鬼臼苦素抗Ph+急性淋巴细胞白血病细胞Sup-B15的作用及其机制

目的 探讨鬼臼苦素(picropodophyllin,PPP)对Ph+急性淋巴细胞白血病(Ph+ ALL)细胞Sup-B15的作用及其分子调控机制,为将PPP开发成为治疗Ph+ ALL药物提供理论依据.方法 MTS法检测PPP和格列卫(IM)对Sup-B15细胞增殖的影响;流式细胞术检测PPP和IM对Sup-B15细胞周期的影响;Western blot检测PPP对细胞增殖和周期相关蛋白表达,以及对IGF1R蛋白磷酸化和表达的影响.结果 PPP和IM均呈时间和剂量依赖性关系抑制Sup-B15细胞的增殖,且相同剂量下PPP对细胞增殖的抑制作用均强于IM;PPP处理细胞12 h和24 h后G2/M期细胞比例显著升高,而S期细胞比例则相应减少;PPP能够上调p53和cyclinB1蛋白的表达以及抑制p21和c-myc蛋白的表达,但对IGF1R总蛋白表达水平和磷酸化水平均无明显影响.结论 PPP能有效抑制Sup-B15细胞增殖和诱导细胞发生G2/M期阻滞,其机制与上调p53和cyclin B1蛋白表达以及抑制p21和c-myc蛋白表达相关.     

10058-F4诱导宫颈癌CaSki细胞凋亡及其机制探索

目的 探讨10058-F4诱导宫颈癌CaSki细胞凋亡的现象及机制.方法 用CCK8的方法检测不同浓度的10058-F4和10058-F4作用不同时间对CaSki细胞生长的影响;流式细胞术检测10058-F4对CaSki凋亡率的影响;Western blot方法检测10058-F4的药物有效性(c-MYC的表达下调)及对CaSki细胞的凋亡诱导作用;Western blot和RT-PCR的方法检测线粒体蛋白的表达情况,流式细胞术检测细胞ROS产生.结果 通过CCK8实验检测出10058-F4对CaSki的增殖抑制具有时间依赖性和浓度依赖性,始于第48小时,IC50为122μmmol/L.用122 μmmol/L的10058-F4处理CaSki细胞48 h,通过流式细胞术检测凋亡发现处理组细胞出现明显凋亡(52％),同时Western blot检测发现剪切型PARP表达量上调.Western blot和RT-PCI检测发现122 μmmol/L的10058-F4处理CaSki细胞48 h可以明显降低线粒体氧化磷酸化蛋白(NDUFS1、SDHA、UQCRC2、COXIV、OSCP)的表达,引起线粒体活性氧(ROS)产生明显增高,从而诱导细胞凋亡.结论 10058-F4可以通过降低线粒体氧化磷酸化蛋白的表达引起ROS产生来诱导CaSki细胞凋亡.     

c-Myc小分子抑制剂10058-F4对肾癌786-0细胞增殖凋亡的影响

目的 探讨c-Myc 小分子抑制剂10058-F4对肾癌786-0细胞增殖、凋亡的影响.方法 采用MTT检测10058-F4对肾癌786-0细胞增殖的影响,FCM检测 10058-F4对细胞周期及凋亡的作用,Western blot法进一步检测10058-F4对c-Myc及其靶基因p21、p27和 Bcl-2蛋白表达改变.结果 10058-F4可抑制786-0细胞增殖且呈浓度、时间依赖性,阻止细胞周期于G0/G1期,且可诱导细胞凋亡,能明显分别下调和上调c-Myc及其靶基因p21、p27及Bcl-2蛋白表达. 结论 c-Myc 小分子抑制剂10058-F4能抑制肾癌786-0细胞增殖并诱导其凋亡,并呈时间依赖性和浓度依赖性.     

mTORC1/2抑制剂与伊马替尼联用抑制Ph +ALL细胞株生长的作用机制

【摘要】 目的 探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白C1/2（mTORC1/2）抑制剂PP242与伊马替尼（IM）联用对费城染色体阳性（Ph+）急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞株SUP-B15的抗白血病作用及机理。方法 以SUP-B15细胞为研究模型,MTT法检测IM与PP242联合处理SUP-B15细胞72 h后的半数抑制浓度（IC ₅₀ ）及联合作用指数（CI ）;Western blot法检测PP242处理SUP-B15细胞后对磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/mTOR通路的影响,以及IM与PP242联合处理SUP-B15细胞后对PI3K/Akt/mTOR通路及凋亡相关蛋白的影响。结果 IM单用于SUP-B15细胞的IC ₅₀ 值为（1.50±0.09） μmol/L。而IM与20、30、50 nmol/L PP242联用于SUP-B15细胞,其IC ₅₀ 分别下降为（0.81±0.030） μmol/L、（0.36±0.140） μmol/L、（0.02±0.002） μmol/L, CI 值分别为0.764、0.545、0.507,提示两药有较高的协同作用。PP242单独作用于SUP-B15细胞后,磷酸化Akt（p-Akt）、p-4EBP1、p-elF4E、p-ABL、p-mTOR、p-P70等 PI3K/Akt/mTOR通路上的关键磷酸化蛋白表达下调,且这种变化呈现浓度和时间依赖性。PP242与IM联合用于SUP-B15细胞时,SUP-B15细胞PI3K/Akt/mTOR通路的各关键蛋白下调较PP242或IM单用时更明显,凋亡相关蛋白Bax、cleaved Caspase-3上调也较两药单用时更明显。结论 PP242与IM联合使用时可增强对于PI3K/Akt/mTOR通路的抑制,增加由Bax、Caspase-3所介导的凋亡作用。     

Ph+与Ph-成人急性淋巴细胞白血病的比较研究

目的"明确Ph+成人急性淋巴细胞白血病的长期疗效. 方法"回顾12例Ph+成人急淋的临床特点、疗效和预后,与同期40例Ph-成人急淋患者进行比较.治疗均采用经典的VDP/VDLP方案,并以VDP/VDLP和蒽环类+阿糖胞苷二组方案交替巩固化疗. 结果"Ph+成人急淋初次诱导完全缓解率为66.7%,略低于Ph-成人急淋病例;12和24个月总生存率为27.8%±15.8%和0,明显低于Ph-病例的69.8%±9.4%和14.9%±12.0%. 结论"Ph+可作为独立的预后不良指标;Ph+成人急淋的生存率明显低于Ph-病例,应采用更强的巩固化疗或引入骨髓移植治疗.     

Ph+与Ph-成人急性淋巴细胞白血病的比较研究

目的"明确Ph+成人急性淋巴细胞白血病的长期疗效. 方法"回顾12例Ph+成人急淋的临床特点、疗效和预后,与同期40例Ph-成人急淋患者进行比较.治疗均采用经典的VDP/VDLP方案,并以VDP/VDLP和蒽环类+阿糖胞苷二组方案交替巩固化疗. 结果"Ph+成人急淋初次诱导完全缓解率为66.7%,略低于Ph-成人急淋病例;12和24个月总生存率为27.8%±15.8%和0,明显低于Ph-病例的69.8%±9.4%和14.9%±12.0%. 结论"Ph+可作为独立的预后不良指标;Ph+成人急淋的生存率明显低于Ph-病例,应采用更强的巩固化疗或引入骨髓移植治疗.     

Glut5在Ph+急性淋巴细胞白血病伊马替尼耐药中的机制研究

目的采用费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病（Ph+ALL）伊马替尼耐药细胞株SUP-B15/R研究伊马替尼耐药的可能机制。方法通过基因芯片分析法对比找出伊马替尼耐药株SUP-B15/R与敏感株SUP-B15/S之间表达差异的基因,筛选出可能与耐药相关的基因SLC2A5,分别采用实时荧光定量PCR（qPCR）和Western blot进一步验证SLC2A5及其编码蛋白葡萄糖转运体5（Glut5）在SUP-B15/R与SUP-B15/S之间表达的差异。采用MTT实验检测果糖对SUP-B15/S细胞伊马替尼敏感性的影响,以及qPCR检测相关信号通路的改变,探究Glut5表达增加在SUP-B15细胞伊马替尼耐药中的作用。结果基因芯片结果发现,与细胞代谢相关的SLC2A5基因在SUP-B15/R中高表达,qPCR和Western blot实验进一步验证了上述结果。而果糖处理后SUP-B15/S细胞对伊马替尼的敏感性下降,IC50由（44.50±2.38 ）μmol/L增加到（64.71±1.69） μmol/L,同时Glut5、PI3K、AK mRNA表达增强。结论SUP-B15/R细胞高表达SLC2A5,Glut5高表达促进细胞对果糖的吸收,激活伊马替尼作用下受到抑制的PI3K/AKT信号通路,导致SUP-B15细胞对伊马替尼耐药。     

TKI维持治疗对Ph+ALL移植后疗效影响的临床研究

目的:观察Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)患者异基因造血干细胞移植后酪氨酸激酶抑制剂(TKI)维持治疗与否对移植后疗效的影响.方法:选择2012年1月1日—2020年12月31日我院血液内科收治的行异基因造血干细胞移植的Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病患者,移植后按照患者意愿分为TKI维持组和观察组,T...     

异基因造血干细胞移植联合伊马替尼治疗成人Ph+急性淋巴细胞白血病临床观察

目的 观察异基因造血干细胞移植(allogenic hematopoietic stem-cell transplantation,allo-HSCT)联合伊马替尼治疗成人Ph+急性淋巴细胞白血病的效果.方法 2008年3月至2010年3月,我科对20例成人Ph+急性淋巴细胞白血病患者采用异基因造血干细胞移植联合伊马替尼方案,其中9例接受同胞间HLA全相合移植,6例接受同胞间HLA单倍型移植,3例接受非血缘关系HLA全相合移植,2例接受非血缘关系HLA半全相合移植.20例患者在明确诊断后开始予化疗联合伊马替尼治疗,移植前2周至移植造血重建前停用伊马替尼,造血功能稳定后继续予伊马替尼维持治疗,移植后应用RT-PCR和FISH方法监测BCR/ABL表达水平.结果 20例患者均成功植入,均未出现严重的移植相关并发症.移植前20例患者接受伊马替尼联合化疗均达到完全缓解(complete remission,CR),BCR/ABL均转为阴性.随访至2012年3月,20例患者中15例骨髓持续CR,BCR/ABL持续阴性,5例复发.结论 异基因造血干细胞移植联合伊马替尼是治疗Ph+急性淋巴细胞白血病的有效方法.     

急性淋巴细胞白血病患者化疗前后CD4~+CD25~+调节性T细胞变化及相关因素研究

目的观察急性淋巴细胞白血病(ALL)患者化疗前后外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的变化。方法选择26例化疗后完全缓解的ALL患者进行自体对照研究,采用流式细胞术对化疗前后外周血中CD4+CD25+调节性T细胞进行检测,并采用ELISA检测血清中白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)水平,另选择同期体检健康志愿者20例为对照组,进行上述检查。比较对照组与ALL患者化疗前后外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的变化。结果 ALL患者化疗前CD4+CD25+调节性T细胞比例为(5.69±1.39)%,明显高于对照组(P<0.05)。ALL患者化疗后CD4+CD25+调节性T细胞比例明显较化疗前降低(P<0.05)。ALL患者化疗后CD4+CD25+调节性T细胞比例与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ALL患者化疗前IL-10和TGF-β表达水平与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。ALL患者化疗后IL-10和TGF-β水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。相关性分析显示,26例患者化疗前IL-10、TGF-β表达水平与CD4+CD25+调节性T细胞比例均呈正相关(P<0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞水平在化疗前后具有显著差异,提示其可能与免疫抑制有关,该指标的检测有助于对ALL患者预后及治疗效果的判断。     

紫杉醇对黑色素瘤细胞B16-F10细胞凋亡影响的机制研究

目的 探讨紫杉醇对黑色素瘤细胞B16-F10细胞凋亡的影响和作用机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测紫杉醇对B16-F10细胞增殖能力及细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡.结果 紫杉醇（0.001-10 μM）对B16-F10细胞表现出抑制作用,并且这种抑制作用具有浓度依赖性和时间依赖性,随着浓度的增加和作用时间的延长,抑制作用更为明显.低浓度对细胞周期G0/G1作用,而高浓度对G0/G1和G2/M均发挥作用.结论 紫杉醇对黑色素瘤细胞B16-F10具有明显促进凋亡的作用.紫杉醇可能作为黑色素瘤治疗的策略之一.     

6-MP联合伊马替尼治疗高龄Ph(+)急性淋巴细胞白血病1例

患者,女,74岁,因乏力、体重下降6个月先就诊于我院消化内科,诊断为十二指肠球部溃疡,予抑酸、护胃、抗炎等治疗效果不佳,多次复查血常规白细胞进行性升高,血红蛋白及血小板降低,后行骨穿检查诊断为急性淋巴细胞白血病,为进一步治疗来我科,于2009年3月8日收住院.     

Ph染色体对阳性急性淋巴细胞白血病患者预后的影响

８例Ｐｈ染色体阳性急性淋巴细胞白血病均为Ｂ细胞型，其中ＣＡＬＬＡ阳性６例，ＣＲ３例，ＰＲ１例，但２例于缓解后复发。认为Ｐｈ染色体的出现提示疗效差，不易缓解，预后差。     

维吾尔族 Ph 染色体阳性急性淋巴细胞白血病36例临床分析

目的：研究总结维吾尔族 Ph 染色体阳性急性淋巴细胞白血病（Ph＋－ALL）的临床特征、治疗转归。方法对36例维吾尔族 Ph ＋－ALL 患者进行回顾性分析。结果36例患者外周血白细胞（1.9～452.0）×109?L－1,中位数105.8×109? L－1,其中＜30×109? L－111例,≥30×109? L－125例;免疫分型 B －ALL 35例,T －ALL 1例,在 B －ALL 中,Pro －B 1例,Common －B 27例,Pre －B 7例。外周血白细胞＜30×109? L －1和≥30×109? L－1患者的治疗完全缓解（CR）率分别是63.6％、28.0％（P ＝0.043）。正常核型、单纯 t （9;22）、伴附加染色体异常的治疗 CR 率分别是66.7％、53.8％和15.4％（P ＝0.048）,2年总生存率（OS）分别是33.3％、35.9％和10.3％（P ＝0.011）。联合伊马替尼与非联合伊马替尼治疗的 CR 率分别为88.9％、22.2％（P ＝0.001）,2年 OS分别是59.3％、10.9％（P ＝0.007）。治疗随访期间是否合并败血症的2年 OS 分别是0.0、38.8％（P ＝0.035）。结论维吾尔族 Ph＋－ALL 的主要临床特征以外周血白细胞高、Common －B 分型多见;初诊时伴外周血白细胞≥－1或附加染色体异常的患者对治疗效果有一定的负性影响,伴附加染色体异常或治疗期间合并败血症30×109? L的患者预后差,联合伊马替尼治疗可明显提高治疗 CR 率及延长患者生存时间。     

成人Ph染色体阴性急性淋巴细胞白血病的治疗进展

虽然成人Ph染色体阴性的急性淋巴细胞(Ph-ALL)的治疗效果落后于儿童急性淋巴细胞白血病,但是随着对ALL生物学特点认识的进展治疗效果也取得进展,与儿童ALL疗效差距正在逐渐缩小。在青少年和年轻成人急性淋巴细胞白血病患者中采用儿童化疗方案、根据患者的遗传学特点和微小残留病变进行危险性分层并调整缓解后治疗进一步提高了患者的治疗效果。近年来,以单克隆抗体为基础的免疫治疗在成人Ph-ALL的治疗中取得初步成功。现将近年来Ph-ALL的治疗进展做一简要总结。     

RNA干扰对NB4细胞凋亡的影响

目的:探讨靶向PML-RARαmRNA的siRNAs对急性早幼粒白血病NB4细胞株凋亡的影响。方法:体外培养人白血病细胞株NB4细胞,以不同浓度的siRNAs分别转染细胞,MTT法检测siR-NAs对NB4细胞的抑制作用,细胞形态学观察和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:siRNA转染NB4细胞后,对细胞的增殖有明显的抑制,siRNA1244的24hIC50为46.578nM;细胞形态学观察可见明显的细胞凋亡现象,流式细胞仪检测也证明转染siRNA后细胞凋亡率增加,转染50nM siRNA1244的NB4细胞,24h后凋亡率从4.29%增至59.35%。结论:siRNA1244诱导NB4细胞凋亡效果最为明显,并且与抑制细胞增殖的效应一致,具有抗急性早幼粒细胞白血病效应,它的作用分子机制很可能是下调PML-RARα基因的表达而抑制增殖并诱导凋亡。     

儿童ALL（MRD）的相关基因表达及临床意义

探讨儿童ＡＬＬ（ＭＲＤ）的相关基因表达及临床意义。方法：运用ＰＣＲ技术,以ＩｇＨ和ＩｇＲｒ基因重排为标志,检测了４８例完全缓解（ＣＲ）的儿童ＡＬＬ的ＭＲＤ。结果化疗组（短期）２８例,２１例阳性,阳性检出率为７５．０％。长期ＣＣＲ组２０例,４例阳性,阳性检出率为２０．０％。二组比较采用ｔ检验,Ｐ〈０．０５。随访结果,化疗组阳性患者中１３例复发,ＣＣＲ组阳性患者中１例复发死亡。结论：①ＣＲ时间越短,Ｍ     

As2O3对ALL Caspase-3原代细胞的作用及作用机制的研究

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对急性淋巴细胞白血病(ALL)原代白血病细胞的作用及作用机制,为As2O3在急性淋巴细胞白血病中的应用提供实验依据.方法 采用MTT法检测As2O3对ALL原代白血病细胞生长的抑制作用;结果As2O3浓度为1.0-10.0μmol/L的As2O3可以明显抑制ALL原代白血病细胞的生长,并呈时间与浓度依赖性.结论 As2O3可诱导ALL原代细胞凋亡; As2O3通过激活Caspase-3诱导ALL原代细胞凋亡.     

CAHB诱导成人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡机制的研究

目的 探讨二乙酰己二胺（diacetyl hexamethylene diamine,CAHB）诱导成人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡的机制,为CAHB应用于临床提供理论依据。方法 采用流式细胞仪分析CAHB处理后Jurkat细胞AnnexinⅤ+/PI-细胞率,观察应用胱天蛋白酶（caspase）-9抑制剂Z-LEHD-FMK处理后AnnexinⅤ+/PI-细胞率的变化;蛋白质印迹法观察凋亡相关蛋白caspase-8、caspase-9、caspase-3的表达变化。结果 CAHB诱导后Jurkat细胞体积缩小、胞膜皱缩、染色质浓染、核固缩或碎裂等,可见典型凋亡小体。CAHB通过激活caspase-9、caspase-3诱导Jurkat细胞发生凋亡,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性,caspase-9抑制剂可在一定程度上抑制CAHB的凋亡诱导作用。结论 CAHB诱导Jurkat细胞凋亡与激活caspase-9及caspase-3有关。