蝙蝠葛酚性碱对胰腺癌BxPC-3细胞增殖抑制作用及其对Hh信号通路影响

目的:探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对人胰腺癌BxPC-3细胞的增殖抑制作用,以及通过观察PAMD对胰腺癌BxPC-3细胞Hedgehog信号通路中Shh、Ptch1 mRNA和蛋白表达的影响,进一步讨论PAMD抗胰腺癌的作用机制及其作用靶点。方法:对人胰腺癌BxPC-3细胞进行体外培养,以不同终浓度的PAMD培养液进行干预,对照组用正常培养液培养,进行以下实验:(1)利用台盼蓝染色测定各组中BxPC-3细胞生长周期;(2)运用MTT法检测各组BxPC-3细胞增殖情况;(3)利用RT-PCR、Western Blot技术检测各组BxPC-3细胞中Shh、Ptch1mRNA及蛋白的表达。结果:(1)各给药组与对照组相比,癌细胞生长缓慢;(2)PAMD高、低剂量组及5-FU组细胞的增殖抑制率分别为72.35%、44.62%、56.07%;(3)与对照组相比,Shh、Ptch1 mRNA的表达均下降,差异显著(P0.01),具有统计学意义。结论:PAMD对人胰腺癌BxPC-3细胞有增殖抑制作用,对Hedgehog信号通路关键位点的表达有一定的抑制作用。由此推断,PAMD对胰腺癌的抗癌作用机制可能与Hedgehog信号通路有关。     

蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3裸鼠的抑瘤作用及对bFGF表达的影响

目的 研究蝙蝠葛酚性碱（PAMD）对BxPC-3裸鼠的抑瘤作用及对肿瘤新生血管bFGF表达的影响,进一步探讨其作用机制。方法建立BxPC-3裸鼠的动物模型,检测蝙蝠葛酚性碱对转移瘤的抑制率,同时应用SP免疫组织化学方法检测各组BxPC-3裸鼠肿瘤组织bFGF的表达水平。结果蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3裸鼠瘤组织具有抑制作用,高、中、低剂量组抑瘤率分别为34．91％、52．83％、41．51％,与模型对照组比较具有统计学意义（P〈0．01）;各剂量均能明显降低BXPC-3裸鼠瘤组织bFGF的表达水平。结论蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3裸鼠肿瘤具有明显的抑制作用,其机制可能是通过改善裸鼠免疫功能,抑制肿瘤新生血管形成来实现的。     

PAMD对BxPC-3细胞病理形态、细胞凋亡及细胞周期影响

目的:研究人胰腺癌细胞BxPC-3在蝙蝠葛酚性碱(PAMD)的干预下出现增殖抑制的作用,以及观察PAMD作用于BxPC-3细胞使其产生的病理形态、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法:培养BxPC-3细胞,进行以下实验:(1)利用台盼蓝染色测定法测定各组中BxPC-3细胞的生长周期,并根据周期绘制其生长曲线;同时采用MTT法检测法测定各组中BxPC-3细胞的增殖情况;(2)利用透射电镜观察PAMD对BxPC-3细胞病理形态的变化;然后利用流式细胞术检测法检测各组BxPC-3细胞的细胞周期及其细胞凋亡的情况。结果:(1)根据盼蓝染色测定实验可知,各给药组细胞的生长较为缓慢;MTT实验可知,各组细胞的增殖抑制率PAMD高剂量组最高,其次是5-FU组,最后PAMD低剂量;(2)透射电镜显示:各给药组与对照组相比较各给药组的细胞核固缩,并伴有凋亡小体样形成;流式细胞术结果显示:各给药组与对照组的相比,各给药组细胞均停滞在细胞周期中的G1期并且各给药组细胞的细胞凋亡率均有所上升,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:PAMD使BxPC-3细胞被阻滞在G1期然后阻断其复制增殖,促进细胞凋亡,并且对肿瘤细胞的超微结构造成一定的影响。BxPC-3在PAMD的作用下出现增殖抑制。     

O-甲基蝙蝠葛碱和蝙蝠葛碱抗实验性心律失常的比较

O-甲基蝙蝠葛碱(O-Methel dauricine,OMD)为蝙蝠葛碱(Dauricine,Dan)的烃化衍生物。我室对Dau系列衍生物进行实验研究时发现,OMD抗实验性心律失常与母体化合物不同。本文旨在研究OMD的抗心律失常作用,并与Dau比较。     

蝙蝠葛苏林碱调控Akt/mTOR信号通路对胶质瘤细胞增殖及自噬的影响

目的 探讨蝙蝠葛苏林碱（DAS）对胶质瘤U251和U87细胞生长与增殖的影响及其分子机制。方法用2.5、5.0和10.0μmol/L DAS(DAS组)、10.0μmol/L替莫唑胺（TMZ组）和空白对照（对照组）处理U251和U87细胞。采用CCK-8法检测DAS对细胞活力的影响,细胞集落形成和Edu实验检测DAS对细胞增殖的影响,流式细胞术检测DAS对细胞凋亡的影响,透射电镜观察自噬小体的形成,Western blotting检测DAS对胶质瘤细胞凋亡、自噬和Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响。结果 CCK-8结果显示,与对照组比较,不同浓度DAS组胶质瘤细胞活力逐渐降低（P <0.05）,DAS组细胞活力低于TMZ组（P <0.05）。胶质瘤U251和U87细胞IC50分别为5.11μmol/L和6.35μmol/L。Edu和克隆结果显示,DAS能抑制胶质瘤细胞增殖,且随着药物浓度升高细胞增殖逐渐减少（P <0.05）。流式细胞术结果显示,DAS能诱导胶质瘤细胞凋亡,且随着药物浓度升高细胞凋亡增加（P <0.05）。DAS能增加胶质瘤细胞Bax、L...     

蝙蝠葛酚性碱与胰腺癌研究

主要分析中药成分蝙蝠葛酚性碱对胰腺癌的作用研究,分别从中药成分蝙蝠葛酚性碱的来源、药理作用及其对胰腺癌的抗肿瘤分子机制进行总结,为寻求中医药防治恶性肿瘤的新途径和研制新药提供实验和理论依据。     

自身化学离子化/傅里叶变换质谱法研究蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱及其衍生物的结构

采用自身化学离子化/傅里叶变换质谱(SCI/FTMS)技术研究了蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱及这二个化合物的9个衍生物,由[M 1]准分子离子峰和特征碎片峰的质谱数据鉴定了这些衍生物的结构。     

蝙蝠葛苏林碱对缺血性损伤细胞的保护作用

采用培养ＰＣ１２细胞为材料,观察了蝙蝠葛苏林碱（Ｄａｕｒｉｓｏｌｉｎｅ,Ｄａｕ）对六种脑缺血样损伤模型中的细胞保护作用及其作用机制进行了分析。实验结果表明：Ｄａｕ１００μｍｏｌ／Ｌ对细胞损伤有明显的保护作用,其保护作用又以对一氧化氮毒性损伤较为敏感。     

自身化学离子化/傅里叶变换质谱法研究蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱及其衍生物的结构

采用自身化学离子化/傅里叶变换质谱(SCI/FTMS)技术研究了蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱及这二个化合物的9个衍生物,由[M 1]准分子离子峰和特征碎片峰的质谱数据鉴定了这些衍生物的结构。     

蝙蝠葛碱对麻醉犬心肌耗氧量的影响

用测量麻醉犬冠状窦血流量及冠状动静脉血氧差的方法，研究了蝙蝠葛碱（Ｄａｕ）对麻醉犬心肌耗氧量等指标的影响，并与硝酸甘油（ＮＧ）和肾上腺素（Ａｄｒ）进行了对比。实验结果显示，５．０ｍｇ·ｋｇ￣（－１）的Ｄａｕ使犬血压及心肌耗氧量明显降低；ＮＧ亦显示类似的作用。提示，Ｄａｕ降低心肌耗氧量的作用与其扩张外周血管，降低血压的作用有关。     

PAMD对人胰腺癌Hh信号通路中Smo、Gli-1mRNA和蛋白表达的影响

目的:探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对人胰腺癌BxPC-3细胞的增殖抑制作用,以及通过观察PAMD对胰腺癌BxPC-3细胞Hedgehog信号传导通路中Smo、Gli-1mRNA和蛋白表达的影响,进一步讨论PAMD对胰腺癌Hh信号通路的作用机制及其作用靶点。方法:对人胰腺癌BxPC-3细胞进行体外培养,以终浓度为80、40μg/mL的PAMD培养液以及5-FU终浓度为50μg/mL进行干预,进行以下实验:(1)利用台盼蓝染色测定各组中BxPC-3细胞不同时间点的活细胞数;(2)运用MTT法检测各给药组对BxPC-3细胞增殖抑制情况;(3)利用RT-PCR、Western Blot技术检测各组BxPC-3细胞中Smo、Gli-1mRNA及蛋白的表达。结果:(1)与对照组相比,BxPC-3细胞生长缓慢;(2)PAMD高、低及5-FU组细胞的增殖抑制率分别为71.15%、43.44%、55.38%;(3)PAMD高、低剂量组及5-FU组BxPC-3细胞中的Smo、Gli-1mRNA及蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:PAMD对人胰腺癌BxPC-3细胞有增殖抑制作用,对Hedgehog信号通路中相关蛋白的表达有抑制作用。因此我们推断,PAMD对胰腺癌的增殖抑制作用机制可能与Hedgehog信号通路有关。     

蝙蝠葛碱的抗氧化实验研究

采用大鼠海马缺血再灌注模型，观察蝙蝠葛碱的抗氧化作用。结果表明，蝙蝠葛碱能明显降低大脑海马结构组织中MDA的含量，显著提高SOD活力和GSH－PX活力，SOD／MDA比值和GSH／MDA比值显著升高，提示蝙蝠葛碱具有明显的抗氧化作用。     

蝙蝠葛酚性碱对K562、BXPC-3增殖的影响

目的观察蝙蝠葛酚性碱（PAMD）在体外的广谱抗肿瘤作用。方法采用MTT比色法测定不同质量浓度的蝙蝠葛酚性碱对体外处理白血病细胞株（K562）、人胰腺癌细胞株（BXPC-3）24h的存活率,同时测定药物处理不同细胞株的细胞增殖抑制率和IC50及IC90。实验设立阴性空白对照组和氟尿嘧啶阳性对照组。结果不同质量浓度蝙蝠葛酚性碱对K562、BXPC-3细胞株的细胞增殖具有抑制作用,抑制作用均与质量浓度呈梯度关系。结论蝙蝠葛酚性碱对体外培养人肿瘤细胞株的增殖有明显的抑制和杀伤作用,揭示其具有细胞毒效应,蝙蝠葛酚性碱产生抗肿瘤生物学效应的机理有待进一步研究。     

蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3裸鼠抑瘤作用及对VEGF表达的影响

目的研究蝙蝠葛酚性碱（PAMD）对BXPC-3裸鼠抑瘤作用及对肿瘤新生血管内皮因子（VEGF）表达的影响,并进一步探讨其作用机制。方法建立BXPC-3裸鼠的动物模型,检测蝙蝠葛酚性碱对转移瘤的抑瘤率,采用免疫组织化学方法检测各组BXPC3小鼠肿瘤组织VEGF的表达水平。结果蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3胰腺癌裸鼠瘤组织具有一定的抑制作用,与模型对照组比较具有统计学意义（P〈0．01）。PAMD各剂量均能明显降低BXPC-3胰腺癌裸鼠瘤组织VEGF的表达水平。结论蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3裸鼠胰腺癌具有明显的抑制作用。其机制可能是通过改善裸鼠免疫功能,抑制肿瘤新生血管形成来实现的。     

蝙蝠葛碱对豚鼠心脏去甲肾上腺素释放的影响

目的 :探讨蝙蝠碱 (Dau)对心脏去甲肾上腺素 (NE)释放的影响。方法 :运用高效液相色谱 电化学法测定不同条件下豚鼠离体心脏流出液中NE含量。结果 :Dau组 (n =13 )停灌时心脏NE释放显著低于对照组 (n =11,P <0 .0 1) ;在正常灌注电刺激时 ,Dau组 (n =12 )心脏NE释放明显低于对照组 (n =11,P <0 .0 1)。结论 :表明Dau可抑制心脏NE的释放。     

蝙蝠葛苏林碱对映异构体的合成

蝙蝠葛苏林碱属双苄基四氢异喹啉类生物碱,存在于防己科植物蝙蝠葛的根茎中,由郑锡文等分离得到,并证明结构。华维一等全合成了蝙蝠葛苏林碱并验证了结构。近几年来的药理研究发现,此生物碱为较强的Ca离     

蝙蝠葛酚性碱对脑缺血大鼠海马CA3区诱发电位的影响

目的 探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMd)对脑缺血大鼠海马CA3区神经元突触传递功能的影响。方法 在体记录正常大鼠海马CA3区诱发的群峰电位(PS)；结扎大鼠双侧颈总动脉，造成急性不完全性脑缺血，观察PS幅度的变化；缺血前给予PAMd(5、10、20mg／kg)，观察其对缺血后PS幅度的影响；并观察不同剂量谷氨酸(Glu)对诱发电位的影响。结果 ①急性不完全性脑缺血后，PS的幅度显著降低。②5、10、20mmol／l，Glu注入后，PS的幅度均升高；当给予50mmol／L，Glu时PS幅度则显著降低。③20mg／kg PAMd能部分改善脑缺血引起的PS幅度降低，并能减弱50mmol／L Glu降低PS幅度的作用。结论 预先给予20mg／kg PAMd对高浓度Glu和急性脑缺血所致CA3区突触传递功能减弱有明显的改善作用。     

蝙蝠葛酚性碱对人肿瘤细胞PC-3、BT5637增殖的影响

目的 观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)体外抗肿瘤作用.方法 采用MTT比色法测定不同浓度的蝙蝠葛酚性碱对体外处理PC-3(前列腺癌)和BT5637(膀胱癌)细胞株24h的存活率.同时测定药物处理不同细胞株的细胞增殖抑制率和IC50及IC90.实验设立阴性空白对照组和氟尿嘧啶阳性对照组.结果 不同浓度蝙蝠葛酚性碱对PC-3和BT5637细胞株的细胞增殖具有抑制作用,抑制作用呈浓度依赖关系,与空白对照组比较具有统计学意义.结论 蝙蝠葛酚性碱对体外培养人肿瘤细胞株的增殖有明显的抑制和杀伤作用,显示其具有细胞毒效应.