHIP”的蛋白质类物质。此新闻发表在2009年2月8日的英国科学期刊《自然细胞生物学》的网络版上。     

仙茅提取物对小鼠成骨细胞增殖的影响

目的观察仙茅对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响。方法将稀释成不同梯度浓度的仙茅提取物与成骨样细胞MC3T3-E1共同体外培养,以四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测细胞的增殖。结果仙茅低浓度组(1∶1500)增殖率为6.0%,对MC3T3-E1细胞增殖没有影响;中浓度组(1∶1000)增殖率21.7%,对细胞增殖影响明显(P<0.05);高浓度组(1∶500)增殖率是51.9%(P<0.05);极高浓度组(1∶250)增殖率是66.3%(P<0.01)。结论在体外,仙茅提取物能明显促进MC3T3-E1细胞的增殖。     

黄芩素对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231增殖的影响

目的：探讨植物雌激素结构类似物黄芩素对乳腺癌细胞MCF-7和MDA－MB-231增殖的影响。方法：MTT法测定不同剂量黄芩素作用于MCF－7和MDA—MB-231细胞株不同时间后对细胞增殖的影响;流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡情况。结果：随黄芩素浓度增加,细胞增殖受到抑制,细胞的生存率逐渐下降;随着黄芩素作用时间的延长,细胞的生存率也逐渐下降。结论：黄芩素能抑制MCF07和MDA—MB-231细胞的增殖,诱导细胞凋亡的发生。     

镁锌合金对成骨细胞增殖的影响

目的研究镁锌合金对前成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖的影响,探讨镁锌合金成为一种新型骨科内植物材料的可行性。方法在镁锌合金金属片上接种前成骨细胞MC3T3-E1,采用MTT法及碱性磷酸酶（ALP）检测试剂盒等方法检测MC3T3-E1细胞在材料表面的增殖活性,用左旋聚乳酸对照组。结果培养第1,3天后,镁锌合金表面成骨细胞增殖与对照组没有差异（P〉0.05）,第5、7、9后,镁锌合金表面成骨细胞增殖明显高于对照组（P〈0.01）。结论镁锌合金能够促进MC3T3-E1细胞的增殖,可以初步认为具有良好的生物相容性。     

虫草素体外抑制NB4细胞增殖与诱导细胞凋亡作用研究

目的观察虫草素体外对急性早幼粒细胞性白血病细胞（NB4细胞）的抑制增殖和诱导凋亡作用。方法将0.5,1.0,1.5,2.0 mg&#8226;mL 1虫草素在体外与NB4细胞共同培养,采用细胞计数、噻唑蓝（MTT）法检测不同浓度虫草素在24,48,72 h对NB4细胞增殖的抑制作用;用细胞瑞氏染色法、Hoechst33258荧光染色法、DNA亚二倍体检测法和线粒体膜蛋白检测法观察虫草素诱导NB4细胞凋亡的作用。结果与对照组比较,不同浓度虫草素均能显著抑制NB4细胞增殖,并呈剂量和时间依赖的量效关系;不同浓度虫草素作用24 h后均能显著促进NB4细胞凋亡。结论虫草素在体外能明显抑制NB4细胞增殖,并诱导细胞凋亡。     

毛蕊花糖苷对新生大鼠体外培养成骨细胞增殖与分化作用研究

目的研究毛蕊花糖苷对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖、分化作用的影响。方法采用Ⅱ型胶原酶消化法分离制备新生大鼠颅骨ROB细胞,MTT法测定ROB细胞增殖,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒法测定ROB细胞内ALP活性,以细胞的增殖率和ALP活性作为考察指标,观察不同浓度的毛蕊花糖苷对ROB细胞增殖和分化作用的影响。结果 1×10-7～1×10-9mol·L-1的毛蕊花糖苷对ROB细胞的增殖具有显著的促进作用(P<0.05),且终浓度为1×10-7mol·L-1的毛蕊花糖苷在作用72h后能显著提高ROB细胞内碱性磷酸酶的活性(P<0.05)。结论一定浓度的毛蕊花糖苷能显著的促进ROB细胞的增殖和分化。     

血根碱抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖的机制研究

目的研究血根碱(Sanguinaria canadensis,SAN)诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡可能的作用机制。方法 MTT法检测SAN对MCF-7细胞存活率的影响;激光扫描共聚焦显微镜观察SAN对MCF-7细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量的影响;化学发光法检测SAN对MCF-7细胞内caspase-3、caspase-8、caspase-9活性的影响。结果 SAN能降低MCF-7细胞存活率;SAN可明显升高MCF-7细胞内ROS含量,升高细胞内caspase-3、caspase-8、caspase-9的活性,而这种作用能被抗氧化剂NAC抑制。结论以上结果证明SAN能够抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖,其机制可能是通过升高细胞内ROS水平,激活caspase级联反应,进而诱导细胞凋亡发挥作用。     

三氧化二砷抑制乳腺癌MCF-7细胞作用机制的研究

目的 探讨三氧化二砷抑制乳腺癌MCF-7细胞的作用机制.方法 时滞显微摄影技术用于检测细胞容量;激光扫描共聚焦显微镜观察细胞钙离子的变化.结果 三氧化二砷作用后的MCF-7细胞出现凋亡性容量下降,并且细胞内钙明显升高.结论 三氧化二砷诱导MCF-7细胞凋亡与凋亡性容量下降和钙超载有关.     

葛根对大鼠成骨细胞增殖分化影响的血清药理学实验

目的：观察葛根含药血清对新生大鼠颅骨成骨细胞增殖分化的影响。方法：将32只SD大鼠随机分为实验组与对照组，在同等条件下制备葛根处理大鼠含药血清和对照血清，观察不同采血时间及血清添加量对成骨细胞增殖和碱性磷酸酶（ALP）的影响。结果：葛根末次灌胃后1～2小时采血的含药血清对成骨细胞增殖和ALP的作用明显（P〈0．01），随着含药血清添加量的增加，对成骨细胞增殖和ALP的作用明显增强（P〈0．01）。结论：含葛根处理大鼠血清可促进成骨细胞增殖和分化。     

阿霉素诱导小鼠MCF-7乳腺癌细胞凋亡和抑制增殖的体内实验研究

目的:探讨阿霉素对荷瘤鼠MCF7乳腺癌细胞凋亡和增殖的影响。方法:建立小鼠MCF7乳腺癌细胞模型,用TUNEL法和免疫组化法检测阿霉素作用下MCF7乳腺癌细胞的凋亡和PCNA表达的变化。结果:1.25mg·kg-1阿霉素的抑瘤率为43%。MCF7乳腺癌细胞的凋亡指数为1.93%,较荷瘤对照组的1.11%明显升高(P<0.05)。增殖指数为35.75%,较荷瘤对照组的56.38%明显下降(P<0.01)。结论:阿霉素有诱导小鼠MCF7乳腺癌细胞凋亡和抑制其增殖的作用。     

乳腺癌变过程细胞凋亡和增殖变化的研究

目的探讨乳腺癌变过程细胞凋亡和增殖的变化.方法用末端转移酶介导的脱氧核苷酸末端标记法(TUNEL法)和免疫组化法,检测乳腺癌组31例、乳腺癌前病变组43例(其中乳腺不典型增生21例,乳腺单纯性增生22例),正常乳腺组11例的凋亡指数、增殖细胞核抗原指数和bcl-2蛋白表达强度的变化.结果乳腺癌组凋亡指数和增殖细胞核抗原指数(5.36±0.61和40.84±9.99)低于乳腺癌前病变组(9.97±1.50和48.68±7.78),但高于正常乳腺组的凋亡指数和增殖细胞核抗原指数(2.66±0.49和22.8 7±6.98),差异有统计学意义(P＜0.01);bcl-2蛋白表达分值为2.81±0.88、1.38±0.76、0.5 0±0.67,以乳腺癌组最高(P＜0.01).对乳腺癌组凋亡指数与PCNA、凋亡指数与bcl-2分值和PCNA与bcl-2分值行等级相关分析,相关系数r s分别为:0.832、-0.608和-0.475.结论乳腺组织细胞凋亡与增殖的异常表达预示着恶性转变可能发生.     

胰岛素对人乳腺癌细胞株MDA-MB-543生长的增殖作用

目的探讨胰岛素对人乳腺癌细胞株MDA-MB-543生长的增殖作用。方法将胰岛素直接作用于体外培养的人乳腺癌细胞株(MDA-MB-543),采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期分布。结果胰岛素在1～10 mU/mL浓度范围内和作用时间2～16 h范围内,对MDA-MB-543增殖作用逐步增强,反映增殖活性的S期和G2/M期细胞比例逐渐增多,其中S期细胞比例与对照组比较有显著性差异(均P<0.05或0.01)。结论胰岛素能加快诱导MDA-MB-543细胞进入细胞周期S期增殖,呈剂量和时间依赖关系,但是短暂和可逆的。     

二苯乙烯苷对大鼠成骨细胞增殖及分化的影响

目的研究二苯乙烯苷（THSG）对大鼠成骨细胞增殖、分化的影响。方法体外分离、培养SD大鼠成骨细胞,M1rr法检测成骨细胞增殖活性;碱性磷酸酶（ALP）活性试剂盒检测成骨细胞AIJP活性比;Elisa方法检测成骨细胞c-fos和c—ju．蛋白表达水平。结果0．03—10rag／mr的THSG干预成骨细胞24h成骨细胞活性较对照组明显增强（P〈0．05或〈0．01）;在二苯乙烯苷干预细胞后第3天时,二苯乙烯苷组成骨细胞ALP活性较对照组明显增加（P〈0．05或〈0．01）,成骨细胞c-fos和c-jun表达均较对照组明显增强（P〈0．05或〈0．01）。结论二苯乙烯苷能显著促进成骨细胞发育成熟。     

车前子多糖对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制

目的:研究车前子多糖对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并初步探究其作用机制.方法:以人乳腺癌细胞MDA-MB-231为对象,采用MTT法检测不同质量浓度车前子多糖(8、16、32、64 mg/L)对细胞增殖能力的影响并计算细胞存活率;采用划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测不同质量浓度车前子多糖(8、16 m...     

紫苏醇亚微乳剂对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用研究

目的:研究紫苏醇亚微乳剂对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制作用。方法:以紫苏醇溶液为对照,采用MTT比色法检测不同浓度(0、50、100、200、400、800μmol·L-1)紫苏醇亚微乳剂处理不同时间(24、48、72h)后对人乳腺癌细胞MCF-7的抑制率及半数抑制量(IC50)值,并设立空白组进行比较。结果:与空白组比较,试验组与对照组在作用24h、浓度高于400μmol·L-1,48h、浓度高于100μmol·L-1,72h、浓度高于50μmol·L-1时均表现出明显抑制作用(P<0.05);后2组抑制作用比较无显著性差异;试验组与对照组对MCF-7细胞株的IC50值分别为353.9、377.9μmol·L-1。结论:紫苏醇制成亚微乳剂后与其溶液比较,对人乳腺癌细胞MCF-7具有相同的抑制作用。     

丹蒽醌对乳腺癌细胞MCF-7增殖及侵袭转移的抑制作用及其作用机制研究

目的 研究丹蒽醌对乳腺癌细胞MCF-7增殖及侵袭转移的抑制作用,并探讨其作用机制。方法 CCK-8法检测不同浓度（10、20、40、60、80、100 μmol/L）的丹蒽醌作用24、48 h对乳腺癌细胞MCF-7增殖能力的影响;Transwell实验考察丹蒽醌对乳腺癌细胞MCF-7侵袭转移能力的影响。实时荧光当量PCR（RT-qPCR）法检测c-Myc、Cyclin D1 mRNA的表达水平;Western blotting法检测p-AMPKα、ACC、c-Myc、Cyclin D1蛋白的表达水平。结果 不同浓度的丹蒽醌作用不同时间对乳腺癌细胞MCF-7增殖均具有抑制作用;20、40 μmol/L的丹蒽醌能够明显的抑制乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移,同时能够激活p-AMPKα的表达,抑制ACC、c-Myc、Cyclin D1等基因的表达,从而抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖。结论 丹蒽醌对乳腺癌细胞MCF-7增殖及侵袭转移具有抑制作用,其作用机制可能与激活AMPK信号通路抑制c-Myc、Cyclin D1等增殖相关基因表达有关。     

葛根对大鼠成骨细胞增殖分化影响的血清药理学实验

目的:观察葛根含药血清对新生大鼠颅骨成骨细胞增殖分化的影响.方法:将32只SD大鼠随机分为实验组与对照组,在同等条件下制备葛根处理大鼠含药血清和对照血清,观察不同采血时间及血清添加量对成骨细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)的影响.结果:葛根末次灌胃后1～2小时采血的含药血清对成骨细胞增殖和ALP的作用明显(P＜0.01),随着含药血清添加量的增加,对成骨细胞增殖和A"的作用明显增强(P＜0.01).结论:含葛根处理大鼠血清可促进成骨细胞增殖和分化.     

经典Wnt信号通路对成骨细胞增殖和分化的影响

成骨细胞中存在经典Wnt信号通路（即Wnt/β-catenin信号通路[1]）,其成分包括LRP5、β-catenin和GSK-3β等。这些成分在细胞中的改变可以影响成骨细胞的增殖和分化,进而影响骨的形成和重建。LRP5失活,β-catenin缺失时,经典Wnt信号通路受到抑制,成骨细胞的分化受到抑制,从而减少骨的形成。GSK-3β受到抑制时,可使成骨细胞中的特异性基因表达增加,从而增加成骨细胞的发生,促进骨的形成。经典Wnt信号通路对骨的生理活动具有重要意义,本文就经典Wnt信号通路对骨的增殖和分化的调节作一综述。     

中药活性成分对乳腺癌细胞干预的研究进展

乳腺癌是最常见的妇科肿瘤之一,约占全身恶性肿瘤的7%－10%,己成为严重影响女性身心健康甚至危及生命的一种多发病,全球每年约有120万妇女患乳腺癌[1]。在一些发达国家以及我国一些大型工业化城市乳腺癌已经成为女性成为女性恶性肿瘤第一位[2]。我国是乳腺癌的低发国家,近20年来发病率也不断升高。因此乳腺癌的防治工作已成为众多学者关注的焦点之一。近年来很多学者对中药干预乳腺癌细胞的的机制做了深入的研究,本文就这一些研究做一些回顾与展望。     

MicroRNA-503抑制乳腺癌细胞增殖的作用及其机制研究

目的　观察miR-503 对乳腺癌细胞增殖的影响并探讨其作用机制。方法　收集35 对乳腺癌及癌旁组织,利用实时荧光定量 PCR 法检测和比较其miR-503 的表达。选择体外培养的乳腺癌T47D 细胞系,分别转染miR-503 模拟物和miR 阴性对照模拟物(miR-NC),构建miR-503 和miR-NC 过表达细胞系。同时,利用荧光素酶报告基因检测法探索miR-503 的下游靶基因。转染miR-503 靶基因的真核表达质粒于上述两种T47D 细胞系中,通过MTT 检测细胞活力变化。结果　miR-503在乳腺癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织。过表达miR-503 能显著降低乳腺癌 T47D 细胞的增殖。胰岛素样生长因子1型受体（IGF-1R）是miR-503 的靶基因,其在T47D 细胞中的蛋白表达水平被miR-503 负调控,上调IGF-1R 的表达能显著逆转miR-503 对T47D 细胞增殖的抑制作用。结论　miR-503 通过负调控IGF-1R 的表达,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。