ChiTaS BSS1200血液核酸检测系统的分析性能验证

目的：对 ChiTaS BSS1200血液核酸检测系统（简称“ChiTaS ”）主要分析性能进行验证,确定该系统是否稳定、准确、可靠。方法参照美国临床实验室标准化协会（CLSI）相关文件要求,对在 ChiTaS 上开展的HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA 项目进行检出限、精密度、准确度及抗干扰等方面验证。结果 ChiTaS 分析系统HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA 最低检出限分别为3．63（3．16～6．26） IU ／mL、12．71（10．37～21．63） U ／mL、25．49（21．43～37．48） IU ／mL;HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA 阳性样本总变异系数分别为2．56％、1．03％、3．36％;22个阴性样本和10个阳性样本进行8混样模式检测结果为反应性,拆分检测结果：阳性样本符合率100％、阴性样本符合率100％;溶血血浆（血红蛋白含量为5 g／L）、脂肪血浆（甘油三酯大于6．3 mmol／L）对低浓度 HBV （6．3 IU ／mL）、HCV（23．3 IU ／mL）、HIV （47．6 IU ／mL）样本检出无显著影响。结论 ChiTaS 检出限、精密度、准确度等均达到生产商的检测性能的要求,实验室该系统的检测能力可以满足本血站对无偿献血者样本的常规核酸检测要求。     

献血者核酸筛查情况分析

目的：分析枣庄市献血者的核酸检测情况,为以后更好的开展核酸检测工作提供依据。方法ALT检测合格及酶联免疫法检测乙肝、丙肝、艾滋病、梅毒阴性的献血者标本9901例,进行HBV-DNA、HCV-RNA和HIV-RNA的联合混样检测,对混样阳性的标本再进行拆分检测。并对拆分乙肝HBV-DNA阳性的样本进行乙肝两对半血清学的酶联免疫检测。结果共完成9901例标本的核酸混样检测,拆分阳性的标本7例,阳性率为0.071%(7/9901)。HBcAb阳性或HBcAb阳性伴HBsAb强弱阳性占71.40%(5/7),而HCV-RNA、HIV-RNA均阴性。对7例HBV-DNA阳性的标本进行乙肝两对半检测,结果显示：HBcAb阳性2例（28.5%),HBcAb阳性伴HBsAb强弱阳性3例(42.9%),HBsAg弱阳性伴HBsAb阳性1例(14.3%),两对半结果全部阴性1例（14.3%)。结论常规检测后的献血者依然有传染性的可能,核酸检测可有效降低传染性的风险。     

一种核酸筛查系统在无偿献血检测中的应用价值

目的分析2018年10月至2019年5月浩源核酸筛查系统运行以来的检测数据,评估该系统在无偿献血核酸检测(NAT)中的应用价值。方法根据浩源核酸筛查系统运行情况、献血者标本检测数据及2019年卫健委临床检验中心(NCCL)、中国国际输血感染预防和控制(CITIC)核酸检测室间质评样本的反馈结果进行统计分析。结果浩源核酸筛查系统共检测57 434例标本,混检阳性pools数69个,其中34个pools拆出阳性标本,阳性标本共37例(其中3个pools各检出2个标本),有效拆分率、阳性检出率分别为49.28%(34/69)、0.06%(37/57 434)。运行期间设备故障6次,无效pools 59个,31例阳性标本的复检符合率为87.1%(27/31)。10个NCCL标本检测结果与反馈结果一致,15个CITIC标本中有3个低浓度HBV DNA标本初次检测未检出核酸,再次检测为反应性。结论浩源筛查系统能在酶免阴性标本中检出核酸阳性标本,进一步保障血液安全,对检测过程中存在的问题及时分析和整改,有助于进一步提高检测效率。     

大规模新冠病毒核酸筛查的生物安全问题

目的 本文旨在对全流程的生物安全管理问题进行梳理,为未来出现的大规模核酸筛查提供参考.方法 我们参考技术规范及其他医疗机构的实践总结,结合自身实际经验,梳理了核酸采集场所、个人防护、标本采集转运检测流程共3个方面的生物安全管理需注意的问题及解决措施.严格要求采样队伍按标准要求执行,以达到保质保量完成筛查任务的目的.结果...     

2019新型冠状病毒核酸检测体系性能验证

目的:评估2019新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测体系在质量上是否能满足临床需求.方法:对本实验室采用的新冠核酸采样管、提取试剂、两种扩增试剂及相应仪器在配套使用时的阴阳性符合率、批内精密度、批间精密度及最低检测限、交叉反应等项目进行性能验证.结果:本实验室的新冠核酸检测体系阴阳性符合率100％;ORF1ab...     

乳腺癌血浆循环核酸p53基因突变的意义

目的 探讨血浆循环核酸p53基因突变检测的可行性，研究乳腺癌患者循环核酸p53基因突变对于乳腺癌发生、发展和预后估计的临床意义。方法 应用聚合酶链反应（PCR）扩增p53基因外显子5－8，并用变性高效液相色谱技术（DHPLC）分析产物突变情况，再与各生物学参数进行了相关研究。结果 33例患者中14例（42．4％）p53基因突变，且突变率与组织分化级别、ER阴性显著相关（P＜0．05），与临床分期和淋巴结及远处转移情况无关。结论 DHPLC可作为一种快速简便的基因突变检测手段，p53基因突变在乳腺癌循环核酸中有较高的检出率并预示肿瘤的恶性程度，血浆基因突变有望成为简便的预后参考指标。     

疟原虫核酸检测技术建立及在献血员筛查应用的研究

目的建立血液中疟原虫检测的核酸技术，探讨应用于献血员筛查的效果。方法根据红细胞内期疟原虫ssurRNA编码基因序列，设计合成三条扩增引物。将5份待检血样混合，采用蛋白酶K消化裂解法制备模板，在同一反应体系中扩增恶性疟原虫和间日疟原虫DNA，诊断鉴别恶性疟和间日疟。与厚血膜镜检法比较评价其灵敏度及特异性。结果将3份恶性疟原虫及10份间日疟原虫感染者的血样随机混入5000份无偿献血者血样中，每5份为一个检测单元，采用PCR方法从感染血样中扩增出分别为436bp和341bp的恶性疟原虫及间日疟原虫特异性的DNA片段，并经序列测定证实扩增片段的正确性；10份间日疟患者血样以及3份恶性疟患者血样均被检出，献血者血样PCR检测结果均为阴性，结果与厚血膜方法完全一致。结论所建立的疟原虫核酸检测技术灵敏度高、特异性好，且可以批量处理，提高了检测的效率，能有效降低疟原虫的输血传播，具有很好的推广使用价值。     

HPV核酸分型检测联合TCT筛查宫颈癌的临床价值

目的 分析探讨女性人乳头病毒(HPV)核酸分型检测联合宫颈液基细胞学检查(TCT)筛查癌前期病变和早期宫颈癌的临床价值.方法 选择2020年1月至2020年8月成都市锦江区妇幼保健院行宫颈癌筛查的女性6626例,对其进行HPV核酸分型检测和TCT检测,分析其HPV感染率、亚型分布及占比、年龄段分布,评估高危型HPV和T...     

核酸筛查实验室 RNA 酶污染防止对策探讨

目的探讨核酸筛查实验室RNA酶污染防止对策,使核酸筛查能够顺利进行,按时发放检验报告。方法根据实验中出现的问题,采取逐步排除法,在其它条件不变的情况下,改进某一步骤,记录实验结果,以内对照失败率为主要参数,进行比较。结果排除试剂配制,核酸提取,核酸扩增检测无因RNA酶污染造成的实验失败后,采用75%酒精多次擦拭进样器,台面和向空中喷酒75%酒精,拖地,勤换手套等方法,可有效防止RNA酶污染。结论对RNA病毒进行核酸筛查时,RNA酶污染必须引起高度重视。     

核酸筛查实验室RNA酶污染防止对策探讨

目的探讨核酸筛查实验室RNA酶污染防止对策,使核酸筛查能够顺利进行,按时发放检验报告。方法根据实验中出现的问题,采取逐步排除法,在其它条件不变的情况下,改进某一步骤,记录实验结果,以内对照失败率为主要参数,进行比较。结果排除试剂配制,核酸提取,核酸扩增检测无因RNA酶污染造成的实验失败后,采用75%酒精多次擦拭进样器,台面和向空中喷酒75%酒精,拖地,勤换手套等方法,可有效防止RNA酶污染。结论对RNA病毒进行核酸筛查时,RNA酶污染必须引起高度重视。     

血站Rh阴性血浆抗体筛查结果分析

目前，国外很多国家已将不规则抗体筛查列入血液制剂常规检测，而我国对血液制剂中的不规则抗体的检查还尚未进行，特别是各地区由于经济发展不平衡，大多数临床医院血库的配血水平的提高还比较滞后，有的医院甚至还在延用盐水法进行交叉配血，甚至对于新鲜冰冻血浆的输注原则是按ABO血型相容原则输注，不做交叉配血。目前大多数血站对于Rh阴性血浆在未进行抗体筛查的情况下，     

核酸检测与酶免检测平行筛查血液的效果评价

目的:分析评价核酸检测与酶免检测平行筛查血液的效果.方法:利用ELISA和NAT对2015年1月1日至2016年12月19日,一共8776人份献血者标本进行检测,对比分析ELISA的检测结果(抗-HCV、抗-HIV、HBsAg)和NAT的检测结果.结果:ELISA和NAT阳性的符合率是80.9%;NAT阳性和HBsAg符合率是82.5%;NAT阳性和抗-HCV符合率是70.0%;NAT抗-HIV的阳性符合率是100%.结论:ELISA与NAT检测平行筛查血液,可以防漏互补,确保血液可以安全供应.     

核酸检测在血液传染病筛查的应用价值

目的 探讨核酸检测在血液传染病筛查[乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)]的应用价值.方法 选取2018-2019年在该院住院因手术或输血需要检测乙肝五项和抗HCV、HIV抗原抗体的500例患者血清标本.化学发光法检测乙肝五项、抗HCV、HIV抗原抗体,提取核酸定性检测HBV DN...     

血浆循环核酸p53突变诊断原发性肝癌的价值

目的　研究肝脏良恶性疾病患者血浆循环核酸 p5 3基因突变 ,探讨其突变检测诊断肝癌的可行性和价值 .方法　肝脏疾病患者 6 1例 ,其中原发性肝癌 36例 ,良性组为肝血管瘤、肝囊肿和乙型肝炎肝硬化患者共 2 5例 ,提取血浆DNA,采用 PCR扩增 p5 3基因外显子 5 & 6 ,7和 8(E5 & 6 ,E7和 E8) ,用变性高效液相色谱法 (DHPL C)对产物进行突变筛选 .结果　肝恶性肿瘤患者 36例血浆提取的 DNA扩增出E5 & 6 ,E7和 E8例数分别为 10 ,36和 35 ,良性组对应为 0 ,6和 4例 . DHPL C检测到 4 / 36例 E5 & 6突变 ,12 / 36例 E7突变 ,未检测到 E8突变 ,良性组检测到 2 / 2 5例 E7突变 .结论　良恶性组间扩增阳性率有明显差异 (P<0 .0 5 ) ,p5 3基因突变与乙型肝炎感染有关 ,HBs Ag+肝癌患者 p5 3基因突变率明显高于 HBs Ag- 肝癌患者 (P<0 .0 5 ) ,循环核酸 p5 3突变检测有望成为肝癌高危人群特别是乙型肝炎感染和携带者预警或早期诊断的参考指标     

金堂地区公民捐献原料血浆意愿调查分析

一九八○年,我国开始应用血浆单采术采集原料血浆,金堂地区于一九八六年建立单采血浆站,至今已有26个年头,20多年来,金堂浆站通过采取多种宣传、招募和动员的方式,不断提高金堂地区公民捐献原料血浆的积极性.但随着人民生活水平的提高,医疗卫生需求的日益增加,血液制品用量也不断加大,使血液制品供需矛盾显得日益突出.     

罗氏和浩源核酸检测系统的性能比较

目的：研究罗氏和浩源两套多重核酸检测系统对无偿献血者血液标本的检测结果,为本血站实验室的核酸检测系统使用提供参考。方法：汇总2020年1—12月南通市中心血站无偿献血血液标本,经两遍不同厂家试剂的酶联免疫吸附试验剔除双阳性标本后,并采用罗氏或浩源核酸系统进行病毒核酸检测的标本结果,对两套核酸检测(NAT)系统的拆分阳性率和标本阳性检出率进行统计分析。结果：回顾性统计得知罗氏核酸检测系统共检测标本84 798例,混检阳性117例,拆分单检阳性标本67例,拆分阳性率57.26%,标本阳性检出率0.79‰;浩源核酸检测系统共检测标本12 192例,混检阳性19例,拆分单检阳性标本11例,拆分阳性率57.89%,标本阳性检出率0.90‰。两套核酸检测系统相比较,拆分阳性率,差异无统计学意义(χ²=0.801,P>0.05),标本阳性检出率,差异无统计学意义(χ²=0.167,P>0.05)。结论：两套系统可以互为备用设备,用于血站献血者的血液筛查工作,提高临床供血的安全性。     

核酸扩增技术(NAT)在血液HBV DNA筛查中的应用研究

输血相关传染病的预防和控制已成为全社会关注的焦点,随着检测技术的不断进步,输血传播相关病毒的危险性大大降低,目前酶免疫检测(ELTSA)技术已经广泛应用于血液筛查,但每年仍有少量新发输血后肝火病例报道,如美国无偿献血者每单位供血传播HBV的危险性为1/6.3万.这些危险主要来自病毒感染者"窗口期"献血、病毒变异、低病毒载量感染及人工操作失误等,其中"窗口期"漏检是影响血液安全性的主要问题.核酸扩增技术(NAT)可直接检测病毒核酸,大大缩短病毒ELISA检测的窗口期及检出变异株,发达国家已陆续将其纳入献血者的常规筛查项目,并取得一定的成效.但由于进口 NAT试剂成本很高,取制了该技术在我国血液常规筛查中的推广应用.为了进一步提高血液的安全性,降低血液核酸筛查的成本,笔者尝试将国产NAT试剂应用到血液HBV DNA筛查中,并对在献血者HBV DNA检测中建立一套适合中国国情的筛查检测体系的可行性进行了探讨.