Cyclopiazonic acid增加SHR和WKY血管平滑肌细胞Ca~(2+)-依赖性外向K~+-电流

采用全细胞及细胞贴附式斑片钳技术记录自发性高血压大鼠(SHR)和Wistar-Kyoto对照鼠(WKY)培养主动脉平滑肌细胞的Ca~(2+)-依赖性外向K~+电流[I_(k(Ca))],测定肌浆网Ca~(2+)泵抑制剂CPA对其影响.CPA能增加I_K(Ca))单通道开放时间,缩短关闭时间,增加全细胞I_(K(Ca))幅度,这些作用与Ca~(2+)相关并可被K~+通道阻断药glybenclamide阻断。CPA作用在SHR和WKY之间无明显差异。结果提示高血压状态下血管平滑肌的功能改变可能与I_(K(Ca))无关。     

Cl~-通道在内皮素-1引起的血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的　研究Cl-通道在内皮素 1(endothelin 1,ET 1)引起的血管平滑肌细胞增殖中的作用 ,并探讨其可能的作用机制。方法　通过细胞计数和3H TdR参入实验 ,并结合fura 2 /AM荧光测定胞浆游离Ca2 + 浓度 ([Ca2 + ]i)等技术 ,观察了Cl-通道阻断剂对ET 1引起的 [Ca2 + ]i 变化及血管平滑肌细胞增殖的影响。结果　Cl-通道阻断剂DIDS可呈浓度依赖性地抑制 10nmol·L-1ET 1引起的血管平滑肌细胞增殖 ,其它Cl-通道阻断剂如IAA 94、NPPB、SITS、DPC和速尿均无此作用 ,DIDS也能抑制 10nmol·L-1ET 1引起的内流相 [Ca2 + ]i 升高 ,而对ET 1引起的Ca2 + 释放无影响 ;预先将细胞与 1μmol·L-1nifedipine作用后 ,3μmol·L-1DIDS对 10nmol·L-1ET 1引起的内流相 [Ca2 + ]i 升高及血管平滑肌细胞增殖不再有效 ,将细胞与 10 μmol·L-1SK&F96 36 5预孵后 ,DIDS却能进一步抑制ET 1的上述作用 ;3μmol·L-1DIDS对 30mmol·L-1KCl引起的胞浆[Ca2 + ]i升高无影响。结论　DIDS可通过阻断Cl-通道来抑制ET 1因促发Cl-通道开放经电压依赖性钙通道的Ca2 +内流及细胞增殖 ,DIDS敏感的Cl-通道可能在ET 1促发的Ca2 + 内流及血管平滑肌细胞增殖的调控上都起着重要的作用     

Cl~-通道阻断剂对5-HT和CPA引起的兔脑椎基底动脉平滑肌细胞Ca~(2+)内流的影响

目的　在培养的兔脑椎基底动脉平滑肌细胞上观察5 HT和CPA诱导的Ca2 + 内流的特性 ,电压依赖性Ca2 + 通道 (VDC)抑制药尼莫地平 ,非电压依赖性Ca2 + 通道抑制药SK&F963 65及Cl-通道阻断剂DIDS、NPPB对两种激动剂引起 [Ca2 + ]i 反应的影响 ,以探讨脑血管平滑肌细胞中 5 HT引起Ca2 + 内流的特性、Cl-通道与Ca2 + 内流的关系。方法　采用生物荧光双波长影像分析系统瞬即测定单细胞胞质[Ca2 + ]i 技术。结果　① 5 HT和CPA均能诱导平滑肌细胞[Ca2 + ]i 呈双相升高 ,并且 5 HT诱导的Ca2 + 释放是环匹阿尼酸 (CPA)敏感Ca2 + 池的一部分 ;②尼莫地平对 5 HT和CPA触发的Ca2 + 内流无明显影响 ,而SK&F963 65可阻止二者触发的Ca2 + 内流 ;③Cl-通道阻断剂DIDS、NPPB呈浓度依赖性抑制Ca2 + 内流 ,在SK&F963 65最大限度抑制Ca2 + 内流后 ,DIDS、NPPB可进一步抑制Ca2 + 内流 ;而Ca2 +内流被DIDS、NPPB分别最大抑制后 ,SK&F963 65也可进一步抑制Ca2 + 内流。结论　 5 HT引起的Ca2 + 内流是经SK&F963 65敏感的非VDC ,其中包含Ca2 + 释放引起的Ca2 + 内流 (CRAC)成分与非CRAC成分 ,并且这两部分Ca2 +内流均与DIDS、NPPB敏感的Cl-通道开放有关     

平滑肌细胞上的非选择性阳离子通道

平滑肌上存在着多种激动剂激活的不同类型的非选择性阳离子通道,该通道在神经递质和激素介导的平滑肌的兴奋中起重要作用,此种通道的激活可引起膜的去极化和细胞兴奋性的提高。该文对其性质、单通道特性、通道调节、信号传导、药理学研究及生理学意义作一概述。     

平滑肌细胞膜的钙激活Cl^1通道

在多种平滑肌上都已发现Ｃａ＾２＋激活Ｃｌ＾－通道。胞内游离钙升高是钙激活氯通道的必要条件。多种刺激剂诱导胞内钙库释放钙而同时激活钾通道〖ＩＫ（Ｃａ）〗和氯通道〖ＩＣｌ（Ｃａ）〗。平滑肌细胞上激活ＩＣｌ（Ｃａ）的〖Ｃａ＾２＋〗ｉ阈值因动物种属和组织差异而不同。用荧光指示剂直接测定大鼠门静脉平滑肌细胞上的〖Ｃａ＾２＋〗ｉ得出激活Ｉｋ（Ｃａ）的最小〖Ｃａ＾２＋〗ｉ应大于７０～８０μｍｏｌ．Ｌ＾－１,比激     

一氧化氮对钾离子通道的直接激活作用

一氧化氮是主要的内皮衍生松弛因子，通过激活鸟苷酸环化酶、使它的产物ｃＧＭＰ累积，以及激活几种依赖于ｃＧＭＰ的细胞内过程，包括通过ｃＧＭＰ依赖性蛋白激酶对钾通道的激活而松弛平滑肌细胞。作者提出的证据认为，外源性ＮＯ和组织所产生的ＥＤＲＦ两者在缺乏所需要的ｃＧＭＰ的、无细胞膜片钳位上，能直接激活单个Ｃａ＾２＋依赖性钾通道。在用亚甲蓝抑制鸟苷酸环化酶的条件下，ＮＯ能持续使兔主动脉显著舒张，这种舒张作用被     

蝙蝠葛碱对离体豚鼠气管平滑肌舒张作用的研究

目的:研究蝙蝠葛碱(Dauricine,Dau)对离体豚鼠气管平滑肌的作用及机制。方法:取豚鼠气管制成气管片,运用离体器官实验的方法,记录蝙蝠葛碱对离体豚鼠气管平滑肌的作用和在不同通道及受体阻滞剂孵育的条件下对豚鼠气管平滑肌的作用的变化。结果:蝙蝠葛碱对离体气管平滑肌有明显的舒张作用,在60～120μmol/L的浓度之间舒张效果具有明显的浓度依赖性(P<0.05)。硝苯地平+Dau组在80～160μmol/L浓度下舒张离体豚鼠气管平滑肌的作用较Dau组弱(P<0.05)。普萘洛尔+Dau组在60～120μmol/L浓度下舒张离体豚鼠气管平滑肌的作用较Dau组弱(P<0.05),在120～160μmol/L浓度下舒张离体豚鼠气管平滑肌的作用与Dau组相近(P>0.05)。结论:蝙蝠葛碱对离体豚鼠气管平滑肌有明显的舒张作用,其机制可能是通过阻断Ca2+通道和激动气管平滑肌上的β2受体有关。     

平滑肌细胞膜的钙激活Cl~-通道

在多种平滑肌上都已发现Ｃａ２＋激活Ｃｌ－通道。胞内游离钙升高是钙激活氯通道的必要条件。多种刺激剂诱导胞内钙库释放钙而同时激活钾通道［ＩＫ（Ｃａ）］和氯通道［ＩＣｌ（Ｃａ）］。平滑肌细胞上激活ＩＣｌ（Ｃａ）的［Ｃａ２＋］ｉ阈值因动物种属和组织差异而不同。用荧光指示剂直接测定大鼠门静脉平滑肌细胞上的［Ｃａ２＋］ｉ得出激活ＩＫ（Ｃａ）的最小［Ｃａ２＋］ｉ应大于７０～８０μｍｏｌ·Ｌ－１,比激活ＩＣｌ（Ｃａ）的最低浓度１８０μｍｏｌ·Ｌ－１要小,因此认为ＩＫ（Ｃａ）要比ＩＣｌ（Ｃａ）对［Ｃａ２＋］ｉ更敏感。胞外钙通过电压依赖性钙通道进入胞内,［Ｃａ２＋］ｉ升高也能激活氯通道。Ｇ蛋白与某些受体偶联激活胞内第二信使ＩＰ３而激活氯通道。钙激活氯通道的电导很小,从全细胞电流分析应小于１０ｐＳ。平滑肌细胞上的氯平衡电位（ＥＣｌ）正于静息膜电位,因此Ｃｌ－通道开放Ｃｌ－外流驱动膜电位向ＥＣｌ方向靠近,形成膜的去极化。Ｃａ２＋激活Ｃｌ－通道开放使细胞膜去极化并引起细胞的兴奋,这种通道在由激素或神经递质引起平滑肌细胞的兴奋过程中起重要作用。     

血管平滑肌钙激活钾通道及其调节机制

在所有离子通道中，钾通道种类最多。就血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ，ＶＳＭＣ）而言，目前正式命名的就有４大类即电压依赖性钾通道（Ｋｖ）、钙激活的钾通道（ＫＣａ）、内向整流钾通道（ＫＩＲ）和ＡＴＰ敏感性钾通道（ＫＡＴＰ）...     

钾通道开放剂的平滑肌作用

钾通道开放剂是近年来研究的热点课题。本文综述了钾通道开放剂的作用机制，对血管，呼吸道平滑肌作用和细胞内钙，一氧化氮之间的关系，以及与钙通道拮抗剂的差异。     

Kir2.1和Kir3.1钾通道mRNA在大鼠平滑肌组织中的比较表达

目的　研究Kir2 1和Kir3 1mRNA在平滑肌及其它组织中表达的差异。方法　用RT PCR方法检测mRNA的表达 ,用光密度扫描法半定量测定表达差异。结果　在大鼠的左心室、大脑皮层、主动脉平滑肌、膀胱平滑肌和呼吸道平滑肌上均有Kir2 1和Kir3 1的表达 ,通过光密度扫描分析显示Kir2 1mRNA在各组织的表达水平 (Kir2 1/GAPDH)依次为主动脉平滑肌 >心脏 =大脑皮层 =气管平滑肌 >膀胱平滑肌 ;Kir3 1mRNA的表达水平 (Kir3 1/GAPDH)依次为主动脉平滑肌 =气管平滑肌 >心脏 =大脑皮层 =膀胱平滑肌。结论　Kir2 1和Kir3 1在不同组织中2 0 0 0 0 4 0 5收稿 国家自然科学基金资助项目 ,No 39770 85 9;国家重点基础研究“973”子课题 ,NoG19980 5 110 6作者简介 :任亚军 ,男 ,30岁 ,博士研究生 ;王晓良 ,男 ,45岁 ,PhD (德国 ) ,研究员 ,博士生导师 ,中国药理学会常务理事的表达量是有差异的 ,这种差异有内在的生理意义。     

粉防己碱对肺动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的双重作用

目的：研究粉防己碱（Ｔｅｔ）对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活钾（Ｋｃａ）通道的影响。方法 内面朝外膜片箝单通道记录法,结果：Ｔｅｔ７．５和１５μｍｏｌ．Ｌ＾－１使Ｋｃａ的开放概率由０．２５１±０．０１２增加到０．３４０±０．０１３和０．４１５±０．０１１（Ｐ〈０．０１）,关闭时间由（６１±１５）ｍｓ缩短到（３３±１０）和（２８±１１）ｍｓ（Ｐ〈０．０１）Ｔｅｔ３０μｍｏｌ．Ｌ＾－１使开放概率和开放时间     

高血压发展过程中脑血管平滑肌细胞离子通道的变化

脑血管重构是高血压发展过程中最重要的病理生理改变,由此引起的脑卒中更日益危害人类的健康。在高血压发展过程中,脑血管平滑肌细胞上分布的多种离子通道,如钾钙、氯等均发生变化,导致细胞内离子浓度异常,在脑血管重构的发生发展过程中发挥了重要作用。     

血管平滑肌的ATP敏感钾通道

ＡＴＰ敏感钾通道（ＫＡＴＰ）是一类较广泛分布的内向整流钾通道。在生理状态及某些病理条件下ＫＡＴＰ参与血管张力的调节。ＫＡＴＰ活性受多种因素的调控,胞内二磷酸核苷酸（ＮＤＰｓ）、钾通道开放剂（ＫＣＯｓ）等可激活通道,而ＡＴＰ和硫脲类药物则特异性抑制通道的开放。分子生物学研究证明ＫＡＴＰ由Ｋｉｒ６０和硫脲类受体（ＳＵＲ）共同组成,Ｋｉｒ６０构成Ｋ＋可穿透的通道核心,ＳＵＲ受体构成通道的调节单位。血管平滑肌中的ＫＡＴＰ是由Ｋｉｒ６１和ＳＵＲ２Ｂ组成的四聚体结构。但两种亚单位如何联结成有功能的多聚体还需进一步的证明。     

Proteomic analysis of the effect of iptakalim on human pulmonary arterial smooth muscle cell proliferation

Aim： To investigate the anti-proliferative effect of iptakalim （Ipt）, a newly selective KATP channel opener, in endothelin-1（ET-1）-induced human pulmonary arterial smooth muscle cells （PASMCs） using proteomic analysis. Methods： Human PASMCs were incubated with ET-1 （10^-8mol/L） and ET-1 （10^-8mol/L） plus iptaklim （10^-5mol/L） for 24 h. Analysis via 2-DE gel electrophoresis and MALDI-TOF-MS was employed to display the different protein profiles of whole-cell protein from cultures of control, ET-1 treatment alone, and treatment with ET-1 and iptaklim combined. Real time RT-PCR and Western blot analysis were used to confirm the proteomic analysis. Results： When iptakalim inhibited the proliferative effect of ET-1 in human PASMCs by opening the KATp channels, the expression of different groups of cellular proteins was changed, including cytoskeleton-associated proteins, plasma.membrane proteins and receptors, chaperone proteins, ion transport-associated proteins, and glycolytic and metabolism-associated proteins. We found that iptakalim could inhibit the proliferation of human PASMCs partly by affecting the expression of Hsp60, vimentin, nucleoporin P54（NUP54） and Bcl-XL by opening the KATP channel. Conclusion： The data suggest that a wide range of signaling pathways may be involved in abolishing ET-1-induced proliferation of human PASMCs following iptakalim treatment.     

作用于电压门控Na~+通道的海洋生物毒素

电压门控Na+通道是神经、肌肉和心脏产生和传递快速电信号的基础。在海洋生态系统中,有许多毒素通过与电压门控Na+通道相互作用,从而产生一系列的药理作用和毒理效应。此文综合介绍了作用于电压门控Na+通道的代表性海洋生物毒素。     

钾通道开放剂降低血管平滑肌细胞内游离钙浓度

研究ＰＣＯ－Ｐｉｎ，Ｎｉｃ，Ｌｅｍ及ＲＰ对ＶＭＳＣ内［Ｃａ＾２＋］ｉ的改变及其可能机制。ＶＳＭＣ加入Ｆｕｒａ－２ＡＭ２．５μｍｏｌ．Ｌ＾－１３７℃下孵育５０ｍｉｎ，［Ｃａ＾２＋］ｉ用荧光分光光度计检测。４种ＰＣＯ能较弱地抑制Ｋ＾＋３０ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１诱导的［Ｃａ＾２＋］ｉ增加，但明显抑制ＡＴＰ０．１ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１诱导的［Ｃａ＾２＋］ｉ峰相及持续相增加，且呈剂量依赖性。格列苯脲完全阻断Ｐｉｎ，