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目的 探讨一种新的肠道病毒分型诊断方法的临床应用价值.方法 选取我院2006.06~2009.08期间诊断为病毒性脑炎的住院患儿共50例,均于入院的当天抽取脑脊液.试验先经种属特异性引物扩增,筛选出肠道病毒样本,然后分别用测序VP1及VP2序列的方法进行分型.分型结果最后经回顾性中和试验进行确认.试验同时设立阳性对照及阴性对照.结果 50例临床样本中,共有45例临床样本检测出EV RNA.其中,经VP1序列分型方法可成功扩增分型40例,反应产物为357 bp的片段.经VP2序列分型方法可成功扩增分型38例,扩增产物为584 bp的片段.微量中和试验及BLAST比对结果显示:两者在分型结果上有较高的一致性及互补性.结论 ①经VP1序列分型方法可以成功分型临床常见肠道病毒中的大多数血清型.②联合VP2序列分型方法较单用VP1序列分型方法,分型率及敏感性更高,值得临床上进一步推广. 相似文献
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目的 探讨一种新的肠道病毒分型诊断方法的临床应用价值.方法 选取我院2006.06~2009.08期间诊断为病毒性脑炎的住院患儿共50例,均于入院的当天抽取脑脊液.试验先经种属特异性引物扩增,筛选出肠道病毒样本,然后分别用测序VP1及VP2序列的方法进行分型.分型结果最后经回顾性中和试验进行确认.试验同时设立阳性对照及阴性对照.结果 50例临床样本中,共有45例临床样本检测出EV RNA.其中,经VP1序列分型方法可成功扩增分型40例,反应产物为357 bp的片段.经VP2序列分型方法可成功扩增分型38例,扩增产物为584 bp的片段.微量中和试验及BLAST比对结果显示:两者在分型结果上有较高的一致性及互补性.结论 ①经VP1序列分型方法可以成功分型临床常见肠道病毒中的大多数血清型.②联合VP2序列分型方法较单用VP1序列分型方法,分型率及敏感性更高,值得临床上进一步推广. 相似文献
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目的 筛选安全有效新型EV71候选疫苗,为将来EV71疫苗开发应用奠定基础.方法 以重组蛋白VP1为疫苗设计靶点,不同候选疫苗包括灭活疫苗、DNA疫苗、VP1蛋白疫苗在0、2周、4周分别按照不同剂量和肌内注射途径免疫BALB/c雌性小鼠,在0、2周、4周、6周、8周、10周、16周分别采集小鼠尾静脉血,16周处死小鼠,收集小鼠脾脏细胞,检测小鼠体液免疫和细胞免疫功能,筛选评价候选疫苗的疗效和安全性.结果 灭活病毒疫苗、VP1 DNA质粒疫苗、VP1蛋白疫苗免疫小鼠2周后IgG抗体滴度即开始升高,4周后明显升高,8周后达高峰,至少维持16周以上;IgG亚类以IgG2a和IgG1为主.三种疫苗能诱导以γ-IFN和IL-4为主的细胞免疫反应.灭活疫苗疗效优于其他候选疫苗,未发现疫苗相关不良反应.结论 灭活病毒疫苗、VP1 DNA质粒疫苗、VP1蛋白疫苗均能诱导持久的特异性细胞免疫和中和抗体反应,以灭活病毒疫苗疗效较好,需要将来攻毒实验可进一步验证其免疫力. 相似文献
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目的 :硒缺乏可能是克山病发生的条件因子 ,而非特异性致病因素。为探讨克山病的发生与肠道病毒感染的关系。方法 :应用柯萨奇B5病毒的Vp1蛋白单克隆抗体 ,采用免疫组化方法 ,对黑龙江、山东、云南 3省区急型、亚急型、慢型、潜在型克山病患者尸检心肌组织共 83例 ,风心病 10例 相似文献
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EV71感染重症病例的临床表现及流行病学特征分析 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 探讨EV71感染的重症手足口病病例的临床及流行病学特征,为手足口病的防治提供科学依据.方法 查阅病历,填写个案调查表,应用Epidata录入数据,SAS9.13软件进行统计分析.结果 共调查201人,3岁以下者占84.65%,最小年龄5个月,最大8岁,男女比为2.2∶1;散居儿童占85.08%;农村发病51.74%,城市28.36%,城乡结合部19.90%;发病后1~4 d 81.59%发展成重症;发热和出疹分别占100%和99.95%,96.52%患儿伴有神经系统症状;病毒性脑脊髓脑炎、肺炎以及呼吸衰竭是主要的并发症;98.01%的患儿痊愈或好转.结论 3岁以下患儿是高危人群,农村和城乡结合部是防治重点,发病后1~4 d是预防并发症的关键期. 相似文献
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轻型和重型手足口病临床和实验室特征分析 总被引:6,自引:0,他引:6
目的 研究2008年深圳市轻型和重型手足口病临床特点和实验室特征.方法 将深圳市东湖医院和儿童医院共145例手足口病住院患者作为研究对象,其中轻型124例,重型21例.收集患者临床和一般实验室资料,急性期与恢复期连续粪便和血标本,通过RT-PER检测EV71病毒核酸,分离和培养EV71肠道病毒,其中2例死亡患者行病理组织学检测.结果 与轻型患者比较,重型患者白细胞计数、血糖显著升高,但年龄显著降低,粪便中轻型和重型患者EV71基因检出率分别为35%与67%,重型患者EV71检出率显著高于轻型患者,从9例患者粪便中分离培养出肠道病毒,其中1例为死亡患者粪便标本.2例患者死于神经源性肺水肿和脑干脑炎.结论 EV71是重型患者和死亡患者的最主要病原体,神经源性肺水肿和脑干脑炎是EV71型手足口病的最主要死亡原因,对年龄小于4岁,高热、皮疹稀疏和高血糖的EV71型手足口病患者应警惕向重型发展. 相似文献
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目的明确2018—2020年丽江市手足口病(hand, foot and mouth disease, HFMD)的流行情况及2020年EV-A71分离株的基因特征。方法对收集到的2018—2020年丽江市HFMD患者粪便标本进行核酸检测, 结果为EV-A71阳性的标本进行病毒分离, 扩增其VP1区, 获得的序列与参考株构建系统进化树。结果 2018—2019年, 丽江市HFMD报告病例以≤5岁儿童为主。历年男性病例数均高于女性, 但男女性病例阳性检出率差异无统计学意义。构成丽江市HFMD主要病原的是EV-A71、CV-A16和其他EV。其中EV-A71阳性病例2018年1份(0.48%, 1/210), 2019年未检出, 2020年159份(66.53%, 159/239)。系统进化分析显示丽江市EV-A71分离株均处于C4a分支, 分离株间核苷酸和氨基酸同源性分别是99.44%~100%和99.65%~100%, 与攀枝花参考株核苷酸和氨基酸同源性分别是99.10%~100%和98.99%~100%。所有丽江分离株在中国大陆EV-A71常见的氨基酸变异位点均发生了S283T和A2... 相似文献
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肠道病毒持续性感染与人类慢性疾病的病因学联系 总被引:3,自引:0,他引:3
肠道病毒可引起急性感染,一般仅在无γ球蛋白血症者和新生儿可形成慢性感染。本文综述健康人肠道病毒感染与人类慢性疾病,如自发护张性心肌病,自发炎性肌病、胰岛素依赖性糖尿病、病毒感染后疲劳综合征、及脊髓灰质炎后综合征等有病因学联系。其致病机理尚待进一步阐明,可能是肠道病毒引起自身免疫,也可能是肠道病毒持续感染并使疾病不愈。 相似文献
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我国深圳地区手足口病患者肠道病毒71型的分离与鉴定 总被引:25,自引:2,他引:25
肠道病毒71型(Enterovirustype71;EV-71)自1974年首次从患有中枢神经系统疾病的患者标本中分离后[1],世界上许多国家和地区相继报道了该病毒的流行。近年来,EV-71病毒的流行(特别是在亚洲地区的流行)、呈逐渐上升的趋势,日益... 相似文献
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目的 分析湖南省祁阳县2012-2015年手足口病的流行病学特征,探索影响手足口病的影响因素,为调整控制策略提供依据.方法 运用SPSS 13.0软件对2012-2015年手足口病数据进行统计分析.结果 祁阳县2012-2015年共报告手足口病病例3 430例,年均发病率80.90/10万.病例发病时间集中分布在5-6月,占病例总数的44.99%.病例年龄最小的为3个月,最大的为17岁,0~5岁年龄组占发病数的94.08%,男女性别比为1.9:1.散居儿童占发病总数的91.05%.乡村高于城镇,其差异有统计学意义.致病病原体EV71、CoxA 16和其他肠道病毒同时存在,以EV71为主,占总数的50.49%.死亡病例2例均为EV71感染.结论 2012-2015年祁阳县手足口病发病水平呈逐年增高趋势,应重点加强对散居儿童的防控力度. 相似文献
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目的 了解不同病原类型以及普通、重症病例手足口病患儿的流行特征及临床特点.方法 采用描述流行病学方法对113例实验室确诊手足口病病例的流行病学特征和临床特点进行详细分析.结果 113例手足口病确诊病例流行特征与同期疫情流行特征基本相同,不同病原类型以及普通、重症病例手足口病部分临床特点存在差异.结论 应根据本病特点开展防控工作,早期识别重症病例,重点应做好暴发疫情的调查处置,减少重症和死亡病例. 相似文献
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目的:了解手足口病不同病原体的感染现状以及流行病学特点,为制定观察、治疗方案,做好手足口病防控工作提供参考。方法:收集2016年1月至2019年12月在上海市儿童医院院传染科门诊诊断为手足口病的病例采集部分病例的咽拭子、粪便标本进行病原学检测并收集相关资料进行流行病学分析。用RT-PCR法对肠道病毒71型(entero... 相似文献
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目的研究肠道病毒71型(EV71)诱导细胞凋亡的分子机制。方法采用CCK8比色法检测EVT1感染对于人横纹肌肉瘤细胞RD增殖的影响,通过Hoechst33342染色和Caspase3活性测定检测细胞凋亡特征,用WesternBlot方法检测凋亡相关蛋白Caspase3和8的激活。同时通过免疫共沉淀检测EV71感染后细胞内Bax的活化。结果EV71感染RD细胞可以明显抑制细胞增殖,引起Caspase3、8和PARP蛋白的激活,同时引起Bax蛋白表达增加并发生构象变化。结论EV71通过Bax构象变化诱导Caspase依赖的细胞凋亡。 相似文献
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楚雄地区克山病与肠道病毒感染的关系探讨 总被引:3,自引:0,他引:3
肠道病毒感染与克山病发病有关。用套式聚合酶链式反应,分别对克山病患者6例心内膜心肌活检与21例尸检心肌冷冻及蜡块标本和21例脑外伤患者心肌冷冻及蜡块标本进行肠道病毒核糖核酸检测,在克山病患者中,发现5例活检及18例尸检标本中有肠道病毒核糖核酸存在,而脑外伤患者心肌标本中均为阴性,说明克山病患者活检及尸检心肌组织中均有肠道病毒感染,且两者感染率基本一致,提示肠道病毒感染可能是楚雄地区克山病发病的主要 相似文献
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心肌炎和克山病患者分离的肠道病毒核酸序列分析 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 分析自心肌炎和克山病患者分离的肠道病毒的核酸序列,探讨病毒病因的分子基因。方法 使用肠道病毒特异引物对从心肌炎和克山病患者分离的肠道病毒RNA进行RT-PCR扩增,PCR产物经纯经后分别经不同的引物正反向直接核酸循环测序,并应用SeqEd和DNA软件及AssemblyLIGN软件对测序结果进行分析。结果 确定7株病毒5′端从核苷酸位点40到750之间710bp基因序列;序列分析结果发现,尽管为同血清型病毒,但其5′非编码区基因变异率仍在15%左右,而血清型为柯萨奇B5病毒则高达34.08%,与肠道病毒各血清型之间5′端非编码区基因变异率无明显差异;对血清型为CVB3的两分离株病毒5′端基因特殊位点分析,发现与CVB3标准株(Nancy株)比较234位由T→C、690位由C→A。结论 确定了所分离到的一些肠道病毒5′端非编码区序列;肠道病毒5′端非编码区基因与血清型关系不大;CVB3分离株5′端基因特殊位点变异与致病的关系值得进一步探讨。 相似文献
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用RACE技术对一株肠道病毒3''端进行扩增和序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 应用3′RACE技术对一株本室分离肠道病毒基因组3′末端进行扩增,并对其核苷酸序列进行比较分析。方法 提取病毒总RNA,以锚定oligdT(17)引物进行逆转录,用特异引物及锚定引物进行3′RACE扩增,将PCR产物进行克隆、测序和序列分析。结果 获得了该病毒的3′端核苷酸序列,同源性分析结果显示该肠道病毒的核苷酸序列与肠道病毒76、89、90、91型的同源性最高为90%左右,而与其他型别的肠道病毒的同源性均小于80%;推导的氨基酸同源性与肠道病毒76、89、90、91型均在90%以上。结论 用RACE技术对肠道病毒3′端进行扩增及序列分析,证明该病毒属新型肠道病毒类,为进一步研究该病毒的分子生物学特性奠定了基础。 相似文献